魚類病毒性疾病防治學(xué)_第1頁
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文檔簡介

魚類病毒性疾病防治學(xué)

魚類病毒性疾病目錄草魚出血病斑點(diǎn)叉尾鮰病毒病鯉痘瘡病錦鯉皰疹病毒病淋巴囊腫病真鯛虹彩病毒病7.傳染性脾腎壞死病8.流行性造血器官壞死病9.牙鲆彈狀病毒病10.鯉春病毒血癥11.病毒性神經(jīng)壞死病12.傳染性胰臟壞死病

草魚是我國主要的淡水養(yǎng)殖品種,其產(chǎn)量占了我國南方水產(chǎn)養(yǎng)殖品種的半壁江山。長期以來,影響草魚產(chǎn)量和效益的根本原因就是草魚的“四病”:病毒性出血病、爛鰓病、腸炎病、赤皮病。草魚出血病

草魚出血病是一種嚴(yán)重危害草魚的一種病毒傳染病,對草魚的魚種生產(chǎn)和養(yǎng)殖可造成重大損失,我國將之列為二類動(dòng)物疫病。

【病原】

病原為草魚呼腸孤病毒(GCRV)或草魚出血病病毒(GCHV)。病毒為20面體的球形顆粒,直徑為70~80nm,具雙層衣殼,無囊膜。病毒基因組為雙股RNA,由11條片段組成。目前已確定的病毒株分為三種類型,在核酸電泳圖譜、毒力和抗原性等方面都有一定差別。流行的毒株第一型占22%,第二型75%,第三型3%?!玖餍刑攸c(diǎn)】1.

流行區(qū)域

草魚出血病是一種流行地區(qū)廣泛、流行季節(jié)長、發(fā)病率高、死亡率高、危害性大的病毒性傳染病。此病于1972年在我國湖北灄口首次發(fā)現(xiàn),1978年證實(shí)由病毒引起。此病主要流行于湖北、湖南、廣東、廣西、江西、福建、江蘇、浙江、安徽、上海、四川、重慶等我國長江中下游以南廣大地區(qū),夏季北方部分地區(qū)也有該病流行。2.危害對象草魚出血病主要危害全長2.5cm~15cm的草魚魚種,也可感染麥穗魚,鰱、鳙、鯽、鯉等淡水魚類,感染后沒有臨床癥狀,但可以攜帶病毒,是疾病的傳染源。當(dāng)年草魚死亡率一般在30%-50%,最高可達(dá)70%-80%。二齡以上草魚較少發(fā)病,但可攜帶病毒而成為傳染源。3.發(fā)病季節(jié)和溫度主要發(fā)生于5~9月水溫在20~30℃的季節(jié),尤以25~28℃為流行高峰;但當(dāng)水質(zhì)惡化,水中有機(jī)氮、亞硝酸態(tài)氮和有機(jī)物含量高,水溫變化大,魚體抵抗力低下,病毒的數(shù)量多及毒力強(qiáng)時(shí),在水溫12℃及34.5℃時(shí)也有發(fā)病。4.傳播途徑對草魚出血病的流行病學(xué)調(diào)查表明,該病的主要傳播途徑是水平傳播(通過水或外寄生蟲),傳染源是己經(jīng)感染的或帶毒的草魚,也可通過卵進(jìn)行垂直傳播。5.發(fā)病過程(1)潛伏期:從病毒侵入魚體到出現(xiàn)癥狀以前的一段時(shí)間叫潛伏期。在此期間內(nèi),魚的外表無任何癥狀,活動(dòng)與攝食均正常。草魚出血病的潛伏期約3-10天。潛伏期的長短與水溫、病毒的毒力和數(shù)量、魚體的抵抗力、水環(huán)境等有密切關(guān)系。如水溫高、病毒的毒力強(qiáng)、侵入魚體的病毒數(shù)量多、魚體的抵抗力低、水環(huán)境差,潛伏期就短;反之,則潛伏期長。(2)前趨期:這期的期限很短,一般為1-2天。這期的特征為病魚體色發(fā)暗變黑、離群獨(dú)游、攝食減少或停止,這些癥狀還不是這種病所特有的。(3)充分發(fā)展期:時(shí)間長短不一,一般為1-2天,此期為疾病的高潮期,病魚表現(xiàn)充血、出血等典型癥狀而死。6.繼發(fā)感染草魚出血病病毒的魚體靶器官是腎,它導(dǎo)致魚的免疫力下降。發(fā)病時(shí)正值高溫季節(jié),水溫一般在25℃~28℃,此時(shí)的細(xì)菌繁殖也特別快,極易并發(fā)繼發(fā)感染(特別是“老三病”),使細(xì)菌容易侵入血液和內(nèi)臟組織中大量繁殖,造成魚體嚴(yán)重?fù)p傷和出現(xiàn)全身性敗血癥而大量死亡。這也是GCRV引起草魚高死亡率的原因之一?!景Y狀與病理】按其癥狀表現(xiàn)和病理變化的差異,大致可分為三個(gè)類型,可同時(shí)出現(xiàn),也可交替出現(xiàn)。1.紅肌肉型

主要癥狀為肌肉明顯出血,全身肌肉呈鮮紅色,鰓絲因嚴(yán)重出血而蒼白,多見于5-10cm的小草魚種。2.紅體表型

主要癥狀為體表、鰭基、鰓蓋嚴(yán)重出血,頭頂、口腔、眼眶等處有出血點(diǎn),多見于10cm以上的大草魚種。

3.腸炎型

主要癥狀為腸道嚴(yán)重充血,腸道全部或局部呈鮮紅色,內(nèi)臟點(diǎn)狀出血,體表亦可見到出血點(diǎn),在各種規(guī)格的草魚種中均可見到。肝出血,紅腸,積水4.病理變化

血液中紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量及白細(xì)胞數(shù)均非常顯著地低于健康魚,單核細(xì)胞百分率則非常顯著地高于健康魚;肝臟病變表現(xiàn)為肝血竇脹大,肝細(xì)胞空泡變性、顆粒變性;脾臟充血和出血,有大量紅細(xì)胞浸潤,造血組織有核固縮、碎裂及溶解等現(xiàn)象;腎中的毛細(xì)血管破裂出血,腎曲小管上皮細(xì)胞顆粒變性、胞漿中有嗜酸性包涵體;腸固有層和粘膜下層紅細(xì)胞浸潤、腸上皮剝落于腸腔;骨胳肌纖維腫脹,大量紅細(xì)胞浸潤,局部腫脹呈泡狀【診斷】1.初步診斷

水溫22~30℃,尤其是25~28℃時(shí),草魚魚苗大量死亡,而其他同塘魚類并無死亡,病魚出現(xiàn)紅鰭、紅鰓蓋、紅腸子、紅肌肉等的癥狀中的一種或多種,應(yīng)作為草魚出血病疑似病例2.實(shí)驗(yàn)室確診用草魚腎細(xì)胞系(CIK)或草魚卵巢細(xì)胞系(CO)對疑似病樣進(jìn)行病毒分離,再用凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)或PCR鑒定。3.鑒別診斷注意草魚出血病和細(xì)菌性腸炎病的區(qū)別?;顧z時(shí)出血病的腸壁彈性較好,腸壁內(nèi)黏液較少,嚴(yán)重時(shí)腸腔內(nèi)有大量細(xì)菌細(xì)胞及成片脫落的上皮細(xì)胞;而腸炎的腸壁彈性較差,腸腔內(nèi)黏液較多,嚴(yán)重時(shí)腸腔內(nèi)有大量黏液和壞死脫落的上皮細(xì)胞,紅細(xì)胞較少?;疾〔蒴~雖腸道充血,但仍具有彈性和光澤患細(xì)菌性腸炎的腸道雖然也出血,但無光澤、無彈性,且呈腐敗、糜爛狀【防控措施】1.免疫防治

