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文檔簡介

第一章藥理學實驗的基礎(chǔ)知識

一、藥理學實驗課的目的和要求

藥理學實驗課的目的在于通過實驗,使學生掌握進行藥理學實驗的基本方法,了解獲得

藥理學知識的科學途徑,驗證藥理學中的重要基本理論,更牢固地掌握藥理學的基本概念。

在實驗課中還應(yīng)培養(yǎng)學生科學工作的嚴肅的態(tài)度、嚴格的要求、嚴密的工作方法和實事求是

的作風,并初步具備客觀地對事物進行觀察、比較、分析、綜合和解決實際問題的能力。

為了達到上述目的,要求做到下列事項:

實驗前(1)仔細閱讀實驗指導,了解實驗?zāi)康?、要求、方法和操作步驟,領(lǐng)會其設(shè)計原

理;(2)結(jié)合實驗內(nèi)容,復(fù)習有關(guān)藥理學和生理學、生化學等方面理論知識達到充分理解;

(3)估計實驗中可能出現(xiàn)的情況和發(fā)生的問題。

實驗中(1)將實驗器材妥善安排,正確裝置;(2)嚴格按照實驗指導書上的步驟進行操

作,準確計算給藥量,防止出現(xiàn)差錯意外;(3)認真、細致地觀察實驗過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象,

隨時記錄藥物反應(yīng)的出時間、表現(xiàn)以及最后轉(zhuǎn)歸,聯(lián)系課堂講授內(nèi)容進行思考;(4)注意節(jié)

