湖北省沙洋中學2025屆高三第四次模擬考試生物試卷含解析

湖北省沙洋中學2025屆高三第四次模擬考試生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．用柳樹的枝條浸出液來處理扦插枝條，可早生根1-3天，存活率提高10%-20%，下列相關敘述錯誤的是（）A．柳樹枝條浸出液中的調(diào)節(jié)物質(zhì)主要是吲哚乙酸B．幼嫩枝條中的調(diào)節(jié)物質(zhì)主要由幼嫩組織中相應腺體分泌C．植物激素發(fā)揮完作用后會被滅活，不能反復使用D．插條生根過程中存在著細胞的分裂和分化2．下圖表示某細菌細胞中部分氨基酸的代謝過程。V至Z代表不同的酶，①至⑥代表不同的氨基酸。每一種氨基酸對該細菌都是必需的。野生型的細菌只需要從環(huán)境中攝取氨基酸①便可存活，而此細菌的某變異種只有在培養(yǎng)基中同時提供①③④氨基酸才能生存，該變異種細菌細胞內(nèi)不存在的酶是（）A．X、W B．V、W C．X、Y D．V、Z3．編碼CFTR蛋白基因的模板鏈上缺失AAA或AAG三個堿基，導致CFTR蛋白缺少一個苯丙氨酸，引發(fā)囊性纖維病。下列不正確的是（）A．編碼CFTR蛋白基因中發(fā)生堿基對的缺失屬于基因突變B．與苯丙氨酸對應的密碼子為AAA或AAGC．細胞中合成CFTR蛋白需要tRNA、mRNA、rRNA參與D．CFTR蛋白基因缺失堿基對后轉錄形成的mRNA中嘧啶比例降低4．研究表明，人體的乳腺癌細胞中染色體數(shù)目為48條，若用15N標記乳腺癌細胞DNA的雙鏈，在含14N的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)5代，下列敘述正確的是（）A．乳腺癌細胞間期染色體復制后，染色體與DNA數(shù)量均加倍B．第1代細胞在分裂中期時，只有一半染色體上含有15N標記C．乳腺細胞癌變的原理是基因突變，其染色體未發(fā)生變異D．使用RNA聚合酶抑制劑可以抑制乳腺癌細胞的增殖5．下列細胞中的結構所對應的成分，不正確的是（）A．核糖體：蛋白質(zhì)和核酸 B．中心體：蛋白質(zhì)和脂質(zhì)C．線粒體內(nèi)膜：蛋白質(zhì)和脂質(zhì) D．染色體：蛋白質(zhì)和核酸6．下列關于變異和進化的說法，正確的是()。A．用秋水仙素處理單倍體植株后得到的一定是純合子B．在三倍體無子西瓜的育種過程中，用四倍體西瓜做母本，用二倍體西瓜做父本得到的種子的胚細胞中含有三個染色體組C．兩個種群間的隔離一旦形成，這兩個不同種群的個體之間就不能進行交配，或者即使能交配，也不能產(chǎn)生可育后代D．突變能為生物進化提供原材料，但不包括染色體數(shù)目的變異，因為該過程并沒有新的基因產(chǎn)生二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）ACC合成酶是乙烯合成過程中的關鍵酶，由ACC合成酶基因（簡稱A基因）控制合成。將A基因反向連接在啟動子和終止子間可構成反義ACC合成酶基因（A1基因），轉A1基因番茄的后熟過程變慢，利于番茄的儲藏和運輸。請回答：（1）從番茄的果肉細胞中提取RNA，利用RT－PCR獲取A基因，即利用RNA和PCR技術獲取目的基因。利用RT－PCR獲取A基因所需要的酶主要有___________。在A基因擴增過程中需要特定的引物，該引物的作用是_____________________________。（2）S1和S2為A基因和A1基因的特異性啟動子，S2在番茄果肉細胞內(nèi)起作用，S1在除果肉細胞外的其他細胞內(nèi)起作用。在構建轉A1基因表達載體時，啟動子應選擇____________，不選另一個的理由是___________________。A1基因的表達元件包括啟動子、終止子以及反向連接在兩者之間的A基因，若用農(nóng)桿菌轉化法將此元件整合到番茄細胞的染色體DNA上，則應將此元件應構建在Ti質(zhì)粒的____________中。（3）在檢測番茄細胞的染色體DNA上是否插入了A1基因時，__________（填“能”“不能”）用放射性物質(zhì)標記的A基因做探針進行檢測，理由是________________________。檢測表明，與非轉基因番茄相比，轉A1基因蕃茄的果肉細胞內(nèi)乙烯含量下降，機理是______________________________。8．（10分）經(jīng)過多年生態(tài)修復的庫布齊沙漠，植被覆蓋度、野生動物種類顯著增加，成為了生態(tài)庫布齊。回答下列有關問題：（1）從生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結構分析，沙漠治理往往種植胡楊、沙柳、梭梭樹等多種生物以便形成復雜的____________進而增強生態(tài)系統(tǒng)抵抗外力干擾的能力。為適應缺水環(huán)境和最大限度地減少競爭，可以調(diào)整植樹造林中種群的空間配置格局為____________。庫布齊從沙漠變成沙漠濕地、草原、森林，群落的這種依次取代現(xiàn)象稱為____________。（2）庫布齊沙漠變成綠洲，不僅固定了風沙、涵養(yǎng)了水源，而且促進了碳循環(huán)從________到植物和動物的路線。野生動物種類的增加豐富了物種多樣性，同時每種野生生物作為獨一無二的基因庫也反映了_______變得更為豐富。（3）在庫布齊農(nóng)業(yè)生產(chǎn)區(qū)，采用“板上發(fā)電、板下種草、板間養(yǎng)殖”的生態(tài)光伏和生態(tài)農(nóng)牧業(yè)，即上層架設太陽能電板，地表種植甘草，并在其間養(yǎng)殖牛、羊、鵝等動物。