GB 15979-2024 一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生要求

ICS11.080CCSC59代替GB15979—20022024-06-25發(fā)布2025-07-01實施國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會IGB15979—2024前言 2規(guī)范性引用文件 13術(shù)語和定義 4原材料衛(wèi)生要求 25生產(chǎn)過程衛(wèi)生要求 26產(chǎn)品衛(wèi)生要求 37檢測方法 58包裝、運輸和貯存 6 610標(biāo)準(zhǔn)的實施 6附錄A(規(guī)范性)生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生要求檢測方法 7附錄B(規(guī)范性)產(chǎn)品微生物檢測方法 9附錄C(規(guī)范性)消毒效果檢測評價方法 附錄D(規(guī)范性)產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法 附錄E(規(guī)范性)產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性檢測方法 附錄F(規(guī)范性)產(chǎn)品毒理學(xué)試驗方法 參考文獻(xiàn) Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB15979—2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》。與GB15979—2002相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：——修改了適用范圍(見第1章);——更改了一次性使用衛(wèi)生用品定義(見3.1,2002年版的3.1),增加了衛(wèi)生濕巾、抗菌劑、抑菌劑、生產(chǎn)車間和高吸水材料的術(shù)語和定義(見3.2、3.3、3.4、3.5、3.6);——增加了原材料衛(wèi)生要求中禁用物質(zhì)和生產(chǎn)用水要求(見4.3、4.4);——將生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)(見2002年版的第5章)、消毒效果生物監(jiān)測評價(見2002年版的第6章)與產(chǎn)品衛(wèi)生指標(biāo)中初始污染菌(見2002年版的4.3)合并調(diào)整為生產(chǎn)過程衛(wèi)生要求(見第5章),——刪除了生產(chǎn)環(huán)境與過程衛(wèi)生要求以及消毒過程要求(見2002年版的第9章、第10章);——增加了產(chǎn)品衛(wèi)生要求中理化指標(biāo)(見6.2);將毒理學(xué)試驗項目和毒理學(xué)指標(biāo)要求(見2002年版的附錄A)從附錄調(diào)整到正文(見6.3);——更改了衛(wèi)生栓(內(nèi)置棉條)、抗菌劑及抑菌劑的微生物學(xué)指標(biāo)(見6.4,2002年版的4.3);——增加了相關(guān)產(chǎn)品理化指標(biāo)的檢測方法(見7.2);——增加了空氣采樣器法(見附錄A);B.8);——更改了“產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法”(見附錄D,2002年版的附錄D);——更改了“產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性檢測方法”中樣品采集數(shù)量(見附錄E,2002年版的附錄C);——增加了部分抗(抑)菌試驗方法(見附錄E,2002年版的附錄C);——更改了殺菌和抑菌作用時間(見附錄E,2002年版的附錄C);——增加了“產(chǎn)品毒理學(xué)試驗方法”中眼刺激試驗樣品處理方法(見附錄F);——刪除了“培養(yǎng)基與試劑制備”(見2002年版的附錄G)。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由國家疾病預(yù)防控制局提出并歸口。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——本次為第二次修訂。1GB15979—2024一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生要求本文件規(guī)定了一次性使用衛(wèi)生用品的原材料衛(wèi)生要求、生產(chǎn)過程衛(wèi)生要求、產(chǎn)品衛(wèi)生要求、包裝、運輸和貯存、標(biāo)識要求，描述了相應(yīng)的檢測方法。本文件適用于銷售和使用的一次性使用衛(wèi)生用品。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T8939衛(wèi)生巾(護(hù)墊)GB/T15981消毒器械滅菌效果評價方法GB/T26367胍類消毒劑衛(wèi)生要求GB/T26369季銨鹽類消毒劑衛(wèi)生要求GB/T27741紙和紙板可遷移性熒光增白劑的測定GB/T27947酚類消毒劑衛(wèi)生要求GB/T28004.1紙尿褲第1部分：嬰兒紙尿褲GB/T28004.2紙尿褲第2部分：成人紙尿褲GB/T38496消毒劑安全性毒理學(xué)評價程序和方法GB38598消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說明書通用要求GB50073潔凈廠房設(shè)計規(guī)范WS/T10009消毒產(chǎn)品檢測方法中華人民共和國藥典(國家藥品監(jiān)督管理局、國家衛(wèi)生健康委員會)消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范[衛(wèi)生部(2009年版)]3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。與人體直接接觸的，為達(dá)到人體生理衛(wèi)生或抗菌、抑菌目的的一次性使用日常生活用品。以非織造布、織物、木漿復(fù)合布、木漿紙等為載體，適量添加生產(chǎn)用水和殺菌成分等原材料，對處理對象(如手、皮膚、黏膜及普通物體表面)具有清潔殺菌作用的濕巾。2GB15979—2024注：僅包括與手、皮膚或(和)黏膜直接接觸的衛(wèi)生濕巾。3.3抗菌劑antibacterialag直接接觸人體完整皮膚或黏膜，具有一定殺菌(細(xì)菌和酵母菌)作用，但不以治療疾病或者改善皮膚、黏膜的癥狀為目的的制劑。注：不包括人體足部、眼睛、指甲、腋部、3.4直接接觸人體完整皮膚或黏膜，具有一定抑菌(細(xì)菌和酵母菌)作用，但不以治療疾病或者改善皮膚、黏膜的癥狀為目的的制劑。3.5生產(chǎn)加工一次性使用衛(wèi)生用品的場所。注：包括配料間(區(qū))、制作加工間(區(qū))、分(灌)裝間(區(qū))、內(nèi)包裝間(區(qū))等。其中，分裝企業(yè)生產(chǎn)車間包括分(灌)裝間(區(qū))、內(nèi)包裝間(區(qū))等。[來源：《消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》(2009年版),第十二條，有修改]4原材料衛(wèi)生要求4.1原材料應(yīng)符合消毒產(chǎn)品相關(guān)規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)的要求，無毒、無害。原材料包裝應(yīng)清楚標(biāo)明內(nèi)含物的名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期或生產(chǎn)批號；有特殊要求的原材料應(yīng)標(biāo)明貯存條件和保質(zhì)期。4.2不應(yīng)使用廢棄或使用過的一次性使用衛(wèi)生用品作為原材料或半成品。4.3原材料中不得添加下列禁用物質(zhì)。a)抗(抑)菌劑中不應(yīng)添加列入《中華人民共和國藥典》的藥品及其同名原料(消毒防腐藥、中藥和抑菌劑除外，也不包括藥用輔料和純化水);疫苗、血清或毒素及其制品等用于產(chǎn)生主動或被動免疫的制劑，用于診斷免疫狀態(tài)的制劑，蛋白、多肽制劑(溶菌酶、溶葡萄球菌酶除外);列入《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的禁用化學(xué)物質(zhì)(碘除外);國家衛(wèi)生健康行政部門規(guī)定的其他禁止使用的物質(zhì)及其他對人體健康有明確危害的物質(zhì)。b)衛(wèi)生濕巾和其他具有抗(抑)菌功能的一次性使用衛(wèi)生用品不應(yīng)添加抗菌藥物、抗真菌藥物、抗病毒藥物、激素類藥物及其同名原料等和國家衛(wèi)生健康行政部門規(guī)定的其他禁止使用的物質(zhì)及其他對人體健康有明確危害的物質(zhì)。c)非織造布、織物或其他原材料不應(yīng)添加可遷移性熒光增白劑等禁用成分。4.4根據(jù)產(chǎn)品工藝規(guī)程選用符合相應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)用水。濕巾、衛(wèi)生濕巾和抗(抑)菌劑的生產(chǎn)用水應(yīng)符合《中華人民共和國藥典》中純化水要求，其他一次性使用衛(wèi)生用品的生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749和企業(yè)相關(guān)規(guī)范的要求，并保證5生產(chǎn)過程衛(wèi)生要求5.1原輔料的購入、貯存、發(fā)放、使用應(yīng)滿足產(chǎn)品質(zhì)量控制要求并符合管理制度規(guī)定。