草魚出血病目前無有效的藥物用于治療,最有效的控制措施是注射疫苗。由中國水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所研發(fā)的草魚出血病活疫苗(GCHV—892株,凍干細(xì)胞疫苗)獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的一類新獸藥證書(證書號:(2010)新獸藥證字51號),目前由廣東溫氏大華農(nóng)動(dòng)物科技有限公司生產(chǎn)和銷售。這是國內(nèi)外首個(gè)獲批的草魚出血病活疫苗,標(biāo)志著我國水產(chǎn)疫苗研發(fā)與應(yīng)用進(jìn)入了實(shí)質(zhì)性的產(chǎn)業(yè)化階段。2.其它預(yù)防措施對草魚苗種場、良種場實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度;加強(qiáng)水源消毒,對繁殖用的魚卵和親魚、引進(jìn)的魚苗及相應(yīng)設(shè)施等進(jìn)行嚴(yán)格消毒可切斷傳染源,減少病毒感染的幾率;發(fā)現(xiàn)患病魚必須銷毀,并對養(yǎng)殖水體、工具、運(yùn)輸工具及周圍的場地進(jìn)行消毒;采用碘液或碘伏與面粉混合后投喂,對預(yù)防和控制疾病有一定作用。第二節(jié)斑點(diǎn)叉尾鮰病毒病

斑點(diǎn)叉尾鮰病毒病是斑點(diǎn)叉尾鮰的一種急性傳染病,以腎小管和腎間組織的廣泛性壞死為主要病理特征,幼魚病情呈急性暴發(fā)性,死亡率高,可造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動(dòng)物疫病?!静≡?/p>

鮰皰疹病毒1型(Ictalurid

herpervirus

1),又稱斑點(diǎn)叉尾鮰病毒(CCV),屬皰疹病毒目、異樣動(dòng)物皰疹病毒科、鮰皰疹病毒屬成員。病毒顆粒有囊膜,呈二十面體,雙股DNA,直徑175~200nm?!玖餍刑攸c(diǎn)】

斑點(diǎn)又尾鮰病毒?。–CVD)最早于1968年在美國發(fā)生,當(dāng)時(shí)主要在北美流行,目前已成為危害世界各國鮰養(yǎng)殖的最主要傳染病之一。我國自1984年首次從美國引進(jìn)斑點(diǎn)叉尾鮰并開展繁育與養(yǎng)殖以來,斑點(diǎn)叉尾鮰的養(yǎng)殖面積和規(guī)模逐漸擴(kuò)大,近幾年已有學(xué)者在養(yǎng)殖的斑點(diǎn)叉尾鮰魚苗中分離到CCV,懷疑部分地區(qū)曾受到過這種疾病的危害。CCV對宿主有很強(qiáng)的選擇性。目前報(bào)道,自然暴發(fā)病僅僅是斑點(diǎn)叉尾的魚苗和魚種;人工注射病毒可以使白叉尾、長鰭叉尾、斑點(diǎn)叉尾與長鰭叉尾雜交種患病,口喂及浸浴則不患病。不同品系的鮰魚對CCV有不同的易感性,同時(shí)魚齡與臨床感染密切相關(guān),剛孵化魚苗死亡率達(dá)100%,八月齡鮰魚則很少感染CCV。CCV暴發(fā)流行與水溫、養(yǎng)殖方式有著密切的關(guān)系,CCVD的流行水溫是20~30℃,在此溫度范圍內(nèi)水溫越高,發(fā)病速度越快,發(fā)病率和死亡率越高,當(dāng)水溫在25~30℃時(shí),病程比較短,一般為3~7d,死亡率可達(dá)90%以上。本病20℃時(shí)潛伏期10天,25~30℃時(shí)3天,15℃以下不發(fā)病。人工感染后,腎臟在24小時(shí)分離到病毒,肝臟及腸則需在70小時(shí)分離到病毒,腦在96小時(shí)才分離到病毒。高密度養(yǎng)殖、運(yùn)輸、水污染等脅迫因素及細(xì)菌感染均可誘發(fā)或引起疾病流行和大量死亡。CCV可垂直傳播和水平傳播。垂直傳播是CCV普遍的傳播方式,但傳播機(jī)制不詳。水平傳播可直接傳播或通過媒介傳播,其中水是主要的非生物傳播媒介,其他生物媒介或污染物也可傳播CCV。CCVD流行后,存活魚可成為隱性無癥狀帶毒魚;帶毒魚可能通過尿排毒,然后CCV通過皮膚、嗅覺器官、腸道或者鰓感染健康魚?!景Y狀與病理】CCV感染后宿主可表現(xiàn)為臨床癥狀或和隱性帶毒不同類型。病魚臨床表現(xiàn)為食欲下降,離群獨(dú)游,反應(yīng)遲鈍,病魚中有些魚尾向下、頭浮在水面,有些出現(xiàn)痙攣式旋轉(zhuǎn)游動(dòng)(尤其在驚動(dòng)時(shí)),然后沉入水中死亡。病魚鰭基部(尤其是腹鰭基部)、腹部和尾柄處出血,腹部膨大,眼球單側(cè)或雙側(cè)性外突,肛門紅腫、外突,表皮發(fā)黑、鰓蒼白;鰓蒼白,有些出血。解剖后可見肌肉出血,腹腔內(nèi)有黃色或淡紅色液體,內(nèi)臟通常貧血,消化道內(nèi)無食物,腸道內(nèi)有淡黃色黏液,脾臟通常腫大變黑,后腎嚴(yán)重?fù)p傷。CCVD流行暴發(fā)流行后的殘存魚往往隱性帶毒者,一般無臨床癥狀。CCV能夠侵害斑點(diǎn)叉尾鮰的主要器官,引起腎臟、肝臟、脾臟、分泌組織、胃道、胰腺和骨骼肌聚集或擴(kuò)散壞死。病毒感染后,魚體病毒含量最高的器官是腎和脾。組織病理學(xué)檢查可見腎間造血組織及腎單位彌漫性壞死,同時(shí)伴有出血和水腫;肝灶性壞死,偶爾在肝細(xì)胞內(nèi)可見嗜酸性胞漿包涵體;胃腸道黏膜層上皮細(xì)胞變性、壞死。【診斷】