約實驗材料。

實驗后(1)整理實驗結(jié)果,經(jīng)過分析思考,寫出實驗報告,按時交給指導教師;(2)整

理實驗器材,洗凈擦干,妥為安放。將存活和死亡動物分別送至指定處所。做好實驗室的清

潔衛(wèi)生工作。

二、實驗動物的捉持和給藥法

實驗L1蛙和蟾蛛的捉持和給藥法

[目的]學習蛙和蟾蛛的捉持和淋巴囊給藥法。

[材料]蛙或蟾蛛;注射器、針頭、生理鹽水。

[方法]1.捉持法通常以左手握持,用食指和中指夾住左前肢,用拇指壓住右前肢,將

下肢拉直,用無名指及小指夾住。

2.淋巴囊內(nèi)注射法蛙及蟾蛛皮下有多個淋巴囊,注入藥物后易于吸收。通常將藥物注

射于胸、腹或股淋巴囊。蛙及蟾蛛的皮膚很薄,缺乏彈性,注射后藥物易自針眼漏出,故作

胸部淋巴囊注射時應(yīng)將針頭插入口腔,由口腔底部穿過下頜肌層而達胸部皮下;作股淋巴囊

注射時,應(yīng)由小腿皮膚剌入,通過膝關(guān)節(jié)而達大腿部皮下。這樣才可避免藥液外漏。注入藥

液量一般為0.25ml-0.50ml試以生理鹽水作胸淋巴囊和股淋巴囊注射練習。

實驗L2小鼠的捉持和給藥法

[目的]學習小鼠的捉持和各種給藥法。

[材料]小鼠3s4只;鼠籠、天平、注射器、針頭、灌胃針頭、小鼠尾靜脈注射用固定

筒、生理鹽水。

[方法]1.捉持法以右手提鼠尾,將小鼠放于鼠籠或其它粗糙面上,將鼠尾向后輕拉,

使小鼠固定在粗糙面上,以左手的拇指及屈成“V”狀的食指捏其雙耳及頭頸部皮膚,無名指、

小指和掌心夾其背部皮膚和尾部,這樣便可將小鼠完全固定,并可保持頭頸部平直。

2.灌胃法以左手捉持小鼠,使其頭部朝上,頸部拉直。右手持配有灌胃針頭(以16

號輸血針頭磨去針尖后制成)的注射器,自口角插入口腔,再從舌面緊沿上腭進入食道。如

手法正確,不難成功。若遇阻力,應(yīng)退出后再插,不能用力強插,以免刺破食道或誤入氣管,

使動物致死。灌胃的藥液量一般為01s0.3ml/10g。試以生理鹽水作灌胃練習。

3.皮下注射可由兩人合作。一人左手抓住小鼠頭部皮膚,右手拉住鼠尾。另一人左手

捏起背部皮膚,右手持注射器(5號或6號針頭),將針頭刺入背部皮下。如由一人操作,可

按前法捉持小鼠,右手持注射器,針尖從右側(cè)肋緣上穿入皮下,向前推至右前肢腋下部位,

將藥液推入即可。小鼠皮下注射的藥液量一般為0.05s().2ml/10g。試以生理鹽水進行練習。

4.肌內(nèi)注射可由兩人合作。一人左手抓住小鼠頭部皮膚,右手拉住鼠尾。另一人持注

射器(4號或5號針頭),將針頭刺入后肢外側(cè)部肌肉。如一人單獨操作,以左手拇指和食指

抓住小鼠頭部皮膚,小指、無名指和掌部夾住鼠尾及一側(cè)后肢,右手持注射器刺入后肢肌肉

給藥。注射器每腿不宜超過O」ml。試以生理鹽水進行練習。

5.腹腔注射以左手抓住小鼠,使腹部在上面,頭部下傾,右手持注射器(5號或6號

針頭),取30度角將針頭從一側(cè)下腹部向頭端刺入腹腔。進針部位不宜太高,刺入不能太深,

以免傷及內(nèi)臟。注射量一般為01s0.2ml/10g。試以生理鹽水進行練習。

6.尾靜脈注射將小鼠置特制的固定筒內(nèi)(或倒置的大漏斗、乳缽下),使鼠尾露出在

外。用酒精(或二甲苯)棉球涂擦尾部,或?qū)⑹笪苍?0C熱水中浸泡半分鐘,使血管擴張。

用左手拉住尾尖,從左右兩側(cè)尾靜脈中,選擇一條擴張最明顯的尾靜脈,右手持注射器(4

號針頭),將針頭刺入血管,推入藥液。如推注時有阻力,且局部腫脹變白,表明針頭沒有

剌入血管,應(yīng)撥出后重新穿刺。穿刺血管時宜從鼠尾末端開始,以便失敗后可在第一次穿刺

點的近心端重新進行。小鼠尾靜脈注射的藥液量一般為0.1-0.2ml/10go試以生理鹽水作尾

靜脈注射練習。

實驗L3家兔的捉持和給藥法

[目的]學習家兔的捉持和各種給藥法。

[材料]家兔ls2只;兔固定箱、兔開口器、磅稱、導尿管、注射器、

生理鹽水

[方法]1.捉持法用一手抓住家兔頸背部皮膚,將兔提起,另一手托其臀部,使兔

呈坐位姿勢。

2.灌胃需由兩人合作進行。一人取坐位,用兩腿夾持兔身,左手握家兔雙耳,右手

抓住兩前肢,另一人將木制開口器橫插家兔口內(nèi),壓住舌頭,并固定之。取8號導尿管,從

開口器中部小孔插入食道,深約15sl8cm。插管時易誤入氣管。區(qū)別方法主要在于謹慎觀

察插管后動物的反應(yīng)。插入氣管時將引起劇烈掙扎和呼吸困難。也可將導尿管的外端浸入水

中,如有氣泡吹出,表示已誤入氣管內(nèi),此時應(yīng)撥出重插。在判明導尿管確定插在食道內(nèi)以

后,取注射器接在導尿管上,將藥液推入。再推注少量空氣,使導尿管中不致有藥液殘留。

然后抽出導尿管,取出開口器。如用兔固定箱,亦可一人操作。左手將開口器固定于兔口內(nèi),

右手將導尿管插入食道。家兔灌胃給藥時的藥液容量一般為5s20ml/kg。試以生理鹽水進行

練習。

3.皮下、肌內(nèi)及腹腔注射給藥方法基本上同小白鼠,唯針頭可稍大(6號或7號),

給藥量可稍多(皮下與肌內(nèi)0.5sl.0ml/kg,腹腔1.0s5.0ml/kg)。

4.靜脈注射將家兔置固定箱內(nèi),撥去耳殼外緣的毛,選擇一條比較明顯的耳緣靜脈,

用酒精棉球涂擦皮膚,使血管顯露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖,以食指墊在兔耳擬進

針部位的下面,右手持注射器(6號),從近耳尖處將針頭刺入血管。如見到針頭確在血管內(nèi),

即以左手將針頭固定在兔耳上,將藥液推入。推注時如有阻力,局部出現(xiàn)腫脹,表明針頭不

在血管內(nèi),應(yīng)立即撥針重新穿刺。家兔的靜脈注射量,一般藥液為0.2s2.0ml/kg,等滲藥液

可達1Oml/kg,試以生理鹽水進行練習。

附:其他動物的給藥法

大鼠的捉持和給藥法

捉持法將大鼠放于粗糙面上,用右手拉其尾部,左手戴保護手套,以拇指和食指捉

其頭部,其余三指夾住背部腹部。對于身體特大或兇狠易咬人的大鼠,可先以布巾包裹全身

(露出口、鼻),然后進行操作。

給藥法大鼠的各種給藥法基本上同小鼠,唯所用的給藥工具可稍大,給藥量也可稍多。

豚鼠的捉持和給藥法

捉持法豚鼠性溫和,一般不咬人,用手握住身體即可。

皮下、肌內(nèi)及腹腔注射方法基本上同小鼠,給藥量可稍多。

靜脈注射可選用后腳掌外側(cè)的靜脈或外頸靜脈進行注射。作后腳掌外側(cè)靜脈注射時,

可由一人捉豚鼠并固定一條后腿,另一人剪去注射部位的毛,用酒精棉球涂擦后腳掌外側(cè)的

皮膚使血管顯露,再將連在注射器上的小兒頭皮靜脈輸液針頭刺入血管。作外頸靜脈注射時

需先剪去一點皮膚,使血管暴露,然后將連在注射器上的小兒頭皮靜脈輸液針頭刺入。豚鼠

的靜脈管壁脆弱易破,操作時需特別小心。

貓的給藥法

皮下、肌內(nèi)及腹腔注射方法基本上同家兔。給性情暴躁的貓注射麻醉藥時,可先將

貓裝在布袋內(nèi),然后逐漸收縮布袋,將貓推到袋角,按住頭部和軀體,隔著布層作腹腔內(nèi)注

射。

狗的給藥法

給藥前處置對于未經(jīng)馴服的狗,需先以特制鐵鉗夾住頸部,將其按倒,以繩索捆扎

