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3.3DNA的復(fù)制怎樣證明DNA是半保留復(fù)制的?DNA的半保留復(fù)制對遺傳信息的穩(wěn)定傳遞有什么意義?DNA的復(fù)制過程是怎樣的?本
節(jié)
聚
焦溫故啟新Q1:什么是遺傳現(xiàn)象Q2:生物具有遺傳現(xiàn)象的原因是什么親子代性狀上的相似性。生物通過生殖產(chǎn)生后代,才能表現(xiàn)出遺傳現(xiàn)象。Q3:親代在生殖過程中傳遞給子代什么物質(zhì)或是結(jié)構(gòu),使子代表現(xiàn)出與親代相似的性狀呢Q4:為什么親代將DNA傳遞給子代,能夠使子代表現(xiàn)出與親代相似的性狀Q5:子代為什么能獲得與親代相同的DNADNA子代獲得的DNA與親代相似遺傳的核心是:親代DNA復(fù)制后傳遞給子代。思考:如何知道細(xì)胞增殖過程中DNA發(fā)生了自我復(fù)制資料1:1956年,美國科學(xué)家科恩伯格在試管中加入大腸桿菌提取液、合成DNA的原料——4種脫氧核苷酸(利用放射性同位素進(jìn)行標(biāo)記),再加入極微量的“模板DNA”,保溫30min。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有新的DNA分子產(chǎn)生,其證據(jù)是“放射性標(biāo)記”已進(jìn)入DNA。提純新合成的DNA,測定其堿基組成,與加入的微量“模板DNA分子”完全相同。同時發(fā)現(xiàn)了催化DNA合成的DNA聚合酶。大腸桿菌提取液可以提供合成DNA所需的酶,大腸桿菌的DNA作為模板,結(jié)果是合成與其DNA相同的新DNA?;顒?:請根據(jù)日常生活經(jīng)驗,描述“復(fù)制”的定義。思考:①2個DNA分子相同或者不同,體現(xiàn)在DNA結(jié)構(gòu)的哪部分?
一、推理構(gòu)建DNA復(fù)制概念復(fù)制是以原有樣品為模板,制作出1份或者多份與原有樣品相同的產(chǎn)品。P55DNA復(fù)制:以親代DNA為模板,合成完全相同的子代DNA的過程。②據(jù)此推測DNA分子復(fù)制的關(guān)鍵步驟是?DNA復(fù)制的關(guān)鍵在于如何讀取DNA分子堿基的排列順序。③根據(jù)堿基對排列在內(nèi)側(cè)這一特點,請推測復(fù)制前DNA分子還需要發(fā)生什么變化?堿基對的數(shù)量和排列順序。DNA分子雙螺旋結(jié)構(gòu)得先解旋。資料2:沃森和克里克提出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型之后,又提出DNA復(fù)制的假說。他們推測:在DNA復(fù)制時,氫鍵斷裂,DNA雙螺旋解開,解開的2條單鏈分別作為復(fù)制的模板合成子代鏈。新形成的2個DNA分子,各有1條鏈來自親代DNA,另1條鏈?zhǔn)切潞铣傻?,這種復(fù)制的機(jī)制被稱為半保留復(fù)制。思考:DNA分子是以何種方式合成的,從而達(dá)成“復(fù)制”的結(jié)果呢?5’3’5’3’雙螺旋解開氫鍵斷裂3’5’5’3’模板模板子鏈子鏈二.對DNA復(fù)制方式的推測5’3’5’3’5’3’3’5’3’5’5’3’半保留復(fù)制+5’3’5’3’全保留復(fù)制5’3’5’3’+5’3’5’3’都是新鏈如何證明哪種假說正確?1、從子代DNA兩條鏈的來源區(qū)分:若子代DNA兩條鏈____________________,為半保留復(fù)制若子代DNA兩條鏈____________________,為全保留復(fù)制都是母鏈或都是子鏈一條母鏈一條子鏈2、如何區(qū)分母鏈和子鏈?同位素標(biāo)記法三、證明DNA半保留復(fù)制的實驗——假說-演繹法提出問題DNA以什么方式復(fù)制?作出假說半保留復(fù)制全保留復(fù)制演繹推理關(guān)鍵思路:通過實驗區(qū)分親代和子代的DNA。