上海中學(xué)2025屆高考生物一模試卷含解析

上海中學(xué)2025屆高考生物一模試卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．楓糖尿病是一種單基因遺傳病，患者氨基酸代謝異常，出現(xiàn)一系列神經(jīng)系統(tǒng)損害的癥狀。下圖是某患者家系中部分成員的該基因帶譜，以下推斷不正確的是A．該病為常染色體隱性遺傳病 B．2號攜帶該致病基因C．3號為雜合子的概率是2/3 D．1和2再生患此病孩子的概率為1/42．引起新冠肺炎的新型冠狀病毒是一種RNA病毒，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．效應(yīng)T細胞的溶酶體分泌酸性水解酶使感染的細胞凋亡B．在大腸桿菌的培養(yǎng)基中加入動物血清可以培養(yǎng)冠狀病毒C．冠狀病毒RNA徹底水解的產(chǎn)物可部分用于DNA的合成D．研究病毒RNA的堿基種類可確定病毒變異株的親緣關(guān)系3．1988年，阿格雷分離出了細胞膜中的水通道蛋白；1998年，麥金龍測出了K+通道立體結(jié)構(gòu)。為此他們獲得了2003年的諾貝爾化學(xué)獎。下列敘述不正確的是（）A．細胞膜中的水通道蛋白等所有蛋白質(zhì)都是可以運動的B．水分子通過水通道蛋白和磷脂分子間隙的運輸方式不同C．一種離子通道蛋白只能運輸同一種離子D．不同細胞運輸同種離子或分子的方式可能不同，蛋白質(zhì)也可以不同4．下列關(guān)于細胞中元素和化合物的說法正確的是（）A．酶都是以碳鏈為骨架的生物大分子 B．鹽析過程中蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化C．細胞中的元素大多以離子形式存在 D．葉綠素含C、O、N、Fe等大量元素5．如圖中的曲線表示人體內(nèi)某抗體在兩種免疫接種方式后的含量變化。下列說法正確的是（）A．疫苗必須通過注射進入人體B．采用方法1會使人體產(chǎn)生細胞免疫應(yīng)答C．方法2中注射的可以是減毒的微生物D．注射天花疫苗屬于方法1的免疫接種6．下列關(guān)于藍藻和黑藻的敘述，正確的是（）A．都是生產(chǎn)者，都有細胞壁B．光合色素都分布在類囊體膜中C．都以DNA為主要的遺傳物質(zhì)D．在細胞分裂時，都會發(fā)生染色質(zhì)和染色體的轉(zhuǎn)化二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）下圖甲表示某豆科植物葉肉細胞中C3的相對含量在夏季某天24h內(nèi)（有一段時間烏云遮蔽）的變化趨勢，圖乙表示該豆科植物種子吸水萌發(fā)過程中CO2釋放速率和O2吸收速率的變化趨勢（以葡萄糖為底物）。據(jù)圖回答問題：（1）該豆科植物生成C3的場所是______。圖甲中AB段C3相對含量不變的原因是_________，CD段C3相對含量增加的原因是______________________，F(xiàn)G段C3相對含量減少加快的原因是____________________，與G點相比，H點[H]含量較__________（填“高”或“低”）。（2）圖乙中，12h時O2的吸收速率：CO2的釋放速率＝3：8，則此時有氧呼吸與無氧呼吸消耗的葡萄糖比值為___________。（3）胚根長出后，CO2釋放速率加快的主要原因是_________________________________。8．（10分）1，4，6-三氯酚主要通過農(nóng)藥施放、污水灌溉進入土壤造成環(huán)境污染，對人類有很強的致畸、致癌和致突變作用。由于氯代酚類物具有很強的毒性，所以對于被1，4，6-三氯酚污染的土壤僅利用土著微生物進行降解非常困難。常采用投加具有高效降解此類有機物的菌種以強化和補充土著微生物數(shù)量不足的問題。（1）為獲得高效降解菌，某科研機構(gòu)選取適量農(nóng)田土壤，加以_______________為唯一碳源進行為期4個月的菌種培養(yǎng)和馴化。馴化期間，每周需要輕輕翻動一次土壤，其目的是_______________________________________。（1）馴化結(jié)束后，將菌種土壤加___________配制成土壤溶液，合理處理后加入配制好的選擇培養(yǎng)基中，37℃條件下培養(yǎng)7d，再將培養(yǎng)基中菌落在無菌條件下用接種環(huán)挑取至50mL的_______培養(yǎng)基中（按物理性質(zhì)分類）進行選擇培養(yǎng)，選擇培養(yǎng)的目的是__________________。