血液分子生物學腫瘤形成基本理論

關于血液分子生物學腫瘤形成基本理論

腫瘤(tumor，neoplasm)

是一類常見病、多發(fā)病，其中惡性腫瘤是目前危害人類健康最嚴重的一類疾病。

在歐美一些國家，癌癥的死亡率僅次于心血管系統(tǒng)疾病居第二位。

在我國,腫瘤的發(fā)病率和死亡率都有增加。

繼心血管疾病之后，腫瘤是另一威脅人類健康和生命的主要疾病。在世界范圍內(nèi)，至少有l(wèi)／3的人在其一生中患上腫瘤；腫瘤是1／4的男性和l／5的女性的死亡原因。第2頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆據(jù)統(tǒng)計，城市地區(qū)居民惡性腫瘤死亡率居死因第一位，為139.28／10萬，男性為166.92／10萬，女性為109．99／10萬。農(nóng)村地區(qū)居民惡性腫瘤死亡率居死因第三位，為105．57/10萬，男性為133．02/10萬，女性為77．76／10萬?！粑覈顬槌Ｒ姾臀：π試乐氐哪[瘤按照死亡率排列為胃癌、肝癌、肺癌、食管癌、大腸癌、白血病及淋巴瘤、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌等。第3頁,共79頁，星期六，2024年，5月目前提出的有關腫瘤形成的基本理論：1、腫瘤是一種基因??；2、腫瘤是瘤細胞單克隆性擴增的結果；3、原癌基因的激活和(或)抑癌基因的失活；4、腫瘤是一個長期的、分階段的、多種基因突變積累的過程；5、腫瘤的發(fā)生是免疫監(jiān)視功能喪失的結果。

第4頁,共79頁，星期六，2024年，5月腫瘤的基本特征在近期，3月新出版的Cell雜志上，Weinberg教授發(fā)表了一篇綜述：Hallmarks

of

Cancer:

The

Next

Generation，闡述了最近10年腫瘤學中的熱點和進展，提出了腫瘤細胞十個特征：

1.自給自足生長信號（Self-Sufficiency

in

Growth

Signals）；

2.抗生長信號的不敏感（Insensitivity

to

Antigrowth

Signals）；

3.抵抗細胞死亡(Resisting

Cell

Death)；

第5頁,共79頁，星期六，2024年，5月4.潛力無限的復制能力(Limitless

Replicative

Potential)；5.持續(xù)的血管生成(Sustained

Angiogenesis)；6.組織浸潤和轉移(Tissue

Invasion

and

Metastasis)；7.避免免疫摧毀(Avoiding

Immune

Destruction)；8.促進腫瘤的炎癥（Tumor

Promotion

Inflammation）；

9.細胞能量異常（Deregulating

Cellular

Energetics）；10.基因組不穩(wěn)定和突變（Genome

Instability

and

Mutation）。第6頁,共79頁，星期六，2024年，5月腫瘤細胞生存的微環(huán)境◆腫瘤的發(fā)生和轉移與腫瘤細胞所處的內(nèi)外環(huán)境有著密切關系?！舭[瘤所在組織的結構、功能和代謝，而且亦與腫瘤細胞自身的(核和胞質(zhì))內(nèi)在環(huán)境有關?！裟[瘤細胞可以通過自分泌和旁分泌，改變和維持自身生存和發(fā)展的條件，促進腫瘤的生長和發(fā)展?！羧砗途植拷M織亦可通過代謝、分泌、免疫、結構和功能的改變，限制和影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。第7頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆腫瘤與環(huán)境，兩者既是相互依存，相互促進，又是相互拮抗，相互斗爭的。

◆近年來由于腫瘤細胞學和分子生物學的進展，人們對于腫瘤和環(huán)境的相互關系有了更加深入的了解。這不僅對于認識腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉移等有著重要的意義，而且對于腫瘤的診斷、防治和預后亦有著重要的作用。

是現(xiàn)代腫瘤生物學的一個關鍵和核心的問題第8頁,共79頁，星期六，2024年，5月腫瘤的生物學行為----異質(zhì)性（heterogeneity）

