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文檔簡介
高中生物基因工程知識點總結
基因工程的概念
基因工程是指按照人們的愿望,進行嚴格的設計,通過,賦予生
物以,創(chuàng)造出o基因工程是在上進行設
計和施工的,又叫做o
(一)基因工程的基本工具
1.”分子手術刀"_________________________
(1)來源:主要是從中分離純化出來的。
(2)功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種的核甘酸序列,并
且使每一條鏈中一..一部位的兩個核甘酸之間的
斷開,因此具有性。
(3)結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:
___._和_______:_
2.“分子縫合針“一一一1
(1)兩種DNA連接酶(和)的
比較:
①相同點:都縫合鍵。
②區(qū)別:E?coliDNA連接酶來源于,只能將雙鏈DNA片
段互補的之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連
接酶能縫合但連接平末端的之間的效率較
⑵與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將力口至U已有
的核甘酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接
的末端,形成磷酸二酯鍵。
3.“分子運輸車”一一
(1)載體具備的條件:①___________________________
(2)最常用的載體是,它是一種裸露的、結構簡單的、獨
立于,并具有能力的
_DNA分子。
(3)受它載體:______________________________
(二)基因工程的基本操作程序
第一步;
1、獲取目的基因的方法________________________________
(1)基因文庫是___________________________________________
cDNA文庫是_________________________________________________
(2).PCR技術擴增目的基因
①原理:
②原料:________________________________________
③過程:第一:加熱至90?951使.;
第二:冷卻到55?60。&;
第三:加熱至70?752,進行互補鏈的合成。
第二步:一.
1.目的:使目的基因在受體細胞中,并且可以
—,使目的基因能夠。
2.組成:+++
(1)啟動子:是一段有特殊結構的,位于基因的
是酶識別和結合的部位,能驅動基因
―,最終獲得所需的。
(2)終止子:也是一段有特殊結構的,位于基因的
(3)標記基因的作用:是為了鑒定受體細胞中
從而將篩選出來。常用的標記基因是
o第三步J_____________________
常用的轉化方法:
將目的基因導入植物細胞:采用最多的方法是,其
次還有和
_______等。
將目的基因導入動物細胞:最常用的方法是。此
方法的受體細胞多是o
將目的基因導入微生物細胞:原核生物作為受體細胞的原因是
,最常用的原核細胞是,其轉化方法是
先用處理細胞,使其成為再將
溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA
分子,完成轉化過程。
第四步:
[首先要檢測上是否插入了,方法是采用
2.其次還要檢測,方法是采用用作
探針與雜交。
3.最后檢測,方法是從轉基因生物中提取—,用
相應的進行O
4.有時還需進行水平的鑒定。如
(四)蛋白質工程
蛋白質工程的基本途徑:
專題2細胞工程
(一)植物細胞工程
1.理論基礎(原理):
2.植物組織培養(yǎng)技術
(1)過程:離體的植物器官、組織或細胞>--------------*試管苗一
一植物體
(2)用途:微型繁殖、、、、細胞產物
的工廠化生產。
3.植物體細胞雜交技術
(1)過程:
植物細胞甲-逑4原生質體甲
植物細胞乙-逑"甦質體乙
質體.急修種細胞脫加>愈傷組織再分化》雜種植株
(2)誘導融合的方法:物理法包括等。
化學法一般是用作為誘導劑。
(3)意義:_______________________
(二)動物細胞工程
1.動物細胞培養(yǎng)
(1)概念:動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的—,將它分
散成,然后放在適宜的中,讓這些細胞
(2)動物細胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或
組織)一剪碎一用處理分散成一
制成一轉入培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)一貼滿瓶壁的
細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)
―培養(yǎng)。
(3)細胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細胞很快就,
稱為。細胞數目不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面_
時,細胞就會:,這種現象稱為
(4)動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件
①的環(huán)境:培養(yǎng)液應進行處理。通常還要在培養(yǎng)液中添
加一定
量的,以防培養(yǎng)過程中的污染。
②營養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素
等。通常需力口入;等天然成分。
③溫度:適宜溫度:哺乳動物多是36.5℃+0.5℃;pH:7.2-7.4
④氣體環(huán)境:95%+5%o是所必
需的,C02的主要作用是
2.動物體細胞核移植技術和克隆動物
(1)哺乳動物核移植可以分為核移植(比較容易)和
_核移植(比較難)。
(2)選用去核卵(母)細胞的原因:__________________________________
逸洋供體母牛受體母牛
(3)體細胞核移植的大致過程是:II
.....一一同期發(fā)情處理.........