同位素標(biāo)記放射性同位素穩(wěn)定同位素3H14C32P18O15N檢測放射性檢測密度或相對分子質(zhì)量科學(xué)方法:同位素標(biāo)記法(同位素示蹤法):用物理性質(zhì)特殊的同位素來標(biāo)記化學(xué)反應(yīng)中原子的去向。標(biāo)記DNA研究DNA復(fù)制方式。P二543H標(biāo)記亮氨酸,研究分泌蛋白的合成與運輸過程。14C標(biāo)記CO2,研究暗反應(yīng)中碳的轉(zhuǎn)移途徑。標(biāo)記DNA,噬菌體的遺傳物質(zhì)標(biāo)記H2O、CO2研究光合產(chǎn)物O2中氧原子的來源。P二45P一102P一103P一51密度梯度離心通過超離心機(jī)對某一介質(zhì)(氯化銫等)
長時間加一個離心力,使其在離心管內(nèi)從液面到底部出現(xiàn)一定的密度梯度。15N和14N是氮元素的兩種穩(wěn)定同位素,15N的DNA比14N的DNA密度大。利用離心技術(shù)可在試管中分開不同氮元素的DNA。思考:如何標(biāo)記?15N標(biāo)記母鏈,14N標(biāo)記子鏈(P54)①如果親代的DNA兩條鏈用15N標(biāo)記,然后放在14N
的原料中復(fù)制,則親代、子一代、子二代DNA分別怎樣?②密度梯度離心的結(jié)果
親代F1F2輕中重
親代F1F2輕中重演繹推理子一代子二代親代半保留復(fù)制子一代子二代親代全保留復(fù)制材料:
。方法:
。過程:用
標(biāo)記的NH4Cl培養(yǎng)大腸桿菌多代,獲得
的DNA,移到
的培養(yǎng)基中培養(yǎng),在
收集大腸桿菌并提取DNA進(jìn)行
,記錄離心后試管中DNA的
。結(jié)果:離心后共出現(xiàn)
條DNA帶。結(jié)論:DNA的復(fù)制方式
是
。大腸桿菌(繁殖快,20min一代)同位素標(biāo)記法密度梯度離心法15N15N/15N14N不同時刻離心位置三半保留復(fù)制驗證假說1958年,美國生物學(xué)家梅塞爾森和斯塔爾小
結(jié)提出問題作出假設(shè)得出結(jié)論演繹推理實驗驗證證明DNA半保留復(fù)制的實驗克里克和沃森提出DNA以半保留方式進(jìn)行復(fù)制(全保留、半保留)推理、探究幾種復(fù)制模式下得到子代DNA的可能情況,預(yù)測可能實驗結(jié)果DNA以半保留方式進(jìn)行復(fù)制證明DNA半保留復(fù)制的實驗(梅塞爾森和斯塔爾)假說演繹法資料3:赫伯特·泰勒利用蠶豆(2N=12)根尖細(xì)胞作為實驗材料,用放射性同位素H標(biāo)記細(xì)胞染色體DNA(標(biāo)記雙鏈),然后讓細(xì)胞在不含3H的培養(yǎng)液中進(jìn)行有絲分裂,經(jīng)放射自顯影顯示實驗結(jié)果,觀察染色體被標(biāo)記的情況。
請根據(jù)自己的論點以圖示方式預(yù)測實驗結(jié)果:畫出有絲分裂過程中第1次有絲分裂中期和第2次有絲分裂中期每條染色體的2條姐妹單體被標(biāo)記的情況。思考:真核生物的DNA復(fù)制是否也是半保留復(fù)制3H有放射性1H無放射性說明染色體第一次復(fù)制:每條染色體都帶放射性,但只有一條姐妹染色體有放射性。第二次復(fù)制半保留復(fù)制復(fù)制復(fù)制復(fù)制著絲粒分裂著絲粒分裂第一次復(fù)制:每條染色體、姐妹染色體都帶放射性第二次復(fù)制:每條染色體都帶放射性,但只有一條姐妹染色體有放射性。細(xì)胞分裂后期,著絲粒分裂后,姐妹染色單體分開,每條子染色體移向細(xì)胞的哪一極具有“隨機(jī)性”。
實驗結(jié)果與半保留復(fù)制預(yù)期的情況完全符合,證明了真核細(xì)胞的DNA復(fù)制也符合半保留復(fù)制。四、DNA復(fù)制的過程1.概念:以
為模板合成
的過程。
2.時間:
。
3.場所:①真核生物:
(主要)
和
。②原核生物:
(主要),質(zhì)粒(細(xì)胞質(zhì))。③DNA病毒:
。親代DNA子代DNA細(xì)胞分裂前的間期細(xì)胞核線粒體葉綠體擬核活的宿主細(xì)胞內(nèi)提取信息:請同學(xué)們自主閱讀教材P55-56,思考回答下列問題。