狗嘴,然后才可作給藥操作。但是對于已經(jīng)馴養(yǎng),用于慢性實驗的狗,切不可用鐵鉗夾頸。

否則狗的性情將由此變得暴躁而難以操作。

灌胃、皮下、肌內(nèi)和腹腔注射方法上基本上同家兔,用具和給藥量應(yīng)相應(yīng)增大。

靜脈注射常用的注射部位是后肢小隱靜脈,該血管由外踝前側(cè)走向外上側(cè)。也可選

用前肢的皮下頭靜脈,該血管在腳爪上方背側(cè)的正前位。注射時先局部剪毛,以酒精涂擦皮

膚,一人捏緊注射肢體的上端,阻斷血液回流,使靜脈充盈,以便看清其走向,另一人持注

射器進行靜脈穿刺,將藥液注入。

三、實驗動物的性別鑒別、編號和處死法

(一)實驗動物的性別鑒別

1.小鼠和大鼠兩性的區(qū)別要點有三:雄鼠可見陰囊,站位時陰囊內(nèi)睪丸下垂,熱天

尤為明顯,成熟雌鼠的腹部可見乳頭;雄鼠的尿道口與肛門距離較遠,雌鼠的陰道口與肛門

比較靠近;肛門和生殖器間有溝的為雌鼠,無溝的為雄鼠。

2.豚鼠與小鼠和大鼠基本相同。

3.兔雄兔可見陰囊,兩側(cè)各有一個睪丸;用拇指和食指按壓生殖器部位,雄兔可露

出陰莖;雌兔的腹部可見乳頭。

4.其它較大動物,性別特點明顯,不難辨認。

(二)實驗動物的編號

較大的動物如貓、狗、猴等,可用號碼牌掛在動物頸部,或?qū)⑻刂频匿X質(zhì)標牌固定在耳

殼上。小鼠、大鼠及家兔一般用1%苦味酸溶液(以稀醇配制)涂于體表不同部位的毛上。

方法不盡相同,以能明顯區(qū)別為原則。例如1號涂在左前肢,2號涂在左后肢,3號涂右前

肢,4號涂右后肢,5號涂頭部,6號涂背部,7號涂尾部,8號涂頭及背部,9號涂頭及尾

部,10號不涂色等。

(三)實驗動物的處死法

1.蛙和蟾蛛可以斷頭處死。也可用探針經(jīng)枕骨大孔破壞其腦和脊髓。

2.小鼠和大鼠也常以斷頭處死。對于小鼠,還可用頸椎脫臼法處死,即用左手的拇指

和食指緊按其頭部,右手捉其尾根,向后猛拉,就可使其致死。

3.兔、貓及狗靜脈注射空氣10到30毫升,可使動物因血管氣栓而死。靜脈注射大劑

量戊巴比妥鈉等麻醉藥,則更可使動物在死前免受痛苦。

四、實驗動物給藥量的計算

在要給動物給藥的時侯,常常會遇到兩個問題:(1)給予多少劑量才恰當?(2)應(yīng)配成

何種濃度的藥液,給予多少毫升才合適?現(xiàn)分述其處理方法。

(-)給藥劑量的決定

藥物對于某種動物的適當劑量得自實踐經(jīng)驗,不能憑空推算。在我們?yōu)榱四骋荒康臏蕚?/p>

給某種動物用藥而需要解決劑量問題時,首先應(yīng)該查閱該藥的有關(guān)文獻(學報、文摘、手冊

和專著等),了解前人的經(jīng)驗。如能查到為了同一目的,給相同種類動物用藥的記錄,那就

可以直接照試。有時侯查不到治療劑量,但能找到致死量(LDso或MLD),可先用1/5S1/3

的致死量進行嘗試。

如果查不到待試動物的劑量,但知道其它動物的劑量或人用劑量,這就需要加以換算。

關(guān)于不同種類動物間用藥劑量的換算,一般認為不能簡單的按體重比例增減,而需按單位體

重所占體表面積的比值來換算,其具體方法詳見附錄五。但換算而得的劑量仍有可能偏大或

偏小,也只能當作一個參考值。

(二)藥液濃度的考慮與給予藥液容量的計算

決定了給藥劑量以后,應(yīng)該怎樣考慮將要配制藥液的適當濃度呢?這時侯就應(yīng)當從在供

試動物身上,以某種特定途徑給藥時的最適給藥容量入手,現(xiàn)舉例加以說明:

例1已知戊巴比妥鈉給家兔靜脈注射時的適當劑量為25mg/kg,問宜將戊巴比妥鈉配

成何種濃度的溶液,方便于給藥?

解:家兔靜脈注射時的藥液容量以lml/kg較較恰當?,F(xiàn)在即已決定采用25mg/kg的劑量,

這就是說每1ml藥液中以含戊巴比妥鈉25mg為宜。25mg/ml的濃度如用百分濃度表示,就

是2.5%。因此當需要給家兔按25mg/kg靜脈注射戊巴比妥鈉時,宜將藥液配成2.5%的濃度。

在需要按照預(yù)定劑量,利用現(xiàn)成藥液給藥的時侯,又該怎樣計算每個動物應(yīng)當給予的毫

升數(shù)呢?現(xiàn)再舉例說明:

例2鹽酸嗎啡給小鼠腹腔注射時的劑量為15mg/kg。現(xiàn)有藥液的濃度為0.1%,17g體重

的小鼠應(yīng)注射此種藥液多少毫升?

解:按15mg/kg的劑量計算,17g體重的小白鼠應(yīng)給藥0.255mg,0.1%的藥液每100ml

含藥100mg,即每1ml含藥Img。所以該小鼠應(yīng)注射鹽酸嗎啡溶液0.26ml.

在某些藥理試驗中,也按摩爾濃度配制藥液,如將1摩爾質(zhì)量的藥物溶于溶劑中,配成

1L的溶液(其它濃度依此類推),表示為Imol/L,余類推。

五、實驗結(jié)果的整理和實驗報告的撰寫

整理實驗結(jié)果和撰寫實驗報告就是做完每項實驗以后的總結(jié)工作。通過良好的總結(jié),可

使我們在實驗過程中獲得的感性認識提高到理性認識,明確已經(jīng)取得的成果,尚未解決的問

題以及工作中的優(yōu)缺點。實驗報告是向他人提供研究經(jīng)驗及供本人日后查閱的重要資料。應(yīng)

當充分認識在校學習期間學會做這一道科學研究工作中關(guān)鍵性工序的重要性。

(一)實驗結(jié)果的整理

實驗結(jié)束以后應(yīng)對原始記錄進行整理和分析。藥理實驗結(jié)果有測量資料(如血壓值、心

率數(shù)、瞳孔大小、體溫變化、生化測定數(shù)據(jù)和作用時間等),記數(shù)資料(如陽性反應(yīng)或陰性

反應(yīng)數(shù)、死亡或存活數(shù)等),描記曲線、心電圖、腦電圖、照片和現(xiàn)象記錄等。凡屬測量資

料和計數(shù)資料,均應(yīng)以恰當?shù)膯挝缓蜏蚀_的數(shù)值作定量的表示,不能籠統(tǒng)提示。必要時應(yīng)作

統(tǒng)計處理,以保證結(jié)論有較大的可靠性。盡可能將有關(guān)數(shù)據(jù)列成表格或繪制統(tǒng)計圖,使主要

結(jié)果有重點地表達出來,以便閱讀、比較和分析。作表格時,一般將觀察項目列在表內(nèi)左側(cè),

由上而下逐項填寫,而將實驗中出現(xiàn)的變化,按照時間順序,由左而右逐格填寫。繪圖時,

應(yīng)在縱軸和橫軸上畫出數(shù)值刻度,表明單位。一般以縱軸表示反應(yīng)強度,橫軸表示時間或藥

物劑量,并在圖的下方注明實驗條件。如果不是連續(xù)性變化,也可用柱形圖表示。凡有曲線

記錄的實驗,應(yīng)及時在曲線圖上標注說明,包括實驗題目,實驗動物的種類、性別、體重、

給藥量和其他實驗條件等。對較長的曲線記錄,可選取有典型變化的段落,剪下后粘貼保存。

這里需要注意的是必須以絕對客觀的態(tài)度來進行裁剪工作,不論預(yù)期內(nèi)的結(jié)果或預(yù)期外的結(jié)

果,均應(yīng)一律留樣。

(二)實驗報告的寫作

每次實驗后應(yīng)寫好報告,交負責老師批閱。實驗報告要求結(jié)構(gòu)完整、條理分明、用詞規(guī)

范、詳略得宜、措辭注意科學性和邏輯性。一般包括下列內(nèi)容:

1.實驗題目

2.實驗?zāi)康?/p>

3.實驗方法當完全按照實驗指導上的步驟進行時,也可不再重述。如果實驗方法臨

時有所變動,或者發(fā)生操作技術(shù)方面的問題,影響觀察的可靠性時,應(yīng)作簡要說明。

4.實驗結(jié)果實驗結(jié)果是實驗報告中最重要的部分,需絕對保證其真實性。應(yīng)隨時將實

驗中觀察到的現(xiàn)象在草稿本上記錄,實驗告一段落后立即進行整理。不可單憑記憶或擱置了

長時間之后再作整理,否則易致遺漏或差錯。實驗報告上一般只列經(jīng)過歸納、整理的結(jié)果。

但原始記錄應(yīng)予保存?zhèn)洳椤?/p>

5.討論應(yīng)針對實驗中所觀察到的現(xiàn)象與結(jié)果,聯(lián)系課堂講授的理論知識,進行分析和

討論。不能離開實驗結(jié)果去空談理論。要判斷實驗結(jié)果是否為預(yù)期的。如果屬于非預(yù)期的,

則應(yīng)該分析其可能原因。

6.結(jié)論實驗結(jié)論是從實驗結(jié)果歸納出來的概括性判斷,也就是對本實驗所能說明的問

題、驗證的概念或理論的簡要總結(jié)。不必再在結(jié)論中重述具體結(jié)果。未獲證據(jù)的理論分析不

能寫入結(jié)論。

第二章藥理學總論

實驗2.1藥物的局部作用與吸收作用

[目的]觀察藥物對動物機體的局部作用和吸收作用

[材料1兔子1只;兔固定箱、鑲子、注射器、兔用麻醉口罩;

松節(jié)油、01%硝酸士的寧、麻醉乙醛、5%水合氯醛注射液

[方法]

1、取兔一只放于兔固定箱內(nèi),對光觀察兔耳血管粗細及顏色等情況,然后對一只兔耳

涂擦松節(jié)油,待兩分鐘后對比兩只兔耳有何不同?

2、將兔稱重,先觀察正?;顒樱描傋虞p擊四肢和背部,看有何反應(yīng)。

(1)給兔皮下注射02%硝酸士的寧注射液0.2ml/kg,用藥后每隔二分鐘用鏡子輕擊四

肢,觀察兔有何反應(yīng)。

(2)待兔出現(xiàn)典型的士的寧中毒癥狀(表現(xiàn)為全身痙攣,角弓反張,呼吸暫停等)后,

立即套上有麻醉乙雁的兔口罩,再觀察兔的反應(yīng)。

(3)當兔的中毒狀態(tài)消失后,除去麻醉口罩,靜注水合氯醛注射液2ml/kg。

[討論題]

記錄實驗結(jié)果,說明哪種作用是局部作用?哪種作用是吸收作用?

實驗2.2藥物的協(xié)同作用和拮抗作用

L目的]觀察激動劑與拮抗劑之間的相互作用

[材料]兔子1只;0.05%硫酸阿托品注射液,0.1%鹽酸腎上腺素注液,0.2%硝酸毛果

蕓香堿注射液。

[方法]

1、取兔放于兔固定箱內(nèi)固定,避免陽光直射眼睛,用毛剪剪去兔兩眼睫毛,然后用睡

孔量尺測量瞳孔大小,連續(xù)三次,取平均值。

2、在兔左眼滴入0.2%毛果蕓香堿3滴,滴藥時用姆指和食指將下眼瞼提起,使成囊狀,

再用中指壓住鼻淚管開口處,防止藥液流入鼻淚管而不起作用,再用右手滴入藥液。15分鐘

后再測量瞳孔大小,連續(xù)三次,取平均值,并進行比較。

3、滴入毛果蕓香堿20分鐘后,分別在兩眼滴入0.1%腎上腺素3滴,15分鐘后測量兩

瞳孔大小,連續(xù)3次,取平均值并進行比較。

4、滴入腎上腺素15分鐘后,分別于兩眼滴入0.05%硫酸阿托品注射液3滴,15分鐘后

觀察兩眼瞳孔變化,并測量其大小,連續(xù)3次,并取平均值。

[記錄]

項目正常毛果蕓香堿腎上腺素阿托品

瞳孔左眼

大小右眼

[討論題]

從實驗結(jié)果中如何說明藥物的協(xié)同作用和拮抗作用?

實驗2.3不同給藥途徑對藥物作用的影響

L目的]觀察不同途徑給藥對藥物效應(yīng)的影響

[材料]小白鼠5只;注射器、小白鼠灌胃器、鐘罩、電子秤、鏡子、3.5%硫酸鎂溶

液、5%炭末阿拉伯膠混懸液、0.3%戊巴比妥鈉。

[方法]]

一、灌胃和腹腔注射給硫酸鎂的藥效比較

取禁食12h的昆明種小鼠3只,稱重,分別標為對照組、灌胃組和腹腔注射組按以下給

藥:

A:對照組:灌胃給生理鹽水0.2ml/10g;

B:灌胃組:灌胃給3.5%硫酸鎂溶液0.2ml/10g;

C:腹腔注射組:腹腔注射給3.5%硫酸鎂溶液0.2ml/10g。

給藥后注意觀察動物的活動情況,是否有肌肉松弛的表現(xiàn)。15min后每只小鼠均灌胃給

予5%炭末阿拉伯膠混懸液0.2ml。炭末灌胃后15min,將小鼠脫臼處死,剖開腹腔,取出胃

腸道。剪去附著在腸管上的腸系膜,將腸管不加牽引地輕輕地平鋪在玻璃板上(玻璃板上滴少

許鹽水)。以幽門為起點,測量炭末在腸管內(nèi)的移動距離和小腸(自幽門至回盲部)的全長,計算

每只小鼠炭末的移動距離占小腸全長百分率,比較3組動物的活動狀況和胃腸炭末推進率有

何不同。

炭末推進率計算公式:

炭末的移動距離(cm)

小腸推進率----------------------xi00%

小腸全長(cm)

[記錄]

鼠號體重(g)藥物及劑量給藥途徑動物反應(yīng)炭末推進率(%)

A

B

C

二、灌胃、皮下注射、腹腔注射戊巴比妥鈉的效應(yīng)比較

取體重相近的小白鼠3只,稱其體重分別放入鐘罩內(nèi),觀察它們的正?;顒蛹胺瓷?/p>

情況,然后用0.3%戊巴比妥鈉溶液0.1ml/10g的量以不同途徑給藥,甲鼠灌胃,乙鼠皮下注射,

丙鼠腹腔注射。觀察小白鼠用藥后的反應(yīng)及活動情況,以翻正反射消失時作為麻醉開始指標。

記錄麻醉開始時間(從給藥至翻正反射消失的時間),麻醉維持時間(即從翻正反射消失至

翻正反射恢復(fù)的時間),麻醉深度有何不同(用鏡子夾其后肢看其反應(yīng))。

[記錄1

鼠號給藥方法麻醉開始時間麻醉維持時間麻醉深度

[討論題]

為什么會有這些不同的結(jié)果?

