第十單元　第59課時(shí)　動(dòng)物細(xì)胞工程

第59課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞工程課標(biāo)要求1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培育的條件和過程。2.闡明動(dòng)物細(xì)胞核移植的原理和過程。3.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合的概念。4.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。5.簡(jiǎn)述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。考情分析1.動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)2022·福建·T32022·江蘇·T142022·湖北·T62.動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備2023·北京·T122023·湖北·T222022·山東·T152022·福建·T132021·山東·T152021·江蘇·T112020·全國Ⅰ·T383.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)2023·天津·T72021·遼寧·T132020·天津·T1考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培育1．動(dòng)物細(xì)胞培育的概念從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培育條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。2．動(dòng)物細(xì)胞培育的條件3．動(dòng)物細(xì)胞培育的過程(1)細(xì)胞貼壁：體外培育的大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞往往貼附在培育瓶的瓶壁上。(2)接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖。(3)原代培育：分瓶之前的細(xì)胞培育，即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培育。(4)傳代培育：分瓶后的細(xì)胞培育。4．干細(xì)胞培育及其應(yīng)用種類胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞來源早期胚胎骨髓、臍帶血和外周血體細(xì)胞(如成纖維細(xì)胞等)特點(diǎn)能分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的組織和器官甚至個(gè)體分化成特定的細(xì)胞或組織能誘導(dǎo)分化成類似胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞應(yīng)用分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元和造血干細(xì)胞等造血干細(xì)胞用于治療白血病等；神經(jīng)干細(xì)胞用于治療帕金森病、阿爾茨海默病等治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血、阿爾茨海默病、心血管疾病等推斷正誤(1)在進(jìn)行細(xì)胞培育時(shí)，通常接受培育皿或打開培育瓶蓋的方式以獵取新陳代謝所必需的O2(×)提示動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)通常接受培育皿或松蓋培育瓶。(2)將動(dòng)物細(xì)胞置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培育箱中進(jìn)行培育(×)提示將動(dòng)物細(xì)胞置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培育箱中進(jìn)行培育。(3)動(dòng)物細(xì)胞在培育過程中都具有細(xì)胞貼壁的現(xiàn)象(×)提示體外培育的動(dòng)物細(xì)胞可以分為兩大類：一類細(xì)胞能夠懸浮在培育液中生長增殖，不具有細(xì)胞貼壁的現(xiàn)象；另一類則需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖，大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類型。(4)培育動(dòng)物細(xì)胞的第一代(即第一次細(xì)胞增殖)被稱為原代培育(×)提示人們通常將分瓶之前的細(xì)胞培育，即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培育稱為原代培育，原代培育時(shí)細(xì)胞增殖不止一代。(5)干細(xì)胞都能分化成多種類型的細(xì)胞(×)提示胚胎干細(xì)胞能分化產(chǎn)生多種類型的組織或細(xì)胞，成體干細(xì)胞一般只能分化成特定的細(xì)胞或組織。(6)胚胎干細(xì)胞是發(fā)覺最早、爭(zhēng)辯最多、應(yīng)用也最為成熟的一類成體干細(xì)胞(×)提示造血干細(xì)胞是發(fā)覺最早、爭(zhēng)辯最多、應(yīng)用也最為成熟的一類成體干細(xì)胞。為爭(zhēng)辯長春新堿(VCR)對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響，科研人員進(jìn)行了相關(guān)爭(zhēng)辯。①將等量的小鼠肝癌Hepa1－6細(xì)胞懸液，分別接種于若干個(gè)含有等量培育液的培育瓶中；②將培育瓶放于37℃、5%CO2培育箱中培育24h，靜置、去除上清液；③分別加入等量但含不同濃度VCR的培育液，置于37℃、5%的CO2培育箱中連續(xù)培育；④分別在24h、36h、48h時(shí)吸取培育液，觀看結(jié)果，得到不同濃度VCR作用于肝癌細(xì)胞不同時(shí)間的抑制率(%)如表所示。