35.2生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生指標(biāo)要求如下。a)抗(抑)菌劑生產(chǎn)車間空氣應(yīng)符合《消毒產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)衛(wèi)生規(guī)范》的要求，凈化車間應(yīng)符合GB50073的要求；其他一次性使用衛(wèi)生用品生產(chǎn)車間空氣中菌落總數(shù)應(yīng)小于或等于2500CFU/m3(空氣采樣器法)或應(yīng)小于或等于16CFU/(皿·5min)(平皿暴露法)。b)直接接觸未包裝產(chǎn)品的工作臺表面菌落總數(shù)應(yīng)小于或等于20CFU/cm2。c)直接接觸未包裝產(chǎn)品的工人手表面菌落總數(shù)應(yīng)小于或等于300CFU/只手(套)。5.3消毒級一次性使用衛(wèi)生用品初始污染菌應(yīng)小于或等于10000CFU/g或CFU/mL。5.4應(yīng)對用于消毒級一次性使用衛(wèi)生用品的消毒方法進(jìn)行消毒效果檢測，并應(yīng)符合以下要求：a)環(huán)氧乙烷消毒：對枯草桿菌黑色變種(ATCC9372)芽孢的殺滅對數(shù)值大于或等于3.00;b)電離輻射消毒：對短小桿菌E601(ATCC27142)芽孢的殺滅對數(shù)值大于或等于3.00;c)壓力蒸汽消毒：對嗜熱脂肪桿菌(ATCC7953)芽孢的殺滅對數(shù)值大于或等于3.00。6產(chǎn)品衛(wèi)生要求外觀應(yīng)整潔，符合產(chǎn)品固有性狀，不應(yīng)有掉毛、掉屑現(xiàn)象，不應(yīng)有異常氣味與異物。6.2.1理化指標(biāo)應(yīng)符合表1的規(guī)定。指標(biāo)適用范圍標(biāo)識均值±1以內(nèi)標(biāo)識pH值的衛(wèi)生用品可遷移性熒光增白劑不得檢出含紙的衛(wèi)生用品鉛(以Pb計)≤10mg/kg或mg/L濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑等衛(wèi)生用品砷(以As計)≤2mg/kg或mg/L濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑等衛(wèi)生用品汞≤1mg/kg或mg/L濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑等衛(wèi)生用品環(huán)氧乙烷殘留量經(jīng)環(huán)氧乙烷消毒的衛(wèi)生用品穩(wěn)定性有效期≥1年衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑及其他含有抗(抑)菌成分的衛(wèi)生用品6.2.2衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑和其他含有抗(抑)菌成分的一次性使用衛(wèi)生用品有效成分含量應(yīng)符合產(chǎn)品標(biāo)簽說明書標(biāo)注的含量，其中用于手、皮膚、黏膜的產(chǎn)品，限用物質(zhì)使用濃度應(yīng)符合表2的規(guī)定。使用對象葡萄糖酸氯己定或醋酸氯己定g/L或g/kg2,4,4’-三氯-2’-羥基二苯醚g/L或g/kg苯扎溴銨或苯扎氯銨g/L或g/kg國家規(guī)定的其他限用物質(zhì)手、皮膚符合黏膜符合6.3.1產(chǎn)品首次上市時，婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品、排泄物衛(wèi)生用品、濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑和其他4GB15979—2024衛(wèi)生用品中乳墊、一次性內(nèi)褲、衛(wèi)生手套或指套、化妝棉(紙、巾)及嬰兒用紙、紙巾、棉柔巾、衛(wèi)生棉(棒、簽、球等)等應(yīng)進(jìn)行毒理學(xué)試驗。當(dāng)原材料、生產(chǎn)工藝等發(fā)生變化可能影響產(chǎn)品毒性時，應(yīng)按要求重新進(jìn)行產(chǎn)品毒理學(xué)試驗。6.3.2毒理學(xué)試驗應(yīng)按表3進(jìn)行，指標(biāo)符合表4的規(guī)定。表3毒理學(xué)試驗項目產(chǎn)品種類a毒理學(xué)試驗項目皮膚刺激試驗b眼刺激試驗陰道黏膜刺激試驗皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品十十排泄物衛(wèi)生用品十—十濕巾、衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑僅接觸手、皮膚十士d僅接觸口腔黏膜十僅接觸陰道黏膜—十接觸皮膚和口腔黏膜十接觸皮膚和陰道黏膜十接觸皮膚、口腔和陰道黏膜十十乳墊、一次性內(nèi)褲、衛(wèi)生手套或指套、化妝棉(紙、巾)、嬰兒用紙、紙巾、棉柔巾、衛(wèi)生棉(棒、簽、球等)等僅接觸皮膚十—十僅接觸黏膜十接觸皮膚和黏膜十其他一次性使用衛(wèi)生用品參照執(zhí)行。使用過程中多次接觸皮膚的應(yīng)進(jìn)行多次完整皮膚刺激試驗；標(biāo)注使用后及時清洗的應(yīng)進(jìn)行暴露時間2h的急性一次完整皮膚刺激試驗?！銟?biāo)注用于陰道黏膜偶爾使用或間隔數(shù)日使用的應(yīng)進(jìn)行一次陰道黏膜刺激試驗，連續(xù)使用的應(yīng)進(jìn)行多次陰道黏膜刺激試驗。d用于孕婦、嬰兒的應(yīng)進(jìn)行皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗。表4毒理學(xué)指標(biāo)要求皮膚刺激試驗無刺激性或輕刺激性眼刺激試驗無刺激性或輕刺激性陰道黏膜刺激試驗無刺激或極輕刺激皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗未見或極輕度,bc適用于嬰兒的一次性使用衛(wèi)生用品皮膚刺激試驗和眼刺激試驗應(yīng)無刺激性，未見皮膚變態(tài)反應(yīng)。6.4微生物學(xué)指標(biāo)微生物學(xué)指標(biāo)應(yīng)符合表5的規(guī)定。5產(chǎn)品種類微生物學(xué)指標(biāo)細(xì)菌菌落總數(shù)CFU/g或CFU/mL特定微生物*及其他致病微生物b真菌菌落總數(shù)CFU/g或CFU/mL婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品普通級衛(wèi)生栓(內(nèi)置棉條)其他婦女經(jīng)期衛(wèi)生用品消毒級≤20不得檢出不得檢出不得檢出不得檢出排泄物衛(wèi)生用品普通級消毒級不得檢出不得檢出不得檢出衛(wèi)生濕巾、抗(抑)菌劑不得檢出不得檢出套或指套、化妝棉(紙、巾)、紙、紙巾、棉柔巾、衛(wèi)生棉(棒、簽、球等)等不得檢出特定微生物指大腸菌群、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌。6懷疑發(fā)生相關(guān)感染時，進(jìn)行相應(yīng)目標(biāo)致病微生物檢測。6.5衛(wèi)生濕巾及抗(抑)菌衛(wèi)生用品抗(抑)菌性能6.5.1衛(wèi)生濕巾除應(yīng)符合表5中的微生物學(xué)指標(biāo)外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺菌率應(yīng)大于或等于90%;如標(biāo)明對致病性酵母菌有殺菌作用，對白色念珠菌的殺菌率應(yīng)大于或等于90%;如標(biāo)明對其他微生物有殺滅作用，對相應(yīng)微生物的殺菌率應(yīng)大于或等于90%。6.5.2具有抗菌功能的一次性使用衛(wèi)生用品除應(yīng)符合表5中的同類同級產(chǎn)品微生物學(xué)指標(biāo)外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的殺菌率應(yīng)大于或等于90%(振蕩燒瓶試驗方法殺菌率應(yīng)大于26%);如標(biāo)明對致病性酵母菌或其他微生物有殺滅作用，對白色念珠菌或相應(yīng)微生物的殺菌率應(yīng)達(dá)到上述要求。6.5.3具有抑菌功能的一次性使用衛(wèi)生用品除應(yīng)符合表5中的同類同級產(chǎn)品微生物學(xué)指標(biāo)外，對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌率應(yīng)大于或等于50%(振蕩燒瓶試驗方法抑菌率應(yīng)大于26%,高吸水材料抑菌率應(yīng)大于或等于99%)或抑菌環(huán)直徑大于7.0mm;如標(biāo)明對致病性酵母菌或其他微生物有抑菌作用，對白色念珠菌或相應(yīng)微生物的抑菌率或抑菌環(huán)應(yīng)達(dá)到上述要求。7檢測方法7.1.1生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生要求檢測方法按照附錄A要求執(zhí)行。7.1.2初始污染菌檢測方法按照附錄B要求執(zhí)行。7.1.3消毒效果檢測評價方法按照附錄C要求執(zhí)行。7.2產(chǎn)品衛(wèi)生要求檢測方法7.2.1產(chǎn)品外觀采用目測、鼻嗅的方法進(jìn)行測定。67.2.2衛(wèi)生巾、衛(wèi)生護(hù)墊等吸水產(chǎn)品pH按GB/T8939的方法進(jìn)行測定，其他產(chǎn)品pH有相應(yīng)測定標(biāo)準(zhǔn)的按相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的方法進(jìn)行測定，無相應(yīng)測定標(biāo)準(zhǔn)的按WS/T10009的方法進(jìn)行測定。