這種立體養(yǎng)殖并調(diào)整作物品種，提高了經(jīng)濟效益和_______。生態(tài)農(nóng)牧業(yè)和生態(tài)光伏體現(xiàn)了農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的種植業(yè)和畜牧業(yè)合理優(yōu)化技術及_______技術。9．（10分）自然界里有多種微生物，將其進行合理的篩選、培養(yǎng)和應用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領域帶來巨大經(jīng)濟效益。回答下列問題。（1）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取____________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用____________法，若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒____________次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的____________開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線____________。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____________培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了____________。長期保存菌種時，應將培養(yǎng)的菌液與____________充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。（3）甲、乙兩組同學用稀釋涂布平板法測定某種微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下每隔一段時間記錄數(shù)據(jù)（統(tǒng)計時間內(nèi)微生物總數(shù)小于環(huán)境容納量），得到以下結果：培養(yǎng)時間(小時)24487296甲組菌落均值(個)18253632乙組菌落均值(個)20283832計數(shù)時最好取培養(yǎng)____________小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結果，一方面是由于培養(yǎng)時間較短，會遺漏菌落數(shù)目，另一方面是由于____________。10．（10分）苯丙酮尿癥是一種單基因遺傳病，由于PKU某因突變導致患者尿液中含有大量苯丙酮酸。基因定點整合可替換特定某因用于該病治療，即將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細胞的染色體DNA上，替換突變基因。簡要過程如下圖所示。請回答下列問題：注：圖中neoR為新霉素抗性基因，HB1和HB2為小鼠胚胎干細胞染色體DNA上突變的PKU基因兩側的一段DNA序列。（1）構建重組載體時，需要根據(jù)_____________序列分別合成HB1'和HB2'，在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有_____________。此過程常用的工具酶有____________，neoR基因的作用是___________。（2）可用________技術將重組載體導入小鼠胚胎干細胞，誘導相應區(qū)域互換，完成胚胎干細胞的基因改造。胚胎干細胞的特點有_________（答出兩點即可）。（3）現(xiàn)用完成基因改造后的胚胎干細胞進行個體生物學水平鑒定，寫出鑒定思路、結果及結論：___________________________。11．（15分）某科研人員從野生型紅眼果蠅（2N=8）中分離出紫眼突變體，并進行了以下實驗：實驗一：紫眼雌果蠅x野生型紅眼雄果蠅→F1均為紅眼→F2中紅眼：紫眼=3:1實驗二：紫眼雄果蠅x野生型紅眼雌果蠅→F1均為紅眼→F2中紅眼：紫眼=3:1（1）根據(jù)上述實驗結果，下列關于眼色基因存在部位的假設，不成立的是_________。①眼色基因位于細胞質(zhì)中②眼色基因只位于X染色體上③眼色基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段④眼色基因只位于Y染色體上⑤眼色基因位于常染色體上（2）研究者讓實驗一的F1紅眼雄果蠅與親本紫眼雌果蠅雜交，若子代中雌果蠅均表現(xiàn)為紫眼、雄果蠅均表現(xiàn)為紅眼，則（1）小題中的假設_________成立；如果利用該假設進一步分析實驗一和實驗二中F2的實驗結果，則具體的實驗結果應該是__________。（3）若（1）小題中的假設⑤成立，則子代中雌雄果蠅表現(xiàn)為___________。（4）果蠅的細眼（B）粗眼（b）也是一對相對性狀B/b基因位于X染色體上。一只粗眼雌果蠅（XbXb）與一只細眼雄果蠅（XBY）交配，子代中出現(xiàn)了一只粗眼雌果蠅，該粗眼雌果蠅的基因型可能是________[選填合適序號：①XbXbY（雌果蠅）②X-Xb（一條X染色體部分缺失）③XbXb]。能確定該粗眼雌果蠅基因型的簡單實驗方法是___________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