（3）為解決因為外界環(huán)境因素（如濕度、光照等）使菌種無法發(fā)揮降解作用的難題?？蒲袡C構(gòu)做了以下操作：①取少量菌液，加入1．5％的海藻酸鈉溶液，將菌液與海藻酸鈉溶液按體積比1：3配制成混合液。②充分混勻后，用注射針頭吸取混合液滴入一定質(zhì)量分數(shù)為4％的______溶液中，形成半透明小球。③取出后用甘露醇溶液沖洗兩次后保存于滅菌袋中，備用。（4）上述技術(shù)是_____________，該技術(shù)既可以使高效降解菌保持活性，反復(fù)使用，又能提高微生物的催化活性和污染物降解速率。如果所使用的海藻酸鈉濃度過高，則會導(dǎo)致__________。9．（10分）回答下列關(guān)于群落結(jié)構(gòu)的問題：（1）一個群落的不同地段往往分布著不同的種群，外形上表現(xiàn)為斑塊相間，這種現(xiàn)象稱為__________。（2）兩個或多個群落之間的過渡區(qū)琙稱為群落交錯區(qū)，是一個種群競爭激烈的區(qū)域。圖甲呈現(xiàn)了不同群落交錯區(qū)的群落組合數(shù)與鳥類建巢數(shù)的關(guān)系。請參照該圖推測，群落交錯區(qū)的種群數(shù)目比單一群落區(qū)___（填“多”或“少”），出現(xiàn)這種現(xiàn)象的原因是_____________。（3）生物種間關(guān)系影響群落的結(jié)構(gòu)。圖乙表示潮間帶常見的浜螺捕食藻類（尤其喜食小型綠藻滸苔）的關(guān)系。請據(jù)圖分析：①當浜螺密度由0逐漸增大到150只/m2左右時，藻類種數(shù)逐漸增多，由此可知，小型綠藻滸苔在與其他藻類的競爭中處于_____________（填“優(yōu)勢”或“劣勢”）地位。②當浜螺密度超過了150只/m2時，藻類種數(shù)下降的原因是________________。10．（10分）斑馬魚的HuC基因在早期胚胎神經(jīng)細胞中選擇性表達，研究人員構(gòu)建了HuC基因的表達載體，并導(dǎo)入到斑馬魚細胞中研究其作用，請回答：（1）為獲取HuC基因，研究人員從早期胚胎神經(jīng)細胞中提取HuC基因的mRNA，通過_________獲得大量的DNA，進而構(gòu)建出HuC基因的______________。（2）DraⅢ，SnaBⅠ等是質(zhì)粒上不同限制酶的切割位點。為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的____________酶進行切割，這樣做的原因是_________。不選擇NotⅠ酶切割的原因是_____________。（3）用Ca2+處理大腸桿菌，大腸桿菌細胞即能夠______________。實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察________________________或者在培養(yǎng)基中添加______________，篩選出導(dǎo)入表達載體的大腸桿菌。11．（15分）阿爾茨海默是一種神經(jīng)退行性疾病，科研人員為了探究發(fā)病機理和治療方案，進行了如下研究。（1）研究發(fā)現(xiàn)，患者腦部的神經(jīng)元數(shù)量及神經(jīng)元之間的_____（結(jié)構(gòu)）明顯減少。進一步研究證實這是由于神經(jīng)元_____（填“胞體”、“樹突”或“軸突”）內(nèi)的核糖體上合成的β﹣淀粉樣蛋白（Aβ）異常積累而引發(fā)細胞損傷導(dǎo)致。科研人員推斷這種異常積累可能與_____Aβ的酶C表達量下降有關(guān)。（2）科研人員提取正常人和患者的神經(jīng)元DNA，對酶C基因進行測序，測序結(jié)果完全一致，說明酶C基因表達量的改變不是_____導(dǎo)致。（3）科研人員分別提取正常人和患者神經(jīng)元的酶C基因啟動子的DNA片段，再分別用具有相同識別序列（CCGG）的HpaⅡ和MspⅠ酶切（但HpaⅡ不能切割甲基化的胞嘧啶）。結(jié)果顯示正常人該DNA片段用MspⅠ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目與用HpaⅡ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目的差值_____（大于/小于）患者的相應(yīng)差值，說明患者細胞中酶C基因啟動子甲基化程度更高。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