濃度24h36h48h0.5mg/mL12.517.2261.0mg/mL20.531422.0mg/mL31.538.847請(qǐng)回答下列問題：(1)步驟③中需要設(shè)置對(duì)比組，對(duì)比組的處理方法為加入等量不含VCR的培育液(或只加等量培育液)。步驟③中每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置5個(gè)培育瓶同時(shí)進(jìn)行培育，計(jì)數(shù)后統(tǒng)計(jì)平均值，目的是什么？提示目的是減小誤差，使試驗(yàn)結(jié)果更精確?????。(2)依據(jù)表格中的結(jié)果可以得出的結(jié)論是什么？提示VCR對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制率與VCR的濃度和作用時(shí)間呈正相關(guān)?？枷蛞粍?dòng)物細(xì)胞培育1．航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上呈現(xiàn)了培育的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是()A．培育心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．培育心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳C．心肌細(xì)胞在培育容器中通過有絲分裂不斷增殖D．心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)答案B解析培育心肌細(xì)胞的器具要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，但是試劑并不都需要高壓蒸汽滅菌，如動(dòng)物血清不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，否則會(huì)使其中的成分失活，A錯(cuò)誤；心肌細(xì)胞高度分化，不能進(jìn)行有絲分裂，C錯(cuò)誤。2．(2022·湖北，6)某愛好小組開展小鼠原代神經(jīng)元培育的爭(zhēng)辯，結(jié)果發(fā)覺其培育的原代神經(jīng)元生長緩慢，其緣由不行能是()A．試驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織B．為了防止污染將培育瓶瓶口密封C．血清經(jīng)過高溫處理后加入培育基D．所使用的培育基呈弱酸性答案A解析小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元，細(xì)胞增殖力量強(qiáng)，不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢，A符合題意；培育瓶瓶口密封會(huì)使培育液中缺氧，影響細(xì)胞的有氧呼吸，造成供能不足，可能導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢，B不符合題意；血清經(jīng)過高溫處理后，其中活性成分變性，失去原有功能，細(xì)胞的生存環(huán)境嚴(yán)峻惡化，可能導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢，C不符合題意；小鼠的內(nèi)環(huán)境為弱堿性，若所使用的培育基呈弱酸性，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的生存環(huán)境惡劣，可能導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢，D不符合題意?？键c(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1．動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)2．單克隆抗體的制備(1)傳統(tǒng)抗體的獲得①方法②缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低、特異性差。(2)單克隆抗體的制備及優(yōu)點(diǎn)①制備過程②單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)a．能精確?????地識(shí)別抗原的微小差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合(特異性強(qiáng)、靈敏度高)。b．可以大量制備。(3)單克隆抗體的應(yīng)用①被廣泛用作診斷試劑，在多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要的作用。②運(yùn)載藥物，形成抗體—藥物偶聯(lián)物，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。③用于治療疾病。推斷正誤(1)動(dòng)物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞膜的融合也有核的融合(√)(2)動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成單核的雜交細(xì)胞，植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是得到雜種植株(√)(3)動(dòng)物體細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞仍舊是二倍體細(xì)胞(×)提示兩個(gè)二倍體動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜交細(xì)胞具有四個(gè)染色體組，是四倍體細(xì)胞。(4)將抗原注入小鼠體內(nèi)，是為了獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(√)(5)將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合，培育液中融合后的細(xì)胞即雜交瘤細(xì)胞(×)提示將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，需要進(jìn)行篩選。(6)單克隆抗體診斷試劑提高了診斷的精確?????性、靈敏性(√)長春新堿(VCR)能夠干擾腫瘤細(xì)胞的有絲分裂，也會(huì)影響正常細(xì)胞的增殖和分裂，導(dǎo)致藥物副作用的發(fā)生。