根據(jù)癥狀及流行情況進(jìn)行初步診斷;用虹鱒性腺細(xì)胞株分離病毒,觀察細(xì)胞病變,可做出進(jìn)一步診斷;最后確診需采用血清中和試驗(yàn)或/和PCR技術(shù)檢測,具體辦法參見《GB/T15805.4-2008魚類檢疫方法第4部分:斑點(diǎn)叉尾鮰病毒(CCV)》。(1)初步診斷:根據(jù)疾病流行的最佳水溫25℃~30℃、病魚的臨床癥狀初步診斷。病魚眼球突出,鰓蒼白,有些出血;皮膚和鰭有出血現(xiàn)象;晚期腹部膨脹,肛門突出。解剖發(fā)現(xiàn)胃擴(kuò)張,內(nèi)有黏液,肌肉、腎、肝、脾等處可見出血。(2)樣品采集:按GB/T18088-2000的規(guī)定采樣。對有臨床癥狀的魚,如是體長小于等于4cm的魚苗取整條魚,體長4cm-6cm的魚苗取內(nèi)臟(包括腎);體長大于6cm的魚則取腦、肝、腎、脾。而對無癥狀的魚要取腎、脾、鰓和腦組織,成熟雌魚還需取卵巢液,魚卵則取卵殼。(3)實(shí)驗(yàn)室確診:對可疑樣品先用敏感細(xì)胞進(jìn)行病毒培養(yǎng)分離,在細(xì)胞出現(xiàn)CPE后用中和試驗(yàn)、免疫熒光、ELISA或PCR中的一種鑒定CCV。①將病魚組織勻漿上清液接種到斑點(diǎn)叉尾鮰卵巢細(xì)胞株(CCO)或BB細(xì)胞系,為避免假陰性現(xiàn)象,應(yīng)采用不同稀釋度(1∶10和1∶100……)接種細(xì)胞;經(jīng)25℃~30℃,18小時(shí)的培養(yǎng),病毒在接種細(xì)胞內(nèi)形成核內(nèi)包涵體、合胞體及細(xì)胞崩解等細(xì)胞病變(CPE)。在細(xì)胞出現(xiàn)CPE后用中和試驗(yàn)和/或PCR技術(shù)鑒定CCV。如果樣品經(jīng)過接種細(xì)胞和盲傳后仍不出現(xiàn)CPE,則判為陰性。②經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)CPE,并經(jīng)中和試驗(yàn)或者PCR試驗(yàn)為陽性者,若出現(xiàn)臨床癥狀,可判為患有斑點(diǎn)叉尾鮰病毒??;若無臨床癥狀,則判為CCV攜帶者。③若細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)CPE,僅中和試驗(yàn)為可疑,PCR試驗(yàn)為陰性,則判為可疑?!痉乐巍?/p>

該病目前尚無有效的治療方法,故要加強(qiáng)日常的預(yù)防管理,遠(yuǎn)離一切可能的帶毒污染物是阻止CCVD暴發(fā)的有效措施。國外現(xiàn)有CCV減毒疫苗,可使鮰魚苗獲得97%的免疫保護(hù)力,但國內(nèi)還無可用的疫苗進(jìn)行預(yù)防。(1)預(yù)防措施:①對苗種場、良種場實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度;加強(qiáng)疫病監(jiān)測與檢疫,掌握流行病學(xué)情況。②加強(qiáng)綜合預(yù)防措施,嚴(yán)格執(zhí)行檢疫制度,池埂消毒,對網(wǎng)具、運(yùn)輸工具等用高濃度消毒液浸泡消毒,防止病毒擴(kuò)散。③漁場中應(yīng)設(shè)置隔離帶將魚卵孵化區(qū)和剛孵化魚苗飼養(yǎng)區(qū)分開,并確認(rèn)與帶毒魚完全隔離。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,夏季要降低魚苗的養(yǎng)殖密度,減少環(huán)境脅迫。④發(fā)病地區(qū),養(yǎng)殖對斑點(diǎn)叉尾鮰皰疹病毒病有抵抗力的長鰭叉尾鮰和斑點(diǎn)叉尾鮰雜交種、白叉尾鮰、長鰭叉尾鮰等。(2)處理:發(fā)現(xiàn)患病魚或疑似患病魚必須銷毀,并對養(yǎng)魚設(shè)施進(jìn)行徹底消毒。(3)劃區(qū)管理:根據(jù)水域和流域的自然隔離情況劃區(qū),并實(shí)施劃區(qū)管理。

鯉痘瘡病

【病原】鯉痘病毒。一種皰疹病毒,病毒核心為二十面體,呈六角形,外面包有一層囊膜,整個(gè)病毒粒子近似球形。病毒直徑為140~160nm,核心直徑為80~100nm,為有囊膜的DNA病毒提純的病毒負(fù)染電鏡照片,顯示成熟的病毒顆粒帶有松散的囊膜,直徑170~230nm【流行特點(diǎn)】

本病流行于歐洲。鯉對這種病特別敏感。目前,在我國上海、湖北、云南、四川等地均有發(fā)生。主要危害鯉、鯽及圓腹雅羅魚等。本病通過接觸傳染,也可能通過單殖吸蟲、蛭、鲺等傳染。流行于冬季及早春低溫(10~16℃)時(shí)。水質(zhì)肥的池塘、水庫和高密度的網(wǎng)箱養(yǎng)殖流行較為普遍,當(dāng)水溫升高后會逐漸自愈。【癥狀與病理】

病魚體表出現(xiàn)俗稱“石蠟樣增生物”,狀似痘瘡。這種增生物一般不能被摩擦掉,但增長到一定程度會自然脫落,接著又在原患部再次出現(xiàn)新的增生物。對大魚危害不大,不會致死。但如增生物占魚體的大部分,會嚴(yán)重影響魚的正常發(fā)育,對骨骼特別是對脊椎骨的生長發(fā)育影響較大,可引起骨質(zhì)軟化?!景Y狀與病理】組織學(xué)檢查,增生物為上皮細(xì)胞及結(jié)締組織增生形成,在有些上皮細(xì)胞的核內(nèi)可見包涵體,染色質(zhì)邊緣化。增生物不侵入真皮,也不轉(zhuǎn)移。電子顯微鏡下在增生的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可以見到大量的病毒顆粒。痘瘡切片的電鏡照片(上:已成熟的病毒顆粒在空泡中向細(xì)胞膜移動(dòng),正通過空泡向細(xì)胞表面釋放;下:為局部放大)【診斷】(1)肉眼:根據(jù)“石蠟狀增生物”等癥狀及流行情況,作出初步診斷。(2)光鏡:病理組織學(xué)檢查,可見增生物為上皮細(xì)胞及結(jié)締組織組織異常增生,有些上皮細(xì)胞的核內(nèi)有包涵體。(3)電鏡:確診須進(jìn)行電子顯微鏡觀察,見到皰疹病毒或分離培養(yǎng)到皰疹病毒?!痉揽卮胧款A(yù)防措施:(1)加強(qiáng)綜合預(yù)防措施,嚴(yán)格執(zhí)行檢疫制度。(2)流行地區(qū)改養(yǎng)對本病不敏感的魚類。(3)升高水溫及適當(dāng)稀養(yǎng),也有預(yù)防效果。(4)將病魚放入含氧量高的清潔水(流動(dòng)水更好),體表增生物會自行脫落。【治療方法】(1)排出原池水3/5,使用生石灰全池潑灑,調(diào)pH為9.4~10后加入新水。(2)每立方米水體每天使用10%聚維酮碘溶液0.45~0.75mL,全池潑灑。(3)每千克飼料添加銀翹板藍(lán)根3.2~4.8g,或七味板藍(lán)根8~16g,每天投喂2次,連續(xù)投喂7d。

錦鯉皰疹病毒病

錦鯉皰疹病毒病(KHVD)是鯉和錦鯉的一種急性、接觸性傳染病,對北美、歐洲和亞洲的錦鯉、鯉危害均極為嚴(yán)重。

2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動(dòng)物疫病,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須申報(bào)的疾病

【病原】鯉皰疹病毒3型(CyprinidsHerpesvirus-3,CyHV-3),又名錦鯉皰疹病毒(KoiHerpesvirus,KHV)。核衣殼呈對稱二十面體結(jié)構(gòu),直徑為100~110nm,雙鏈DNA。成熟的病毒顆粒帶有松散的囊膜,直徑170~230nm。皰疹病毒結(jié)構(gòu)示意圖【流行特點(diǎn)】1.