7.2.3可遷移性熒光增白劑：衛(wèi)生巾(護(hù)墊)按GB/T8939的方法進(jìn)行測定；紙尿褲分別按GB/T28004.1、GB/T28004.2的方法進(jìn)行測定；其他衛(wèi)生用品按GB/T27741的方法進(jìn)行測定。7.2.4鉛、砷、汞的檢測按《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》的方法進(jìn)行測定。7.2.5產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量測試方法按照附錄D要求執(zhí)行。7.2.6產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性測試方法按照附錄E要求執(zhí)行。7.2.7葡萄糖酸氯已定、醋酸氯已定按照GB/T26367及國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法進(jìn)行測定；2,4,4’-三氯-2’-羥基二苯醚按照GB/T27947及國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法進(jìn)行測定；苯扎溴銨、苯扎氯銨按GB/T26369及國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法進(jìn)行測定；其他有效成分含量按照WS/T10009及國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法進(jìn)行測定；無法使用化學(xué)測定法的不測定。7.2.8產(chǎn)品毒理學(xué)試驗方法按照附錄F要求執(zhí)行。7.2.9產(chǎn)品微生物檢測方法按照附錄B要求執(zhí)行。8包裝、運輸和貯存8.1無外包裝影響衛(wèi)生質(zhì)量的原材料應(yīng)有包裝；直接與產(chǎn)品接觸的包裝材料應(yīng)無毒、無害、清潔；包裝材料應(yīng)保證產(chǎn)品在正常運輸與貯存條件下不受污染。包裝儲運圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191要求。8.2應(yīng)按照運輸與貯存要求進(jìn)行運輸或貯存。9標(biāo)識9.1產(chǎn)品標(biāo)簽說明書應(yīng)符合GB38598的有關(guān)要求。9.2消毒級產(chǎn)品還應(yīng)在銷售包裝上標(biāo)注“消毒級”字樣、殺滅或抑制微生物類別、消毒方法和消毒日期；在運輸包裝上標(biāo)注“消毒級”字樣、生產(chǎn)日期及有效期或生產(chǎn)批號及限用使用日期。9.3原材料中有表2規(guī)定的限用物質(zhì)時，應(yīng)在包裝上標(biāo)識。本文件實施之日前生產(chǎn)或進(jìn)口的產(chǎn)品，在符合GB15979—2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的前提下，可以銷售至產(chǎn)品標(biāo)示的有效期(保質(zhì)期)限為止。7生產(chǎn)環(huán)境衛(wèi)生要求檢測方法A.1空氣采樣與測試方法A.1.1樣品采集室內(nèi)面積小于或等于30m2,在對角線上設(shè)里、中、外三點，里、外點位置距墻1.0m;室內(nèi)面積大于30m2,設(shè)東、西、南、北、中5個采樣點，周圍4個采樣點距墻1.0m。生產(chǎn)企業(yè)也可根據(jù)實際生產(chǎn)線的布局自行增加培養(yǎng)基數(shù)量和放置位置?？諝獠蓸悠鞣ǎ嚎蛇x擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗證的空氣采樣器。采樣時，將采樣器置于室內(nèi)中央0.8m～1.5m高度，按采樣器使用說明書操作，且每次采樣時間不應(yīng)超過30min。平皿暴露法：采樣時，將含營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的平皿(直徑9cm)置采樣點(0.8m～1.5m高度),無菌操作打開平皿蓋，扣放于平皿邊緣，使平皿在空氣中暴露5min后蓋上平皿蓋，及時送檢?？諝獠蓸邮走x空氣采樣器法。A.1.2菌落總數(shù)檢測在采樣前將準(zhǔn)備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,取出檢查有無污染，將污染培養(yǎng)基剔除。將已采集的培養(yǎng)皿在4h內(nèi)送實驗室，于36℃±1℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計數(shù)平皿上菌落數(shù)。空氣采樣器法菌落總數(shù)計算見公式(A.1):…Y空氣中菌落總數(shù)，單位為每立方米菌落形成單位(CFU/m3);v——采樣速率，單位為升每分(L/min);t——采樣時間，單位為分(min);1000——換算系數(shù)。A.2工作臺表面與工人手表面采樣與測試方法A.2.1樣品采集A.2.1.1工作臺：將經(jīng)滅菌的內(nèi)徑為5.0cm×5.0cm的滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用一支浸有滅菌生理鹽水(或相應(yīng)中和劑)的棉簽在其內(nèi)橫豎往返涂抹各5次，然后剪去或拗?jǐn)嗍纸佑|部分棉棒，以無菌方式將棉簽放入含10.0mL滅菌生理鹽水(或相應(yīng)中和劑)的采樣管內(nèi)送檢。A.2.1.2工人手(套):被檢人五指并攏，用一支浸濕生理鹽水(或相應(yīng)中和劑)的棉簽在右手指曲面，從指根到指端來回涂擦2次，然后剪去或拗?jǐn)嗍纸佑|部分棉棒，將棉簽放入含10.0mL滅菌生理鹽水(或相應(yīng)中和劑)的采樣管內(nèi)送檢。8A.2.2菌落總數(shù)檢測將已采集的樣品在4h內(nèi)送實驗室，每支采樣管充分振蕩混勻(宜使用渦旋振蕩器振蕩)后取1.0mL樣液，放入滅菌平皿內(nèi)，傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每個樣品平行接種兩塊平皿，置36℃±1℃培養(yǎng)48h,計數(shù)平皿上菌落數(shù)。工作臺表面菌落總數(shù)計算見公式(A.2):…………10——稀釋倍數(shù)。工人手菌落總數(shù)計算見公式(A.3):Y?=Yo×10…………(A.3)Y。工人手表面菌落總數(shù)，單位為每只手(套)菌落形成單位[CFU/只手(套)];Y?平皿上平均菌落數(shù)，單位為10——稀釋倍數(shù)。9產(chǎn)品微生物檢測方法B.1產(chǎn)品采集與樣品處理于同一批號的3個運輸包裝中至少抽取6件最小銷售包裝樣品(若樣品數(shù)量不能滿足試驗所需，則應(yīng)相應(yīng)增加采樣數(shù)量),其中1/3樣品用于檢測，2/3樣品用于留樣。抽樣的最小銷售包裝不應(yīng)有破裂，檢驗前不得開啟。在空氣潔凈度5級凈化條件下用無菌方法打開至少2個包裝用于檢測，從每個包裝中取樣，準(zhǔn)確稱取10.0g±1.0g樣品。剪碎后加入到200mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個生理鹽水樣液(若產(chǎn)品太輕，可稱取2.5g±0.2g樣品，加入50mL滅菌生理鹽水中)。液體產(chǎn)品吸取10.0mL原液直接作樣液。如被檢樣品具有抑菌或抗菌作用，應(yīng)選擇適宜的中和劑中和，稀釋梯度最高不超過1:100。無相應(yīng)中和劑則選用薄膜過濾法去除樣品中對微生物生長有影響的抑菌或抗菌成分，再按上述方法制備樣液。如被檢樣品含有大量吸水樹脂材料而導(dǎo)致不能吸出足夠樣液時，稀釋液量可按每次50mL遞增，直至能吸出足夠測試用樣液。在計算細(xì)菌菌落總數(shù)與真菌菌落總數(shù)時相應(yīng)調(diào)整稀釋度。B.2初始污染菌與細(xì)菌菌落總數(shù)檢測方法B.2.1操作步驟按B.1得到的生理鹽水或中和劑樣液自然沉降后取上清液，如需要可進(jìn)行10倍系列稀釋。選擇適宜的稀釋度進(jìn)行菌落計數(shù)。共接種2個平皿，每個平皿中加入2.0mL樣液，然后用冷卻至40℃~45℃左右熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基15mL～20mL倒入每個平皿內(nèi)混合均勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置36℃±1℃培養(yǎng)48h,計算平皿上的菌落數(shù)。B.2.2菌落計數(shù)菌落呈片狀生長的平皿不宜采用，確保2塊平皿符合計數(shù)要求并進(jìn)行菌落計數(shù)，按公式(B.1)計算結(jié)果：A——細(xì)菌菌落總數(shù)，單位為每克菌落形成單位(CFU/g)或每毫升菌落形成單位(CFU/mL);K——稀釋倍數(shù)；首先選取平均菌落數(shù)在30CFU～300CFU之間的平皿。當(dāng)菌落數(shù)小于或等于100CFU/g或CFU/mL,按實有數(shù)報告，大于100CFU/g或CFU/mL時采用二位有效數(shù)字；當(dāng)2塊營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿上的細(xì)菌菌落總數(shù)為0CFU時，如為固體應(yīng)當(dāng)報告細(xì)菌菌落總數(shù)小于5CFU/g,如為液體按稀釋倍數(shù)報告。B.2.3結(jié)果報告B.2.3.1如經(jīng)首次檢測，樣品細(xì)菌菌落總數(shù)符合本文件的規(guī)定，直接按檢測結(jié)果報告。