腫瘤組織無論在細胞形態(tài)和組織結構上，都與其發(fā)源的正常組織有不同程度的差異，這種差異稱為異型性（atypia）。

腫瘤的異質(zhì)性是指同一腫瘤在組織結構和功能性質(zhì)上是由不同質(zhì)的細胞所組成的。腫瘤組織內(nèi)的瘤細胞在細胞核型、生長速度、DNA含量、治療反應、轉移傾向、細胞表面抗原、受體、標記物及生物學行為等方面不同。第9頁,共79頁，星期六，2024年，5月如甲狀腺癌中同時存在濾泡和乳頭狀結構，甚至還證明有的甲狀腺癌同時可存在濾泡癌和髓樣癌（C細胞癌）的瘤細胞成分。如肺的小細胞癌中出現(xiàn)較高分化水平的腺癌或鱗癌成分。腫瘤異質(zhì)性另外一種比較特殊的形式是，在一個腫瘤中出現(xiàn)與瘤細胞及間質(zhì)細胞以外的其它細胞成分，最常見的是內(nèi)分泌細胞（不是瘤細胞），如某些惡性腫瘤（子宮內(nèi)分泌癌，肺腺癌等），在同一腫瘤的不同區(qū)域可出現(xiàn)多種不同分化水平、不同性質(zhì)的內(nèi)分泌細胞，如降鈣素、胃泌素、促腎上腺皮質(zhì)激素、絨毛膜促性腺激素等激素分泌細胞，由此產(chǎn)生的相關癥狀稱為副腫瘤綜合癥。

第10頁,共79頁，星期六，2024年，5月腫瘤異質(zhì)性臨床表現(xiàn)

1.腫瘤個體異質(zhì)性：腫瘤存在地域、種族、流行病學等方面明顯的差異，尤其表現(xiàn)在個體腫瘤發(fā)生的不同敏感性上。在腫瘤研究中強調(diào)采取多中心、大樣本的臨床隨機對照試驗，旨在克服個體異質(zhì)性的差異；在腫瘤治療方面，強調(diào)規(guī)范化的同時，也應注重個體化治療。第11頁,共79頁，星期六，2024年，5月

2.腫瘤結構異質(zhì)性：主要表現(xiàn)在器官、組織和細胞水平形態(tài)學差異。組織器官大體表現(xiàn)如形狀、大小、顏色、質(zhì)地、數(shù)目、包膜等；鏡下表現(xiàn)為不同組織結構如巢狀、小梁狀、乳頭狀、篩狀等；細胞形態(tài)差異如小細胞、大細胞、立方狀、柱狀、圓形等。第12頁,共79頁，星期六，2024年，5月

3.腫瘤細胞生長異質(zhì)性即時間異質(zhì)性：細胞生長周期是每個增殖細胞從一次分裂結束時到下一次分裂結束時的整個過程，包括G1期、S期、G2期和M期,處于靜止細胞群為靜止細胞（G0期）；腫瘤組織中的腫瘤細胞由增殖細胞群、靜止細胞群和無增殖能力細胞群細胞混合組成，顯示腫瘤細胞的非同步性，即時間異質(zhì)性；在增生腫瘤細胞群體內(nèi)，約10%細胞處在S期；G0期的細胞有一定的增殖能力，在受到一定內(nèi)外因素刺激下成為增殖細胞，進入增殖細胞群，可能為腫瘤復發(fā)的主要根源。因此，腫瘤細胞時間異質(zhì)性可能是復發(fā)理論基礎之一。第13頁,共79頁，星期六，2024年，5月4.腫瘤細胞遺傳異質(zhì)性：

目前研究顯示多數(shù)惡性腫瘤中，瘤細胞的染色體組型存在各種異常改變。這種改變在不同腫瘤細胞和腫瘤中存在差異，即使在相同遺傳背景的腫瘤細胞系中不同代細胞間也存在差異。第14頁,共79頁，星期六，2024年，5月5.腫瘤細胞功能異質(zhì)性：腫瘤細胞的增生、凋亡、細胞內(nèi)或細胞間信號傳導、細胞黏附、血管生成、轉移行為等生物學功能存在異質(zhì)性。其中轉移是決定腫瘤的侵襲性及臨床預后重要的過程，轉移異質(zhì)性是功能異質(zhì)性的主要表現(xiàn)之一。研究顯示，原發(fā)腫瘤及其轉移灶在基因表達、功能及組成上存在差異。最近研究顯示，乳腺癌的原發(fā)灶及轉移灶的雌、孕激素受體表達狀態(tài)可能存在差異。鑒于轉移腫瘤的異質(zhì)性，有必要對原發(fā)腫瘤及其轉移瘤的生物學情況進行比較研究，利于腫瘤的治療。第15頁,共79頁，星期六，2024年，5月第16頁,共79頁，星期六，2024年，5月腫瘤是多步驟發(fā)生、多基因突變的演進性疾病