生長素及其類似物的生理作用：促進生長、促進扦插的枝條生根、促進果實的發(fā)育；特點：具有雙重性，即低濃度促進生長，高濃度抑制生長。赤霉素的主要作用是促進細胞伸長，從而引起植物的增高，促進種子的萌發(fā)和果實的發(fā)育；乙烯的主要作用是促進果實成熟；細胞分裂素的主要作用是促進細胞分裂。【詳解】A、生長素能促進枝條生根，說明柳樹枝條浸出液中的調(diào)節(jié)物質(zhì)可能為吲哚乙酸，A正確；B、浸出液中的調(diào)節(jié)物質(zhì)是由一定的部位產(chǎn)生的，而不是由腺體分泌的，B錯誤；C、植物激素發(fā)揮完作用后也會被滅活，不能夠反復利用，所以需要源源不斷的產(chǎn)生激素，C正確；D、生根的過程存在細胞的分裂和分化，D正確。故選B。2、A【解析】

1.基因控制性狀包括兩種方式：一是通過控制酶的合成控制代謝過程，間接控制生物體的性狀，二是通過控制蛋白質(zhì)的結構直接控制生物的性狀；2、題圖分析，酶V能將氨基酸①轉化成氨基酸②，酶W能將氨基酸②轉化成氨基酸④，酶Y能將氨基酸④轉化成氨基酸⑥，酶X能將氨基酸②轉化成氨基酸③，酶Z能將氨基酸④轉化成氨基酸⑤。【詳解】由題意可知“細菌的變種只有在培養(yǎng)基中提供氨基酸①③④才能生存”說明該變種細菌無合成氨基酸①③④的酶，必須直接提供氨基酸①③④；培養(yǎng)基中需提供氨基酸③④說明培養(yǎng)基中不存在將氨基酸②轉化成氨基酸③④的酶X和W，而氨基酸①是培養(yǎng)該細菌必須要提供的，根據(jù)分析可知該突變菌細胞內(nèi)不存在的酶是X和W，即A正確。故選A。3、B【解析】