B.2.3.2如經(jīng)首次檢測，樣品細(xì)菌菌落總數(shù)超過本文件的規(guī)定，應(yīng)用留存的樣品依前法復(fù)測2次，然后才能報告結(jié)果。當(dāng)2次復(fù)測結(jié)果都達(dá)到本文件的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，以2次合格結(jié)果的均值報告；其中有任何1次復(fù)測結(jié)果超過本文件規(guī)定，則判定被檢樣品不合格，以所有不合格結(jié)果的均值報告。B.3大腸菌群檢測方法B.3.1操作步驟B.3.1.1增菌培養(yǎng)：取樣液5.0mL接種至50mL乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,如不產(chǎn)酸也不產(chǎn)氣，則報告為大腸菌群陰性。B.3.1.2分離培養(yǎng)：如產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則劃線接種伊紅美藍(lán)瓊脂平皿，置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,觀察平皿上菌落形態(tài)。典型的大腸菌落為黑紫色或紅紫色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常具有金屬光澤，也有的呈紫黑色，不帶或略帶金屬光澤，或粉紅色，中心較深的菌落。B.3.1.3染色鏡檢與鑒定：取疑似菌落1個～2個作革蘭染色鏡檢，同時接種乳糖發(fā)酵管，置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況。凡乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在伊紅美藍(lán)平皿上有典型大腸菌群菌落，革蘭染色為陰性無芽孢桿菌，可報告被檢樣品檢出大腸菌群。B.4.1.1增菌培養(yǎng)：取樣液5.0mL,加入到50mLSCDLP(SoyaCaseinDigestLecithinPolysorbate簡稱)培B.4.1.2分離培養(yǎng)：從培養(yǎng)液的薄菌膜處挑取培養(yǎng)物，劃線接種十六烷基三甲基溴化銨瓊脂平皿，置36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平無定型，向周邊擴(kuò)散，或蔓延，表面濕潤，菌落呈灰白色，菌落周圍培養(yǎng)基常擴(kuò)散有水溶性色素。在缺乏十六烷基三甲基溴化銨瓊脂時也可用乙酰胺培養(yǎng)基進(jìn)行分離，將菌懸液劃線接種于平皿上，放36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,觀察菌落特征。銅綠假單胞菌在此培養(yǎng)基上生長良好，菌落扁平，邊緣不整，菌落周圍培B.4.1.3染色鏡檢：取鑒定培養(yǎng)基上可疑菌落涂片作革蘭染色，鏡檢為革蘭陰性菌者還需進(jìn)行下列B.4.1.5綠膿菌素試驗：取鑒定培養(yǎng)基上2個～3個可疑菌落，分別接種在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基斜面，36℃±1℃培養(yǎng)24h,加入三氯甲烷3mL～5mL,充分振蕩使培養(yǎng)物中可能存在的綠膿菌素溶解，待三氯甲烷呈藍(lán)色時，用吸管移到另一試管中并加入1.0mol/L的鹽酸1mL,振蕩后靜置片刻。如上層出現(xiàn)粉紅色或紫紅色即為陽性，表示有綠膿菌素存在。B.4.1.6硝酸鹽還原產(chǎn)氣試驗：取鑒定培養(yǎng)基上可疑菌落接種在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基中，置36℃±1℃培B.4.1.7明膠液化試驗：取鑒定培養(yǎng)基上可疑菌落純培養(yǎng)物，穿刺接種在明膠培養(yǎng)基內(nèi)，置36℃±1℃培養(yǎng)24h,取出放干4℃~10℃,如仍呈液態(tài)為陽性.凝固者為陰性。B.4.1.842℃生長試驗：取鑒定培養(yǎng)基上可疑培養(yǎng)物，接種在普通瓊脂斜面培養(yǎng)基上，置42℃培養(yǎng)24h～48h,有銅綠假單胞菌生長為陽性。B.4.1.9其他檢驗：使用生化鑒定試劑或生化鑒定卡的，依據(jù)商品試劑說明書對可疑菌落進(jìn)行鑒定。B.4.2結(jié)果報告被檢樣品經(jīng)增菌分離培養(yǎng)后，證實為革蘭陰性桿菌，氧化酶及綠膿菌素試驗均為陽性者，即可報告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長試驗三者皆為陽性時，仍可報告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌。B.5金黃色葡萄球菌檢測方法B.5.1.2分離培養(yǎng)：自上述增菌懸液中取1～2接種環(huán)，劃線接種BairdParker培養(yǎng)基(首選)或血瓊脂培養(yǎng)基，置36℃±1℃培養(yǎng)24h～48h。在BairdParker培養(yǎng)基上為圓形，光滑，凸起，濕潤，直徑為2.0mm～3.0mm,顏色呈灰色到黑色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明帶，用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的軟度。偶爾會遇到非脂肪溶解的類似菌落，但無混濁帶及透明帶。在血瓊脂平皿上典型菌落呈金黃色，大而突起，圓形，不透明，表面光滑，周圍有溶血圈。B.5.1.3染色鏡檢：挑取典型菌落，涂片作革蘭染色鏡檢，金黃色葡萄球菌為革蘭陽性球菌，排列成葡萄狀，無芽孢與莢膜。鏡檢符合上列情況，還需進(jìn)行甘露醇發(fā)酵試驗和血漿凝固酶試驗。B.5.1.4甘露醇發(fā)酵試驗：取血瓊脂平皿上典型菌落接種甘露醇培養(yǎng)液，置36℃±1℃培養(yǎng)24h,發(fā)酵B.5.1.5血漿凝固酶試驗(試管法):吸取1:4新鮮血漿或凍干血漿生理鹽水溶液0.5mL,放滅菌小試管中，加入等量待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL,混勻，放36℃±1℃溫箱或水浴中，每30min觀察一次，24h之內(nèi)呈現(xiàn)凝塊即為陽性。同時以已知血漿凝固酶陽性和陰性菌株肉湯培養(yǎng)物各0.5mL作為陽性凡在瓊脂平皿上有可疑菌落生長，鏡檢為革蘭陽性呈葡萄狀排列的球菌，并能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸，血漿凝固酶試驗陽性者，可報告被檢樣品檢出金黃色葡萄球菌。B.6溶血性鏈球菌檢測方法B.6.1.1增菌培養(yǎng)：取樣液5.0mL加入到50mL葡萄糖肉湯中，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。B.6.1.2分離培養(yǎng)：將培養(yǎng)物劃線接種血瓊脂平皿，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h觀察菌落特征。溶血性鏈球菌在血瓊脂平皿上為灰白色，半透明或不透明，表面突起，圓形，表面光滑，邊緣整齊，周圍有無上述情況，還需進(jìn)行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。取上清液),加入0.8mL滅菌生理鹽水，混勻后再加入待檢菌24h肉湯培養(yǎng)物0.5mL和0.25%氯化鈣0.25mL,混勻，放36℃±1℃水浴中，2min觀察一次(一般10min內(nèi)可凝固),待血漿凝固后繼續(xù)觀察并記錄熔化時間。如2h內(nèi)不熔化，繼續(xù)放置24h觀察，如凝塊全部熔化為陽性，24h仍不熔化為陰性(依據(jù)商品試劑說明書)。B.6.1.5桿菌肽敏感試驗：將被檢菌懸液涂于血瓊脂平皿上，用滅菌鑷子取每片含0.04單位桿菌肽的紙片放在平皿表面上，同時以已知陽性菌株作對照，在36℃±1℃下放置24h～48h,有抑菌帶者為陽性。B.6.1.6其他檢驗：使用生化鑒定試劑或生化鑒定卡的，依據(jù)商品試劑說明書對可疑菌落進(jìn)行鑒定。B.6.2結(jié)果報告鏡檢革蘭陽性鏈狀排列球菌，血瓊脂平皿上呈現(xiàn)溶血圈，鏈激酶和桿菌肽試驗陽性，可報告被檢樣品檢出溶血性鏈球菌。B.7真菌菌落總數(shù)檢測方法B.7.1操作步驟按B.1得到的生理鹽水或中和劑樣液自然沉降后取上清液，如需要可進(jìn)行10倍系列稀釋。選擇適宜的稀釋度進(jìn)行真菌菌落計數(shù)。共接種2個平皿，每個平皿中加入2.0mL樣液，然后用冷卻至40℃~45℃熔化的沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基或改良沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基15mL～20mL倒入每個平皿內(nèi)混合均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿置25℃±1℃(沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基)或28℃±1℃(改良沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基)培養(yǎng)72h,分別于第24h、第48h、第72h觀察，計算平皿上的菌落數(shù)，如果發(fā)現(xiàn)菌落蔓延，以前一次的菌落計數(shù)為準(zhǔn)。B.7.2菌落計數(shù)菌落呈片狀生長的平皿不應(yīng)采用；確保2塊平皿符合計數(shù)要求并進(jìn)行菌落計數(shù)，按公式(B.2)計算結(jié)果：式中：B——真菌菌落總數(shù)，單位為每克菌落形成單位(CFU/g)或每毫升菌落形成單位(CFU/mL);B?