人教版選修1-專題2-課題2-土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)-作業(yè)

專題2課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)[學(xué)生用書P71(單獨成冊)]一、選擇題1．土壤中的尿素分解菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成()A．尿素酶 B．脲酶C．蛋白酶 D．肽酶解析：選B。土壤中的尿素分解菌體內(nèi)能夠產(chǎn)生脲酶，脲酶能夠?qū)⑼寥乐械哪蛩胤纸鉃榘薄?．三個培養(yǎng)皿中分別加入10mL不同的培養(yǎng)基，然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36小時后，計算菌落數(shù)，結(jié)果如下表。下列選項不正確的是()培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)Ⅰ瓊脂、葡萄糖35Ⅱ瓊脂、葡萄糖、生長因子250Ⅲ瓊脂、生長因子0A．該實驗采用的是固體培養(yǎng)基B．該實驗采用稀釋涂布平板法接種C．Ⅰ和Ⅱ?qū)φ?，說明大腸桿菌的生長不需要生長因子D．Ⅱ和Ⅲ對照，說明大腸桿菌的生長需要糖類解析：選C。Ⅰ與Ⅱ?qū)φ?，Ⅰ缺少生長因子，菌落數(shù)少于Ⅱ，說明大腸桿菌的生長需要生長因子。3．(2019·山西太原高二期末)用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對照是()A．未接種的選擇培養(yǎng)基B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基D．接種了的選擇培養(yǎng)基解析：選C。取稀釋相同倍數(shù)的菌液，分別接種在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上，則前者生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于后者生長的菌落數(shù)目，因此，接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基即為所需要的對照。設(shè)置對照實驗應(yīng)遵循單一變量原則，所以應(yīng)與選擇培養(yǎng)基一樣進(jìn)行接種、培養(yǎng)。4．分離土壤中分解尿素的細(xì)菌，對培養(yǎng)基的要求是()①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦解析：選C。分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)微生物，因此培養(yǎng)基中應(yīng)該加入有機碳源，如葡萄糖；分離分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基從功能上分屬于選擇培養(yǎng)基，應(yīng)該以尿素為唯一氮源；從物理性質(zhì)上分屬于固體培養(yǎng)基，因此應(yīng)加入凝固劑瓊脂。5．(2019·四川彭州中學(xué)期中)苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B．如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C．若圖中④為對照實驗，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一碳源D．使用平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落答案：C6．下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A．微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進(jìn)行消毒B．測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法C．分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D．分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源解析：選A。微生物培養(yǎng)前，需對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，而不是消毒；測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計數(shù)法；分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度以便能從中選擇出菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計數(shù)；分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源。7．(2019·湖北沙市中學(xué)高二月考)下列需要在火焰旁操作的有()①土壤取樣②稱取土壤③稀釋土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培養(yǎng)A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④答案：D8．(2019·海南中學(xué)期末)下列關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)實驗的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，該細(xì)菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B．選擇菌落數(shù)在30～300間的所有平板進(jìn)行計數(shù)，以平均數(shù)為實驗結(jié)果C．要用所有的稀釋液涂布平板，以便選擇出菌落數(shù)在30～300間的平板D．應(yīng)該設(shè)置對照以排除非測試因素對實驗結(jié)果的干擾，提高可信度解析：選D。土壤中分解尿素的細(xì)菌為異養(yǎng)菌，硝化細(xì)菌是自養(yǎng)菌，其碳源為二氧化碳，故二者利用的碳源不同，A錯誤；同一稀釋度下，選擇菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計數(shù)，舍去數(shù)據(jù)相差較大的數(shù)據(jù)，以平均數(shù)為實驗結(jié)果，B錯誤；取0.1mL稀釋液涂布平板，選擇菌落數(shù)在30～300間的平板進(jìn)行計數(shù)，C錯誤；分離微生物時，需要設(shè)置不接種的培養(yǎng)基與實驗組一起培養(yǎng)做空白對照，設(shè)置對照的目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的干擾，D正確。9．(2019·河北波峰中學(xué)高二月考)下圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析下列敘述正確的是()A．3號試管的稀釋倍數(shù)為103倍B．4號試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)恰好為5號試管的10倍C．5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)約為1.7×109個D．該實驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要高答案：C二、非選擇題10．(2019·甘肅蘭州診斷)食品安全一直是世界各國最關(guān)注的話題之一，日前席卷全球的非洲豬瘟疫情還未降溫，2月8日世界動物衛(wèi)生組織(OIE)又報告稱，以色列發(fā)生了山羊分歧桿菌疫情。某研究機構(gòu)檢測了導(dǎo)致山羊致病的微生物，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)微生物接種最常用的兩種方法是________________和________________。所用的培養(yǎng)基是________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基滅菌的方法是______________。(2)在5個平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上的菌落數(shù)分別為48、50、54、56、430，則每升原菌液樣品中細(xì)菌數(shù)為________個。