囊性纖維病70%的患者中，編碼一個跨膜蛋白的基因缺失了3個堿基，導致CFTR蛋白在第508位缺少苯丙氨酸，進而影響了CFTR蛋白的結構，使CFTR轉運氯離子的功能異常，導致患者支氣管中黏液增多，管腔受阻，細菌在肺部大量生長繁殖，最終使肺功能嚴重受損?！驹斀狻緼、基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換，因此編碼CFTR蛋白基因中發(fā)生堿基缺失屬于基因突變，A項正確；B、密碼子在mRNA上，編碼CFTR蛋白基因的模板鏈上缺失AAA或AAG三個堿基，導致CFTR蛋白缺少一個苯丙氨酸，根據(jù)堿基互補配對原則，苯丙氨酸的密碼子是UUU或UUC，B項錯誤；C、細胞中合成CFTR蛋白包括轉錄和翻譯兩個過程，其中翻譯過程需要tRNA、mRNA、rRNA參與，C項正確；D、由前面分析可知，mRNA上缺少的密碼子含有的堿基都是嘧啶，故D項正確。故選B?！径ㄎ弧窟z傳信息的轉錄和翻譯【點睛】正確區(qū)分遺傳信息、遺傳密碼子和反密碼子（1）基因、密碼子、反密碼子的對應關系（2）氨基酸與密碼子、反密碼子的關系①每種氨基酸對應1種或幾種密碼子（密碼子簡并性），可由1種或幾種tRNA轉運。②1種密碼子只能決定1種氨基酸，1種tRNA只能轉運1種氨基酸。③密碼子有64種（3種終止密碼子，61種決定氨基酸的密碼子），反密碼子理論上有61種。4、D【解析】

1、DNA的復制是半保留復制，以兩條鏈作為模板進行的。2、（1）間期：進行DNA的復制和有關蛋白質(zhì)的合成；（2）前期：核膜、核仁逐漸解體消失，出現(xiàn)紡錘體和染色體；（3）中期：染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰；（4）后期：著絲點分裂，姐妹染色單體分開成為染色體，并均勻地移向兩極；（5）末期：核膜、核仁重建、紡錘體和染色體消失。【詳解】A、間期染色體復制后，DNA分子數(shù)目加倍，而染色體數(shù)目不變，A錯誤；B、由于DNA的復制方式是半保留復制，所以第1代細胞在分裂中期時，每條染色體上都有15N標記，B錯誤；C、乳腺細胞癌變的原理是基因突變（堿基對發(fā)生了堿基對的增添、缺失和替換），染色體上DNA分子的堿基排列順序發(fā)生改變，C錯誤；D、使用RNA聚合酶抑制劑可以抑制癌細胞中基因的表達，進而抑制癌細胞的增殖，D正確。故選D?！军c睛】解答本題的B選項中，需要結合半保留復制和細胞分裂的特點進行分析。5、B【解析】

1、細胞中的核糖體有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離在細胞質(zhì)中，是“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機器”。2、中心體常見于動物和某些低等植物細胞，由一對互相垂直的中心粒及周圍物質(zhì)組成，與細胞的有絲分裂有關。3、線粒體是細胞內(nèi)進行有氧呼吸的主要場所，是細胞的“動力車間”。【詳解】A、核糖體由蛋白質(zhì)和核酸（RNA）組成，A正確；B、中心體沒有膜結構，不含脂質(zhì)，只有蛋白質(zhì)，B錯誤；C、線粒體內(nèi)膜主要由蛋白質(zhì)和脂質(zhì)組成，C正確；D、染色體主要由蛋白質(zhì)和核酸（DNA）組成，D正確。故選B。6、B【解析】