4.簡述DNA復(fù)制過程怎么進(jìn)行5.DNA復(fù)制過程需要哪些條件6.DNA復(fù)制過程有何特點7.DNA為什么可以精確復(fù)制?8.精確復(fù)制有何生物學(xué)意義?⑴解旋:在能量的驅(qū)動下,解旋酶將DNA雙螺旋的兩條鏈解開。斷開氫鍵CGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATACGTATACGGCTAGCCGTA3'5'CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ATP解旋酶課本P55最后1段
解旋:細(xì)胞內(nèi):解旋酶使氫鍵斷裂
體
外:高
溫使氫鍵斷裂4.DNA復(fù)制過程⑵以母鏈為模板進(jìn)行堿基配對:
形成氫鍵CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT
游離的脫氧核苷酸按堿基互補配對原則隨機(jī)地與兩條母鏈的堿基配對,確定子鏈的脫氧核苷酸排列順序。4.DNA復(fù)制過程課本P55最后1段⑶合成子鏈:
形成磷酸二酯鍵CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTTACGCAAGCTAGTCATTADNA聚合酶5'3'TATGCATGATCGAGCTT5'3'ATPATP在DNA聚合酶的催化下從子鏈的5'端把子鏈的脫氧核苷酸聚合成脫氧核苷酸鏈。DNA聚合酶:只能從5
→3
方向聚合DNA子鏈。母鏈延伸方向:3’端→5’端
子鏈延伸方向:5’端→3’端
DNA聚合酶作用:將單個的脫氧核苷酸連接成脫氧核苷酸鏈
4.DNA復(fù)制過程課本P55最后1段⑷形成子代DNA分子:每條新鏈與其對應(yīng)的模板鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)。重新螺旋CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATAA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT5'3'TAGCCGTATAGCCGATAT3'5'TTACGCGTATATATA5'3'4.DNA復(fù)制過程課本P55最后1段拓展資料:為什么DNA的復(fù)制需要RNA引物?ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC5’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’GGAUCG5’AUCGCG5’RNA引物ⅠRNA引物ⅡTAGCGCTATCGCATCGACGCT3’ATAGCGTAGCTGCGACCTAGC3’DNA聚合酶特點:不能從頭合成DNA,而只能延伸3’-端DNA鏈。
因此,DNA復(fù)制需要引物,為DNA聚合酶提供3’。DNA的合成方向:總是從子鏈的5‘端向3’端延伸。5.DNA復(fù)制過程需要的條件:(2)原料:四種脫氧核苷酸(A、G、C、T)
(3)酶:解旋酶、DNA聚合酶等(4)能量:ATP(物質(zhì))(1)模板:親代DNA的兩條鏈(兩條母鏈)6.DNA復(fù)制過程的特點:①邊解旋邊復(fù)制
(從過程上看)②半保留復(fù)制
(從結(jié)果上看)DNA聚合酶a和c,b和d的堿基排列順序相同。DNA獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu)為復(fù)制提供精確的模板。復(fù)制過程嚴(yán)格遵循堿基互補配對原則,保證了復(fù)制的準(zhǔn)確進(jìn)行。a和b,c和d的堿基排列順序互補。7.DNA可以精確復(fù)制的原因?1)圖1中的酶1和酶2分別是什么酶?2)圖1中的a、b、c、d四條脫氧核苷酸鏈中,哪些鏈的堿基排列順序是相同的?哪些鏈的堿基排列順序是互補的?解旋酶微視頻:DNA分子的半保留復(fù)制過程2.已知果蠅的基因組大小為1.8×108bp(bp表示堿基對),真核細(xì)胞中DNA復(fù)制的效率一般為50~100bp/s。下圖為果蠅DNA的電鏡照片,圖中的泡狀結(jié)構(gòu)叫作DNA復(fù)制泡,是DNA上正在復(fù)制的部分。請你推測果蠅DNA形成多個復(fù)制泡的原因。由此加快DNA復(fù)制的速率,為細(xì)胞分裂做好物質(zhì)準(zhǔn)備。拓展應(yīng)用