H18雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗人肝癌單克隆抗體HAb18對(duì)于人體肝癌的診斷和靶向治療具有重要的意義?；卮鹣铝袉栴}：(1)抗人肝癌單克隆抗體HAb18的制備過程中，需要向小鼠體內(nèi)注射肝癌細(xì)胞懸液，其目的是什么？提示刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)單克隆抗體被廣泛用作診斷試劑的緣由是什么？提示單克隆抗體能精確?????地識(shí)別抗原的微小差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。(3)資料：①細(xì)胞合成DNA包括D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。②免疫的B淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但它不能分裂增殖，其本身也不能在體外長期存活。③鼠骨髓瘤細(xì)胞中只有D途徑，沒有S途徑，但它能不斷分裂增殖。假如它的D途徑被阻斷的話，它會(huì)因不能合成DNA而死亡。抗人肝癌單克隆抗體HAb18的制備過程中，需要兩次篩選，請(qǐng)依據(jù)上述資料提出第1次篩選的目的和具體方法。提示第1次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞；第1次篩選的具體方法是利用加入氨基蝶呤的選擇培育基篩選。(4)將VCR與抗人肝癌單克隆抗體HAb18通過接頭連接形成抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌細(xì)胞的特異性殺傷，ADC的作用機(jī)制如圖。據(jù)圖分析，ADC的抗體和藥物(VCR)各具有什么作用？提示ADC的抗體主要發(fā)揮靶向運(yùn)輸作用，攜帶VCR與肝癌細(xì)胞特異性結(jié)合；藥物(VCR)發(fā)揮治療效應(yīng)，通過抑制微管蛋白聚合阻礙紡錘體的形成，從而阻斷肝癌細(xì)胞分裂，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡?？枷蚨?dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體3．(2021·山東，15)一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原打算簇，一個(gè)抗原打算簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗p72的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分別出多抗。下列說法正確的是()A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大B．單抗制備過程中通常將分別出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合C．利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗D．p72部分結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變后會(huì)消滅原單抗失效而多抗仍有效的狀況答案D解析單抗的制作需要篩選，而多抗不需要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越高，因此抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響小，A錯(cuò)誤；單抗制備過程中通常是免疫后將脾臟裂開，然后用離心法將脾臟細(xì)胞(包含各種產(chǎn)生或不產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞)和紅細(xì)胞分開，然后用脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，而不能直接分別出漿細(xì)胞，B錯(cuò)誤；非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72上有多種抗原打算簇，一個(gè)抗原打算簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以向小鼠體內(nèi)注入p72后，可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗，C錯(cuò)誤；p72部分結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變只轉(zhuǎn)變了部分抗原打算簇，因此由這部分抗原打算簇產(chǎn)生的抗體失效，但由于還存在由其他抗原打算簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，所以多抗仍有效，D正確。4．(2023·湖北，22節(jié)選)某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害格外嚴(yán)峻。我國學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測(cè)該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)________(填“需要”或“不需要”)通過原代培育擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培育基(如HAT培育基)，該培育基對(duì)________________________和____________________生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是_______________________________________________________________________________________________。