GXAS-沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質譜聯(lián)用法

Q/LB.□XXXXX-XXXX前言本文件參照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由廣西分析測試協(xié)會提出、歸口并宣貫。本文件起草單位：廣西博測檢測技術服務有限公司、廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質量檢驗研究院、廣西益譜檢測技術有限公司、廣西綠保環(huán)境監(jiān)測有限公司、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部亞熱帶果品蔬菜質量監(jiān)督檢驗檢測中心、廣西壯族自治區(qū)分析測試研究中心、百色市檢驗檢測中心、廣西眾晟生物科技有限公司、廣西東盟食品檢驗檢測中心、廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院、南寧市武鳴區(qū)經(jīng)濟作物技術服務中心、橫州市綜合檢驗檢測中心、廣西工商學校、北海市農(nóng)業(yè)技術服務中心、金秀瑤族自治縣食品藥品與計量檢驗檢測中心、憑祥市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局。本文件主要起草人：沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質譜聯(lián)用法范圍本文件描述了沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑殘留量的氣相色譜-質譜聯(lián)用方法。本文件適用于沃柑中溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑殘留量的測定。本文件定量限溴菌腈為0.076mg/kg，氟吡菌酰胺為0.003μg/kg，亞胺唑為0.0005mg/kg。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB2763食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。原理試樣用乙酸乙酯浸泡超聲或渦旋振蕩提取，鹽析離心后，取上清液，經(jīng)分散固相萃取凈化，氣相色譜-質譜聯(lián)用法檢測，外標法定量。試劑和材料除另有說明外，在分析中僅使用分析純試劑和GB/T6682中規(guī)定的一級水。試劑乙腈（CH3CN，CAS號：75-05-8）：色譜純。甲醇（CH3OH，CAS號：67-56-1）：色譜純。乙酸乙酯，（CH3COOC2H5，CAS號：141-78-6)：色譜純。氯化鈉（NaCl，CAS號：7647-14-5）：優(yōu)級純。硫酸鎂(MgSO4，CAS號：7487-88-9)。用前在500℃下烘5h，冷卻200℃取出，冷卻近室溫，貯存于干燥器備用。標準品溴菌腈（C6H6Br2N2，CAS號35691-65-7）標準品：純度≥99%。亞胺唑（C17H13Cl3N4S，CAS號：86598-92-7）標準品：純度宜≥99%。氟吡菌酰胺（C16H11ClF6N2O，CAS號：658066-35-4）標準品：純度宜≥99%。標準溶液配制溴菌腈標準儲備溶液（1000mg/L）準確稱取約10mg（精確至0.1mg）溴菌腈標準品（5.2.1）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解并定容，避光-18℃及以下條件保存，有效期6個月。亞胺唑標準儲備溶液（1000mg/L）準確稱取約10mg（精確至0.1mg）亞胺唑標準品（5.2.2）于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.2）溶解，并定容至10mL。避光-18℃及以下條件保存，有效期6個月。氟吡菌酰胺標準儲備溶液（1000mg/L）準確稱取約10mg（精確至0.1mg）氟吡菌酰胺標準品（5.2.3）于10mL容量瓶中，用乙腈（5.1.1）溶解，并定容至10mL。避光-18℃及以下條件保存，有效期6個月?；旌蠘藴手虚g溶液（100μg/mL）分別取適量上述標準儲備溶液（3.1～3.3）于10mL容量瓶中，40℃水浴氮氣吹至近干，用乙酸乙酯（5.1.3）定容配制成100μg/mL的混合標準溶液，再用乙酸乙酯（5.1.3）稀釋，配制10μg/mL的混合標準溶液，避光-18℃及以下條件保存，有效期1個月。材料乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠(PSA)：40μm～60μm。微孔過濾膜（有機相）：O.22μm或相當者。儀器和設備氣相色譜-質譜儀：配有電子轟擊源（EI）。分析天平：感量0.1mg和感量0.01g。組織搗碎儀。渦旋振蕩儀。超聲波清洗器。離心機：轉速不低于4500r/min。旋轉蒸發(fā)儀。試樣制備試樣制備樣品取樣部位按照GB2763的規(guī)定執(zhí)行。對于個體較小的樣品，取樣后全部處理；對于個體較大的基本均勻樣品，可在對稱軸或對稱面上分割或切成小塊后處理；用四分法取樣或直接放入組織搗碎機中搗碎成勻漿。