I
巡級排卵
供體公牛一R#
I
沖卵
I
質,檢奇、培罪一*即胞移位
,I
妊娓槍交
I
分娩《胚胎移M的膜牛)
@為(b)為。
(4)體細胞核移植技術存在的問題:
克隆動物存在著問題、表現缺陷等。
3.動物細胞融合
(1)動物細胞融合也稱,是指兩個或多個動物細胞結合形成
一個細胞的過程。融合后形成的具有原來細胞遺傳信
息的單核細胞,稱為
(2)動物細胞融合與植物原生質體融合的原理基本相同,誘導動物細胞融
合的方法與植物原生質體融合的方法類似,常用的誘導因素有
___________、、_________等O
(3)動物細胞融合的意義:克服了,成為研
究.、.、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。
4.單克隆抗體
(1)單克隆抗體的制備過程:
(2)雜交瘤細胞的特點:既能,又能產生
(3)單克隆抗體的優(yōu)點:o
(4)單克隆抗體的作用:
①作為診斷試劑:準確識別各種.............物質的細微差異,并跟
發(fā)生特異性結合,具有..
的優(yōu)點。
②用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療,可制成
””,也有少量用于治療其它疾病。
專題3胚胎工程
(-)動物胚胎發(fā)育的基本過程
1、動物胚胎發(fā)育的基本過程
(1)受精場所是母體的0
(2)卵裂期:特點:細胞有絲分裂,細胞數量不斷增加,但胚胎的總體體
積。
(3)桑松胚:特點:胚胎細胞數目達到32個左右時,胚胎形成致密的細
胞團,形似桑根。是細胞。
(4)囊胚:特點:細胞開始出現(該時期細胞的)o
聚集在胚胎一端個體較大的細胞稱為,
將來發(fā)育成胎兒的各種組織。中間的空腔稱為
(5)原腸胚:
(二)胚胎干細胞
1、哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞,來源于
中分離出來。
2、具有胚胎細胞的特性,在形態(tài)上表現為小,大,
明顯;在功能上,具有發(fā)育的,可分化為成年
動物體內任何一種組織細胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以——
——而不發(fā)生,可進行保存,也可進行——
3、胚胎干細胞的主要用途是:
①可用于研究哺乳動物;
②是在體外條件下研究的理想材料,在培養(yǎng)液中加入
如牛黃酸等化學物質時,就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞
分化,這為揭示...............的機理提供了有效的手段;
③可以用于治療人類的某些,如帕金森綜合癥、少年糖尿病
等;
④利用可以被誘導分化形成新的特性,移植ES細胞可使壞死或
退化的部位得以修復并恢復正常功能;
⑤隨著組織工程技術的發(fā)展,通過ES細胞,定向
培育出,用于,解決供體器官不足
和器官移植后的問題。
(三)胚胎工程的應用
L體外受精和胚胎的早期培養(yǎng)
(1)卵母細胞的采集和培養(yǎng):
主要方法:用處理,使其排出更多的卵子,然后,從
—中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第二種方法:從剛屠宰母
畜的中采集卵母細胞;第三種方法是借助超聲波探測儀、腹腔鏡等直
接從中吸取卵母細胞。采集的卵母細胞,都要在體外經
后,才能與受精。
(2)精子的采集和獲能:在體外受精前,要對精子進行處理。
(3)受精:獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵細胞在溶液或專用的_
—成受精過程。
⑷胚胎的早期培養(yǎng):不同動物胚胎移植的時間不同。(牛、羊一般要培育
到或階段才能進行移植,小
鼠、家兔等實驗動物可在——的階段移植,人的體
外受精胚胎可在
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