參與細胞生長調(diào)控的蛋白質(zhì)大致分為5類：

生長因子(growthfactors，GFs)、

生長因子受體(growthfactorreceptorGFR)、

細胞內(nèi)信號轉導子(intracellularsignaltransducers)、

細胞核轉錄因子(nucleartranscriptionfactor)

細胞周期蛋白質(zhì)(cellcycleprotein)。

第17頁,共79頁，星期六，2024年，5月

在細胞生長、復制的過程中，可能隨機地存在著細胞生長、分裂調(diào)控機制的基因突變。如這種突變發(fā)生，所產(chǎn)生的是“基因受損(genedamage)”的子細胞，當“基因受損”不斷累積，細胞將失控性增長與分裂，顯示其異質(zhì)性的生物學行為。

一方面是失控性的細胞生長，另一方面是來自細胞演化過程中參與細胞生長調(diào)控的蛋白質(zhì)的紊亂。

第18頁,共79頁，星期六，2024年，5月

腫瘤病因和多步驟發(fā)生、多基因突變的演進性機制第19頁,共79頁，星期六，2024年，5月

單個的基因改變尚不足以造成細胞的完全惡性轉化。要使得細胞完全惡性轉化，需要多個基因的改變，包括幾個癌基因的激活，兩個或更多抑癌基因的失活，以及凋亡調(diào)節(jié)和DNA修復基因的改變。

所謂腫瘤是一類“多基因疾病”，包括三層含義，①腫瘤的發(fā)生源于遺傳物質(zhì)或基因的改變(geneticchanges)；②這種改變是多步驟(multistep)完成的；③所有的基因變化最終導致細胞的失控性生長。第20頁,共79頁，星期六，2024年，5月第21頁,共79頁，星期六，2024年，5月

腫瘤的遺傳易感性◆目前發(fā)現(xiàn)不少常見腫瘤有家族史，如乳腺癌、胃腸癌、食管癌、肝癌、鼻咽癌、白血病、子宮內(nèi)膜癌、前列腺癌、黑色素瘤等?！舾鶕?jù)遺傳學原理，當某一特定的疾病以可預測的方式在家系內(nèi)傳遞時，一定存在著遺傳缺陷和易感性。第22頁,共79頁，星期六，2024年，5月

◆不同的腫瘤可能有不同遺傳傳遞方式。真正直接遺傳的腫瘤只是少數(shù)不常見的腫瘤，遺傳因素在大多數(shù)腫瘤發(fā)生中的作用是對致癌因子的易感性或傾向性。第23頁,共79頁，星期六，2024年，5月X第24頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆抑癌基因生物學特征是抑制細胞增殖。抑癌基因的隱性遺傳學特征使一對等位基因中的任何一個基因的丟失或破壞，都不足以使其抑制細胞增殖的功能失活，因另一個等位基因的完好仍能產(chǎn)生抑癌基因產(chǎn)物，并發(fā)揮其功能?！糁挥幸粚Φ任换蛉鈦G失或破壞，才能使其抑制細胞增殖的功能喪失。也說明腫瘤的發(fā)生是由于一個等位基因的結構破壞或功能喪失和接踵而至的另一個等位基因功能減弱或結構受損的結果?！羰聦嵣线z傳因素與環(huán)境因素在腫瘤發(fā)生中起協(xié)同作用。