分析基因帶譜可知，4號患病，基因帶譜在下面，說明下面的基因為致病基因，則上面的帶譜說明為正?；?，1號含有兩種基因，為致病基因的攜帶者，說明該致病基因最可能位于常染色體上。5號含有兩種基因。3號只含有正常基因，為顯性純合子?！驹斀狻扛鶕?jù)“無中生有為隱性”可判斷該病為隱性遺傳病，根據(jù)基因帶譜，1號和4號有相同的條帶，說明1號也含有致病基因，故該病為常染色體隱性遺傳病，A正確；根據(jù)A項分析可知該病為常染色體隱性遺傳病，4號個體的致病基因有一個來自2號，故2號一定攜帶該致病基因，B正確；根據(jù)基因帶譜可知3號沒有致病基因，故為雜合子的概率是0，C錯誤；根據(jù)A項分析，該病為常染色體隱性遺傳，所以1和2的基因型均為Aa，再生患此病孩子的概率為1/4，D正確。

?故選C。2、C【解析】

本題以新型冠狀病毒為背景考查病毒的培養(yǎng)、研究方法及免疫等知識?！驹斀狻緼、效應(yīng)T細胞與靶細胞密切接觸后引起靶細胞凋亡，效應(yīng)T細胞發(fā)揮細胞免疫功能裂解靶細胞，效應(yīng)T細胞本身沒有分泌水解酶，A錯誤；B、冠狀病毒只能用活細胞培養(yǎng)，不能用普通培養(yǎng)基直接培養(yǎng)，動物血清中不含活細胞，B錯誤；C、冠狀病毒RNA被徹底水解的產(chǎn)物為磷酸、核糖和4種含氮堿基，其中磷酸、腺嘌呤、鳥嘌呤和胞嘧啶可作為合成DNA的原材料，C正確；D、病毒遺傳物質(zhì)的含氮堿基均是4種，病毒變異株的親緣關(guān)系體現(xiàn)在堿基序列方面，而不是堿基的種類，D項錯誤。

故選C。3、A【解析】

水通道蛋白是一類跨越細胞膜磷脂雙分子層的蛋白質(zhì)。水通過磷脂雙分子層的運輸方式屬于自由擴散；水通過水通道蛋白協(xié)助，不消耗能量，運輸方式為協(xié)助擴散?！驹斀狻緼、細胞膜上大多數(shù)蛋白質(zhì)可以運動，A錯誤；B、水直接跨膜的運輸方式為自由擴散，通過水通道蛋白的協(xié)助方式為協(xié)助擴散，所以水分子通過水通道蛋白和磷脂分子間隙的運輸方式不同，B正確；C、通道蛋白具有特異性，一種離子通道蛋白只能運輸同一種離子，C正確；D、葡萄糖進入紅細胞和小腸上皮細胞的方式不同，載體蛋白也不同，D正確。故選A?！军c睛】本題設(shè)置“水通道蛋白”的情境，考查物質(zhì)進出細胞方式。答題關(guān)鍵在于掌握生物膜的結(jié)構(gòu)以及物質(zhì)跨膜運輸方式的區(qū)別與聯(lián)系。4、A【解析】