——2塊沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基或改良沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基平皿上的真菌菌落總數(shù)；K——稀釋倍數(shù)；2×22塊平皿，每塊平皿接種2.0mL樣液。當(dāng)菌落數(shù)小于或等于100CFUCFU/g或CFU/mL時，按實有數(shù)報告；當(dāng)大于100CFU/g或CFU/mL時采用二位有效數(shù)字；當(dāng)2塊沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基或改良沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基平皿上真菌菌落總數(shù)為0CFU時，如為固體應(yīng)報告真菌菌落總數(shù)小于5CFU/g,如為液體按稀釋倍數(shù)報告。B.7.3結(jié)果報告B.7.3.1如經(jīng)首次檢測，樣品菌落總數(shù)符合本文件的規(guī)定，直接按檢測結(jié)果報告。B.7.3.2如經(jīng)首次檢測，樣品菌落總數(shù)超過本文件的規(guī)定，應(yīng)用留存的備檢樣品依前法復(fù)測2次，然后才能報告結(jié)果。當(dāng)2次復(fù)測結(jié)果都達(dá)到本文件的規(guī)定，則判定被檢樣品合格，以2次合格結(jié)果的均值報告；其中有任何1次復(fù)測結(jié)果超過本文件規(guī)定，則判定被檢樣品不合格，以所有不合格結(jié)果的均值報告。B.8真菌定性檢測方法B.8.1操作步驟取樣液5.0mL加入到50mL沙堡弱液體培養(yǎng)基或改良沙堡弱液體培養(yǎng)基中，25℃±1℃培養(yǎng)72h,GB15979—2024(規(guī)范性)消毒效果檢測評價方法C.2.1電離輻射消毒效果評價用生物指示菌為短小桿菌E601(ATCC27142)芽孢，在菌量為5.0×10?CFU/片～5.0×10?CFU/片時，其殺滅90%微生物所需劑量D?0值應(yīng)為1.7kGy。C.2.2每次測試至少選5箱產(chǎn)品，每箱布放3片生物指示劑，置于最小劑量處。消毒完畢，取出指示菌種，兩者均置36℃±1℃培養(yǎng)。陽性對照應(yīng)在24h內(nèi)有菌生長。定性培養(yǎng)樣品如連續(xù)觀察7d(或按使用說明書中的培養(yǎng)時間)全部無菌生長，可報告生物指示劑培養(yǎng)陰性，消毒合格。定量培養(yǎng)樣品與陽性產(chǎn)品環(huán)氧乙烷殘留量檢測方法D.1樣品采集于環(huán)氧乙烷消毒后，立即從同一消毒批號的3個運輸包裝中隨機(jī)抽取一定量最小銷售包裝樣品，采樣量至少應(yīng)滿足試驗所需(平行測試2次)規(guī)定的量，并留一定量樣品在需要復(fù)測時備用。分別于環(huán)氧乙烷消毒后24h及以后每隔數(shù)天進(jìn)行殘留量測定，直至殘留量降至6.2.1所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)值以下。D.2儀器與試劑D.2.1.1氣相色譜儀，配有火焰離子化檢測器(FID)。D.2.1.3機(jī)械振蕩器。D.2.1.4冰箱：能使樣品保存在2℃~8℃之間。D.2.1.5氣體調(diào)節(jié)器：用于開、關(guān)環(huán)氧乙烷氣瓶。D.2.1.6氣密性注射器：容量為1.0mL、10.0mL、50mL、100mL,用于標(biāo)準(zhǔn)氣體配制及把標(biāo)準(zhǔn)氣體注入液相色譜。D.2.1.8平底螺蓋瓶：體積能夠容納樣品及浸提溶液，具有聚四氟乙烯(PTFE)襯墊的硅橡膠塞，用于樣品浸提。D.2.2.1環(huán)氧乙烷：裝在適當(dāng)?shù)臍馄恐械挠凶C標(biāo)準(zhǔn)氣體。D.2.2.2水：純度適合于氣相色譜。D.2.2.3載氣和輔助氣體。載氣：高純氮氣(99.999%)。輔助氣體：氫氣、空氣。D.3操作步驟D.3.1標(biāo)準(zhǔn)氣體配制用100mL氣密性注射器抽取環(huán)氧乙烷飽和氣(重復(fù)放空2次，以排除原有空氣),塞上橡皮頭，用10mL氣密性注射器抽取上述100mL氣密性注射器中純環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣10mL,用潔凈空氣稀釋到100mL(可將10mL標(biāo)準(zhǔn)氣注入到已有90mL潔凈空氣的帶橡皮塞頭的氣密性注射器中來完成)。用同樣的方法根據(jù)需要再逐級稀釋，配制4個～5個濃度的標(biāo)準(zhǔn)氣體。根據(jù)環(huán)氧乙烷的純度、稀釋倍數(shù)和室溫，計算出環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體的配制濃度。稀釋后標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度計算見公式(D.1):c——標(biāo)準(zhǔn)氣體濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);t——室溫，單位為攝氏度(℃);44——環(huán)氧乙烷相對分子質(zhì)量，單位為克每摩爾(g/mol);273——絕對溫度換算常數(shù)；22.4——氣體常數(shù)，單位為升每摩爾(L/mol)。D.3.2樣品處理至少取2個最小包裝產(chǎn)品，將其剪碎，隨機(jī)精確稱取0.5g～2.0g,放入適當(dāng)體積的平底螺蓋瓶中，加入2.0mL～5.0mL去離子水，確保樣品完全浸沒于浸提溶液中，加蓋密封后充分搖勻，放置4h或振蕩30min待用。如被檢樣品為吸水樹脂材料產(chǎn)品，可適當(dāng)增加去離子水量，以確保至少可吸出2mL樣品浸提溶液。如果檢測不能馬上進(jìn)行，則將浸提溶液從樣品中分離出來，密封于有聚四氟乙烯襯墊的瓶中蓋緊。任何盛有標(biāo)準(zhǔn)溶液或浸提液的管瓶，其頂端空間應(yīng)少于總體積的10%,浸提溶液可在5℃±3℃的冰箱中暫時貯存，并于浸提當(dāng)天檢測。D.3.3分析待儀器穩(wěn)定后，在同樣條件下，環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣體各進(jìn)樣1.0mL,待分析樣品(樣品浸提溶液)各進(jìn)樣1.0μL,每一樣液平行做2次測定。根據(jù)保留時間定性，根據(jù)峰面積(或峰高)進(jìn)行定量計算，取平均值。D.3.4儀器操作參考條件D.3.4.1色譜柱：極性石英毛細(xì)管色譜柱(固定相為聚乙二醇)或其他等效色譜柱。D.3.4.2柱溫：90℃。D.3.4.3進(jìn)樣口溫度：220℃。D.3.4.6檢測器溫度：230℃。D.3.4.8空氣流量：400mL/min。D.3.5計算以所進(jìn)環(huán)氧乙烷標(biāo)準(zhǔn)氣的微克數(shù)對所得峰面積(或峰高)作環(huán)氧乙烷工作曲線。以樣品中環(huán)氧乙烷對應(yīng)的峰面積(或峰高)在工作曲線上求得環(huán)氧乙烷的量A(μg),并以公式(D.2)求得產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷的殘留量。X——產(chǎn)品中環(huán)氧乙烷殘留量，單位為微克每克(μg/m——所取樣品量，單位為克(g);V萃——萃取液體積，單位為毫升(mL);GB15979—2024(規(guī)范性)產(chǎn)品殺菌性能、抑菌性能與穩(wěn)定性檢測方法E.1樣品采集于同一批號3個運輸包裝中至少抽取6件最小銷售包裝樣品(若樣品數(shù)量不能滿足試驗所需，則應(yīng)相應(yīng)增加采樣數(shù)量),其中1/3樣品用于抑菌、抗菌或殺菌性能測試，2/3樣品用于留樣；如需做穩(wěn)定性測試，樣品數(shù)量再作相應(yīng)增加。E.2試驗方法選擇原則E.2.1衛(wèi)生濕巾選擇衛(wèi)生濕巾殺菌性能試驗。E.2.2液體抗菌劑選擇抗菌劑殺菌性能試驗；黏稠狀(半固體)抗菌產(chǎn)品選擇載體浸泡定量殺菌試驗；添加有殺菌劑的衛(wèi)生濕巾或可溶性抗菌物質(zhì)的載體類產(chǎn)品選擇載體殺菌試驗；含有可溶性抗菌成分的紡織品選擇浸漬殺菌試驗；含有非溶出性抗菌物質(zhì)的產(chǎn)品選擇振蕩燒瓶試驗。E.2.3液體抑菌劑選擇抑菌劑抑菌性能試驗；黏稠狀(半固體)抑菌產(chǎn)品選擇載體浸泡定量抑菌試驗；含溶出性抑菌成分的固體抑菌產(chǎn)品選擇載體抑菌試驗或抑菌環(huán)試驗；含有溶出性抑菌成分的紡織品選擇浸漬抑菌試驗；含有非溶出性抑菌物質(zhì)的產(chǎn)品選擇振蕩燒瓶試驗；含高吸水材料的產(chǎn)品選擇高吸水材料抑菌性能試驗。E.3試驗材料E.3.1試驗菌E.3.1.1試驗菌種類細(xì)菌：大腸桿菌(8099或CICC10899)或大腸桿菌(ATCC25922),金黃色葡萄球菌(ATCC6538或酵母菌：白色念珠菌(ATCC10231)。根據(jù)產(chǎn)品特定用途所需用的其他菌株。E.3.1.2試驗菌懸液制備取冷凍條件下保存的菌種(凍干管、甘油管或磁珠),在無菌操作下打開，加入適量營養(yǎng)肉湯，輕柔吹吸數(shù)次，使菌種融化分散。取含5.0mL～10.0mL營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。用接種環(huán)取第1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿上，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。