色譜應(yīng)用與化合物

關(guān)于色譜應(yīng)用與化合物TLC方法建立（Rf要求）

第2頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月舉例物質(zhì)中可能含有的雜質(zhì)1、碳鏈長(zhǎng)短帶來(lái)的雜質(zhì);2、含氟多少帶來(lái)的雜質(zhì)3、氧化雜質(zhì)（反應(yīng)方程式如下）第3頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月第4頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月TLC方法建立---

甲氟奎

常見問題解決拖尾問題:由于載體對(duì)被分離物質(zhì)吸附太強(qiáng)所致.解決辦法是:對(duì)鹼性化合物,在展開劑中添加比其極性強(qiáng)的不干擾測(cè)定的鹼性物.如氨水、三乙胺等，置換解決。對(duì)酸性化合物，在展開劑中添加比其極性強(qiáng)的不干擾測(cè)定的酸性物.如甲酸、冰乙酸等，置換解決,舉例見幻燈片5.邊沿效應(yīng)問題：特別是對(duì)鋁泊板，可用食指與拇指沿邊沿上下?lián)崞秸螅瓤瞻着佬幸淮慰词欠裼羞呇匦?yīng)，無(wú)則熱風(fēng)吹干后使用。第5頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月TLC方法建立---甲氟奎Syntheticprocess

(1):過(guò)渡物(2):產(chǎn)品

第6頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月TLC方法建立及其驗(yàn)證第7頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月某藥物-中間體監(jiān)控TLC方法建立中間體1檢測(cè)TLC方法建立分離試驗(yàn):△Rf=0.10

滿足分離要求.檢測(cè)限試驗(yàn):中間體1為3.00μg,SM為

2.02μg.加樣試驗(yàn):SM取檢測(cè)限的2-3倍(最少),中間體1取SM量的50-60倍,然后混合.SM:中間體1=4.69:250第8頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月某藥物-中間體監(jiān)控TLC方法建立中間體結(jié)構(gòu)式中間體2中間體3中間體4

極性:中間體4＞3＞2第9頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月薄層原位化學(xué)反應(yīng)簡(jiǎn)介一、創(chuàng)立時(shí)間：1953年由Miller及Kirchner提出二、原始發(fā)表文章：MillerM.KirchnerJG.Analchem，1953三、定義：根據(jù)不同的目的在點(diǎn)樣處點(diǎn)加試劑或以其他方式使被測(cè)物質(zhì)在點(diǎn)樣原位處進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，當(dāng)反應(yīng)完成后再進(jìn)行展開，從而測(cè)定反應(yīng)進(jìn)行情況。四、研究?jī)?nèi)容：氧化還原、光解、水解、脫水、鹵化、酯化、硝化、重氮化等反應(yīng)以及制備衍生物都可以用此方法進(jìn)行。第10頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月薄層原位化學(xué)反應(yīng)的應(yīng)用藥物穩(wěn)定性研究化學(xué)反應(yīng)摸索化學(xué)鑒別反應(yīng)第11頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月

應(yīng)用舉例

硝苯地平對(duì)光穩(wěn)定性研究

第12頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月硝苯地平對(duì)光的穩(wěn)定性第13頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月硝苯地平的氧化反應(yīng)第14頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月硝苯地平氧化反應(yīng)TLC檢測(cè)第15頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月脫水反應(yīng)舉例

尼群地平中間體制備第16頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月TLC方法演示第17頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月雙異丙酚的氧化純品雙異丙酚是無(wú)色液體，在TLC板上展開時(shí)如不顯色則看不出，但在點(diǎn)樣原點(diǎn)處將其用氧化劑氧化后生成了玫瑰紅色的醌類物質(zhì)，展開時(shí)可見紅色斑點(diǎn)在上行。第18頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月利用色譜分析圖構(gòu)思分離方法利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過(guò)程HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系舉例說(shuō)明利用色譜分析圖構(gòu)思分離方法第19頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過(guò)程組分出峰順序及其依據(jù)一、對(duì)一般常用的毛細(xì)管氣相色譜柱和填充柱來(lái)說(shuō)：各被測(cè)定組分主要按照由低到高的沸點(diǎn)順序、由小（大）到大（?。┑臉O性順序依次出峰。二、a.程序升溫情況下，各組分按照由低到高的沸點(diǎn)順序依次出峰。

b.沸點(diǎn)相近的組分，如使用極性柱分離，則按照由小到大的極性順序依次出峰；反之相反。應(yīng)用舉例第20頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過(guò)程應(yīng)用舉例(程序升溫)1、氟苯、氯苯、溴苯的分離沸點(diǎn)順序：氟苯＜氯苯＜溴苯GC譜圖第21頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過(guò)程2、沸點(diǎn)相近組分的分離a.組分A與B第22頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月利用GC譜圖研究蒸餾、精餾過(guò)程2、沸點(diǎn)相近組分的分離b.組分A與B分離色譜圖（A極性大于B）第23頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月GC圖譜與蒸餾、精餾的關(guān)系