流行區(qū)域

1998年以色列首次報(bào)道了錦鯉皰疹病毒病,錦鯉和鯉死亡率高達(dá)75%~95%,直到1999年才確認(rèn)KHV為其真正的病原。自1998年以來,該病在英國、歐洲大陸、美國及以色列等國家和地區(qū)暴發(fā)流行,印度尼西亞、日本、韓國、我國臺灣省等地養(yǎng)殖的錦鯉也因錦鯉皰疹病毒病而大量死亡。2.危害對象無大小限制的錦鯉、鯉和鬼鯉及這些品種的雜交種均對KHV高度敏感。在實(shí)驗(yàn)條件下,2.5g~6g的魚比230g的魚更為敏感。也可感染麥穗魚,鰱、鳙、鯽、鯉等淡水魚類,感染后沒有臨床癥狀,但可以攜帶病毒,是疾病的傳染源。鯉科魚類,包括白鰱、草魚、鳙未有感染KHV的報(bào)道,這些鯉科魚類無論與鯉在自然條件下混養(yǎng)、亦或與病魚同居感染、直接接觸病毒而不發(fā)病3.發(fā)病季節(jié)和溫度最適溫度是23~28℃(低于18℃,高于30℃不會引起死亡)。已感染的魚,水溫18~27℃間持續(xù)時(shí)間越長,疾病暴發(fā)的可能性越大,在此水溫范圍外死亡率明顯降低。該病多發(fā)于高溫季節(jié),具有潛伏期14d,魚發(fā)病并出現(xiàn)癥狀24~48h后開始死亡,2~4d內(nèi)死亡率可迅速達(dá)80%~100%。4.傳播途徑主要通過水平傳播。暴發(fā)后幸存的魚成為疾病的傳播者,可將病毒傳染給其他健康的魚,水是傳播病毒的主要非生物載體,無臨床癥狀的養(yǎng)殖和野生魚也可能是病毒的儲存庫,病毒粒子通過糞便,尿液,鰓和皮膚粘液排出。能否垂直傳播目前尚未確定。5.發(fā)病過程(1)潛伏期:從病毒侵入魚體到出現(xiàn)癥狀以前的一段時(shí)間叫潛伏期。在此期間內(nèi),魚的外表無任何癥狀,活動(dòng)與攝食均正常。錦鯉皰疹病毒病的潛伏期約14天。(2)前趨期:這期的期限很短,一般為1-2天。這期的特征為病魚患病魚無力、無食欲,呈無方向感的游泳,或在水中呈頭下尾上的姿勢漂游,甚至停止游泳,這些癥狀還不是這種病所特有的。(3)充分發(fā)展期:時(shí)間長短不一,一般為1-2天,此期為疾病的高潮期,皮膚充血,魚眼凹陷,爆發(fā)死亡。類似寄生蟲感染和細(xì)菌感染?!景Y狀與病理】主要癥狀為魚體皮膚上出現(xiàn)蒼白的塊斑和水泡,鰭條尤其是尾鰭充血,鰓出血并產(chǎn)生大量黏液或出現(xiàn)大小不等的塊斑狀組織壞死,鱗片有血絲,魚眼凹陷,出現(xiàn)癥狀后24~48h死亡。有些魚表現(xiàn)神經(jīng)癥狀,極小的刺激能引起較強(qiáng)烈的反應(yīng)?!景Y狀與病理】無顯著性、特征性組織病理變化。鰓的病變最穩(wěn)定,初級鰓小片腐蝕,次級鰓小片融合,初級和次級鰓小片的尖部腫脹。脾臟有出血點(diǎn),鏡檢發(fā)現(xiàn)內(nèi)部有少量出血點(diǎn);后腎腫大,鏡檢有出血點(diǎn),鮮紅色;膽固縮,顏色變深。自然感染時(shí),鰓、腎臟和脾臟含病毒量最豐富?!驹\斷】我國目前尚無錦鯉皰疹病毒病診斷的國家標(biāo)準(zhǔn)初步診斷

病毒致死特異性特點(diǎn)可有助于該病的診斷。水溫在18~30℃之間有大量死亡,水溫升高或降低,死亡率下降或停止。死亡極快,從出現(xiàn)發(fā)病癥狀到死亡只要24~48h;死亡率極高,如果疾病暴發(fā)10d內(nèi)死亡率可達(dá)80%~100%。即使觀察到的是類似細(xì)菌或寄生蟲病的癥狀,也應(yīng)當(dāng)高度懷疑KHV感染2.實(shí)驗(yàn)室確診目前有效的檢測和診斷手段主要有:細(xì)胞分離法、PCR、免疫熒光、ELISA等。敏感細(xì)胞系培養(yǎng)KHV,其培養(yǎng)適合溫度為15~25℃,最適培養(yǎng)溫度為20℃。PCR技術(shù)是目前較為精確的檢測錦鯉皰疹病毒感染的方法。3.鑒別診斷應(yīng)與普通細(xì)菌感染和寄生蟲侵襲相區(qū)別,特別是與細(xì)菌性爛鰓病進(jìn)行區(qū)分。敏感細(xì)胞系感染KHV后出現(xiàn)的CPE和PCR檢測陽性【防控措施】1.免疫防治目前無有效的藥物用于治療,對病毒性疾病的預(yù)防最有效的控制措施是注射滅活或弱(減)毒疫苗,但目前該病尚無商品化的疫苗,因此對該病的防制應(yīng)采用綜合防制措施加以控制和消滅2.預(yù)防措施:①加強(qiáng)進(jìn)出口口岸檢疫,防止通過貿(mào)易進(jìn)口和觀賞魚的交流將KHV傳入我國。②對苗種場、良種場實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。③加強(qiáng)疫病監(jiān)測,掌握流行病學(xué)情況。④通過培育或引進(jìn)抗病品種,提高抗病能力。2.預(yù)防措施:⑤加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施,應(yīng)對水源、繁殖用的魚卵和親魚、引進(jìn)的魚苗及相應(yīng)設(shè)施等進(jìn)行嚴(yán)格消毒,可切斷傳染源,減少病毒感染的幾率。⑥有一些方法可以啟動(dòng)錦鯉對KHV的免疫應(yīng)答,如將感染魚飼養(yǎng)于20~28℃一段時(shí)期,然后降低或升高溫度使病毒失活,類似于疫苗免疫,從而使機(jī)體獲得免疫力,達(dá)到免疫的目的。以色列用篩選出的弱毒株經(jīng)射線處理后,對健康魚進(jìn)行免疫,能起到一定的保護(hù)作用。3.處理

發(fā)現(xiàn)疑似病例需及時(shí)向漁業(yè)主管部門上報(bào);患病魚和死魚必須銷毀,并對水和用具進(jìn)行徹底消毒。紫外線、90°C以上10min、200mg/L的漂白粉浸泡1h、500mg/L的季銨鹽碘浸泡1h。4.劃區(qū)管理

據(jù)水域和流域情況及自然屏障進(jìn)行劃區(qū),并對其實(shí)施區(qū)域管理淋巴囊腫病【病原】淋巴囊腫病毒(LDV)。屬虹彩病毒科,細(xì)胞腫大病毒屬,為DNA病毒。病毒粒子呈正二十面體,其輪廓呈六角形,有囊膜,囊膜厚50~70nm。大量病毒顆粒堆積,可呈晶格狀排列;大小隨宿主魚而異,直徑一般為200~260nm。病毒核心為纏繞在一起的雙股DNA纖絲團(tuán)核心,直徑約為120~140nm。。虹彩病毒結(jié)構(gòu)示意圖【流行特點(diǎn)】該病流行很廣主要發(fā)生在海水魚類。全年可見,但在水溫10~20℃時(shí)為發(fā)病高峰期。在低密度和良好養(yǎng)殖條件下,一般不會引起大量死亡。在苗種階段和1齡魚種,發(fā)病后2個(gè)月死亡率達(dá)30%以上;2齡以上的魚很少出現(xiàn)死亡。該病毒傳染性不強(qiáng),通常在一個(gè)養(yǎng)殖群體中僅有部分魚生病。實(shí)驗(yàn)證明,淋巴囊腫病毒不能通過血液在魚體內(nèi)的各器官之間傳播。皮膚檫傷或寄生蟲機(jī)械損傷的傷口,往往成為病毒侵入的門戶?!景Y狀與病理】淋巴囊腫病是一種慢性皮膚瘤,病魚的皮膚、鰭和尾部等處出現(xiàn)許多菜花樣囊腫物,囊腫物多呈白色、淡灰色和灰黃色,有的帶有出血灶而顯粉紅色,較大的囊腫物上有肉眼可見的紅色小血管;囊腫大小不一,除發(fā)生在魚體表外,有時(shí)在鰓弓或鰓片上也可以觀察到。魚發(fā)病時(shí)行為和攝食正常,但生長緩慢;病癥嚴(yán)重的基本不攝食,部分死亡。部分感染的魚體表囊腫物脫落,恢復(fù)正常,并可在一定時(shí)間內(nèi)具有免疫力。