勻漿放入聚乙烯容器中。試樣儲存將試樣按照測試和備用分別存放。于-18℃及以下條件儲存。分析步驟提取稱取10g試樣置于50mL聚丙烯離心管中，加入10mL乙酸乙酯（5.1.3）超聲或渦旋振蕩提取15min，加入5gNaCl（5.1.4）,渦旋3min，于4500r/min離心5min，待凈化。凈化吸取8.1中上層清液5mL于內(nèi)含1000mg無水硫酸鎂（5.1.5）、200mgPSA（5.4.1）的塑料離心管中，旋渦2min，于4500r/min下離心5min。準確吸取3mL上清液于l5mL離心管中，40℃水浴氮氣吹至約0.8mL，用乙酸乙酯（5.1.3）定容至1.0mL，過微孔濾膜(5.4.2)，轉進樣小瓶用于測定。測定儀器參考條件儀器參考條件如下：色譜柱：5％苯基-95％甲基聚硅氧烷石英毛細管柱；30m×O.25mm×O.25μm或相當者；色譜柱溫度：40℃保持2min，然后以20℃/min程序升溫至180℃，保持2min；再以10℃/min升溫至280℃，保持5min；載氣：氦氣，純度≥99.999%，流速1.0mL/min；進樣口溫度：280℃；進樣量：1μL；進樣方式：不分流進樣；電子轟擊源：70eV；離子源溫度：230℃；GC-MS接口溫度：280℃；選擇離子監(jiān)測：每種化合物分別選擇一個定量離子，2～3個定性離子。每組所有需要檢測的離子按照出峰順序，分時段分別檢測。每種化合物的保留時間、定量離子、定性離子及定量離子與定性離子的豐度比值，參見附錄A。基質匹配標準工作曲線空白樣品按照8.1、8.2進行前處理得到空白基質溶液。精確吸取一定量的混合標準溶液，逐級用空白基質溶液稀釋成質量濃度為0.010mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.400mg/L、0.800mg/L、1.000mg/L的基質匹配標準工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測需要選擇不少于5個濃度點，供氣相色譜質譜聯(lián)用儀測定。以農(nóng)藥定量離子的質量色譜圖面積為縱坐標、相對應的基質匹配標準工作溶液質量濃度為橫坐標，繪制基質匹配標準工作曲線。定性及定量保留時間被測試樣中目標農(nóng)藥色譜峰的保留時間與相應標準色譜峰的保留時間相比較.相對誤差應在±2.5%之內(nèi)。離子豐度比在相同實驗條件下進行樣品測定時.如果檢出的色譜峰的保留時間標準樣相一致，并且在扣除背景后的樣品質譜圖中，目標化合物選擇的離子均出現(xiàn)，而且同一檢測批次，對同一化合物，樣品目標化合物的離子豐度比與質量濃度相當?shù)幕|標準溶液相比，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在這種農(nóng)藥或相關化學品。如果不能確證，應重新進樣，以掃描方式（有足夠靈敏度）或采用增加其他確證離子的方式或用其他靈敏度更高的分析儀器來確證。本方法的標準物質GC-MS選擇離子監(jiān)測質量色譜圖參見附錄B。定性時離子豐度比的最大允許偏差單位為百分比離子豐度比＞50＞20～50＞10～20≤10允許相對偏差±20±25±30±50定量外標法定量。試樣溶液的測定將基質匹配目標準工作溶液和試樣溶液依次注入氣相色譜-質譜聯(lián)用儀中，保留時間和離子豐度比定性，測得定量離子的質量色譜圖峰面積，待測樣液中農(nóng)藥的響應值應在儀器檢測的定量測定線性范圍之內(nèi)，超過線性范圍時應根據(jù)測定濃度進行適當倍數(shù)稀釋后再進行分析。平行試驗按以上步驟對同一試樣進行平行試驗測定。空白試驗除不加試樣外，采用完全相同的測定步驟進行操作。結果計算試樣中各農(nóng)藥殘留量以質量分數(shù)ω計，單位為毫克每千克(mg/kg)，按公式(1)或公式(2)計算。 ω=ρ1×A×V3×V1 ω=ρ2×V3×式中：ω—試樣中各被測物殘留量的數(shù)值，單位為毫克每千克(mg/kg)；ρ1—基質匹配標準工作溶液中被測物的質量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升(mg/L)；ρ2—從基質匹配標準工作曲線中得到的試樣溶液中被測物的質量濃度的數(shù)值，單位為毫克每升(mg/L)；A—試樣溶液中被測物的質量色譜圖峰面積；As—基質匹配標準工作溶液中被測物的質量色譜圖峰面積；V1—提取液的體積，單位為毫升(mL)；V2—移取凈化液的體積，單位為毫升(mL)；V3—樣液最終定容體積，單位為毫升(mL)；m—試樣質量的數(shù)值，單位為克(g)。

（資料性）

溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物的相關化學品和內(nèi)標化合物的保留時間、定量離子、定性離子及定量離子與定性離子的比值見表A.1。溴菌腈、氟吡菌酰胺、亞胺唑農(nóng)藥及其代謝物的相關化學品和內(nèi)標化合物的保留時間、定量離子、定性離子及定量離子與定性離子的比值序號農(nóng)藥中文名農(nóng)藥英文名保留時間(min)定量離子定性離子1定性離子2定性離子31溴菌腈bromothalonil6.52766.052.0106.079.02氟吡菌酰胺fluopyram15.994173.