實驗2.4溶液pH值對某些藥物吸收速率的影響

[目的]通過對于不同pH值的阿托品溶液滴眼后作用快慢的比較,了解溶液的pH

值對弱堿(或弱酸)性藥物穿透生物膜速率的影響。

[材料]家兔1只;兔子固定箱、滴管、測瞳尺。

[方法]

1、取家兔1只,置箱內(nèi)固定。觀察二眼瞳孔大小(測量瞳孔直徑),及測試對光反射是

否存在。

2、由兩人協(xié)作,同時拉開左右眼下眼瞼,在左眼內(nèi)滴入pH值為9.0的1%硫酸阿托品

溶液3滴,右眼內(nèi)滴入pH值為5.0的1%硫酸阿托品溶液3滴,讓藥液在結(jié)膜囊內(nèi)保留2分鐘,

然后放手。

3、立即同時連續(xù)觀察「.眼瞳孔大小的變化,并測試對光反射,直至二眼瞳孔不再擴大,

對光反射完全消失為止。測量瞳孔大小。比較兩種阿托品溶液產(chǎn)生作用的快慢,并記錄結(jié)果。

[注意1

1、測試對光反射的方法為迅速以手電筒光照射兔眼。如瞳孔能隨光照而縮小,即認為

對光反射存在。如不能縮小,則認為對光反射消失。

2、兩種藥液的作用差異在滴藥后2—5分鐘最為明顯,應(yīng)抓住這一時機進行比較。此

后由于分泌物的作用,溶液的pH值發(fā)生變化,差別就不顯著了。

[討論題]

已知弱堿性藥物阿托品在25℃時的pKa值為9.65,根據(jù)Henderson-Hasselbalch二氏的

[解離弱堿]

pKa=pH+lg的公式,計算溶液的pH值為5或9時以未解離形式存在于溶液中

[未解離弱堿]

的阿托品分子占有百分率。

實驗2.5肝臟功能對藥物作用的影響

[目的]觀察肝功能損害對藥物作用的影響。

[材料]小白鼠4只;注射器、鐘罩、電子秤、0.2%戊巴比妥鈉溶液、20%四氯化碳

泊劑。

[方法1

取體重近似正常的小白鼠及損壞肝臟的小鼠(實驗前24小時皮下注射20%四氯化碳

O.lml/lOg)各兩只,分別由腹腔注射0.2%戊巴比妥鈉0.2ml/10g,記錄并比較兩組小白

鼠麻醉持續(xù)時間有何差別?

[記錄]

組別鼠號體重(g)藥量(ml)注射時間產(chǎn)生作用時間醒轉(zhuǎn)時間持續(xù)時間

正1

常2

損壞3

肝組4

實驗結(jié)束后將小鼠拉斷頸椎處死,剖取肝臟,比較二組動物肝臟外觀之不同。四氯化碳

中毒小鼠的肝臟較腫大,有的充血,有的呈灰黃色,觸之有油膩感,其小葉比正常肝臟更清

楚。

[討論題]

為什么損壞肝組織的小白鼠在注射戊巴比妥鈉后作用時間長?有何意義?

實驗2.6腎功能對藥物作用的影響

[目的]觀察腎功能損害對藥物作用的影響

[材料1小白鼠2只;注射器、鐘罩、電子秤;0.1%氯化高汞、5%硫酸鏈霉素。

[方法]

取正常小白鼠和腎功能已被破壞的小白鼠(實驗前24小時腹腔注射0.1%氯化高汞

0.07ml/10g)各2只,稱其體重,分別由腹腔注射3%硫酸鏈霉素0.15ml/10g(375mg/kg),觀

察小白鼠的活動情況,比較兩組小白鼠的變化有何差別?

[記錄]

組別鼠號體重(g)藥量(ml)注射時間產(chǎn)生作用時間表現(xiàn)備注

正1

常2

損壞3

腎組4

實驗結(jié)束后可將小鼠處死,比較二組動物腎臟的差別。氯化高汞中毒小鼠的腎臟常明顯

腫大。如用小刀縱切,可見到皮質(zhì)部較為蒼白,髓質(zhì)部有充血現(xiàn)象。

[討論題]

為什么兩組小白鼠的表現(xiàn)不同?有何意義?

實驗2.7藥物的配伍禁忌

[目的]了解兩種或兩種以上的藥物配合在一起時,可能產(chǎn)生的配伍禁忌。

[材料]小白鼠4只、試管架、試管、乳缽、注射器、電子秤、pH廣泛試紙、蒸儲

水、液體石蠟、水合氯醛、樟腦、10%磺胺喀咤鈉、維生素B1注射液、0.1%腎上腺素注

射液、5%碳酸氫鈉、0.3%戊巴比妥鈉、1%安鈉咖、4%硫酸鎂、1.25%鹽酸四環(huán)素、5%氯

化鈣。

[方法]

一、物理性配伍禁忌

1、樟腦酷lml+水1ml-->混濁、析出樟腦

2、液體石蠟3ml+水3ml----->分層

3、水合氯醛2g+樟腦2g-->液化

二、化學性配伍禁忌

1、10%磺胺喀嚏鈉1ml+維生素B,1ml-—磺胺喀咤(反應(yīng)前后均用pH廣泛試紙測定

pH值)

2、24萬u青霉素G鉀溶液1ml+1.25%鹽酸四環(huán)素溶液1ml

3、(M%鹽酸腎上腺素1ml+5%碳酸氫鈉1ml

三、藥理性配伍禁忌

1、取小白鼠2只稱重,其中1只肌內(nèi)注射1%安鈉咖注射液0.1ml/10g,待5分鐘后二

鼠分別腹腔注射0.3%戊巴比妥鈉液0.2ml/l0g,觀察二鼠反應(yīng)有何不同?

2、取小白鼠2只,均肌內(nèi)注射待出現(xiàn)肌肉松馳現(xiàn)象后,一只立

即腹腔注射5%氯化鈣O.lml/lOg,觀察二鼠反應(yīng)有何不同?

[討論題]

用以上實驗結(jié)果說明藥物配伍禁忌的臨床實用意義。

實驗2.8藥物急性LDs。的測定

[目的]通過實驗學習測定LD,。的方法、步驟和計算過程,了解急性毒性實驗的常

規(guī)方法。

[材料]小鼠(體重20g左右);測試藥物、苦味酸、注射器、小鼠飼養(yǎng)籠

[方法J(以敵百蟲藥物為例)

1、預(yù)備試驗(探索劑量范圍)取小鼠8-10只,以2只為一組分成4一5組,選

擇組距較大的一系列劑量,分別按組腹腔注射敵百蟲溶液,觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù),