挑取上述第2代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h即為第3代培養(yǎng)物。取菌株第3代～第6代的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌為沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基)新鮮斜面培養(yǎng)物(18h～24h),用5.0mL0.03mol/L磷酸鹽緩沖液(簡稱PBS)洗下菌苔，使菌懸浮均勻后用PBS稀釋至所需濃度(浸漬抑菌試驗使用肉湯對培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋)。E.3.2試驗器材E.3.2.1培養(yǎng)基：細(xì)菌培養(yǎng)用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，酵母菌培養(yǎng)用沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基；營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，沙堡弱液體培養(yǎng)基。E.3.2.2稀釋液：0.03mol/LPBS,pH7.2。E.3.2.3中和劑(PBS配制)。GB15979—2024E.3.2.4載體：32支紗/cm×32支紗/cm脫脂白平紋布片(長×寬=10mm×10mm)(衛(wèi)生濕巾：長×寬=20mm×30mm),經(jīng)壓力蒸汽滅菌烤干后使用。E.3.2.5計時器。E.3.2.6電子天平。E.3.2.7振蕩搖床。E.3.2.8大于或等于2000r/min渦旋振蕩器。E.3.2.9恒溫水浴箱。E.3.2.1137℃、35℃~40℃、40℃~45℃和54℃恒溫箱。E.4衛(wèi)生濕巾殺菌性能試驗適用于添加有殺菌成分的衛(wèi)生濕巾或可溶性抗菌物質(zhì)的載體類產(chǎn)品的抗菌性能效果鑒定。E.4.2.1試驗菌種：根據(jù)產(chǎn)品殺滅微生物類別，選擇對其敏感度較高的細(xì)菌，如宣稱對酵母菌有殺滅作用，需增加白色念珠菌；當(dāng)用其他特定微生物進(jìn)行殺菌試驗時，應(yīng)以該特定微生物進(jìn)行中和劑鑒定試驗。E.4.2.2中和劑試驗分組：第1組：5.0mL中和劑十染菌對照片→培養(yǎng)；第2組：(樣片+5.0mL中和劑)十染菌對照片→培養(yǎng)；第3組：5.0mLPBS+染菌對照片→培養(yǎng)；第4組：同批次PBS0.5mL十中和劑0.5mL十培養(yǎng)基→培養(yǎng)。E.4.2.3中和劑試驗評價規(guī)定如下：a)第1組、第2組和第3組有相似量試驗菌生長，并在1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片之間，其組間菌落數(shù)誤差率應(yīng)不超過15%;b)第4組無菌生長；c)連續(xù)3次試驗均符合以上要求判定為合格。E.4.3試驗步驟滴于對照樣片上，回收菌數(shù)應(yīng)為1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。取試驗樣片(大小20mm×30mm,厚度應(yīng)確保菌懸液被完全吸收不滲漏，如被測試樣品厚度無法滿足要求，可增加片數(shù))和對照樣片各1片分別置于無菌平皿內(nèi)，用新鮮制備的菌懸液分別在每個試驗樣片與對照樣片上滴加100μL,均勻涂布，開始計時，作用至說明書規(guī)定時間，用無菌鑷子分別將試驗樣片和對照樣片放入5.0mL相應(yīng)中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，中和作用10min后進(jìn)行10倍系列稀釋，選擇適宜稀釋度，吸取1.0mL接種平皿，每管接種2個平皿，將冷至40℃~45℃熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌),傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿15mL～20mL,轉(zhuǎn)動平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行重復(fù)試驗3次，計算殺菌率。E.4.4計算殺菌率計算見公式(E.1):K——殺菌率；…(E.1)誤差率計算見公式(E.2):E——組間菌落數(shù)誤差率；Xn——各組菌落平均數(shù)，單位為每片菌落形成單位(CFU/片)。E.4.5評價標(biāo)準(zhǔn)各次殺菌率均大于或等于90%,產(chǎn)品有殺菌作用。衛(wèi)生濕巾的最長殺菌作用時間不應(yīng)超過5min。E.5產(chǎn)品抗菌性能試驗E.5.1抗菌劑殺菌性能試驗E.5.1.1適用范圍適用于液體抗菌劑或衛(wèi)生濕巾擠出液對微生物抗菌效果的測定。E.5.1.2中和劑鑒定試驗E.5.1.2.1試驗菌種：根據(jù)產(chǎn)品殺滅微生物類別，選擇對其敏感度較高的細(xì)菌，如宣稱對酵母菌有殺滅作用，需增加白色念珠菌；當(dāng)用其他特定微生物進(jìn)行殺菌試驗時，應(yīng)以該特定微生物進(jìn)行中和劑鑒定試驗。E.5.1.2.2中和劑試驗分組：第1組：4.5mL中和劑+0.4mL硬水+0.1mL菌懸液→培養(yǎng)；第2組：(0.4mL樣液+4.5mL中和劑)+0.1mL菌懸液→培養(yǎng)；第3組：4.9mLPBS+0.1mL菌懸液→培養(yǎng)；第4組：同批次PBS0.5mL十中和劑0.5mL十培養(yǎng)基→培養(yǎng)。E.5.1.2.3中和劑試驗評價規(guī)定：a)第1組、第2組、第3組有相似量試驗菌生長，并在1.0×10?CFU/mL～9.0×10?CFU/mL之間，其組間菌落數(shù)誤差率[計算見公式(E.2)]應(yīng)不超過15%;b)第4組無菌生長；c)連續(xù)3次試驗均符合以上要求判定為合格。E.5.1.3試驗步驟取新鮮制備的菌懸液0.5mL滴加于4.5mL樣液內(nèi)，混勻后開始計時，作用至說明書規(guī)定時間，用定量吸管吸取菌藥混懸液0.5mL放入4.5mL含有中和劑的試管內(nèi)，充分混勻，中和作用10min后進(jìn)行10倍系列稀釋，選擇適宜稀釋度，分別吸取1.0mL接種平皿，每管接種2個平皿，將冷至40℃~45℃熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌),傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿15mL～20mL,轉(zhuǎn)動平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。試驗同時用稀釋液代替試樣，進(jìn)行平行試驗，作為陽性對照，回收菌數(shù)為1.0×10?CFU/mL～9.0×10?CFU/mL。重復(fù)試驗3次，計算殺菌率。殺菌率計算見公式(E.3):式中：K——殺菌率；…………(E.3)N?被試樣品平均菌落數(shù)，單位為每毫升菌落形成單位(CFU/mL)。E.5.1.5評價標(biāo)準(zhǔn)說明書規(guī)定時間的各次殺菌率均大于或等于90%,判有抗菌作用；說明書規(guī)定時間的各次殺菌率均大于或等于99%,判有較強(qiáng)抗菌作用?？咕鷦┑淖铋L殺菌作用時間不應(yīng)超過5min。E.5.2載體浸泡定量殺菌試驗E.5.2.1適用范圍適用于黏稠狀(半固體)抗菌產(chǎn)品如抗菌洗手液等對微生物抗菌效果的鑒定。E.5.2.2染菌載體制備取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至約5.0×10?CFU/mL～5.0×107CFU/mL制成菌懸液備用。用微量移液器滴染10μL菌懸液于滅菌載體上，35℃±1℃烘干或室溫晾干備用。E.5.2.3中和劑鑒定試驗E.5.2.3.1試驗分組第1組：5.0mL中和劑十染菌載體→培養(yǎng)。第2組：(含抗菌劑的載體十5.0mL中和劑)十染菌載體→培養(yǎng)。第3組：5.0mL稀釋液十染菌載體→培養(yǎng)。第4組：稀釋液十中和劑十培養(yǎng)基→培養(yǎng)。E.5.2.3.2試驗步驟根據(jù)試驗分組，準(zhǔn)備試管和平皿，依次進(jìn)行編號。第1組：取5.0mL中和劑于無菌平皿中，置20℃±1℃水浴5min,加入1片染菌載體，作用10min,取出菌片放入5.0mL中和劑試管內(nèi)，作用10min后，置渦旋振蕩器上振蕩1min或在手掌上用力振打80次，將試驗菌洗下，用中和劑做10倍系列稀釋后，選擇適宜稀釋度，分別吸取1.0mL接種于2個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第2組：取5.0mL中和劑于無菌平皿內(nèi)，加入1片沾有抗菌樣品的載體，混勻，置20℃±1℃水浴作用10min制成中和產(chǎn)物。再用無菌鑷子取1片染菌載體，浸于中和產(chǎn)物中作用10min后，用無菌鑷子取出染菌載體移入含5.0mL中和產(chǎn)物試管中，作用10min,振蕩，將試驗菌洗下，用中和產(chǎn)物做10倍系列稀釋，選適宜稀釋度分別吸取1.0mL接種于2個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第3組：取5.0mLPBS于無菌平皿中，置20℃±1℃水浴5min,加入1片染菌載體，作用10min,取出菌片放入5.0mLPBS試管內(nèi)，作用10min后，振蕩，將試驗菌洗下，用PBS做10倍系列稀釋，選適宜稀釋度分別吸取1.0mL接種于2個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第4組：分別吸取稀釋液(PBS)與中和劑各1.0mL于同一無菌平皿內(nèi)，倒入同批次的培養(yǎng)基15mL～20mL,培養(yǎng)觀察。