第25頁,共79頁，星期六，2024年，5月反復的多次打擊(multihit)第26頁,共79頁，星期六，2024年，5月

腫瘤的克隆演化理論和干細胞學說

一、腫瘤細胞的單克隆增生◆

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是細胞克隆演化(clonalevolutiontheory)的過程；◆首先，細胞有了基因突變，使其能在一般正常細胞不足以分裂的條件下進行分裂，繼而子代細胞也有了同樣的不正常分裂能力，使分裂繼續(xù)下去；◆隨后，細胞群中又再次發(fā)生基因突變，使其生長、分裂的能力進一步加強；◆最終，發(fā)展成為惡性腫瘤細胞。第27頁,共79頁，星期六，2024年，5月X第28頁,共79頁，星期六，2024年，5月X第29頁,共79頁，星期六，2024年，5月二、腫瘤干細胞學說1、干細胞的概念

干細胞(stemcells)是一類未分化的原始細胞，其兩大生物學特性為：多潛能分化能力和自我更新能力。當干細胞分裂時，一個子細胞完全地復制成母細胞，而另一個子細胞則分化成熟，發(fā)展成特異組織的體細胞。幾乎每種組織都有自己特異的干細胞，持續(xù)存在且數(shù)量很少，當組織老化或病變損傷時，這些細胞增殖分化，替代修復原有細胞。腫瘤細胞的生長繁殖和干細胞之間有許多驚人的相似之處，從而提出了腫瘤干細胞(Tumorstemcells)學說。

第30頁,共79頁，星期六，2024年，5月2、腫瘤干細胞學說的理論基礎為：⑴細胞發(fā)生癌變必須累積許多突變，一般體細胞壽命較短，

經(jīng)數(shù)個周期的分裂生長就進入正常的程序化死亡，無法累積眾多的突變；只有干細胞才可能長時間存活，從而可以接受所有的導致腫瘤的突變。⑵干細胞幾乎無限的自我更新為發(fā)生基因突變提供了較多的可能。⑶腫瘤細胞與干細胞一樣，具有分裂增殖、遷移、再生長的能力。⑷

腫瘤組織中僅有極小部分細胞(干細胞)能通過接種、培養(yǎng)或轉移等方式形成新的腫瘤。第31頁,共79頁，星期六，2024年，5月3、干細胞與腫瘤自腫瘤干細胞理論建立以來，從最早的血液系統(tǒng)腫瘤干細胞到最近的實體性腫瘤，如肺癌與其他腫瘤干細胞的確定，這一理論得到了有力的證實。不同類型腫瘤干細胞的發(fā)現(xiàn)時間與文獻

發(fā)現(xiàn)時間腫瘤干細胞文獻1994白血病干細胞Blood2003腦膠質(zhì)瘤干細胞CancerResearch2003乳腺癌干細胞PNAS2005肺癌干細胞Cell2005肝癌干細胞

國際肝癌會議

第32頁,共79頁，星期六，2024年，5月

4、腫瘤干細胞的特征

（1）必然具備一定的正常組織干細胞的特征或標志，（2）存在其特有的分化增殖傾向（3）該組織的腫瘤特征

如胰腺腫瘤干細胞的標志分子可能為PDX—1，Ptf—1等，同時也可能表達一些干細胞共同的表面分子，如CD34，CD44等?；谀[瘤的突變性質(zhì)，胰腺腫瘤干細胞也有可能表達胰腺癌高表達的一些產(chǎn)物分子，如k—ras或Ki—67等。因此尋找腫瘤干細胞在一定程度上依賴于的正常組織干細胞的細胞特征。

第33頁,共79頁，星期六，2024年，5月

長期慢性炎癥與癌發(fā)生密切相關，可能的機制為炎癥使細胞因子的釋放，促炎癥的轉錄因子上調(diào)，導致大量氧自由基的堆積，這些介質(zhì)可引起實質(zhì)細胞，包括潛在的干細胞中DNA的損傷，抑癌基因功能丟失，癌基因過度表達，和促進細胞周期的基因上調(diào)，導致細胞異常增生，進而腫瘤發(fā)生。第34頁,共79頁，星期六，2024年，5月

5、意義腫瘤干細胞理論為腫瘤治療提供了新的模式：這一模型跳出以往一味從基因水平來研究腫瘤的框架。從單個細胞水平來理解腫瘤形成機制和生物學特性。為正確理解腫瘤復發(fā)、轉移機制、評價預后提供了理論基礎，提供干細胞水平的治療靶點。第35頁,共79頁，星期六，2024年，5月原癌基因、癌基因、抑癌基因