單倍體是指體細胞中含有本物種配子染色體數(shù)目的個體，那么如果此物種是二倍體，當用秋水仙素加倍后，生成的植株是純合子。但如果此物種是四倍體、六倍體、八倍體等偶數(shù)倍多倍體時，如某四倍體馬鈴薯植株基因型為AAaa時，則形成的單倍體植株的基因型為AA、Aa、aa三種類型，當用秋水仙素使其加倍后，植株的基因型分別為AAAA、AAaa、aaaa三種，其中AAaa不是純合子，自交后代會出現(xiàn)性狀分離?！驹斀狻緼、秋水仙素的作用結果是導致染色體數(shù)目加倍，但不一定是純合子，如Aa是雜合子，加倍后還是雜合子，A錯誤；B、四倍體植株減數(shù)分裂產(chǎn)生的配子含有兩個染色體組，二倍體植物減數(shù)分裂產(chǎn)生的配子含有一個染色體組，因此受精卵中含有三個染色體組，稱為三倍體，B正確；C、隔離包括地理隔離和生殖隔離，兩種群個體不能交配或交配后不能產(chǎn)生可與后代是指形成的生殖隔離，C錯誤；D、突變和基因重組為生物進化提供原材料，其中突變包括基因突變和染色體變異，基因突變的結果是產(chǎn)生新基因，D錯誤。故選B。考點：生物的變異和進化二、綜合題：本大題共4小題7、逆轉錄酶和Taq酶定位A基因的位置，與模板鏈結合并為子鏈的延伸提供起點S2S1不在果肉細胞內(nèi)起作用，番茄果實不會后熟；S1在番茄植株細胞內(nèi)起作用后會導致番茄植株的乙烯合減少，影響番茄植株的正常生理活動T-DNA不能蕃茄細胞內(nèi)本身有A基因，無論是否插了A1基因都能與探針雜交形成雜交帶轉基因番茄細胞中存有A基因與A1基因，二者轉錄產(chǎn)生的mRA能雜交形成雙鏈，導致ACC合成酶的合成受阻，從而使乙烯的合成量降低【解析】

基因工程的操作步驟：1.提取目的基因、2.構建基因表達載體、3.將目的基因導入受體細胞、4.目的基因的檢測和鑒定。PCR技術可擴增目的基因，該技術需要耐高溫的DNA聚合酶和引物，其中引物的作用是定位要擴增DNA的區(qū)段，與模板鏈結合并為子鏈的延伸提供起點。【詳解】（1）由RNA經(jīng)RT-PCR技術獲取了cDNA，進而獲得A因，故RT-PCR技術包含了逆轉錄和PCR兩個過程，因此需要逆轉錄酶和Taq酶。引物和模板結合后，定位了要擴增DNA的區(qū)段，即定位A基因。由于Taq酶只能從單鏈的3′端延伸，因此引物提供了子鏈的延伸起點。（2）S1在番茄的植株細胞內(nèi)起作用，不在果肉細胞內(nèi)起作用，番茄果實不會后熟，因此啟動子應選擇S2。同時也考慮到S1在番茄植株內(nèi)起作用后會導致番茄植株的乙烯合減少，影響番茄植株的正常生理活動。T-DNA是Ti質(zhì)粒的可轉移區(qū)段，表達元件應構建在Ti質(zhì)粒的T-DNA上。（3）茄細胞內(nèi)本身有A基因，無論是否插入了A1基因，A基因A1基因都能與探針雜交形成雜交帶，因此不能用放射性物質(zhì)標記的A1基因做探針進行檢測。（4）在轉A1基因的番茄果肉內(nèi)，同時存有A基因和A1基因，二者轉錄產(chǎn)生的兩種mRNA的堿基互補，會通過核酸分子雜交雜交形成雙鏈，從而導致ACC合成酶的合成受阻，最終使乙烯的合成量與含量下降，使番茄的后熟過程變慢。【點睛】本題解題關鍵是識記基因工程的操作步驟，比較PCR技術與體內(nèi)DNA復制的異同，掌握農(nóng)桿菌轉化法的原理和特點，結合教材相關知識點，用科學規(guī)范的語言答題。8、食物網(wǎng)均勻分布演替（群落演替）大氣圈（大氣中的CO2）遺傳多樣性生態(tài)效益（生態(tài)效益和經(jīng)濟效益）潔凈可再生的新能源開發(fā)【解析】