E.5.2.3.3結(jié)果判定第1組、第2組和第3組有相似量試驗菌生長，且菌量在1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。計算組間菌落數(shù)誤差率[計算見公式(E.2)],其組間菌落數(shù)誤差率應(yīng)不超過15%。第4組無菌生長，否則，說明試劑有污染，應(yīng)更換無污染的試劑重新進(jìn)行試驗。試驗3次，每次試驗均應(yīng)符合以上要求。E.5.2.4試驗步驟載體完全浸沒于抗菌樣品中，立即計時。待染菌載體與抗菌劑相互作用至各預(yù)定時間(以說明書規(guī)定時間為T,時間分別為0.5T、T、1.5T),分別取染菌載體加入5.0mL中和劑試管中，混勻。經(jīng)中和劑作用10min后，振蕩，將試驗菌洗下，分別吸取1.0mL樣液，按活菌培養(yǎng)計數(shù)方法測定存活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可用PBS進(jìn)行系列10倍稀釋后，再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。取與試驗樣品同質(zhì)材料不含抗菌成分的對照樣品代替抗菌樣品浸泡2片染菌載體，進(jìn)行平行試驗，作為陽性對照。陽性對照回收菌量為1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。取同批次稀釋液、中和劑、培養(yǎng)基作陰性對照。所有試驗樣品和對照樣品均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。重復(fù)試驗3次，計算殺菌率。E.5.2.5殺菌率計算殺菌率計算見公式(E.4):K——殺菌率；…………(E.4)GB15979—2024E.5.2.6評價標(biāo)準(zhǔn)說明書規(guī)定時間的各次殺菌率均大于或等于90%,判有抗菌作用；說明書規(guī)定時間的各次殺菌率均大于或等于99%,判有較強(qiáng)抗菌作用。E.5.3載體殺菌試驗適用于添加有殺菌劑的衛(wèi)生濕巾或可溶性抗菌物質(zhì)的載體類產(chǎn)品抗菌性能效果的鑒定。E.5.3.2菌懸液配制及樣片制備取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至1.0×10?CFU/mL～9.0×10?CFU/mL,制成菌懸液備用。用無菌剪刀將抗菌產(chǎn)品和材質(zhì)相同但不含抗菌成分的對照樣品分別剪成20mm×30mm樣片備用。試驗時滴加100μL菌懸液。對照樣片染菌前需經(jīng)121℃15min滅菌處理。E.5.3.3.1試驗分組第1組：5.0mL中和劑十染菌對照樣片→培養(yǎng)。第2組：(5.0mL中和劑十抗菌樣片)十染菌對照樣片→培養(yǎng)。第3組：5.0mL稀釋液十染菌對照樣片→培養(yǎng)。第4組：稀釋液十中和劑十培養(yǎng)基→培養(yǎng)。E.5.3.3.2試驗步驟根據(jù)試驗分組，準(zhǔn)備試管和平皿，依次進(jìn)行編號。第1組：取5.0mL中和劑于無菌試管內(nèi)，置20℃±1℃水浴5min,用無菌鑷子取1片染菌對照樣片加入試管內(nèi)，作用10min,振蕩將試驗菌洗下，用中和劑做10倍系列稀釋后選擇適宜稀釋度分別吸取1.0mL接種于2個平皿中，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第2組：取5.0mL中和劑于無菌試管內(nèi)，用無菌鑷子取1片抗菌樣片加入試管內(nèi)，振蕩混勻置入試管內(nèi)，作用10min,振蕩將試驗菌洗下，用PBS做10倍系列稀釋后選擇適宜稀釋度分別吸取1.0mL接種2個平皿，做活菌培養(yǎng)計數(shù)。第4組：分別吸取稀釋液與中和劑各1.0mL于同一無菌平皿內(nèi)，傾注同批次的培養(yǎng)基15mL~20mL,培養(yǎng)觀察。第1組、第2組和第3組有相似量試驗菌生長，且菌量在1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。計算組間菌落數(shù)誤差率，其組間菌落數(shù)誤差率應(yīng)不超過15%。第4組無菌生長，否則，說明試劑有污染，應(yīng)更換無污染的試劑重新進(jìn)行試驗。試驗重復(fù)3次，每次試驗均應(yīng)符合以上要求。E.5.3.4試驗步驟取無菌平皿，用無菌鑷子取3片試驗樣片，勿重疊，置20℃±1℃水浴5min,在每一樣片上滴加0.1mL試驗用菌懸液，立即計時。待試驗菌與樣片相互作用至各預(yù)定時間(以說明書規(guī)定時間為T,時間分別為0.5T、T、1.5T),分別夾取染菌樣片加于5.0mL中和劑試管中，混勻。經(jīng)中和劑作用10min后，振蕩將試驗菌洗下，分別吸取1.0mL樣液，按活菌培養(yǎng)計數(shù)方法測定存活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可10倍系列稀釋后，再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。同時用不含殺菌成分，其他成分相同的對照樣片2片代替試驗樣片，進(jìn)行平行試驗，作為陽性對照。陽性對照回收菌落數(shù)在1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。取試驗同批次稀釋液、中和劑、培養(yǎng)基作陰性對照。所有試驗樣本和對照樣本均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。試驗重復(fù)3次，計算殺菌率。E.5.3.5殺菌率計算殺菌率計算見公式(E.5):…………(E.5)Ns——被試樣品平均菌落數(shù)，單位為每片菌落形成單位(CFU/片)。E.5.3.6結(jié)果判定各次試驗說明書規(guī)定時間的殺菌率大于或等于90%,判有抗菌作用；各次試驗說明書規(guī)定時間的殺菌率大于或等于99%,判有較強(qiáng)抗菌作用。E.5.4浸漬殺菌試驗適用于抗菌毛巾、抗菌棉襪、抗菌棉布等含有溶出性抗菌材料的抗菌織物對微生物抗菌效果的試驗。E.5.4.2試樣和菌懸液制備在距試樣布邊10.0cm以上、離布端1.0m以上部位，剪取直徑為5.0cm的圓形試樣若干，取3份試樣分別裝于3個錐形瓶中，蓋好瓶口備用(需用試樣數(shù)量要根據(jù)纖維類別及織物織法而定，以能吸收1.0mL菌懸液且錐形瓶中不留殘液為度)。另同法剪取與試樣相同材質(zhì)但不含抗菌劑對照織物若干，取2份分別裝于2個錐形瓶中，蓋好瓶口，121℃滅菌15min備用。用接種環(huán)將保存的菌種以劃線法接種到營養(yǎng)瓊脂平皿，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h,取典型的菌落移種到含肉湯培養(yǎng)基的錐形瓶中，36℃±1℃培養(yǎng)24h,用肉湯對培養(yǎng)液進(jìn)行系列稀釋，使菌懸液的含菌量為1.0×10?CFU/mL～5.0×10?CFU/mL。E.5.4.3試驗步驟分別取1.0mL菌懸液加入2份準(zhǔn)備好的錐形瓶內(nèi)試樣和1份對照織物上，確保其均勻分布，且錐形瓶中不留多余液，封好瓶口，以防蒸發(fā)，造成細(xì)菌死亡。分別在一個盛有已接種菌懸液的試樣和對照織物的錐形瓶中加入100mL中和劑，置渦旋振蕩器上振蕩1min洗滌細(xì)菌，取1.0mL進(jìn)行10倍系列稀釋，選適當(dāng)稀釋度以傾注法接種平皿，作為“0”接觸時間樣品和對照織物上的細(xì)菌數(shù)。將另一個裝有已接種菌懸液試樣的錐形瓶于36℃±1℃培養(yǎng)20h±2h,加入100mL中和劑，置渦旋振蕩器上振蕩1min洗滌細(xì)菌，取1.0mL進(jìn)行10倍系列稀釋，選適當(dāng)稀釋度以傾注法接種平皿，作為試驗組。陰性對照組：試樣不接種菌懸液，在“0”接觸時間加入100mL中和劑，置渦旋振蕩器上振蕩1min取樣，接種平皿。陽性對照組：另取1個裝有對照織物的錐形燒瓶，接種1.0mL菌懸液后，在36℃±1℃培養(yǎng)20h±2h,加入100mLPBS,置渦旋振蕩器上振蕩1min洗滌細(xì)菌，取1.0mL進(jìn)行10倍系列稀釋，選適當(dāng)稀釋度以傾注法接種平皿。將陰性和陽性對照樣品與試驗組樣品接種的平皿一并于36℃±1℃培養(yǎng)48h,計數(shù)菌落數(shù)。試驗產(chǎn)品對白色念珠菌等其他微生物抗菌效果的測試方法同上，選擇相應(yīng)的菌株、培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。E.5.4.4殺菌率的計算殺菌率計算見公式(E.6):式中：K——殺菌率；E.5.4.5評價標(biāo)準(zhǔn)E.5.4.5.1“0”接觸時間對照織物的平均菌落數(shù)應(yīng)在1.0×103CFU/片～5.0×103CFU/片。E.5.4.5.2陰性對照應(yīng)無菌生長，陽性對照菌數(shù)比“0”接觸時間的菌數(shù)明顯增加。E.5.4.5.3各次試驗的殺菌率均大于或等于90%,即可認(rèn)定該樣品具有抗菌作用；各次殺菌率均大于或等于99%,判有較強(qiáng)抗菌作用。E.5.5振蕩燒瓶試驗E.5.5.1適用范圍適用于對含非溶出性抗菌物質(zhì)抗菌產(chǎn)品的抗菌性能檢測。注1:在進(jìn)行振蕩燒瓶試驗前，需要鑒定其抗菌成分是否可溶出，如果有溶出性抗菌材料，參照可溶出抗菌材料檢測，無溶出性抗菌材料，選用振蕩燒瓶法進(jìn)行。注2:非溶出性抗菌材料的鑒定：將樣品置于無菌蒸餾水浸泡24h(通過預(yù)試驗，吸取的浸泡液需滿足后續(xù)檢測要E.5.5.2試驗步驟E.5.5.2.1將材料剪切成10mm×10mm樣片，稱取0.75g兩份分別置入250mL的錐形燒瓶中。