找出引起0%和100%的死亡率(至少應(yīng)找出引起20%—80%死亡率)劑量的所在范圍(參

考劑量:最小300mg/kg,最大1000mg/kg)。

2、正式試驗

(1)取小鼠50只,用苦味酸進行編號,用區(qū)組隨機法進行分組,分為5組,每組1

0只小鼠。

(2)在預(yù)試所獲得的0%和100%的致死量范圍內(nèi),選用5個劑量(一般用3—5個

劑量,按等比級數(shù)增減),盡可能使半數(shù)組的死亡率都在50%以上,另半數(shù)組的死亡率都在

50%以下。

(3)完成動物分組和劑量計算后按組腹腔注射給藥(最好先從中劑量組開始,以便能

從最初幾組動物接受藥物后的反應(yīng)來判斷兩端的劑量是否合適,否則可隨時進行調(diào)整)。

3、LD,。測定中應(yīng)觀察記錄的項目

(1)實驗各要素:實驗題目,實驗日期,室溫,檢品的批號、規(guī)格、來源、理化性狀、

配制方法及所用濃度等;動物品系、來源、性別、體重、給藥方式及劑量(藥物的絕對量與

溶液的容量)和給藥時間等。

(2)給藥后各種反應(yīng):潛伏期(從給藥開始出現(xiàn)毒性反應(yīng)的時間);中毒現(xiàn)象及出現(xiàn)的

先后順序、開始出現(xiàn)死亡的時間;死亡集中時間;末只死亡時間;死前現(xiàn)象等。逐日記錄各

組死亡只數(shù)。

(3)尸解及病理切片:從給藥時開始記時,凡兩小時以后死亡的動物,均及時尸解以

觀察內(nèi)臟的病變,記錄病變情況。若有肉眼可見變化時則需進行病理檢查。整個實驗一般要

觀察7—14天,觀察結(jié)束時,對全部存活動物稱體重,尸解,同樣觀察內(nèi)臟病變并與中毒

死亡尸解情況相比較。當發(fā)現(xiàn)有病變時,也同樣作病理檢查,以比較中毒后病理改變及恢復(fù)

情況。

4、結(jié)果記錄和處理

(1)結(jié)果處理實驗資料按下表列出:

受試物劑量對數(shù)劑量動物數(shù)死亡率概率單位LD50

(mg/kg)(X)(只)(%)(Y)及置信限(95%)

(2)結(jié)果計算

用簡化概率法計算LDso;計算IgLDso的標準誤(Sx50);計算95%的可信限;計算回歸

直線斜率b;并算出LDw,

LD90O

附:戊巴比妥鈉半數(shù)致死量(LD50)測定的實驗示例(寇氏法)

[方法]取體重20g左右小白鼠50只,分為5組,每組10只,各組分別腹腔注射不同

劑量戊巴比妥鈉,注射后24h記錄各組出現(xiàn)的死亡鼠數(shù),結(jié)果如下所示。按公式:

LD5o=log、Xm-i(Ep—0.5)]計算,求LD50。

[結(jié)果]

組別劑量DlogD實驗鼠數(shù)死亡鼠數(shù)死亡反應(yīng)PLD50

(mg/kg)百分率(mg/kg)

1187.52.27310101001

21502.176107700.7

31202.079106600.6120

4961.982102200.2

576.81.88510000

按公式:LD50=log“[Xm-i(Xp—0.5)]計算,求LDso。

其中:Xm=最大劑量對數(shù)值;P=動物死亡率(用小數(shù)表示);EP=動物死亡率的總和;i

=相鄰兩組劑量比值的對數(shù)(高劑量作分子)。

求LDso的95%平均可信限:

SLDso=1>口5杜4.5LDsoxjx總P-EP/n-l

將實驗結(jié)果代入上公式:

Xm=Logl87.5=2.273

Ep=1.0+0.7+0.6+0.2+0=2.5

,187.5

i=log77=log1.25=0.0969

1

LD50=log_[Xm-I(Sp-0.5)]

=log1[2.273-0.0969*(2.5-0.5)]

=log'(2.273-0.1938)

=10^*2.0792

=120mg/kg

[討論題]

什么叫LD50?測定LD50的意義和根據(jù)是什么?

實驗2.9家兔血和肝中游離磺胺喀咤濃度的測定

[目的]掌握磺胺藥物在動物體組織和血液中濃度測定的方法;了解磺胺喀嚏在體內(nèi)的

分布情況。

[材料]家兔1只;燒杯,試管,漏斗,濾紙,試管架,研缽,注射器,小動物手術(shù)臺,

手術(shù)器械,刻度吸管,721分光光度計。

磺胺喀唯鈉注射液,5%三氯醋酸溶液,3%三氯醋酸溶液,0.1%亞硝酸鈉溶液,0.5%氨

基磺胺溶液,0.1%二鹽酸N(1-蔡基)一乙二胺溶液,磺胺嗑咤標準品,95%乙二醇,0.1

N氫氧化鈉,4N硫酸。

[原理J

具有游離氨基的磺胺類藥物在酸介質(zhì)中經(jīng)重氧化后可與N-(1—蔡基)-乙二胺產(chǎn)生

偶合反應(yīng),生成紅色的偶氮染料,再與同樣處理磺胺藥標準比較,即可求得體液中磺胺類藥

的含量,剩余的亞硝酸影響測定,以氨基磺胺鈉分解除去。

[方法1

1、配液:(1)15%的三氯醋酸溶液;(2)空白對照液(3%三氯醋酸溶液):取15%三氯醋酸

溶液,用蒸懦水稀釋即得;(3)0.1%亞硝酸鈉溶液;(4)0.5%氨基磺胺溶液;(5)0.5%二鹽酸N

-(1-蔡基)一乙二胺溶液:取二鹽酸N一(1—蔡基)一乙二胺0.5g,溶于95%乙醇約

400ml中,再加乙醇稀釋至500ml,置棕色玻璃瓶中冰箱保存;(6)貯存標準液:精確稱取磺胺

口密咤標準品0」25g,溶于0.1N氫氧化鈉25ml中,然后加4N硫酸175ml,并用蒸儲水稀釋

至1000ml;(7)應(yīng)用標準液:精確吸取上述貯存標準液3.0mll,置100ml容量瓶中,用3%三

氯醋酸液稀釋至刻度。

2、取兔1只,靜脈注射10%磺胺口密唾注射液半小時后心臟采血,檢查血藥濃

度(游離磺胺測定法)。

3、記錄取全血0.5ml,加蒸儲水15.5ml混勻,放置15分鐘;

(1)加15%三氯醋酸溶液4.0ml,混勻,并過濾;

(3)在試管中加上述濾液5ml作為測定管,在另一試管中加入空白對照液5ml作為空白管;