生態(tài)系統(tǒng)：在一定的空間和時間內(nèi)，在各種生物之間以及生物與無機環(huán)境之間，通過能量流動與物質(zhì)循環(huán)而相互作用的一個自然系統(tǒng)。【詳解】（1）增加物種數(shù)量，以提高食物網(wǎng)復雜程度，可以增強生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性；分布型是種群中個體的空間配置格局，使沙漠地區(qū)植物呈均勻分布可以減少對水分的爭奪；群落的依次取代現(xiàn)象稱為演替。（2）碳循環(huán)的基本路線是從大氣圈到植物和動物，再從動植物流向分解者，最后又回到大氣圈，植樹造林主要增強了C02的固定能力；每一種野生生物作為獨一無二的基因庫反映了遺傳多樣性的增加。（3）農(nóng)業(yè)生態(tài)工程種植業(yè)和畜牧業(yè)結合的優(yōu)化設計就是按照生態(tài)和經(jīng)濟規(guī)律，使系統(tǒng)從總體上獲得最佳的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益，光伏發(fā)電屬于潔凈可再生的新能源開發(fā)技術?！军c睛】本題考查種群的特征、群落的演替、生態(tài)系統(tǒng)的結構和功能及生物多樣性、農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的主要技術，考查理解與表達能力、獲取與處理信息的能力、綜合運用能力，考查生命觀念、科學思維和社會責任。9、高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連（或相接、相交等意思正確）倒置作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染甘油72培養(yǎng)時間過長，兩個或多個菌落連成一個菌落【解析】

1、微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作技術，無菌操作過程中的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌。高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌。2、平板劃線操作的基本步驟是：（一）右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口通過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口通過火焰并塞上棉塞。（二）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。（三）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。（四）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。【詳解】（1）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取高壓蒸汽滅菌法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用灼燒滅菌法。接種環(huán)在每次接種前都要灼燒滅菌，最后一次接種完也要滅菌，所以在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒6次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的末端開始劃線，使菌體的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終獲得由單個菌體形成的單個菌落。最后一次劃的線不能與第一次劃的線相連。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染。長期保存菌種時，應將培養(yǎng)的菌液與甘油充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱保存。（3）根據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，甲組和乙組中的菌落數(shù)都在72時達到最大，由此推知最好取72小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結果，原因是①培養(yǎng)時間不足會導致遺落菌落的數(shù)目；②培養(yǎng)時間過長會導致兩個或多個菌落連成一個菌落，使計數(shù)不準確?！军c睛】本題考查無菌技術和微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法；識記菌種保藏技術，能正確分析表格，再結合所學的知識準確答題。10、HB1和HB2的堿基啟動于、終止子限制酶、DNA連接酶鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞顯微注射能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分化。將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基因治療成功，反之，則不成功。【解析】

結合題圖可知，互換后的小鼠染色體DNA，與小鼠染色體DNA比較，HB1和HB2的堿基分別替換成了重組載體的HB1'和HB2'，并且增加了重組載體的neoR為新霉素抗性基因，原來突變的PKU基因，替換成了正常的PKU基因?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析，構建重組載體時，需要根據(jù)小鼠染色體DNA上HB1和HB2的堿基序列分別合成HB1'和HB2'，并且在二者之間除了插入正常的PKU基因和neoR基因以外，還必須含有啟動子和終止子等組件。此過程常用的工具酶有限制酶、DNA連接酶，neoR基因可用來鑒定與篩選含有正常PKU基因的胚胎干細胞。（2）可用顯微注射技術將重組載體導入小鼠胚胎干細胞，誘導相應區(qū)域互換，完成胚胎干細胞的基因改造。胚胎干細胞的特點：能大量增殖；具有發(fā)育的全能性；體積小、細胞核大、核仁明顯；在體外培養(yǎng)條件下，可以增殖而不發(fā)生分化。（3）完成基因改造后的胚胎干細胞進行個體生物學水平鑒定思路、結果及結論：將該胚胎干細胞培育成小鼠，檢測小鼠尿液中苯丙酮酸含量，若小鼠尿液中不含大量苯丙酮酸，說明PKU基因成功表達，基