【癥狀與病理】魚表皮下結(jié)締組織中的成纖維細(xì)胞被病毒侵染,致使細(xì)胞增生、變圓、膨大和聚集,形成淋巴囊腫細(xì)胞淋巴囊腫細(xì)胞在切片組織中互相擠壓呈不規(guī)則形,細(xì)胞核呈空泡狀,核膜明顯,細(xì)胞核內(nèi)沒有病毒顆粒;細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見大量的包涵體和病毒粒子。左:淋巴囊腫壓片后的巨大細(xì)胞,其中部分細(xì)胞已經(jīng)破裂右:淋巴囊腫切片中的巨大細(xì)胞。細(xì)箭頭示一些正常大小的細(xì)胞;三角形箭頭示細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的網(wǎng)狀包涵體【診斷】通過肉眼觀察外觀癥狀,可進(jìn)行初診。確診可用BF-2、LBF-1等細(xì)胞株分離培養(yǎng)病毒,通過電鏡觀察到病毒粒子。另外,可用LDV的ELISA檢測方法,或LDV的免疫熒光檢測方法?!痉乐巍?.預(yù)防措施(1)引進(jìn)親本、苗種應(yīng)嚴(yán)格檢疫,發(fā)現(xiàn)攜帶病原者徹底銷毀。(2)嚴(yán)格控制養(yǎng)殖密度,防止高密度養(yǎng)殖。(3)優(yōu)化水環(huán)境,加大換水。(4)避免經(jīng)常性地倒池、更換網(wǎng)箱,養(yǎng)殖操作謹(jǐn)慎,防止魚體表受損。(5)提高養(yǎng)殖魚體抗病力。(6)養(yǎng)殖池塘(或網(wǎng)箱)發(fā)現(xiàn)病魚,及時(shí)撿除并進(jìn)行隔離養(yǎng)殖排出的水用濃度為10mg/L的漂白粉消毒2.治療方法

(1)將病魚囊腫割除(囊腫量少時(shí)),并用濃度為每立方水300ml福爾馬林浸浴30-60min,再飼養(yǎng)在清潔的池中,精心管理。(2)投喂抗生素藥餌,每千克餌料拌氟哌酸50-100mg或土霉素1-2g,連續(xù)投喂5-10d,可防止細(xì)菌性繼發(fā)性細(xì)菌感染。(3)將過氧化氫溶液(30%濃度)稀釋至3%,以此為母液,配成50mg/L的濃度,浸洗20min,然后將魚放入25℃水溫飼養(yǎng)一段時(shí)間后,淋巴囊腫會自行脫落。真鯛虹彩病毒病【病原】真鯛虹彩病毒(RSIV)。屬虹彩病毒科,細(xì)胞腫大病毒屬。病毒粒子為正二十面體,大小200~260nm,DNA病毒【流行特點(diǎn)】該病1990年最先發(fā)現(xiàn)于日本養(yǎng)殖的真鯛,主要危害幼魚,發(fā)病后死亡率高達(dá)37.9%。1周齡以上的魚,發(fā)病較輕,死亡率4.1%左右。發(fā)病期在7~10月份,水溫22.6~25.5℃為發(fā)病最高峰期。水溫降至18℃以下可自然停止發(fā)病。RSIV亦侵染條石鯛、五條鰤和花鱸。真鯛虹彩病毒病的主要傳播方式是水平傳播,病毒的流行病學(xué)調(diào)查也證明垂直傳播途徑客觀存在?!景Y狀與病理】病魚體色變黑,昏睡、嚴(yán)重貧血。體表和鰭出血,鰓上有瘀斑,外觀呈灰白色。本病的特征是在顯微鏡下病魚的脾、心、腎、肝和鰓組織的切片中有能被Giemsa染色的異常肥大的細(xì)胞,直徑15~20μm,電鏡觀察這些細(xì)胞中有許多病毒粒子。該病毒病是一種全身性、系統(tǒng)性感染,病毒對魚體上皮組織和內(nèi)皮組織親嗜性較強(qiáng),對脾臟、腎臟等魚類造血器官和組織的破壞尤為嚴(yán)重,從而導(dǎo)致病魚貧血、器官衰竭而死亡。

【診斷】根據(jù)病魚體表、鰓的外觀癥狀和脾臟肥大可做出初步診斷取病魚脾臟、肝臟、心臟、腎臟或鰓組織,切片,Giemsa染色,在光鏡下觀察到被Giemsa濃染的異常肥大的細(xì)胞;另可采用電鏡作脾臟組織超薄切片,觀察到病毒粒子;PCR技術(shù)已應(yīng)用于對RSIVD的診斷,并且發(fā)現(xiàn)與免疫學(xué)診斷比較,PCR的靈敏性、準(zhǔn)確性更高。也可用敏感細(xì)胞系及免疫熒光等病毒經(jīng)典檢測方法?!痉乐巍繀⒖贾暗牟《静 υ摬∫灶A(yù)防為主,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。目前,日本已經(jīng)研制出真鯛虹彩病毒的商用化疫苗。

傳染性脾腎壞死病傳染性脾腎壞死病俗名鱖暴發(fā)性傳染病,是以脾腎壞死為主要病理特征的一種病毒性疾病,可引起淡水養(yǎng)殖鱖暴發(fā)性死亡,嚴(yán)重危害我國鱖養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動(dòng)物疫??;與其病原類似的真鯛虹彩病毒病被OIE列為必須申報(bào)的疾病?!静≡總魅拘云⒛I壞死病毒(ISKNV)。虹彩病毒科,腫大病毒屬。完整病毒顆粒直徑約135nm±10nm,具包膜,切面為六角形、二十面體。病毒基因組為雙鏈DNA?!玖餍刑攸c(diǎn)】傳染性脾腎壞死病主要流行于我國南方淡水養(yǎng)殖的翹嘴鱖中。人工感染研究揭示,ISKNV在鱖體內(nèi)可長期潛伏,流行高峰期鱖在10d內(nèi)死亡率高達(dá)90%左右。最適流行溫度為28~30℃,20℃以下,ISKNV人工感染鱖魚,鱖魚不會發(fā)病,呈隱性感染狀態(tài);氣候突變和氣溫升高、水環(huán)境惡化是誘發(fā)該病大規(guī)模流行的重要因素ISKNV水平感染途徑有二種,一種是經(jīng)體表感染,一種是經(jīng)口感染主要傳播方式是水平傳播,病毒的流行病學(xué)調(diào)查也證明垂直傳播途徑客觀存在【癥狀與病理】病鱖嘴張大,呼吸加快加深,失去平衡,不能消化吞食飼料魚;部分病魚魚體變黑,有時(shí)有抽筋樣顫動(dòng)。病鱖解剖,見脾臟腎臟腫大、潰爛、充血。200g以下的鱖解剖,常見有腹水。大部分魚鰓貧血,呈蒼白色,而有時(shí)伴有寄生蟲寄生或細(xì)菌感染呈現(xiàn)出血、腐爛等現(xiàn)象;受感染的細(xì)胞腫大,主要感染脾和腎,導(dǎo)致脾臟和腎臟腫大壞死,出現(xiàn)空洞,并有大量白細(xì)胞浸潤;在脾臟和頭腎-組織的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可觀測到大量的病毒顆粒。其他受感染的組織細(xì)胞雖然有少量病毒感染,但病變不明顯。感染ISKNV的細(xì)胞腫大【診斷】