答案(1)不需要使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合(2)未融合的親本細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞(3)通過抗體檢測(cè)呈陽性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞解析(1)漿細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能增殖，所以不能通過原代培育擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量。脂溶性物質(zhì)PEG可使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常用特定的選擇培育基進(jìn)行篩選，在該培育基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，是運(yùn)用了抗原—抗體雜交技術(shù)，抗體檢測(cè)呈陽性的細(xì)胞，即為所需的雜交瘤細(xì)胞?？键c(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1．動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的概念和類型(1)概念將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。(2)原理：動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。(3)類型：哺乳動(dòng)物核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，其中胚胎細(xì)胞核移植較易成功。2．體細(xì)胞核移植的過程提示目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人接受梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透亮?????帶的狀況下去核或使其中的DNA變性。3．體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景和存在的問題

前景畜牧業(yè)加速家畜遺傳改良進(jìn)程、促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育醫(yī)藥衛(wèi)生①作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；②轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織或器官可以用于異種移植；③人核移植胚胎干細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官，可用于器官移植科學(xué)爭(zhēng)辯①爭(zhēng)辯克隆動(dòng)物可使人類更深化地了解胚胎發(fā)育及年輕過程；②克隆一批遺傳背景相同的動(dòng)物，可以通過它們之間的對(duì)比來分析致病基因；③克隆特定疾病模型的動(dòng)物，為爭(zhēng)辯致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)的藥物供應(yīng)掛念愛護(hù)瀕危物種增加瀕危物種的存活數(shù)量問題①成功率格外低；②絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在健康問題，表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷推斷正誤(1)通過克隆技術(shù)形成重組細(xì)胞并發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性(×)提示動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理是動(dòng)物體細(xì)胞核的全能性，而不是動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(2)核移植過程中供體理論上是供應(yīng)細(xì)胞核，但操作過程中可以把整個(gè)細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中(√)(3)重構(gòu)胚是指人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成完整個(gè)體的力量(√)(4)可用Ca2＋載體激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程(√)(5)克隆動(dòng)物的性狀與供核動(dòng)物完全相同(×)提示克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自卵母細(xì)胞，與供核細(xì)胞不完全相同，且克隆動(dòng)物與供核動(dòng)物的生活環(huán)境可能有差異，因此二者的性狀不完全相同。癌癥早中期的患者往往通過相應(yīng)的組織或者器官摘除來進(jìn)行治療，但是組織和器官摘除往往嚴(yán)峻影響患者的正常生活和身心健康，如圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)器官的過程。分析并回答下列問題：(1)細(xì)胞A一般選用卵母細(xì)胞，為什么？提示由于卵母細(xì)胞體積大，易操作；養(yǎng)分豐富；卵母細(xì)胞中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性的物質(zhì)。(2)在將體細(xì)胞的核移植到細(xì)胞A之前，為什么必需先對(duì)細(xì)胞A進(jìn)行去核操作？提示為了使核移植的胚胎或核遺傳物質(zhì)全部來自患者供應(yīng)的正常體細(xì)胞。考向三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物5．(2021·遼寧，13)如圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程圖，有關(guān)敘述正確的是()A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同打算B．過程①需要供應(yīng)95%空氣和5%CO2的混合氣體C．過程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理D．