原癌基因、癌基因，抑癌基因等名稱，實際上是對細胞生長、分化起正向或者反向調(diào)節(jié)的基因。在保持機體的正常功能方面起重要的作用。如果發(fā)生異常改變，則可能引起細胞的轉化和腫瘤的發(fā)生。腫瘤的發(fā)生發(fā)展本質(zhì)上是細胞原癌基因的激活和抑癌基因的失活和DNA錯配、修復缺陷造成的。

第36頁,共79頁，星期六，2024年，5月

一、原癌基因、癌基因

現(xiàn)代分子生物學的重大成就之一

。

◆Bishop，Varmus及同事們在研究雞肉瘤病毒(Roussarcomavirus，RSV)時，發(fā)現(xiàn)RSV所攜帶的src基因能夠使正常細胞轉化為腫瘤細胞；隨后發(fā)現(xiàn)src基因亦存在于人類的正常細胞?！粞芯勘砻?，生物界有一類在長期的進化過程中被保留下來的高度保守基因，調(diào)控著正常細胞的生命活動，包括細胞增生、生長因子信號傳遞、細胞周期進展、細胞存活以及DNA轉錄等。第37頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆一旦這類基因發(fā)生某些錯誤(如突變、缺失、擴增或重排等)或功能喪失時，極易導致本來就存在于正常細胞中的以非激活形式存在的原癌基因(proto-oncogene)轉變?yōu)榭墒拐＜毎D化為腫瘤的轉化基因(transforminggene)或癌基因(oncogene)。第38頁,共79頁，星期六，2024年，5月1、癌基因：能導致細胞惡性轉化的核酸片段。◆Bishop和

Varmus因此獲得1989年的諾貝爾獎。癌基因由3個小寫字母命名(如src)；◆逆轉錄病毒中的癌基因加前綴V—(如V—src)，正常細胞中的原癌基因加前綴C—(如C—src);◆在隨后的20多年里，人們發(fā)現(xiàn)了一百多個原癌基因及其產(chǎn)物，或是生長因子(如sis)、生長因子受體(如erbB)，或是信號轉導途徑上的成分(如ras)、轉錄因子(如myc)。上述因子被激活時，正常細胞可能轉化為呈失控性生長的腫瘤細胞。第39頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆原癌基因可因多種因素的作用而被激活成為癌基因?！舭┗蚩梢岳斫鉃榫哂袧撛诘霓D化細胞能力的基因。

第40頁,共79頁，星期六，2024年，5月2、主要的癌基因，其活化方式和相關的人類腫瘤分類原癌基因活化方式

相關人類腫瘤

生長因子

PDGF—β鏈sis過度表達星形細胞瘤，骨肉瘤纖維母細胞生長因子hst-1過度表達胃癌

int-2擴增膀胱癌，乳腺癌，黑色素瘤

生長因子受體

EGF受體家族erb-B1過度表達肺鱗癌

erb-B2擴增乳腺癌，卵巢癌，肺癌和胃癌

erb-B3過度表達乳腺癌集落刺激因子-1受體fms點突變白血病

ret點突變多發(fā)性內(nèi)分泌腫瘤2A和B，家族性甲重排狀腺髓樣癌，自發(fā)性甲狀腺乳頭狀癌第41頁,共79頁，星期六，2024年，5月信號轉導蛋白

GTP結合蛋白ras點突變肺癌、結腸癌，胰腺癌，多種白血病非受體型酪氨酸激酶abl易位慢性粒細胞白血病，急性淋巴細胞白血病核調(diào)節(jié)蛋白轉錄活化因子myc易位伯基特淋巴瘤

N-myc擴增神經(jīng)母細胞瘤，小細胞肺癌

L-myc擴增小細胞肺癌細胞周期調(diào)節(jié)蛋白

cyclinD易位細胞淋巴瘤周期素擴增乳腺癌，肝癌，食道癌周期素依賴激酶CDK4擴增或點突變膠質(zhì)母細胞瘤，黑色素瘤，肉瘤

第42頁,共79頁，星期六，2024年，5月二、原癌基因的激活與對靶細胞的影響

1、原癌基因的激活有兩種方式：

①

發(fā)生結構改變(突變)，產(chǎn)生具有異常功能的癌蛋白；②基因表達調(diào)節(jié)的改變(過度表達)，產(chǎn)生過量的結構正常的生長促進蛋白。基因水平的改變繼而導致細胞生長刺激信號的過度或持續(xù)出現(xiàn)，使細胞發(fā)生轉化。