E.5.5.2.2在上述錐形燒瓶中加入70mLPBS和5.0mL新鮮制備的菌懸液，使菌懸液在PBS中的濃度為1.0×10?CFU/mL～5.0×10?CFU/mL。E.5.5.2.3將錐形燒瓶固定于振蕩搖床上，在20℃~25℃條件下，以300r/min振搖2min,吸取1.0mL作為試驗組振蕩前樣液；繼續(xù)振搖至1h,吸取1.0mL樣液作為試驗組振蕩后樣液。E.5.5.2.4用PBS對振蕩前和振蕩后樣液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后，每個平皿加樣液1.0mL,以瓊脂傾注法接種平皿，每個樣液分別接種兩個平皿，培養(yǎng)后進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。E.5.5.2.5同時設(shè)陰性對照樣片組和不加樣片組。陰性對照樣片組的對照樣片應(yīng)與試驗樣片同等材質(zhì)、同等大小但不含抗菌成分，且經(jīng)滅菌處理；不加樣片組分別取5.0mL菌懸液和70mLPBS加入250mL三角燒瓶中，混勻，分別于振蕩前和振蕩后預(yù)定時間，各取1.0mL菌懸液與PBS的混合液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。E.5.5.2.6以試驗同批次的稀釋液、培養(yǎng)基分別設(shè)陰性對照。E.5.5.2.7重復(fù)試驗3次。E.5.5.3計算公式殺菌率計算見公式(E.7):K——殺菌率；…………(E.7)E.5.5.4評價標(biāo)準(zhǔn)E.5.5.4.1各次試驗陰性對照均應(yīng)無菌生長。E.5.5.4.2不加樣片組活菌計數(shù)在1.0×10?CFU/片～5.0×10?CFU/片之間，且樣品振蕩前后平均菌落數(shù)差值在10%以內(nèi)，試驗有效。E.5.5.4.3各次試驗中，試驗樣片殺菌率與對照樣片殺菌率的差值大于26%,產(chǎn)品具有抗菌作用。E.5.5.4.4抗菌纖維類產(chǎn)品的最長抗菌作用時間不應(yīng)超過1h。E.5.5.5注意事項E.5.5.5.1振蕩前應(yīng)將振蕩搖床上的錐形瓶固定牢，以免碰破。E.5.5.5.2試驗中，在試驗誤差允許的范圍內(nèi)，如果試驗樣片和對照樣片出現(xiàn)振蕩后菌落數(shù)高于振蕩前菌落數(shù)的情況，其殺菌率可按“0”計算。E.6產(chǎn)品抑菌性能試驗E.6.1抑菌劑抑菌性能試驗E.6.1.1適用范圍適用于液體抑菌劑對微生物抑菌效果的測定。E.6.1.2試驗步驟取新鮮制備的菌懸液0.5mL滴加于4.5mL樣液內(nèi)，混勻后開始計時，作用至預(yù)定時間，用定量吸管吸取菌藥混懸液0.5mL放入4.5mL稀釋液的試管內(nèi)，充分混勻，分別吸取1.0mL接種平皿，每管接種2個平皿，將冷至40℃~45℃熔化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(細(xì)菌)或沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基(酵母菌),傾注于已加入樣液的平皿中，每平皿15mL～20mL,轉(zhuǎn)動平皿，使其充分混勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。試驗同時用稀釋液代替試樣，進(jìn)行平行試驗，作為陽性對照，回收菌數(shù)為1.0×10?CFU/mL～9.0×10?CFU/mL。試驗3次，計算抑菌率。抑菌率計算見公式(E.8):式中：Y——抑菌率；E.6.1.4評價標(biāo)準(zhǔn)各次試驗抑菌率Y均大于或等于50%到小于90%之間，產(chǎn)品有抑菌作用；各次試驗抑菌率均大于或等于90%,產(chǎn)品有較強(qiáng)抑菌作用。抑菌劑的最長抑菌作用時間不應(yīng)超過5min。E.6.1.5注意事項若由原液接種的平皿上菌落數(shù)大于300CFU或難以計數(shù)時，才需進(jìn)行10倍系列稀釋，選擇適宜稀釋度平皿作活菌菌落計數(shù)。E.6.2載體浸泡定量抑菌試驗E.6.2.1適用范圍適用于黏稠狀(半固體)抑菌產(chǎn)品(如抑菌洗手液等)對微生物抑菌效果的測定。E.6.2.2試驗步驟取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至約5.0×10?CFU/mL～5.0×107CFU/mL制成菌懸液備用。用微量移液器滴染10μL菌懸液于滅菌載體上，35℃±1℃烘干或室溫晾干備用。按5.0g/片的量稱取樣品于無菌平皿內(nèi)，置20℃±1℃水浴5min,用無菌鑷子取染菌載體，使載體完全浸沒于樣品中，立即計時。待染菌載體與樣品相互作用至說明書的規(guī)定時間，分別取染菌載體加入5.0mLPBS試管中，混勻，振蕩，將試驗菌洗下，分別吸取1.0mL樣液，按活菌培養(yǎng)計數(shù)方法測定存活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可用PBS進(jìn)行10倍系列稀釋后，再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。取10.0g與試驗樣品同質(zhì)材料不含抑菌成分的對照樣品浸泡2片染菌載體進(jìn)行平行試驗，作為陽性對照。陽性對照回收菌量為1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片。取同批次PBS、培養(yǎng)基作陰性對照。所有試驗樣品和對照樣品接種平皿均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。重復(fù)試驗3次，計算抑菌率。抑菌率計算見公式(E.9):Y——抑菌率；E.6.2.4評價標(biāo)準(zhǔn)各次試驗抑菌率Y均大于或等于50%到小于90%之間，判有抑菌作用；各次試驗抑菌率均大于或等于90%,判有較強(qiáng)抑菌作用。E.6.3載體抑菌試驗E.6.3.1適用范圍適用于含溶出性抑菌成分的濕巾、無紡布口罩、衛(wèi)生巾、護(hù)墊、尿布等固體類抑菌產(chǎn)品對微生物抑菌效果的測定。E.6.3.2試驗步驟取試驗菌24h新鮮斜面培養(yǎng)物用PBS洗下，用PBS稀釋至5.0×10?CFU/mL～5.0×10?CFU/mL,制成菌懸液備用。用滅菌剪刀在無菌條件下將試驗樣品和對照樣品分別剪成20mm×30mm樣片備用。試驗時滴加100μL菌懸液。對照樣片染菌前需經(jīng)壓力蒸汽滅菌。取無菌平皿，用無菌鑷子取2片試驗樣片，勿重疊，置20℃±1℃水浴5min,在每一樣片上滴加100μL試驗用菌懸液，立即計時。待試驗菌與樣片接觸作用至說明書的規(guī)定時間，分別夾取染菌樣片加于5.0mLPBS試管中，混勻。振蕩洗脫，分別吸取1.0mL樣液，按活菌培養(yǎng)計數(shù)方法測定存活菌數(shù)，每管樣液接種2個平皿。如平板上生長的菌落數(shù)較多時，可10倍系列稀釋后，再進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù)。同時用與試驗樣品同質(zhì)材料不含抑菌成分的對照樣片2片代替試驗樣片進(jìn)行試驗，作為陽性對照，陽性對照回收菌量為1.0×10?CFU/片～9.0×10?CFU/片；取同批次PBS、培養(yǎng)基作陰性對照。所有試驗樣本和對照樣本均在36℃±1℃培養(yǎng)48h(細(xì)菌)或72h(酵母菌),進(jìn)行活菌菌落計數(shù)。試驗重復(fù)3次，計算抑菌率。E.6.3.3抑菌率計算抑菌率計算見公式(E.10):Y——抑菌率；……(E.10)E.6.3.4結(jié)果判定各次試驗抑菌率Y大干或等于50%到小干90%之間.判有抑菌作用：各次試驗抑菌率大于或等于GB15979—202490%,判有較強(qiáng)抑菌作用。E.6.4抑菌環(huán)試驗E.6.4.1適用范圍適用于含溶出性抑菌物質(zhì)，或可制成直徑為5.0mm片狀物的固體抑菌產(chǎn)品的抑菌效果鑒定；也可用于鑒別抑菌產(chǎn)品中是否含有可溶性抑菌物質(zhì)。E.6.4.2載體和器材E.6.4.2.1液體材料試驗載體：5.0mm直徑圓形濾紙片，經(jīng)壓力蒸汽滅菌處理后，置120℃烤干2h,E.6.4.2.2微量移液器：5.0μL～50μL,可調(diào)式。E.6.4.2.3游標(biāo)卡尺。E.6.4.3.1試驗樣片的制備：對液體材料，取無菌并干燥的濾紙片。每片滴加產(chǎn)品實際使用濃度的溶液5.0μL,然后將濾紙片平放于清潔的無菌平皿內(nèi)，開蓋置37℃恒溫箱中烤干，或置室溫下自然干燥后備的圓片(塊),每4片(塊)一組。E.6.4.3.2陰性對照樣片的制備：對液體材料，取無菌干燥濾紙片，每片滴加無菌蒸餾水5.0μL,干燥后備用。對固體材料，對照樣片應(yīng)與試驗樣片同等材質(zhì)、同等大小但不含抑菌成分。E.6.4.3.3試驗菌的接種：用無菌棉拭子蘸取濃度為5.0×10?CFU/mL～5.0×10?CFU/mL新鮮制備的試驗菌懸液，在適宜的培養(yǎng)基平板表面均勻涂抹3次。每涂抹1次，平板應(yīng)轉(zhuǎn)動60°,最后將棉拭子繞平板邊緣涂抹一周。蓋好平皿，置室溫干燥5min。E.6.4.3.4樣片貼放：每次試驗貼放1個染菌平板，每個平板貼放4片試驗樣片，1片陰性對照樣片，共5片。用無菌鑷子取樣片貼放于平板表面，陰性對照樣片貼于平板中心位置，試驗樣片貼于四周。各樣片中心之間相距25mm以上，與平板的周緣相距15mm以上。貼放好后，用無菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于平板表面。蓋好平皿，置36℃±1℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)16h～18h測量結(jié)果。用游標(biāo)卡尺測量抑菌環(huán)的直徑(包括貼片)并記錄