我國目前尚無該病診斷的國家標(biāo)準(zhǔn),可參考水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SC/T7211-2011《傳染性脾腎壞死病毒檢測方法》進(jìn)行診斷。(1)根據(jù)癥狀及流行情況進(jìn)行初步診斷。(2)病理切片檢查可作出進(jìn)一步檢查。(3)實(shí)驗(yàn)室確診

【防治】

目前,該病的疫苗仍處于試驗(yàn)階段,可行的預(yù)防方法是避免接觸病毒和半封閉式養(yǎng)殖管理、保持水質(zhì)穩(wěn)定。因此嚴(yán)格檢疫,保證水源、引入魚卵和魚不帶病毒,實(shí)行半封閉式池塘養(yǎng)殖管理,及時(shí)進(jìn)行消毒,切斷魚苗來源的垂直傳播途徑和通過水體的水平傳播途徑。平時(shí)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,健康養(yǎng)殖,保持水質(zhì)優(yōu)良,提高魚體抗病力;還可注射多聯(lián)滅活疫苗(尚處于試驗(yàn)階段),進(jìn)行綜合預(yù)防。采用較溫和的中草藥預(yù)防和治療,不亂用藥物,在發(fā)病季節(jié)及時(shí)預(yù)防細(xì)菌、寄生蟲感染,保持水質(zhì)優(yōu)良、穩(wěn)定等。(2)處理:發(fā)現(xiàn)病魚經(jīng)確診后必須全群銷毀,同時(shí)對水源和用具進(jìn)行無害化處理。(3)劃區(qū)管理:根據(jù)水域和流域的自然隔離情況劃區(qū),并實(shí)施劃區(qū)管理。流行性造血器官壞死病流行性造血器官壞死病是一種魚類全身性傳染病,自然宿主僅見于赤鱸和虹鱒,主要流行于歐洲和澳大利亞。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動(dòng)物疫??;世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)在AquaticAnimalHealthCodeandManualofDiagnosticTestsforAquaticAnimals(2011)中將其列為必須申報(bào)的疾病?!静≡苛餍行栽煅鞴賶乃啦《荆‥HNV),屬虹彩病毒科蛙病毒屬成員?!玖餍刑攸c(diǎn)】

流行性造血器官壞死?。‥HN)目前僅流行于澳大利亞部分地區(qū),赤鱸(俗名河鱸)和虹鱒是目前僅知的兩種流行性造血器官壞死病毒(EHNV)的自然感染宿主;各個(gè)年齡段的赤鱸和虹鱒均易感,但魚苗和稚魚的癥狀較成魚明顯。通過浸泡感染試驗(yàn),澳大利亞河鱸、銀鱸、食蚊魚和山南乳魚等其他刺鰭魚類也易感。金魚和鯉等可抵抗EHNV的感染。而歐洲鮰病毒(ECV)和歐洲鲇病毒(ESV)主要引起歐洲鮰和歐洲鲇的發(fā)病死亡,在歐洲有很高的發(fā)病率和死亡率。人工感染表明ECV和ESV能感染虹鱒,但不會引發(fā)虹鱒發(fā)病和死亡。EHNV對赤鱸的致死和流行與水溫、水質(zhì)惡化情況有直接關(guān)系。一般在水溫12~18℃時(shí)潛伏期為10~28d,19~21℃時(shí)為10~11d,天然水體中的河鱸在水溫低于12℃時(shí)一般不會發(fā)病。對虹鱒危害相對較小,只有少量群體易感,自然感染水溫為11~20℃,潛伏期3~10d,人工感染在8~21℃均可發(fā)生。養(yǎng)殖魚密度太高或水質(zhì)太差均可促進(jìn)疾病暴發(fā)。根據(jù)虹鱒群發(fā)病棲息地,可再次感染野生河鱸的情況,認(rèn)為病魚、帶毒魚及污染水體為EHNV的傳染源。虹鱒、赤鱸EHN能在互相隔離的河網(wǎng)、庫區(qū)及其上游廣泛發(fā)生,表明其傳播途徑除水外,還可經(jīng)活魚運(yùn)輸和釣魚餌料傳播。一旦傳播,就會引起疾病的流行。目前在卵巢中尚未檢測到病毒,表明病毒通過垂直傳播的可能性較小?!景Y狀與病理】

無特征性臨床癥狀,僅見魚大量死亡。瀕死魚運(yùn)動(dòng)失衡、鰓蓋張開、頭部四周充血,有的病魚體色發(fā)暗,皮膚、鰭條和鰓損傷壞死,解剖后有時(shí)可見肝表面有直徑1~3mm的小白點(diǎn)。多見于飼養(yǎng)密度過高、水質(zhì)惡化等飼養(yǎng)管理不善的漁場。EHNV靶器官和組織為肝、腎、脾和其他薄壁組織,主要侵害肝細(xì)胞、造血細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等。組織病理學(xué)觀察,可見肝、脾和腎造血組織呈急性局灶性、多灶性或局部大量凝結(jié)性或液化性壞死,肝和腎壞死灶邊緣可見少量嗜堿性質(zhì)內(nèi)包涵體。壞死性病變也可見于心、胰腺、胃腸道、鰓和偽鰓。【診斷】

我國目前尚無該病診斷的國家標(biāo)準(zhǔn),可參考OIEManualofDiagnosticTestsforAquaticAnimals的EHN有關(guān)章節(jié)或檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T2121—2008《流行性造血器官壞死病檢疫技術(shù)規(guī)范》進(jìn)行診斷。

OIE推薦用細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒、ELISA方法對EHNV、ESV和ECV進(jìn)行診斷和調(diào)查。SN/T2121—2008規(guī)定了流行性造血器官壞死病的病原分離、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測方法。(1)初步診斷:該病無特征性的臨床癥狀,難以根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化作出初步診斷,通常需要采用實(shí)驗(yàn)室檢測來作出診斷。(2)樣品采集:有臨床癥狀的魚,體長小于3cm的魚苗取整條魚后,去頭和尾;體長3~6cm的魚苗取內(nèi)臟(包括腎);體長大于6cm的魚則取肝、腎和脾。(3)實(shí)驗(yàn)室診斷:EHNV在藍(lán)鰓魚幼魚細(xì)胞系(BF-2)、大鱗大麻哈魚胚胎細(xì)胞系(CHSE-214)或鯉上皮乳頭瘤細(xì)胞系(EPC)等許多魚細(xì)胞系中生長良好,尤以BF-2培養(yǎng)最佳。待出現(xiàn)細(xì)胞病變后,再用ELISA或PCR方法檢測。如果魚有臨床癥狀,并且從病魚中分離到病毒并用PCR或者ELISA鑒定為EHNV;或者用ELISA檢測病魚的組織中有EHNV抗原,則確診為患流行性造血器官壞死?。蝗绻麤]有臨床癥狀,從樣品中分離到病毒并用PCR或者ELISA鑒定為EHNV,則確認(rèn)為病毒攜帶者。(4)鑒別診斷。EHNV和ECV、ESV的生物學(xué)特性接近,可根據(jù)地理分布初步區(qū)分,目前EHNV僅分布于澳大利亞,ECV和ESV僅流行于歐洲;EHNV主要衣殼蛋白(約為51kd)比ESV、ECV衣殼蛋白(約為49kD)稍大,可采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行區(qū)分;PCR擴(kuò)增后,產(chǎn)物測序可區(qū)分EHNV、ESV和ECV。本病還應(yīng)與傳染性造血器官壞死病(IHN)進(jìn)行區(qū)分,本病的病原屬虹彩病毒科蛙病毒屬,IHNV屬彈狀病毒科粒外彈狀病毒屬。