第43頁,共79頁，星期六，2024年，5月2、引起原癌基因突變的DNA結構改變有：⑴點突變、移碼突變

◆如ras原癌基因第l外顯子的第12號密碼子從GGC突變?yōu)镚TC，相應編碼的氨基酸從甘氨酸變?yōu)槔i氨酸，轉錄產(chǎn)生異常蛋白。◆細胞中癌基因與抑癌基因所發(fā)生的突變包括生殖細胞和體細胞兩種突變。大部分腫瘤所發(fā)生的基因改變都是后天獲得,即體細胞突變。第44頁,共79頁，星期六，2024年，5月⑵染色體易位

如伯基特淋巴瘤的t(8；14)使得c-myc基因和IgH基因拼接，造成c-myc基因的過度表達。易位使癌基因被激活,或使抑癌基因失活,從而使細胞惡變。第45頁,共79頁，星期六，2024年，5月⑶基因擴增

腫瘤細胞內(nèi)一些癌基因在DNA復制中，通過不明機制變成多個拷貝,這種擴增往往導致基因表達產(chǎn)物的增加,如神經(jīng)母細胞瘤的N—myc原癌基因可復制成多達幾百個拷貝。第46頁,共79頁，星期六，2024年，5月⑷DNA的插入

DNA的插入是引起細胞基因重排、活化C－onc并增強其表達水平導致癌變的普遍形式。所插入的基因有外源性和內(nèi)源性兩種。。

第47頁,共79頁，星期六，2024年，5月⑸基因轉錄的改變

◆細胞核內(nèi)編碼蛋白質(zhì)的改變也是細胞轉化為惡性的重要特征。

◆轉化細胞與正常細胞的許多差別中的大部分是由特異性的基因轉錄和/或轉錄的相對穩(wěn)定性發(fā)生改變所致。

◆就轉化細胞而言，總mRNA中只有3％是特異的，但僅此水平就足以使所翻譯的蛋白質(zhì)對細胞的生長和形態(tài)產(chǎn)生多種影響。第48頁,共79頁，星期六，2024年，5月3、癌基因?qū)Π屑毎挠绊?/p>

突變的癌基因編碼的蛋白質(zhì)(癌蛋白，oncoprotein)與原癌基因的正常產(chǎn)物有結構上的不同，并失去正常產(chǎn)物的生長調(diào)節(jié)作用。可通過以下方式影響其靶細胞：

（1）生長因子增加；（2）生長因子受體增加；（3）產(chǎn)生突變的信號轉導蛋白；（4）產(chǎn)生與DNA結合的轉錄因子等；（5）癌基因之間的協(xié)同作用。第49頁,共79頁，星期六，2024年，5月三、新近研究的癌基因㈠Survivin

Survivin是新近發(fā)現(xiàn)的一種抑制細胞凋亡蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)家族成員,特異性表達于人和鼠的胚胎發(fā)育組織以及多數(shù)人類腫瘤細胞。1.Survivin的結構與功能

Survivin是1997年AltieriDC等在研究效應細胞蛋白酶受體-1(EPR-1)時發(fā)現(xiàn)的。人類Survivin基因全長14.7個Kb，定位于染色體17q25上，此位點不穩(wěn)定時可能涉及t(14;18)(q32;21)異位和(或)Bcl22基因的轉錄激活。

第50頁,共79頁，星期六，2024年，5月2.Survivin在腫瘤中的表達

◆

Survivin廣泛表達于人類各種腫瘤組織，而在正常組織中表達很少。

◆體內(nèi)外實驗表明，Survivin可在多種轉化細胞中表達，而且在大部分人類常見腫瘤如肺癌，結腸癌，胰腺癌、前列腺癌和乳腺癌等中表達。

◆在大多數(shù)腫瘤中Survivin表達與不良預后和病人的生存率降低有關。

第51頁,共79頁，星期六，2024年，5月3.Survivin研究的展望⑴Survivin作為一種抗凋亡基因表達的調(diào)控，與其他各種凋亡基因的關系等。⑵