未知沸點(diǎn)的液體組分分離（程序升溫情況下）當(dāng)保留時(shí)間差（ΔRT）很大時(shí)，可直接用蒸餾的方法分離。當(dāng)保留時(shí)間差較小時(shí)，只能考慮用精餾的方法分離或分子蒸餾技術(shù)。一條經(jīng)驗(yàn)：當(dāng)在HP6890型GC上安裝30M毛細(xì)管柱，且當(dāng)載氣流速為1.6ML/min時(shí)，如ΔRT≥1min，則可以用精餾的方法提純組分，理論塔板數(shù)一般小于50；如

ΔRT＜0.5min，則較難用精餾的方法提純。分子蒸餾：高真空較低溫度下，利用液體組分間揮發(fā)時(shí)具有的分子平均自由程差進(jìn)行分離的一種技術(shù)。第24頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系反相色譜與正相色譜概念1、反相色譜：柱子極性小于流動(dòng)相2、正相色譜：柱子極性大于流動(dòng)相出峰順序1、反相色譜：極性大的組分先出峰，小的后出。2、正相色譜：極性小的組分先出峰，大的后出。舉例說(shuō)明1、硝苯地平（Nifedipine）2、某藥物第25頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說(shuō)明1（硝苯地平）反相測(cè)定HPLC圖顯示極性順序?yàn)锳＞B＞Nifedipine，雜質(zhì)A、B為致癌物質(zhì)，均不得超過(guò)0.2%第26頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說(shuō)明1（硝苯地平）重結(jié)晶提純工藝設(shè)計(jì)1、原重結(jié)晶用溶劑-95%工業(yè)乙醇2、根據(jù)HPLC圖設(shè)計(jì)現(xiàn)用重結(jié)晶用溶劑-80%乙醇+1%HOAc（混合溶劑）3、硝苯地平粗品及其雜質(zhì)（B）在兩種溶劑中的溶解度（60℃下測(cè)定）

名稱

用量工業(yè)乙醇混合溶劑硝苯地平粗品1g5ml7ml

雜質(zhì)（B）1g6ml2ml第27頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說(shuō)明1（硝苯地平）

用混合溶劑重結(jié)晶后：收率有所提高，HPLC顯示幾乎全部去掉了雜質(zhì)A及B第28頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說(shuō)明2（抗高血壓藥）反相測(cè)定HPLC圖顯示該產(chǎn)品粗品中主要雜質(zhì)M-IP極性遠(yuǎn)小于主物質(zhì)第29頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月該藥物與主要雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分析1.藥物分子結(jié)構(gòu)中含有磺酰氨基，為強(qiáng)極性基團(tuán)。2.雜質(zhì)分子結(jié)構(gòu)中不含有磺酰氨基。3.除去雜質(zhì)方法：堿溶液處理、過(guò)濾、濾液酸處理，過(guò)濾、洗滌即可。第30頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月HPLC譜圖與重結(jié)晶、吸附工藝關(guān)系

舉例說(shuō)明2（抗高血壓藥）重結(jié)晶：原用變性乙醇重結(jié)晶進(jìn)一步去除雜質(zhì)，后用正丁醇重結(jié)晶去除雜質(zhì)，效果更好。（因?yàn)檎〈紭O性小于乙醇）第31頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月總結(jié)1-相似相溶原理應(yīng)用?。?！在反相HPLC圖中：一般先出峰的組分極性較強(qiáng)，可用極性溶劑重結(jié)晶將其除去。在反相HPLC圖中：一般后出峰的組分極性較弱，可用非極性或弱極性溶劑重結(jié)晶將其除去。第32頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月總結(jié)2-吸附-固體萃取應(yīng)用?。?！在反相HPLC圖中：一般先出峰的組分極性較強(qiáng)，可用硅膠或硅藻土吸附將其除去。在反相HPLC圖中：一般后出峰的組分極性較弱，可用活性炭吸附將其除去。第33頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，5月總結(jié)3-重結(jié)晶、吸附綜合應(yīng)用?。?！對(duì)于既有極性又有非極性雜質(zhì)的組分，可通過(guò)重結(jié)晶、吸附綜合交叉使用的辦法來(lái)除去雜質(zhì)。舉例：硝苯地平除雜

使用混合溶劑溶解硝苯地平粗品后，加入10%的活性炭，回流30分鐘后，熱過(guò)濾，然后緩慢冷凍結(jié)晶，……..所得產(chǎn)品純度大于99.6%，各單個(gè)雜質(zhì)均小于0.1%。HPLC圖見后：在極性大的溶劑中，活性炭吸附極性小的雜質(zhì)，反之相反。第34頁(yè),共37頁(yè)，星期六，2024年，