血涂片的制備

關(guān)于血涂片的制備目的要求1.掌握血涂片的制備方法；2.認識紅細胞及各種白細胞的典型形態(tài)；3.掌握顯微測微尺的使用方法。第2頁,共25頁，星期六，2024年，5月實驗原理涂片技術(shù)是制備血液樣品最常用的技術(shù)。將血液樣品制成單層細胞的涂片標本，染色后可對血液中各種細胞形態(tài)進行形態(tài)觀察、細胞計數(shù)、細胞大小測量等工作。第3頁,共25頁，星期六，2024年，5月實驗用品1.器材:醫(yī)用一次性采血針、酒精棉球、鑷子、經(jīng)脫脂洗凈的載玻片、雙凹片（推片）。2.試劑:Wright’s染液：Wright’s色素粉末0.1g，溶于60ml甲醇。第4頁,共25頁，星期六，2024年，5月方法與步驟一.血涂片的制備與血細胞的觀察二.顯微測微尺的使用第5頁,共25頁，星期六，2024年，5月采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹第6頁,共25頁，星期六，2024年，5月采血第7頁,共25頁，星期六，2024年，5月由于第一滴血中含單核白細胞較多，因此棄去第一滴血。第8頁,共25頁，星期六，2024年，5月推片：擠出第二滴血置于載玻片的右側(cè)第9頁,共25頁，星期六，2024年，5月再取另一張邊緣光滑的雙凹片，斜置于血滴的前緣，先向后稍移動輕輕觸及血滴，使血液沿玻片端展開成線狀。第10頁,共25頁，星期六，2024年，5月30~45°兩玻片的角度以30~45°為宜，輕輕將雙凹片向前勻速推進，即涂成血液薄膜。第11頁,共25頁，星期六，2024年，5月染色待涂片在空氣中完全干燥后，滴加數(shù)滴Wright’s染液蓋滿血膜為止，染色1～3min。然后滴加等量蒸餾水，使其與染液均勻混合，靜置10～15min。用蒸餾水沖去染液，吸水紙吸干，鏡檢。第12頁,共25頁，星期六，2024年，5月結(jié)果顯示第13頁,共25頁，星期六，2024年，5月淋巴細胞第14頁,共25頁，星期六，2024年，5月單核細胞第15頁,共25頁，星期六，2024年，5月嗜中性粒細胞第16頁,共25頁，星期六，2024年，5月嗜酸性粒細胞第17頁,共25頁，星期六，2024年，5月嗜堿性粒細胞第18頁,共25頁，星期六，2024年，5月顯微測微尺的使用顯微測微尺是用來測量在顯微鏡下所觀察到的物體的長度、面積的工具，包括鏡臺測微尺、目鏡測微尺兩部分。在使用的過程中，鏡臺測微尺起標定作用，利用它可以確定目鏡測微尺旋鈕上每小格代表的實際長度。目鏡測微尺標定完成后，即可用于細胞樣品的測量。第19頁,共25頁，星期六，2024年，5月每個大格又可分為10個小格，每小格的實際長度為0.01mm總長0.1mm鏡臺測微尺總長1mm共分為10格第20頁,共25頁，星期六，2024年，5月目鏡測微尺可以通過旋轉(zhuǎn)旋鈕移動目鏡測微尺中交叉線的位置第21頁,共25頁，星期六，2024年，5月使用方法1.取下目鏡,將目鏡測微尺的刻度面向下放入目鏡中,旋上透鏡；2.將鏡臺測微尺蓋片面朝上放在載物臺上,用低倍鏡觀察,調(diào)節(jié)焦距看清鏡臺測微尺的刻度；3.移動鏡臺測微尺,同時轉(zhuǎn)動目鏡,使目鏡測微尺與鏡臺測微尺平行靠近,并將兩尺的“0”點刻度線或某刻度線對齊.然后從左向右查看兩尺刻度線另一重合處,記錄重合線間目鏡測微尺與鏡臺測微尺的格數(shù).按下式計算目鏡測微尺每格等于多少微米。第22頁,共25頁，星期六，2024年，5月目鏡測微尺的標定n×aX=MX:目鏡測微尺每格的實際長度a:鏡臺測微尺每格的實際長度n:鏡臺測微尺的刻度數(shù)。M:目鏡測微尺的刻度數(shù)。第23頁,共25頁，星期六，2024年，5月4.移去鏡臺測微尺，換血涂片，目鏡測微尺測量細胞所占小格數(shù)X目鏡測