過程③將激活后的重組細(xì)胞培育至原腸胚后移植答案B解析后代丁的細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來自甲，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來自乙，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同打算，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培育中需要供應(yīng)95%空氣(保證細(xì)胞的有氧呼吸)和5%CO2(維持培育液的pH)的混合氣體，B正確；過程②常使用顯微操作去核法對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯(cuò)誤；過程③將激活后的重組細(xì)胞培育至囊胚或桑葚胚后移植，D錯(cuò)誤。6．(2024·廈門高三模擬)如圖為體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”的培育流程，為建立動(dòng)物模型、爭(zhēng)辯疾病機(jī)理帶來光明前景。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．過程①將成纖維細(xì)胞注射到去核的卵母細(xì)胞中，說明細(xì)胞膜的把握作用是相對(duì)的B．卵子細(xì)胞質(zhì)中含有促使成纖維細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)C．中中、華華的性別由成纖維細(xì)胞的遺傳物質(zhì)打算D．“去核”去除的是紡錘體—染色體復(fù)合物答案A解析過程①將成纖維細(xì)胞注射到去核的卵母細(xì)胞中是在人為操作下進(jìn)行的，不能說明細(xì)胞膜的把握作用是相對(duì)的，A錯(cuò)誤。

1．(選擇性必修3P44)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)，一般置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培育箱中進(jìn)行培育。CO2的主要作用是維持培育液的pH。2．(選擇性必修3P44)細(xì)胞貼壁：細(xì)胞貼附在培育瓶的瓶壁上的現(xiàn)象。3．(選擇性必修3P44)接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。4．(選擇性必修3P44)細(xì)胞在培育過程中分裂受阻的緣由：懸浮培育的細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培育液中養(yǎng)分物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻；對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，除上述因素外，還會(huì)由于接觸抑制而停止分裂增殖。5．(選擇性必修3P48)誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。6．(選擇性必修3P49)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。7．(選擇性必修3P50)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是能精確?????地識(shí)別抗原的微小差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。8．(選擇性必修3P54)核移植技術(shù)中必需先去掉受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的緣由是保證核移植動(dòng)物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞。9．(選擇性必修3P54)通過體細(xì)胞核移植技術(shù)培育的克隆動(dòng)物，不是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制，緣由是克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自供體細(xì)胞核，其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA來自受體卵母細(xì)胞。此外，動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系。10．(2020·全國Ⅰ，38節(jié)選)為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為試驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下試驗(yàn)流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)上述試驗(yàn)前必需給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所接受的培育基屬于選擇培育基，使用該培育基進(jìn)行細(xì)胞培育的結(jié)果是只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。課時(shí)精練一、選擇題1．(2024·武漢高三模擬)體外培育動(dòng)物細(xì)胞時(shí)常需要供應(yīng)一個(gè)類似該細(xì)胞在生物體內(nèi)的環(huán)境條件，培育方式可分為懸浮培育和貼壁培育。下列敘述正確的是()A．懸浮培育一般使用液體培育基B．貼壁培育一般使用固體培育基C．懸浮培育會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D．血液中淋巴細(xì)胞適合貼壁培育答案A解析動(dòng)物細(xì)胞培育均接受液體培育基，B錯(cuò)誤；貼壁培育會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，懸浮培育不會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，C錯(cuò)誤；體外培育動(dòng)物細(xì)胞時(shí)常需要供應(yīng)一個(gè)類似該細(xì)胞在生物體內(nèi)的環(huán)境條件，因此血液中淋巴細(xì)胞適合懸浮培育，D錯(cuò)誤。