大量死亡的赤鱸腹部腫脹,右下圖示病魚鰓出血病魚肝上有直徑1-3mm大小的白點(diǎn)【防治】該病目前尚無有效疫苗預(yù)防。(1)預(yù)防措施:

對苗種場、良種場實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度;②

加強(qiáng)疫病監(jiān)測與檢疫,掌握流行病學(xué)情況;③

培育或引進(jìn)抗病品種,提高抗病能力,并加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。④

采用PCR技術(shù)檢測隱性帶病毒親魚,剔除帶毒懷卵雌魚,切斷病毒垂直傳播的途徑。(2)處理:發(fā)現(xiàn)疑似患病魚必須馬上隔離,盡快上報(bào),并立即送樣品到專門實(shí)驗(yàn)室確診。一旦疫情確認(rèn),病魚或疑似病魚必須銷毀,并對養(yǎng)魚設(shè)施進(jìn)行徹底消毒。(3)劃區(qū)管理:根據(jù)水域和流域的自然隔離情況劃區(qū),實(shí)施劃區(qū)管理。牙鲆彈狀病毒病【病原】彈狀病毒科中的牙鲆彈狀病毒((HirameRhabdovirus,HRV)。屬于單股負(fù)鏈RNA病毒目,彈狀病毒科,粒外彈狀病毒屬(Mononegavirales,Rhabdoviridae,Novirhabdovirus)

病毒基因組為單股負(fù)鏈的RNA,長約11000bp,主要包含5個(gè)基因病毒粒子呈子彈形,大小為80nm×(160~180)nm。彈狀病毒結(jié)構(gòu)示意圖及基因組信息示意圖【流行特點(diǎn)】此病首先在日本發(fā)現(xiàn),主要危害牙鲆,從幼魚到成魚均可被感染。發(fā)病季節(jié)為冬季和早春,水溫10℃時(shí)為發(fā)病高峰期,死亡率可高達(dá)60%。水溫15℃以上時(shí),疾病有自然停止的傾向。在香魚和許氏平鲉中也分離到此病毒。人工感染真鯛、黑鯛稚魚有強(qiáng)烈的致病性,對虹鱒也具致病性。【癥狀與病理】患病的牙鲆體色變黑,動(dòng)作緩慢,靜止水底或漫游于水面體表和鰭基部充血或出血,腹部膨脹,內(nèi)有腹水;生殖腺淤血;肌肉出血;腎臟造血組織壞死?!景Y狀與病理】細(xì)胞核固縮、破碎、崩解和消失,腎小管上皮崩解、壞死,黑色素大量沉積;脾臟內(nèi)實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死;腸管黏膜固有層、黏膜下肌肉層充血、腫脹,胃黏膜上皮、黏膜下肌肉層顯著出血;肝臟毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血,肝臟實(shí)質(zhì)細(xì)胞變性、壞死。

【診斷】通過肉眼觀察外觀癥狀,可進(jìn)行初診。

確診可用RTG-2細(xì)胞株分離培養(yǎng)病毒,通過電鏡觀察到病毒粒子。PCR鑒定,ELISA鑒定

HRV接種RTG-2細(xì)胞CPE及電鏡切片【防治】1.預(yù)防措施:(1)引進(jìn)親本、苗種應(yīng)嚴(yán)格檢疫,發(fā)現(xiàn)攜帶病原者徹底銷毀。(2)養(yǎng)殖池塘(或網(wǎng)箱)發(fā)現(xiàn)病魚,要及時(shí)撿出并進(jìn)行隔離養(yǎng)殖,排出的水用濃度10mg/L的漂白粉消毒。(3)工廠化養(yǎng)殖用水經(jīng)紫外線或臭氧消毒,也可用含氯消毒劑或二氧化氯消毒。2.治療方法提高養(yǎng)殖水溫至15℃以上,可以有效地防止本病的發(fā)生。鯉春病毒血癥鯉春病毒血癥(SVC),又稱鯉鰾炎癥、急性傳染性腹水、鯉傳染性腹水癥等。由鯉春病毒血癥病毒引起鯉魚科魚類的一種急性、出血性傳染病。該病主要在歐洲的鯉魚養(yǎng)殖中廣泛傳播,造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

2011年被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為必須申報(bào)的疾病。我國2008年將之列為一類動(dòng)物疫病。【病原】

病原為鯉春病毒血癥病毒(spring

viraemia

of

carp

virus,

SVCV),屬彈狀病毒科鯉春病毒屬成員(Rhabdoviridae,

Sprivivirus)。是一種單鏈RNA病毒,病毒顆粒呈棒狀或子彈狀,大小為90~180nm×60~90nm,有囊膜?!玖餍刑攸c(diǎn)】

鯉春病毒血癥(SVC)最早流行于東歐和中歐,嚴(yán)重危害歐洲水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。隨著魚類貿(mào)易和引種,該病已傳播到美洲

1998年英國環(huán)境、漁業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖科學(xué)研究中心從來自中國北京的金魚和錦鯉中分離出SVCV,2003年深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局在天津的兩個(gè)養(yǎng)殖場的觀賞魚中也分離到了SVCV?!玖餍刑攸c(diǎn)】

SVCV感染譜廣泛,主要感染鯉和錦鯉,可引起鯉和錦鯉大批發(fā)病和死亡,還可感染鯉、錦鯉、鳙、鰱、鯽、丁鱥和歐鯰等各種鯉科魚類,可使虹鱒、草魚、狗魚人工感染發(fā)病。各個(gè)年齡段的魚均可患病,但魚齡越小越易感。SVCV感染后的潛伏期與水溫及魚體本身狀況有關(guān),水溫越適宜、魚體健康狀況越差越容易感染?!玖餍刑攸c(diǎn)】

此病在春季水溫7℃以上時(shí)開始發(fā)生,水溫15℃~17℃左右時(shí)最為流行。在春季水溫低于15℃時(shí),鯉越冬由于長期的低水溫免疫力降低,容易大面積流行、暴發(fā)鯉春病毒病,當(dāng)水溫超過22℃就不再發(fā)病,鯉春病毒血癥由此得名?!玖餍刑攸c(diǎn)】

在外界環(huán)境中,SVCV在低溫下非常穩(wěn)定,-20℃下保藏1個(gè)月,或-30℃或-74℃下保藏6個(gè)月毒力不減。傳染源為病魚、死魚和病毒攜帶魚。感染途徑主要以水體為媒介,水溫10~15℃時(shí)潛伏期約為20天。期間為呈現(xiàn)持續(xù)性的病毒血癥時(shí)期,無癥狀的帶毒魚體能持續(xù)數(shù)周通過糞、尿?qū)⒉《九懦鲶w外。外傷也是重要的傳播因素,可通過魚類寄生蟲傳播到健康鯉魚魚體上。理論存在垂直傳播?!景Y狀與病理】感染SVCV的魚類常常聚集在池塘的進(jìn)水口附近,呼吸緩慢、行動(dòng)遲緩、食欲降低,這是SVC暴發(fā)的早期信號。病毒在魚體內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、造血組織和腎細(xì)胞內(nèi)大量增殖。感染魚類突出特點(diǎn):失去平衡,眼球突出,腹部腫大,腹水自動(dòng)流出,肌肉出血,內(nèi)臟出血有血點(diǎn)。該病還經(jīng)常伴隨著細(xì)菌和寄生蟲的并發(fā)感染,其中以氣單胞菌(Aeromonasspp.)的感染最為顯著?!景Y狀與病理】