生物大分子以碳鏈為骨架。鹽析是指在蛋白質(zhì)水溶液中加入某些無機鹽溶液，隨著鹽濃度增大而使蛋白質(zhì)沉淀出來的現(xiàn)象，蛋白質(zhì)可復(fù)原，只是蛋白質(zhì)的溶解度降低。細胞中的元素大多以化合物的形式存在。葉綠素含C、H、O、N、Mg，屬于大量元素?！驹斀狻緼、酶大多是是蛋白質(zhì)，少數(shù)為RNA。蛋白質(zhì)和RNA均為生物大分子，以碳鏈為骨架構(gòu)成，A正確；B、鹽析改變了蛋白質(zhì)溶解度，不改變蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，B錯誤；C、細胞中的元素大多以化合物的形式存在，無機鹽大多以離子形式存在，C錯誤；D、葉綠素含C、H、O、N、Mg，不含F(xiàn)e，并且Fe是微量元素，D錯誤。故選A?！军c睛】答題關(guān)鍵在于掌握生物大分子骨架、蛋白質(zhì)變性、細胞中元素的存在形式、細胞中的無機鹽等有關(guān)知識，建立細胞元素和化合物相關(guān)內(nèi)容的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)。5、C【解析】

分析題圖可知：圖中的曲線顯示了兩種使人體獲得免疫力的方法，其中方法1是注射抗體，屬于被動免疫；方法b是注射抗原，引發(fā)機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)后生成抗體，增強機體的免疫能力。【詳解】A、蛋白質(zhì)類疫苗必須通過注射進入人體，但多糖類疫苗可口服，A錯誤；B、方法1是在患病時給患者注射抗體以消滅抗原，屬于免疫治療，不會引發(fā)人體產(chǎn)生細胞免疫應(yīng)答，B錯誤；C、方法2中注射的是抗原，抗原可以是減毒或滅活的微生物，C正確；D、注射天花疫苗屬于注射抗原，對應(yīng)圖中的方法2，D錯誤。故選C。【點睛】解答此題需要掌握免疫學(xué)原理的應(yīng)用，能分析曲線圖，明確方法1和方法2的作用及應(yīng)用。6、A【解析】

藍藻是原核生物，沒有被核膜包圍的細胞核，沒有復(fù)雜的細胞器，只有核糖體一種細胞器，含有葉綠素和藻類素，能進行光合作用合成有機物，屬于生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)者；黑藻是真核生物，有成形的細胞核，有復(fù)雜的細胞器，能進行光合作用合成有機物，也屬于生產(chǎn)者?！驹斀狻緼、藍藻是原核生物，黑藻是真核生物，都能進行光合作用，都具有細胞壁，都是生產(chǎn)者，A正確；B、藍藻的光合色素分布在質(zhì)膜上，B錯誤；C、細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)就是DNA，無主次之分，C錯誤；D、藍藻無染色體，D錯誤。故選A?！军c睛】本題考查原核細胞和真核的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，首先明確藍藻是原核生物，黑藻是真核生物；其次要求識記原核細胞和真核細胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)的異同，能運用所學(xué)的知識準確判斷各選項。二、綜合題：本大題共4小題7、葉綠體基質(zhì)AB段沒有光照，不進行光合作用烏云遮蔽，光照減弱，[H]和ATP合成減少，C3還原減弱，而CO2固定正常進行溫度較高，氣孔關(guān)閉，CO2供應(yīng)不足，CO2固定減弱，而C3還原正常進行低1:5胚根沖破種皮，O2供應(yīng)增多，有氧呼吸速率加快（合理即可）【解析】