在另一試管中加入應(yīng)用標準液5.0ml作為標準管。在以上三管中各加入0.1%亞硝酸鈉液,混

勻,放置3分鐘。

(4)各加入0.5%艇基磺胺溶液0.5ml混合并放置2分鐘。

(5)加入0.1%二鹽酸N-(l-茶基)一乙二胺溶液2.5ml,充分混合,放置10分鐘。

(6)用分光光度計或光電比色計于550nm波長處進行比色,以空白管校正光密度到。點,

讀取標準管和測定管光密度,計算游離磺胺藥含量。

鱉心鬻x應(yīng)用標準濃度x樣品稀釋倍數(shù)=樣品的藥物濃度

林準L;光給度

例如:標準管光密度為05,測定管光密度為0.4,則

04

告x0.375〃zg%x40=120〃?g%

3、采血后立即將兔處死,打開腹腔,稱取肝組織2g,在研缽中加蒸鐳水5ml研磨,取

上清液,殘渣再加蒸偏水沖洗研缽,并回收于刻度試管,共得16ml,然后加15%三氯醋酸

4ml,混勻,靜置后過濾,待測定。

測定藥物濃度的方法同上。

計算時樣品稀釋倍數(shù)為10,若標準管光密度為0.5,測定光密度為0.4時,則

0.4

■^yx0.375,z?gxl0=3,〃g%

4、記錄并計算

血藥濃度----x3.75mgx10=mg%

月干藥學濃度——x3.15mgxl0=mg%

[討論題]

試分析磺胺血藥濃度和肝藥濃度的高低與臨床應(yīng)用的關(guān)系。

實驗2.10磺胺喀咤藥動學的生物半衰期的測定

[目的1了解磺胺喀呢(SD)在雞體內(nèi)的代謝動力學動態(tài)規(guī)律并計算出其生物半衰

期,為臨床用藥提供依據(jù)。

[材料]動物:雞(成年健康家雞)。

1、10%磺胺喀咤鈉注射液

2、15%三氯醋酸

3、0.1%亞硝酸鈉(貯存冰箱可保存二周)

4、0.5%氨基橫酸鐵

5、0.1%二鹽酸N-(1-蔡基)乙二胺,取本品0.5g,用95%乙醇400ml溶解,再用

乙醇稀釋至500ml,置于棕色瓶中,(貯存于冰箱中)。

6、貯存標準液:精確稱取被測定的磺胺喀咤0.125g,溶于蒸儲水中,并稀釋至1000ml,

因其不易溶于水,可先溶于0.1N氫氧化鈉25ml中,然后加4N硫酸175ml,并用蒸儲水稀

釋至1000ml?

7、應(yīng)用標準液:精確吸取上述貯存標準液3.0ml,置于100ml溶量瓶中,用3%三氯醋

酸稀釋至刻度。

器材:721型分光光度計、容量瓶、刻度試管、注射器、吸管、手術(shù)器械。

[方法1

1、動物準備:取健康成年家雞一只,稱體重后,通常用毛巾將雞裹住,即可被固定。

或一手握住兩翼根部,一手握著兩爪將雞固定好,暴露并剝離一側(cè)靜脈,手插入一根細硬塑

料膠管,固定,供采血時用。

2.(1)在注藥前,由翼下靜脈采血0.5ml,作空白管用。

(2)快速靜脈推注10%SD鈉(70mg/kg),注后計時。

3、采血:于注藥后的下述時間各采一次,每次0.5ml,分別在5:10\15\20\30\

45\60,采血后立即加入15.5ml蒸饋水,使全部溶血,放置15,后,置冰箱保薦(4℃)。

4、加15%三氯醋酸溶液4.0ml,并過濾。

5、在管中加入上述濾液5.0ml作為測定管,在另一管中加入空白全血濾液5.0ml作為

空白管,在另一試管中加入應(yīng)用標準液5.0ml,混合,放置三分鐘。

6、各管分別加入0.5%氨基磺酸鏤溶液0.5ml,混合,并放置二分鐘。

7、各管分別加入0」%二鹽酸N一(1—蔡基)乙二胺溶液2.5ml,充分混勻,放置10

分鐘。

8、721型分光光度計于545—550nm波長處進行比色,以空白管校正光密度到0點,讀

取標準管和測定管光密度,標出血液中游離磺胺喀噬的含量(mg/100ml)。

磺胺量=學x應(yīng)用標準液濃度x稀釋倍數(shù)

標準管光密度1

血藥濃度(C)=膂/鬻x應(yīng)用標準液濃度x稀釋倍數(shù)

標準2管光密度

9、模型選擇與生物半衰期(tl/2)的計算:

(1)模型選擇:將測得不同時間的血藥濃度取其自然對數(shù)為縱座標,以相應(yīng)時間為橫

座標繪制Inc—t曲線草圖,按直觀法(數(shù)點法)用計算器回歸,求出n與b值,再確定動力

學模型(此步略)。

(2)按各次血液中SD的濃度值,求出半衰期(tl/2):

將多次血藥濃度值,用直線回歸法求出SD半衰期;設(shè)X為用藥后的時間(以分計算),

Y為血液中SD濃度對數(shù)值(濃度mg%計算)得一座標點,各點間連成直線的斜率b:

半衰期(1/2)="史

消除速率常數(shù)Kc=bx2.303

Ke

在未知初始濃度C0,而知道任意時間ti和t2時的濃度C>和C2時,可用下式求K值:

徐=微?電言;n/2=啜

[實驗記錄]

采血時間(t)號數(shù)(N)光密度(E)血藥濃度(C)

1

2

0

3

取值

1

2

標準值

3

取值

1

2

5,

3

取值

1

2

10,

3

取值

1

2

15,

3

取值

1

2

20,

3

取值

1

2

30,

3

取值

第三章各論

實驗3.1普魯卡因與丁卡因表面麻醉作用的比較

[目的]了解普魯卡因與丁卡因作用的區(qū)別。

[材料]兔1只;0.5%鹽酸普魯卡因溶液、0.6%鹽酸丁卡因溶液、兔固定箱、毛剪、

滴管。

[方法1

1、取兩眼無眼疾的健康家兔1只,放入固定箱內(nèi),用毛剪剪去兩眼睫毛。用同一根兔

須以相等的力量輕觸角膜,試驗正常的角膜反射。觸及部位可按上、中、下、左、右的順序,

刺激五個點。全部陽性(5次都不霎眼)時記5/5,全部陰性(5次都霎眼)時記0/5,

其余類推。

2、用拇指和食指將兔下眼瞼拉成囊狀,再用中指壓住鼻淚管(以兔藥液流入鼻腔),

然后在兩眼滴藥,左眼滴入0.5%的普魯卡因溶液2滴;右眼滴入0.6%的鹽酸丁卡因溶液2

滴。輕揉眼瞼,使藥液與角膜充分接觸,并在眼中存留1分鐘,然后放手。滴藥后每隔5分

鐘測試角膜反射1次,到30分鐘為止。同時觀察有無結(jié)膜充血等反應(yīng),記錄并比較兩藥之

作用。

[記錄]

兔眼滴入藥物滴藥前角滴藥后角膜反射

膜反射5minlOmin15min20min25min30min

左普魯卡因

右丁卡因

[討論題]

1、影響藥物表面麻醉效果的因素有哪些?使用中需注意什么問題?