教材P56變式:下面是DNA復(fù)制的有關(guān)圖示。A→B→C表示大腸桿菌的DNA復(fù)制。D→F表示哺乳動物的DNA復(fù)制。圖中黑點表示復(fù)制起點,“→”表示復(fù)制方向,“?”表示時間順序。原核生物:單起點雙向復(fù)制真核生物:多起點雙向復(fù)制
具有互補堿基序列的DNA單鏈,可以通過堿基對之間形成氫鍵等,形成穩(wěn)定的雜合雙鏈區(qū)。不能互補的區(qū)域則會形成環(huán)。
常作為鑒定不同物種間親緣關(guān)系遠(yuǎn)近的證據(jù)。雜合雙鏈區(qū)的比例越大,則親緣關(guān)系越近。DNA分子雜交技術(shù)教材P62科學(xué).技術(shù).社會分析甲乙丙三種生物的親緣關(guān)系3.如圖為DNA分子的復(fù)制過程,據(jù)圖分析回答下列問題:①圖示中的解旋酶和DNA聚合酶各自的作用是_____________________________________________
。②蛙的紅細(xì)胞和哺乳動物成熟的紅細(xì)胞,是否都能進(jìn)行圖示過程?說明理由:__________________________________________________________________________________________________________________________。前者使氫鍵打開,DNA雙鏈解旋;后者催化形成磷酸二酯鍵,從而形成新的子鏈蛙的紅細(xì)胞進(jìn)行無絲分裂,可進(jìn)行DNA分子的復(fù)制;哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核,也沒有各種細(xì)胞器,不能進(jìn)行DNA分子的復(fù)制五、DNA的復(fù)制過程中相關(guān)計算規(guī)律假設(shè)將一個全部被15N標(biāo)記的雙鏈DNA分子(親代)轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng)n代,結(jié)果如下:(1)DNA分子數(shù)①子n代DNA分子總數(shù)為______個。②含15N的DNA分子數(shù)為______個。③含14N的DNA分子數(shù)為______個。④只含15N的DNA分子數(shù)為______個。⑤只含14N的DNA分子數(shù)為_________個。
⑦脫氧核苷酸鏈總數(shù)
,
⑧含15N的鏈為_____________,
含14N的鏈為_____________。2n22n0(2n-2)2n+122n+1-2五、DNA的復(fù)制過程中相關(guān)計算規(guī)律假設(shè)將一個全部被15N標(biāo)記的雙鏈DNA分子(親代)轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng)n代,結(jié)果如下:計算1:某DNA分子共有C100個,則此DNA分子復(fù)制3次需胞嘧啶脫氧核苷酸個?2.某DNA分子含腺嘌呤100個,占堿基總數(shù)的20%,若其復(fù)制2次,則需胞嘧啶多少個?700450復(fù)制過程堿基數(shù)計算已知某DNA分子堿基數(shù)為a,T有m個,其連續(xù)復(fù)制n次,則需游離胸腺嘧啶脫氧核苷酸__________個;游離的胞嘧啶脫氧核苷酸________________個(2n-1)·m(2n-1)·(a/2–m)一、概念檢測
課本p561.DNA復(fù)制是在為細(xì)胞分裂進(jìn)行必要的物質(zhì)準(zhǔn)備。據(jù)此判斷下列相關(guān)表述是否正確。(1)DNA復(fù)制與染色體復(fù)制是分別獨立進(jìn)行的。(
)
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