分析圖甲：影響光合作用的環(huán)境因素包括光照強度、二氧化碳濃度、溫度等，由于該圖表示夏季的某天，因此影響該植物光合作用的環(huán)境因素主要為光照強度和二氧化碳濃度。由于題干中提出“有一段時間烏云遮蔽”，這會導(dǎo)致光照強度減弱，光反應(yīng)減弱，將抑制暗反應(yīng)過程中三碳化合物的還原，而二氧化碳固定仍在進行，因此三碳化合物的含量將上升，對應(yīng)曲線中的CD段。分析圖乙：種子萌發(fā)過程中，當胚根未長出時，種子不能進行光合作用，進行細胞呼吸作用，消耗細胞中的有機物，為種子萌發(fā)提供能量和營養(yǎng)，有機物的總量下降。當胚根長出后，種子可以從土壤中獲取營養(yǎng)物質(zhì)。細胞呼吸包括有氧呼吸和無氧呼吸，有氧呼吸吸收的氧氣量等于釋放的二氧化碳量。根據(jù)圖中的二氧化碳和氧氣量的變化，可以判斷12h～24h，種子主要進行無氧呼吸，胚根長出后，種子的有氧呼吸速率明顯增大。【詳解】（1）CO2固定形成C3，場所是葉綠體基質(zhì)。AB段沒有光照，不進行光合作用，沒有C3合成與還原，故相對含量不變。CD段，上午8時左右，C3相對含量增加，可能是烏云遮蔽，光照減弱，[H]和ATP合成減少，C3還原減弱，而CO2固定正常進行，導(dǎo)致C3相對含量增加。FG段，13時左右，C3相對含量減少加快，可能是溫度較高，細胞失水，導(dǎo)致氣孔關(guān)閉，CO2供應(yīng)不足，CO2固定減弱，而C3還原正常進行。與G點相比，H點氣孔已打開，C3形成增多，還原C3時[H]消耗增加，且H點光照弱，光反應(yīng)弱，[H]含量較低，所以與G點相比，H點[H]含量較低。（2）有氧呼吸過程中物質(zhì)對應(yīng)關(guān)系:C6H12O6～6O2～6CO2，無氧呼吸過程中物質(zhì)對應(yīng)關(guān)系:C6H12O6～2CO2，12h時O2的吸收速率∶CO2的釋放速率＝3∶8，可判斷有氧呼吸與無氧呼吸消耗的葡萄糖比為3/6∶5/2=1∶5。（3）胚根長出后，O2供應(yīng)增加，有氧呼吸速率加快，CO2釋放速率加快?！军c睛】本題結(jié)合曲線圖，考查細胞呼吸的過程及意義以及影響光合作用的環(huán)境因素等，要求考生識記植物細胞有氧呼吸和無氧呼吸的總反應(yīng)式，能根據(jù)曲線圖中信息準確判斷相關(guān)問題，屬于考綱識記和理解層次的考查。8、1，4，6-三氯酚補充氧氣，同時讓培養(yǎng)的微生物充分接觸營養(yǎng)物質(zhì)無菌水液體增加1，4，6-三氯酚降解菌濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的菌種CaCl1固定化細胞技術(shù)難形成半透明小球【解析】

由題可知1，4，6-三氯酚降解菌分離主要步驟：土壤取樣（富含1，4，6-三氯酚土壤）→選擇培養(yǎng)（增大降解菌含量）→涂布培養(yǎng)（鑒別）→純化培養(yǎng)（分離出降解菌）。固定化細胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)的方法將細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)?！驹斀狻浚?）投放具有高效降解1，4，6-三氯酚的菌種，應(yīng)以1，4，6-三氯酚為唯一碳源。定期翻動土壤的目的是補充氧氣，同時讓微生物充分接觸營養(yǎng)物質(zhì)。（1）菌種土壤加無菌水配制成土壤溶液；50mL的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，選擇培培養(yǎng)目的是增加1，4，6-三氯酚降解菌濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需的菌種。（3）用注射針頭吸取混合液滴入4%的CaCl1溶液使膠體聚沉，形成穩(wěn)定的半透明小球。（4）將菌種包埋在海藻酸鈉中的技術(shù)是固定化細胞技術(shù)。如果所使用的海藻酸鈉濃度過高，則容易出現(xiàn)拖尾狀的凝膠珠，如果所使用的海藻酸鈉濃度過低，則形成的半透明小球所包埋的菌種數(shù)量過少?！军c睛】答題關(guān)鍵在于掌握微生物培養(yǎng)技術(shù)和細胞固定化技術(shù)，明確各技術(shù)的流程、目的和注意事項。9、鑲嵌分布多群落交錯區(qū)可包含兩個或多個重疊群落中的大多數(shù)種群優(yōu)勢滸苔供不應(yīng)求時，浜螺取食其他藻類，從而使藻類種數(shù)減少【解析】