3.2腎上腺素對普魯卡因浸潤麻醉作用的影響

L目的]了解腎上腺素與普魯卡因聯(lián)合用藥可延長局部麻醉作用的特點。

[材料]兔子1只;注射器、毛剪、燒杯、酒精棉球;0.2%普魯卡因注射液、含有1

/io萬0.2ml腎上腺素的普魯卡因注射液。

[方法]

1、取家兔1只,在脊背兩側(cè)各選擇相互對稱,直徑2cm左右的部位一塊,將毛剪凈

裝于盛水的燒杯里(以免兔毛飛揚),用酒精消毒后,用針頭刺皮膚,試其痛覺反應(yīng),用手

掌緊貼兔背部皮膚,感覺刺激部位肌肉抽縮為痛感指標。刺激方式按左、中、右、上、中、

下的順序進行。全部陽性反應(yīng)記6/6,全部陰性反應(yīng)記為0/6,其余類推。

2、于兩背部分別用0.2%普魯卡因注射液2ml和0.2%普魯卡因腎上腺素注射液2ml作

皮下注射。注射后于1min、2min、5min分別刺激注射部位測其痛覺,然后每5min測試一

次,并比較兩種藥液的麻醉作用、維持時間及注射部位皮膚顏色有何不同?

[記錄]

用藥后反應(yīng)

藥物用藥前反應(yīng)

5min1Omin15min20min25min30min35min

普魯卡因

普魯卡因+Ad

[討論題]

以實驗結(jié)果說明普魯卡因與腎上腺素合用的臨床意義?

3.3氯丙嗪鎮(zhèn)靜作用及其強化麻醉的觀察

[目的]觀察氯丙嗪的鎮(zhèn)靜作用和強化麻醉作用。

[材料]家兔3只;注射器;0.5%鹽酸氯丙嗪、2%戊巴比妥鈉溶液、酒精棉球。

[方法]

每組取家兔1只,稱其體重,根據(jù)下列規(guī)定藥物、劑量、用法、并記錄反應(yīng)。

[記錄]

兔號體0.5%0.2%戊麻醉

用藥前用藥后

重氯丙嗪巴比妥作用

注射液鈉液發(fā)維痛瞳眼角體痛11眼角體

生持孔瞼膜孔瞼膜

時時覺大反反溫覺大反反溫

向同小射射「小射

甲lml/kg

iv

乙lml/kglml/kg

iviv

丙lml/kg

iv

注:甲、乙兔各靜注氯丙嗪10分鐘后,再給乙、丙兔分別注射戊嘏比妥鈉。

[討論題]

以上結(jié)果說明了什么問題?

3.4藥物的鎮(zhèn)痛作用

一、化學刺激法觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用

[目的]觀察哌替咤、羅通定的鎮(zhèn)痛效應(yīng),掌握扭體法鎮(zhèn)痛實驗方法。

[材料]小白鼠,體重18?22g;1ml注射器、鼠籠、苦味酸等;生理鹽水、0.2%哌替

嚏溶液、0.2%羅通定溶液、0.3%酒石酸睇鉀溶液

[方法]取健康小白鼠6只,稱重,隨機分成3組,每組2只,觀察各鼠活動情況后,

分別腹腔注射0.2%哌替唯溶液、0.2%顱痛定溶液及生理鹽水,給藥體積均為01ml/10g。

給藥30min后,各鼠分別腹腔注射0.3%酒石酸睇鉀0.3ml/只,觀察lOmin內(nèi)產(chǎn)生“扭體”反

應(yīng)的動物數(shù)。

[記錄]

藥物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用

扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭扭不扭

哌替咤

羅通定

生理鹽水

[結(jié)果]

匯總?cè)珜嶒炇业膶嶒灲Y(jié)果,將所測得的結(jié)果代入下列公式計算:

實驗組無扭體反應(yīng)的動物數(shù)-對照組無扭體反應(yīng)的動物數(shù)

藥物鎮(zhèn)痛百分率------------------------------------------------------xl00%

對照組扭體反應(yīng)的動物數(shù)

注:“扭體”反應(yīng)的標志:腹部內(nèi)凹,軀體與后腿伸張,同時肢體扭曲,抬臀豎尾等。

二、熱板法觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用

[目的]學習熱板法鎮(zhèn)痛實驗方法;觀察哌替咤和羅通定的鎮(zhèn)痛作用。

[原理]將小鼠置于恒溫的熱板上,以熱刺激小鼠足部產(chǎn)生疼痛反應(yīng)(舔后爪),通過

測定小鼠痛閾(出現(xiàn)疼痛反應(yīng)即舔后爪時間),比較組與對照組小鼠痛閾的差異,判定藥物

有無鎮(zhèn)痛作用。

[材料]小鼠,雌性,體重18~22g;器材:1ml注射器、鼠籠、天平、智能熱板儀;0.2

%哌替咤生理鹽水溶液、0.2%羅通定生理鹽水溶液。

[方法]

1、準備工作打開智能熱板儀,設(shè)定溫度為55士0.5。(3,預(yù)熱15分鐘左右,使其達到

恒溫。

2、小鼠的選擇及正常痛閾的測定取小鼠數(shù)只,依次放入熱板儀上。自放入熱板儀至

出現(xiàn)舔后足所需的時間(秒)作為該鼠的痛閾值。凡在30秒內(nèi)不舔足或逃避者棄置不用。

取篩選合格的小鼠6只,隨機分為3組,各鼠編號后重復(fù)測其正常痛閾值?次,將所測兩次

正常痛閾平均值作為該鼠給藥前痛閾值。

3、給藥及給藥后痛閾值測定按0.1ml/10g腹腔注射給藥,第1組給予0.2%哌替咤溶

液,第2組給予0.2%羅通定溶液,第3組給予生理鹽水作為對照。給藥后lOmin、30min后

各測小鼠痛閾值1次。若放入燒杯內(nèi)60秒仍無反應(yīng),應(yīng)將小鼠取出,痛閾值以60秒計。

4、實驗完畢后,按下列公式計算不同時間的痛閾提高百分率:

給藥后平均痛閾值-給藥前平均痛閾值

痛閾提高百分率(%)=----------------------------------------xlOO%

給藥前平均痛閾值

[記錄]

藥物對小鼠的鎮(zhèn)痛作用

TT"戰(zhàn)她二加斗擊女估,訃、給藥后平均痛閾值(秒)痛閾提高(%)

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