目前已有很多文獻報道將反義Survivin用于對腫瘤的基因療法，并認為由于Survivin在大多腫瘤中表達，而在正常組織中不表達，反義Survivin特異靶向療法有一定的優(yōu)勢。⑵不同來源的腫瘤可能產(chǎn)生并遞呈相同類型的Survivin表位抗原，反義Survivin對此能產(chǎn)生特異性拮抗作用。

第52頁,共79頁，星期六，2024年，5月㈡ERBB2(HER2)

◆原癌基因HER2編碼的人表皮生長因子受體2(HER2)是一種跨膜受體，具有內(nèi)在酪氨酸激酶活性。胞內(nèi)酪氨酸激酶的磷酸化通過胞內(nèi)信號轉導途徑激活細胞生長有關的基因。

◆

HER2的過度表達是許多癌癥中常見的分子事件，并與患者的不良預后、術后短期復發(fā)以及低存活率密切相關。第53頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆Riou等在172名乳腺癌患者中用Southern印跡法分析HER2基因擴增、用免疫組化法測定過表達的HER2蛋白?！鬑ER2基因擴增是第一個在臨床上用作預后和化療效果預測因子的遺傳學改變的指標?！鬑ER2基因擴增較之HER2蛋白過表達檢測是乳腺癌患者不良預后的更好指標。第54頁,共79頁，星期六，2024年，5月

抑癌基因

◆20世紀80年代后期，又發(fā)現(xiàn)與原癌基因編碼的蛋白質(zhì)促進細胞生長相反，在正常情況下細胞內(nèi)的另一類基因的產(chǎn)物能抑制細胞的生長。稱抑癌基因(antioncogenes)或腫瘤抑制基因(tumour-suppressorgenes)；◆當它們發(fā)生遺傳上的錯誤改變而失活或功能丟失時，細胞將失去這種重要的負性調(diào)控物質(zhì)，正常細胞即可能轉變?yōu)槟[瘤細胞。已發(fā)現(xiàn)多個抑癌基因，它們以缺失、突變等方式在人類腫瘤的形成中發(fā)揮作用。第55頁,共79頁，星期六，2024年，5月一、確定抑癌基因應具備以下條件

在該惡性腫瘤的相應正常組織中必須有正常的表達;2.在該種惡性腫瘤中該基因有所改變,包括點突變、DNA片段或全基因的缺失或表達缺陷;3.導入該基因到有該基因缺陷的惡性腫瘤細胞中將部分或全部抑制其惡性表型。

第56頁,共79頁，星期六，2024年，5月

二、常見的抑癌基因第57頁,共79頁，星期六，2024年，5月腫瘤是一類細胞周期疾病

◆腫瘤是一類多步驟發(fā)生的，多基因突變所致的細胞克隆、演進性疾病。幾乎所有癌基因、抑癌基因的功能效應，最終都會聚到細胞周期機制上來；◆許多癌基因、抑癌基因直接參與細胞周期的調(diào)控，或者本身就是細胞周期調(diào)控機制的主要成分?！羲鼈兊耐蛔儗е铝思毎芷谑Э兀毎芷趩?、運行和終止異常。使細胞進入以增殖過多，凋亡過少為主要形式的失控性生長。據(jù)此可說，腫瘤是一類細胞周期疾病(cellcycledisease)。第58頁,共79頁，星期六，2024年，5月1．腫瘤細胞的周期調(diào)控

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G1期細胞對胞外信號作出的反應是決定朝向分裂還是退出細胞周期而進入靜止期(Go)。

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GI期的正常進展有賴于有絲分裂原的刺激，也可受抗增生細胞因子的刺激而終止。

◆失去調(diào)控的癌細胞傾向于保留在細胞周期中持續(xù)循環(huán)；一旦細胞通過G1晚期限制點，將對胞外生長調(diào)控信號產(chǎn)生不應期，并帶著這些信息進入有絲分裂。第59頁,共79頁，星期六，2024年，5月

2．細胞周期監(jiān)控機制的破壞

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細胞基因組完整性(genomeintegrity)的改變，是腫瘤發(fā)生的物質(zhì)基礎?！鬌NA監(jiān)控機制的破壞，將導致染色體重排(rearrangements)，如基因缺失(deletions)、擴增(amplifications)和移位(translocations)。