群落結(jié)構(gòu)的類型：主要包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)。（一）垂直結(jié)構(gòu)：（1）概念：指群落在垂直方向上的分層現(xiàn)象。（2）原因：①植物的分層與對光的利用有關(guān)，群落中的光照強度總是隨著高度的下降而逐漸減弱，不同植物適于在不同光照強度下生長。②動物分層主要是因群落的不同層次提供不同的食物，其次也與不同層次的微環(huán)境有關(guān)。（二）水平結(jié)構(gòu)：（1）概念：指群落中的各個種群在水平狀態(tài)下的格局或片狀分布。（2）原因：由于在水平方向上地形的變化、土壤濕度和鹽堿度的差異、光照強度的不同、生物自身生長特點的不同，以及人與動物的影響等因素，不同地段往往分布著不同的種群，同一地段上種群密度也有差異，它們常呈鑲嵌分布?！驹斀狻浚?）不同地段往往分布著不同的種群，同一地段上種群密度也有差別，常常呈鑲嵌分布，這是群落的水平結(jié)構(gòu)。（2）兩個或多個群落之間的過渡區(qū)域稱為群落交錯區(qū)，是一個種群競爭激烈的區(qū)域。由圖甲可見，某一地段上群落組合數(shù)越多，鳥類建的巢數(shù)就越多，由此推測鳥的種類數(shù)也越多，推而廣之，其他種群數(shù)也越多，原因是該地段均含了兩個或多個重疊群落中的大多數(shù)種群。（3）①浜螺捕食藻類，但更喜歡取食藻類旳小型綠藻滸苔，即浜螺所處環(huán)境既有滸苔又有其他藻類時，浜螺會首選滸苔取食。正因為如此，隨著浜螺密度由0逐漸增加到150只/m2左右時，滸苔被浜螺捕食，為其他藻類的生存提供了空間等條件，從而使藻類的種類增加，由此可見，滸苔在與其他藻類競爭中，占優(yōu)勢地位；②當浜螺密度超過150只/m2時，其喜食的滸苔幾乎取食盡了，只能轉(zhuǎn)向取食其他藻類了，因此，藻類的種數(shù)隨著浜螺的密度繼續(xù)增大而減少?！军c睛】本題主要考查群落得結(jié)構(gòu)，意在考查考生識記所列知識點，并能運用所學(xué)知識做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。10、逆轉(zhuǎn)錄和PCR技術(shù)擴增cDNA文庫EcoRⅠ酶和BamHⅠ可以防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接破壞標記基因無法篩選（且沒有啟動子）吸收周圍環(huán)境中的DNA分子表達的綠色熒光蛋白菌落卡那霉素【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）從早期胚胎神經(jīng)細胞中提取HuC基因的mRNA，通過逆轉(zhuǎn)錄過程合成目的基因，并通過PCR技術(shù)在體外擴增可獲得大量的目的基因，進而構(gòu)建出HuC基因的cDNA文庫。（2）構(gòu)建基因表達載體時，不能破壞運載體上的啟動子、復(fù)制原點，以及運載體上需要保留標記基因，為了防止目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接，常用不同的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，結(jié)合圖示中各種限制酶的酶切位點可知，為獲得HuC基因——綠色熒光蛋白基因的表達載體，需要對HuC基因和質(zhì)粒選用圖中的EcoRⅠ酶和BamHⅠ酶進行切割?？敲顾乜剐曰驗闃擞浕颍粲肗otⅠ酶切割，將會導(dǎo)致卡那霉素抗性基因被破壞，且切割后的質(zhì)粒會失去啟動子，使基因表達載體中缺少標記基因無法選擇，且沒有啟動子無法轉(zhuǎn)錄，所以不選擇NotⅠ酶切割質(zhì)粒。（3）用Ca2+處理大腸桿菌使之成為感受態(tài)細胞，易于吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。由于綠色熒光蛋白表達后會發(fā)綠光，所以實驗過程中可以采用在熒光顯微鏡下觀察表達的綠色熒光蛋白菌落或者在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選出導(dǎo)入表達載體的大腸桿菌?！军c睛】