2．(2024·鹽城高三診斷)為初步驗(yàn)證藥物P1和P2的抗癌效果，爭(zhēng)辯人員將用動(dòng)物細(xì)胞培育液培育的癌細(xì)胞隨機(jī)分成3份，每一份均分成5組，試驗(yàn)組分別加入用生理鹽水配制的不同濃度的藥物P1和P2，試驗(yàn)結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．本試驗(yàn)至少要設(shè)計(jì)并完成11組試驗(yàn)B．對(duì)比組需要加入等量的生理鹽水C．藥物P2的抗癌效果比藥物P1的抗癌效果強(qiáng)D．試驗(yàn)不能說明藥物P1和P2對(duì)正常細(xì)胞有抑制作用答案C解析本試驗(yàn)與藥物P1有關(guān)的試驗(yàn)組有5組，與藥物P2有關(guān)的試驗(yàn)組有5組，對(duì)比組1組，因此，本試驗(yàn)至少要設(shè)計(jì)并完成11組試驗(yàn)，A正確；為排解無關(guān)變量對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，對(duì)比組需要加入等量的生理鹽水，B正確；本試驗(yàn)沒有進(jìn)行藥物P1和P2對(duì)正常細(xì)胞增殖的影響，因而不能說明藥物P1和P2對(duì)正常細(xì)胞有抑制作用，D正確。3．(2024·張家口高三模擬)科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，將它稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱iPS細(xì)胞)，iPS細(xì)胞增殖分化后可形成多種組織細(xì)胞，用于多種疾病的治療。如圖為該技術(shù)的試驗(yàn)示意圖，下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是()A．體外培育小鼠成纖維細(xì)胞和iPS細(xì)胞時(shí)，定期更換培育液可以清除細(xì)胞的代謝物B．選取的小鼠成纖維組織需經(jīng)胃蛋白酶或膠原蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞后制成細(xì)胞懸液C．iPS細(xì)胞用于疾病治療時(shí)存在分化為腫瘤細(xì)胞的風(fēng)險(xiǎn)D．若iPS細(xì)胞取自病人，經(jīng)誘導(dǎo)并移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避開免疫排斥反應(yīng)答案B解析選取的小鼠成纖維組織需經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞后制成細(xì)胞懸液，由于動(dòng)物細(xì)胞培育的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，B錯(cuò)誤。4．(2024·汕頭高三調(diào)研)甲型流感單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細(xì)胞在克隆化培育過程中來自B淋巴細(xì)胞的染色體往往消滅隨機(jī)丟失現(xiàn)象，不考慮基因互作和其他變異。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．可從多次間歇注射甲型流感疫苗的動(dòng)物脾臟中篩選獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞B．在HAT選擇培育基上，B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均無法長期存活C．用96孔板培育和篩選雜交瘤細(xì)胞時(shí)每一個(gè)孔盡量只接種一個(gè)細(xì)胞D．抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤細(xì)胞即具有持續(xù)產(chǎn)生甲型流感抗體的力量答案D解析雜交瘤細(xì)胞在克隆化培育過程中來自B淋巴細(xì)胞的染色體往往消滅隨機(jī)丟失現(xiàn)象，若丟失的染色體含有產(chǎn)生甲型流感抗體的基因，則雜交瘤細(xì)胞分泌單克隆抗體的功能將丟失，D錯(cuò)誤。5．(2024·武漢高三調(diào)研)CD47是一種細(xì)胞膜表面糖蛋白，可與巨噬細(xì)胞結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。為驗(yàn)證抗CD47的單克隆抗體可以減弱CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，科學(xué)家依據(jù)如圖流程進(jìn)行了試驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．試驗(yàn)流程中CD47充當(dāng)抗原的作用B．融合、篩選得到的雜交瘤細(xì)胞不肯定能產(chǎn)生抗CD47的單克隆抗體C．對(duì)比組應(yīng)設(shè)置為：巨噬細(xì)胞＋正常細(xì)胞共培育體系＋單克隆抗體D．預(yù)期試驗(yàn)結(jié)果為試驗(yàn)組的巨噬細(xì)胞的吞噬力量高于對(duì)比組答案C解析用CD47免疫小鼠，則CD47充當(dāng)抗原，A正確；融合、篩選得到的雜交瘤細(xì)胞不肯定能產(chǎn)生抗CD47的單克隆抗體，還需要進(jìn)行專一抗體檢測(cè)，B正確；依據(jù)單一變量原則可知，應(yīng)設(shè)置不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培育體系作為對(duì)比，C錯(cuò)誤；試驗(yàn)組中加入的抗CD47的單克隆抗體，與腫瘤細(xì)胞表面的CD47發(fā)生特異性結(jié)合，從而解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，而對(duì)比組中沒有加入單克隆抗體，因此，試驗(yàn)組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于對(duì)比組可驗(yàn)證上述推想，D正確。6.