如果用顯微鏡直接計數(shù)法對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)時，所統(tǒng)計的細(xì)菌數(shù)通常會比稀釋涂布平板法統(tǒng)計數(shù)目偏________，原因是________________________________________________________。(3)如果采用平板劃線法分離細(xì)菌。操作時，劃線四次一共需要灼燒接種環(huán)________次。第二次劃線之前要灼燒接種環(huán)，目的是________________________的菌種。答案：(1)平板劃線法稀釋涂布平板法固體高壓蒸汽滅菌法(2)5.2×108大顯微鏡直接計數(shù)法將活菌和死菌均計數(shù)在內(nèi)(3)5殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留(或殺死接種環(huán)上)11．(2019·廣東云浮高二質(zhì)檢)在肉牛產(chǎn)業(yè)中，常在飼料中加入一定量的尿素，因其有瘤胃，在瘤胃中生活著多種微生物，其中許多微生物以尿素作為唯一氮源。某同學(xué)設(shè)計了如下實驗，對能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計數(shù)。分析并回答下列問題：(1)圖中弧線箭頭上“？”的具體操作是_____________________________________。(2)純化菌種時為了得到單一菌落，常采用的接種方法是_______________________。(3)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________，培養(yǎng)后，若出現(xiàn)________色，說明其中含有能夠分解尿素的細(xì)菌。(4)在實驗中，當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時，應(yīng)選取________方法計數(shù)；研究者每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止__________________________________。答案：(1)挑出菌落(2)平板劃線法、稀釋涂布平板法(3)酚紅指示劑紅(4)平板計數(shù)因培養(yǎng)時間不足導(dǎo)致遺漏細(xì)菌菌落數(shù)目12．日前微博傳言手機細(xì)菌比馬桶多。如圖，央視和北京衛(wèi)視通過實驗展示調(diào)查結(jié)果。回答下列相關(guān)問題：(1)該實驗需制備________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入________可配制成固體培養(yǎng)基。(2)據(jù)圖，兩電視臺均采用______________法接種，接種前需要采用______________法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。(3)通過觀察菌落的________________以初步鑒定手機屏幕和馬桶按鈕上的生物類群。兩電臺實驗操作均正確且完全一致，但報道結(jié)果截然不同，你認(rèn)為原因是：________________________________________________________________________。(4)按圖操作取樣面積，實驗員測定某手機屏幕的細(xì)菌數(shù)量，將10mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，分別取0.1mL稀釋倍數(shù)為100倍的樣品液接種到三個培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，統(tǒng)計菌落數(shù)分別為98、100、102，則該手機屏幕的細(xì)菌數(shù)為________個/cm2。該實驗對照組要取培養(yǎng)基涂布________________進(jìn)行培養(yǎng)。答案：(1)固體瓊脂(2)稀釋涂布平板高壓蒸汽滅菌(3)形狀、大小、隆起程度和顏色等手機的取樣和馬桶的取樣都不相同(4)4×1040.1mL無菌水13．(2019·四川成都七中高二期中)下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請回答下列有關(guān)問題：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素蒸餾水1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g定容至1000mL(1)該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長，這種培養(yǎng)基稱為________培養(yǎng)基。(2)若要通過統(tǒng)計培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是________，接種時應(yīng)采用________法。(3)從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對其做進(jìn)一步的鑒定，即在上述培養(yǎng)基中加入________指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變________，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。解析：(1)該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細(xì)菌生長，故這種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。(2)若要通過統(tǒng)計培養(yǎng)基中菌落數(shù)來估計樣品中的細(xì)菌數(shù)，需用固體培養(yǎng)基，故上述培養(yǎng)基中還需要添加的成分是瓊脂，接種時應(yīng)采用稀釋涂布平板法。(3)由于細(xì)菌分解尿素的過程中產(chǎn)生了氨，氨能使培養(yǎng)基的pH升高，故從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對其做進(jìn)一步的鑒定，即在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)該菌后，如果指示劑變紅，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。答案：(1)選擇(2)瓊脂稀釋涂布平板(3)酚紅紅14．(2017·高考江蘇卷)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題：(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有____________。(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸________，以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應(yīng)進(jìn)一步________，以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外，還必須添加________。(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中________(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng)，下表中1～5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為____________。管號123456苯酚濃度(mg/L)1如果廢水為50mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋________(填序號：①5②10③20)倍后，再進(jìn)行比色。解析：(1)富集培養(yǎng)基中蛋白胨、苯酚都是含碳的有機物，可作為碳源。(2)欲富集酚降解菌，需隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加逐漸增加培養(yǎng)基中苯酚的含量；若接種培養(yǎng)后平板上菌落過于密集，則應(yīng)進(jìn)一步稀釋后再進(jìn)行涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計數(shù)與分離；平板培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，除含有水、營養(yǎng)物質(zhì)(碳源、氮源、無機鹽等)外，還需添加瓊脂作為凝固劑。(3)利用