SVCV感染鯉幼魚后的組織病理學(xué):

肝臟出現(xiàn)水腫、實(shí)質(zhì)組織顯示多個(gè)病灶壞死及充血

胰臟中通常可以觀察到炎癥和多個(gè)壞死病灶

腹膜、腸道、脾臟、心包膜有明顯炎癥,鰾出血明顯

切片可見腎小管堵塞,出現(xiàn)空泡和透明化

左圖:健康鯉魚右圖:患病鯉魚,可見腹部明顯腫大

【診斷】鯉春病毒血癥的診斷可根據(jù)發(fā)病水溫、病魚外表特征與臨床癥狀做出初步判斷。

疫病的確診參照《GB/T15805.5-2008魚類檢疫方法第5部分:鯉春病毒血癥病毒(SVCV)》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了細(xì)胞分離病毒后,用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PT-PCR)技術(shù)診斷SVC病毒的方法?!捐b別診斷】

在自然情況下,SVC通常與細(xì)菌性病原并發(fā)感染或者繼發(fā)感染。

單獨(dú)SVC感染通常無體表開放性病灶,如病魚體表出現(xiàn)明顯的開放性病灶表明有細(xì)菌混合感染。【防治】

目前,該病唯一可行的預(yù)防方法是避免接觸病毒。該病疫苗僅處于實(shí)驗(yàn)階段。

嚴(yán)格檢疫,保證水源、引入魚卵和魚不帶病毒,養(yǎng)魚設(shè)施消毒等是切實(shí)可行的防治措施。對苗種場、良種場實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。

加強(qiáng)疫病監(jiān)測與檢疫、掌握流行病學(xué)情況。以及通過培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理等綜合措施控制本病?!绢A(yù)防措施】①對苗種場、良種場實(shí)施防疫條件審核、苗種生產(chǎn)許可管理制度。②加強(qiáng)疫病監(jiān)測與檢疫、掌握流行病學(xué)情況。③培育或引進(jìn)抗病品種、切斷傳染源以及加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。④保證水源、引入魚卵和魚不帶病毒,養(yǎng)魚設(shè)施消毒等是切實(shí)可行的防治措施。⑤如果在流行病學(xué)監(jiān)測過程中發(fā)現(xiàn)有無癥狀的攜帶SVC病毒魚,應(yīng)當(dāng)立即進(jìn)行隔離,禁止運(yùn)輸和貿(mào)易,并密切觀察監(jiān)控【防治措施】(2)處理:發(fā)現(xiàn)疑似患病魚必須馬上隔離,盡快上報(bào),并立即送樣品到專門實(shí)驗(yàn)室確診。一旦疫情確認(rèn),應(yīng)當(dāng)銷毀整個(gè)魚群,并對養(yǎng)殖水體、工具、運(yùn)輸工具及周圍的場地進(jìn)行徹底消毒。(3)劃區(qū)管理:根據(jù)水域和流域的自然隔離情況劃區(qū),并實(shí)施劃區(qū)管理。

病毒性神經(jīng)壞死病魚類病毒性神經(jīng)壞死病,又稱為病毒性腦病和視網(wǎng)膜?。╒ER),以病魚的腦部和視網(wǎng)膜存在明顯空泡化為主要病理特征,是一種嚴(yán)重危害海水魚類魚苗的一種病毒性傳染病。2008年《中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告》第1125號將其列為二類動(dòng)物疫病?!静≡?/p>

病毒性神經(jīng)壞死病病毒(nervousnecrosisvirus,NNV)屬于野田村病毒科、乙型野田村病毒屬(Nodaviridae,Betanodavirus)成員。單鏈正股RNA病毒。病毒粒子球形,二十面體,無囊膜,直徑25~34nm,類晶格狀或單個(gè)或成團(tuán)狀排列在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)?!玖餍刑攸c(diǎn)】

病毒性神經(jīng)壞死?。╒NN)是海水魚類最常見、危害最嚴(yán)重的傳染病之一,流行于美洲和非洲以外幾乎所有養(yǎng)殖地區(qū)。1985年,日本、東南亞、澳大利亞等地區(qū)多種海水魚類種苗培育中暴發(fā)了一種魚病,魚苗死亡率高達(dá)90%以上。1990年日本學(xué)者在患病魚腦部發(fā)現(xiàn)病毒粒子,并首次將此病命名為病毒性神經(jīng)壞死癥。我國臺灣地區(qū)從1997年報(bào)道VNN,大陸地區(qū)從2001年開始發(fā)現(xiàn)并報(bào)道此病,主要流行在石鯛、鰺、石斑魚、紅鰭東方魨等的仔魚和幼魚上,也有部分種類的成魚會被感染【流行特點(diǎn)】

我國臺灣地區(qū)1997年報(bào)道VNN,大陸地區(qū)從2001年開始發(fā)現(xiàn)并報(bào)道此病。目前已發(fā)現(xiàn)該病至少可在11科22種魚中流行,常發(fā)生在尖吻鱸、赤點(diǎn)石斑、棕點(diǎn)石斑、巨石斑、紅鰭東方鲀、條斑星鰈、牙鲆和大菱鲆等海水魚魚苗中。對病毒的敏感性與魚齡有關(guān),發(fā)病季節(jié)各個(gè)地方不同,如臺灣地區(qū)一般在每年的4~9月養(yǎng)殖水溫相對高的時(shí)候,特別是6~8月的夏季最容易暴發(fā)此病,低溫季節(jié)一般不發(fā)病?!玖餍刑攸c(diǎn)】

已知的NNV感染途徑主要有兩種:一為來自親魚的垂直傳播。感染病毒親魚的魚卵中可檢測到NNV。一種感染途徑是通過養(yǎng)殖水體中的病毒引起的水平傳播垂直傳播為主要感染方式。目前我國許多海水魚養(yǎng)殖場多采用多品種、多規(guī)格魚類混養(yǎng)方式,常??梢娬麄€(gè)海區(qū)相繼發(fā)生同樣臨床癥狀的傳染病,即是病毒水平傳播的結(jié)果。【癥狀與病理】

魚類病毒性神經(jīng)壞死病的最常見的臨床癥狀表現(xiàn)為行為不協(xié)調(diào)、呈螺旋狀游泳、或急促游動(dòng)等典型的神經(jīng)癥狀。病魚食欲下降或厭食,眼睛和體色表現(xiàn)異常,鰾腫脹導(dǎo)致腹部膨大,發(fā)病嚴(yán)重的魚苗伴隨著極高的死亡率。解剖后鰾異常腫大導(dǎo)致的腹部腫大【癥狀與病理】腦神經(jīng)組織和視網(wǎng)膜是NNV的主要靶器官,組織病理學(xué)變化主要表現(xiàn)在腦和視網(wǎng)膜細(xì)胞空泡化。最典型的組織壞死病變是腦灰質(zhì)細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡。組織損傷還表現(xiàn)為受感染細(xì)胞核固縮,細(xì)胞失水,嗜堿性;神經(jīng)細(xì)胞核固縮、裂解,神經(jīng)纖維突顆粒狀,單核細(xì)胞滲漏;大腦血管損傷,管壁出現(xiàn)嗜酸性物質(zhì);腦細(xì)胞質(zhì)中還出現(xiàn)嗜堿性的包涵體?!驹\斷】

對于病毒性神經(jīng)壞死病的診斷,我國目前已有國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T27531-2011病毒性腦病和視網(wǎng)膜病病原逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測方法》,也可參照檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《SN/T2625-2010病毒性腦病和視網(wǎng)膜病檢疫規(guī)范》進(jìn)行。(1)

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