第60頁,共79頁，星期六，2024年，5月◆紡錘體監(jiān)控機制的破壞將導致有絲分裂過程中染色體不能分開，子代細胞中染色體的丟失或增加，導致染色體組倍體(ploidy)的改變?！暨@些監(jiān)控機制的破壞，是所有癌前細胞和癌細胞的本質(zhì)特征。◆染色體重排、異倍體和多倍體，都常見于腫瘤細胞的演進過程中。第61頁,共79頁，星期六，2024年，5月

腫瘤發(fā)生是免疫監(jiān)視功能喪失的結果

一、腫瘤免疫

腫瘤免疫反應以細胞免疫為主，體液免疫為輔。參加細胞免疫的效應細胞主要有CD8+的細胞毒性T細胞(cytotoxicTlymphocyte，CTL)、自然殺傷細胞(NK)和巨噬細胞。體液免疫參加抗腫瘤反應的主要是激活補體和介導NK細胞發(fā)揮作用。

第62頁,共79頁，星期六，2024年，5月1、CD8+的細胞毒性T細胞

（cytotoxicTlymphocyteCTL）

◆CTL被白細胞介素2(1L—2)激活后可以通過其T細胞受體識別瘤細胞上的人類主要組織相容性復合體(majorhistocompatibilitycomplex，MHC)I型分子而釋放某些溶解酶將瘤細胞殺滅。

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IL-2被稱為T細胞生長因子。IL-2主要以自分泌或旁分泌的方式，誘導特異性CTL克隆增殖，殺傷腫瘤細胞。第63頁,共79頁，星期六，2024年，5月肝癌中IL-2R陽性表達于淋巴細胞膜及胞漿（CTL）第64頁,共79頁，星期六，2024年，5月IL-2腫瘤特異性CTL腫瘤細胞+滲透性細胞溶解誘導細胞凋亡腫瘤細胞實驗結果表明IL-2通過增加肝內(nèi)CTL，增強機體特異性細胞免疫，能夠有效的抑制肝癌形成，一旦癌形成后，IL-2激活肝內(nèi)CTL的作用減弱。第65頁,共79頁，星期六，2024年，5月2、NK細胞

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NK細胞是不需要預先致敏，就能殺傷腫瘤細胞的淋巴細胞。

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NK細胞可以溶解多種人體腫瘤細胞，NK細胞是抗腫瘤免疫第一線的抵抗力量。

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NK細胞識別靶細胞的機制可能是通過NK細胞受體和抗體介導的細胞毒作用。

第66頁,共79頁，星期六，2024年，5月

肝臟NK細胞的抑癌作用

肝臟NK細胞屬于大顆粒淋巴細胞（Largegranularlymphocyte，LGL），位于肝血竇內(nèi)。其細胞毒作用相當于淋巴因子激活殺傷細胞（Lymphokineactivatedkillercell，LAK）。

第67頁,共79頁，星期六，2024年，5月肝臟NK細胞抗腫瘤作用的機制主要有：⑴分泌穿孔素/顆粒酶介導腫瘤細胞滲透性溶解；⑵與腫瘤細胞直接接觸，與TNF/FasL導致靶細胞凋亡；⑶破壞腫瘤微血管系統(tǒng)，導致腫瘤出血壞死;

(4)引起其他效應細胞和淋巴因子滲入到腫瘤組織中。第68頁,共79頁，星期六，2024年，5月3、巨噬細胞

◆巨噬細胞在抗腫瘤反應中與T細胞協(xié)同作用。T細胞產(chǎn)生的干擾素可激活巨噬細胞；

◆巨噬細胞產(chǎn)生的腫瘤壞死因子(TNF—α)和活性氧代謝產(chǎn)物在溶解瘤細胞中起主要作用；

第69頁,共79頁，星期六，2024年，5月

引起機體免疫反應的腫瘤抗原為兩類：⑴腫瘤特異性抗原只存在于腫瘤細胞中；⑵腫瘤相關抗原存在于腫瘤細胞和某些正常細胞中。腫瘤相關抗原可用于制備活性T細胞或抗體，用于腫瘤的免疫治療。

腫瘤相關抗原可分為兩類：

①腫瘤胚胎抗