細(xì)胞毒素類藥物能有效殺傷腫瘤細(xì)胞，但也會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成損害，科學(xué)家將細(xì)胞毒素與單克隆抗體結(jié)合制成抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)，ADC又被稱作“生物導(dǎo)彈”，通常由抗體、接頭和藥物三部分組成(如圖所示)。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．雜交瘤細(xì)胞釋放單克隆抗體，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流淌性B．接頭的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定會(huì)導(dǎo)致藥物分子脫落，造成正常細(xì)胞被破壞C．ADC中的抗體能特異性識(shí)別并殺傷腫瘤細(xì)胞D．利用放射性同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病答案C解析單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞通過胞吐的方式釋放，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流淌性，A正確；ADC通常由抗體、接頭和藥物三部分組成，假如接頭的結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定會(huì)導(dǎo)致藥物分子脫落，則藥物分子失去了靶向性，造成正常細(xì)胞被破壞，B正確；單克隆抗體能與抗原特異性結(jié)合，這種靶向作用使ADC中的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷，而不是抗體殺傷腫瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；利用放射性同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病，該過程利用了抗原—抗體特異性結(jié)合原理，D正確。7．(2024·常州高三模擬)CD47是一種在多種細(xì)胞中廣泛表達(dá)的跨膜糖蛋白，能夠與巨噬細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，并抑制其吞噬作用。結(jié)腸癌等多種癌細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍?？蒲腥藛T制備抗CD47的單克隆抗體，以探究其對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬作用的影響。下列說法正確的是()A．編碼CD47的基因是一種原癌基因B．制備抗CD47的單克隆抗體過程中需為細(xì)胞供應(yīng)95%O2、5%CO2的氣體環(huán)境C．制備抗CD47的單克隆抗體過程中可利用CD47篩選出目標(biāo)雜交瘤細(xì)胞D．將細(xì)胞毒素與抗CD47單克隆抗體偶聯(lián)到一起，可實(shí)現(xiàn)對(duì)癌細(xì)胞的精準(zhǔn)殺傷答案C解析由題意可知，編碼CD47的基因不是原癌基因，由于它的作用是通過調(diào)整免疫系統(tǒng)的功能來影響腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移，而不是通過直接影響細(xì)胞的增殖和分化來促進(jìn)癌癥的發(fā)生，A錯(cuò)誤；制備抗CD47的單克隆抗體過程中，細(xì)胞需在含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培育箱中進(jìn)行培育，B錯(cuò)誤；目標(biāo)雜交瘤細(xì)胞可產(chǎn)生抗CD47抗體，可利用CD47篩選出目標(biāo)雜交瘤細(xì)胞，C正確；正常細(xì)胞表面也含有CD47，對(duì)癌細(xì)胞精準(zhǔn)殺傷應(yīng)選擇癌細(xì)胞特有蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。8．(2024·廈門高三質(zhì)檢)如圖表示雙抗體夾心法，該方法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，利用細(xì)胞工程技術(shù)制備的單克隆抗體能增加該過程的有效性，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．加入酶標(biāo)抗體的目的是通過測(cè)定酶反應(yīng)產(chǎn)物量來推斷待測(cè)抗原量B．固相抗體和酶標(biāo)抗體雖都能與抗原結(jié)合，但二者仍具有不同的結(jié)構(gòu)C．將相關(guān)抗原注射到小鼠體內(nèi)，目的是從小鼠脾中獲得所需的單克隆抗體D．反應(yīng)體系中兩種抗體的量相對(duì)于待檢抗原需過量以確保檢測(cè)結(jié)果的精確?????性答案C解析反應(yīng)體系中固相抗體的作用是固定待測(cè)抗原，酶標(biāo)抗體的作用是與待測(cè)抗原結(jié)合并由酶催化檢測(cè)底物反應(yīng)，這樣就可以通過測(cè)定酶促反應(yīng)產(chǎn)物量來推斷待測(cè)抗原量，兩種抗體的量相對(duì)于待檢抗原需過量以確保檢測(cè)結(jié)果的精確?????性，A、D正確；抗體與抗原的結(jié)合具有特異性，因此不同抗體可與同一抗原表面的不同部位結(jié)合，固相抗體和酶標(biāo)抗體具有不同的結(jié)構(gòu)，B正確；將相關(guān)抗原注射到小鼠體內(nèi)，目的是從小鼠脾臟中獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，不能直接得到單克隆抗體，C錯(cuò)誤。9．(2024·蘇州高三模擬)2017年11月，世界上首個(gè)體細(xì)胞克隆猴“中中”在我國誕生，同年“華華”誕生，寓意為“中華”。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．“中中”和“華華”的培育過程屬于無性生殖B．克隆猴培育過程利用的技術(shù)有核移植、體外受精和胚胎移植C．卵母細(xì)胞中含有大量的養(yǎng)分物質(zhì)，并含有誘導(dǎo)體細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)D．可接受電融合法使供體細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合答案B解析克隆猴涉及的生物工程技術(shù)有核移植、早期胚胎培育和胚胎移植，不涉及體外受精，B錯(cuò)誤。10．科學(xué)家采集了一只一歲半的、睡眠紊亂最明顯的BMAL1(生物節(jié)律基因)敲除猴A6的體細(xì)胞，通過體細(xì)胞核移植技術(shù)，獲得了5只克隆猴——這是國際上首次成功構(gòu)建的一批遺傳背景全都的生物節(jié)律紊亂獼猴模型。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．體細(xì)胞核移植技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培育B．5只克隆猴細(xì)胞的核基因型與核供體細(xì)胞的完全全都C．取自新穎卵巢的卵母細(xì)胞可以直接作為受體細(xì)胞使用D．該爭(zhēng)辯可以彌補(bǔ)試驗(yàn)獼猴繁殖周期長、單胎數(shù)量少的不足答案C解析動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，A正確；克隆猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞完全全都，細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞，B正確；取自新穎卵巢的卵母細(xì)胞需培育到MⅡ期，才能作為受體細(xì)胞使用，C錯(cuò)誤。11．2017年，某國批準(zhǔn)了首例使用細(xì)胞核移植技術(shù)培育“三親嬰兒”的申請(qǐng)。其培育過程可選用如下技術(shù)路線。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因能夠遺傳給“三親嬰兒”B．該技術(shù)可以有效避開母親線粒體DNA中的致病基因遺傳給后代C．捐贈(zèng)者的卵子去核實(shí)質(zhì)是指去除細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物D．“三親嬰兒”同時(shí)擁有自己父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者的部分基因答案A解析捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因位于其細(xì)胞核內(nèi)，而捐獻(xiàn)者給“三親嬰兒”供應(yīng)的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，故捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給“三親嬰兒”，A錯(cuò)誤；母親為“三親嬰兒”供應(yīng)的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，后代的線粒體基因來自捐獻(xiàn)者的卵母細(xì)胞，故該技術(shù)可避開母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代，B正確；“三親嬰兒”的細(xì)胞核基因一半來自母親，一半來自父親，細(xì)胞質(zhì)基因來自卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者，所以“三親嬰兒”同時(shí)擁有自己父親、母親及卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者的部分基因，D正確。12．(2024·河北衡水中學(xué)高三模擬)iPS細(xì)胞被稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞，可通過轉(zhuǎn)入相關(guān)因子來制備。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來，后來發(fā)覺已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)成該類細(xì)胞。下列說法錯(cuò)誤的是()A．導(dǎo)入的物質(zhì)可以是DNA、蛋白質(zhì)，還可用小分子物質(zhì)來誘導(dǎo)B．iPS細(xì)胞的體外培育需要在無菌的CO2培育箱中進(jìn)行C．T細(xì)胞、B細(xì)胞能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞，說明體內(nèi)細(xì)胞的分化是可逆的D．與胚胎干細(xì)胞相比，iPS細(xì)胞具有細(xì)胞來源廣泛，不需要破壞胚胎等優(yōu)點(diǎn)答案C解析目前已接受多種方法來制備iPS細(xì)胞，包括借助載體將特定的基因?qū)爰?xì)胞中，直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞，A正確；iPS細(xì)胞的體外培育是利用動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)，需要在無菌的CO2培育箱中進(jìn)行培育，B正確；T細(xì)胞、B細(xì)胞能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞，說明離體的、已分化的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)可轉(zhuǎn)化為未分化的狀態(tài)，C錯(cuò)誤。13．(2024·重慶高三月考)一種雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，抗體由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈構(gòu)成?？蒲腥藛T通過動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將兩種不同的雜交瘤細(xì)胞(A和B)融合形成雙雜交瘤細(xì)胞AB，雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在液體培育基中生長繁殖，產(chǎn)生的雙特異性抗體AB如圖所示。下列相關(guān)說法不正確的是()A．若雙特異性抗體應(yīng)用于腫瘤治療，則α、β抗原中至少有一種為癌細(xì)胞表面抗原B．雙雜交瘤細(xì)胞無需識(shí)別α、β抗原，就能產(chǎn)生雙特異性抗體C．對(duì)培育到肯定密