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文檔簡介
四川省宜賓市敘州區(qū)二中高三第四次模擬考試新高考生物試卷注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試題卷上答題無效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.兩對相對性狀的遺傳實驗中,可能具有1:1:1:1比例關(guān)系的是()①F1雜種自交后代的性狀分離比②F1產(chǎn)生配子類別的比例③F1測交后代的表現(xiàn)型比例④F1測交后代的基因型比例⑤F1自交后代的基因型比例A.①②④ B.②④⑤ C.②③⑤ D.②③④2.下列有關(guān)細(xì)胞生命歷程的敘述,正確的是()A.動物細(xì)胞分裂能力的強弱與細(xì)胞的壽命呈負(fù)相關(guān)B.細(xì)胞生長使細(xì)胞體積增大,提高了物質(zhì)運輸效率C.白細(xì)胞比紅細(xì)胞凋亡速率快,有助于內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定D.人體正常細(xì)胞中不存在與癌變有關(guān)的基因3.下列關(guān)于育種的敘述,正確的是()A.雜交育種的原理是染色體變異B.多倍體育種得到的個體都能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂C.單倍體育種比誘變育種的目的性強,比雜交育種的年限短D.通過人工誘變,人們有目的地選育新品種,能避免育種的盲目性4.澳大利亞一項新研究發(fā)現(xiàn),女性在懷孕期間除多吃富含蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的食物外,還應(yīng)多吃富含植物纖維素的食物,這有利于胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.蛋白質(zhì)、核酸和纖維素都以碳鏈作為基本骨架B.組成人體蛋白質(zhì)的某些氨基酸必須從食物中獲得C.人體內(nèi)的細(xì)胞能分泌分解纖維素的酶將其水解為單糖D.膽固醇既參與人體血脂的運輸,也參與細(xì)胞膜的構(gòu)成5.蜜蜂中的蜂王和工蜂都由受精卵發(fā)育形成,屬于卵式生殖;雄蜂由卵細(xì)胞發(fā)育形成,屬于孤雌生殖。一個基因型為AaBb(A、a基因位于1號染色體上,B、b基因位于2號染色體上)的蜂王與基因型為ab的雄蜂交配,生出了一只基因型為AA而缺少B、b基因的雄蜂。僅考慮染色體數(shù)目變異,下列可產(chǎn)生該基因型為AA的雄蜂的組合是()①1號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離②1號染色體在減數(shù)第二次分裂時未分離③2號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離④2號染色體在減數(shù)第二次分裂時正常分離A.①③ B.①④ C.②④ D.②③6.無子西瓜的培育過程如圖所示,下列敘述正確的是()A.①過程只能用秋水仙素處理,它的作用主要是抑制細(xì)胞有絲分裂前期紡錘體的形成B.由三倍體種子發(fā)育成無子西瓜,與中心體有密切的關(guān)系C.四倍體西瓜與二倍體西瓜不存在生殖隔離,它們屬于同一物種D.上圖四倍體植株所結(jié)的西瓜,胚細(xì)胞內(nèi)含有3個染色體組7.高密度水體養(yǎng)殖常會引起池塘水體富營養(yǎng)化,影響?zhàn)B殖。如圖為利用稻田生態(tài)系統(tǒng)凈化魚塘尾水的示意圖,箭頭所指為水流方向。相關(guān)敘述錯誤的是()A.魚塘富營養(yǎng)化水為水稻生長提供了一定的N、P等元素B.魚類與稻田生態(tài)系統(tǒng)的其他生物存在捕食、競爭的關(guān)系C.稻田生態(tài)系統(tǒng)凈化魚塘尾水的過程實現(xiàn)了水資源循環(huán)利用D.魚塘尾水中的可溶性有機物能被稻田中的植物直接吸收利用8.(10分)下列關(guān)于tRNA的敘述,正確的是()A.tRNA的組成單位是核糖核苷酸,含有C、H、O、N四種元素B.通常情況下,在翻譯過程中,一個tRNA只能使用一次C.tRNA是單鏈結(jié)構(gòu),但結(jié)構(gòu)中存在堿基互補配對D.tRNA上的密碼子可用于識別氨基酸二、非選擇題9.(10分)科研人員對于植物光合作用與呼吸作用的研究一直沒有停止過,最近科研人員又有了新發(fā)現(xiàn)。發(fā)現(xiàn)植物的細(xì)胞呼吸除具有與動物細(xì)胞相同的途徑外,還包括另一條借助交替氧化酶(AOX)的途徑。(1)交替氧化酶(AOX)分布在植物細(xì)胞線粒體內(nèi)膜上,它可以催化O2與[H]生成水,并使細(xì)胞呼吸釋放的能量更多地轉(zhuǎn)化為_________,導(dǎo)致生成ATP所占的比例下降,在寒冷早春,某些植物的花細(xì)胞中AOX基因的表達(dá)會_________,有利于花序溫度升高,吸引昆蟲傳粉。(2)AOX途徑可能與光合作用有關(guān),科研人員對此進(jìn)行了深入研究。①光合作用過程中,葉綠體中的色素主要吸收可見光中的_________,并將其轉(zhuǎn)化為_________,再經(jīng)過暗反應(yīng),最終儲存在有機物中。根據(jù)這個原理,請解釋“大樹底下無豐草”這一現(xiàn)象出現(xiàn)的原因:_______________________________________。②科研人員將正常光照下發(fā)育的葉片分成4組,用AOX途徑抑制劑處理A組和C組葉片的左側(cè),然后將4組葉片離體,葉柄插入盛滿水的試管中,左側(cè)置于正常光照下,右側(cè)置于正常光照或高光下(圖1),40分鐘后測量葉片左側(cè)光合色素的光能捕獲效率(圖2)。通過A、B、C、D四組對比說明:AOX途徑的作用是_________,利于光合作用進(jìn)行,在周圍受到_________(選填“正常光照”或“高光”)照射的葉片組織中作用更明顯。10.(14分)在適宜溫度和CO2濃度條件下,某實驗小組測得某森林林冠層4種主要喬木的幼苗葉片的生理指標(biāo)如圖所示。其中光補償點是指光合速率等于呼吸速率時的光照強度,光飽和點是指達(dá)到最大光合速率所需的最小光照強度?;卮鹣铝杏嘘P(guān)問題。(1)光反應(yīng)階段光合色素吸收的光能有兩方面用途:一是將水分解成氧氣和[H];二是___________________________。(2)當(dāng)光照強度為39μmol·m-2·s-1時,石櫟葉肉細(xì)胞消耗ADP的場所有___________________________。(3)研究的4種植物中,最耐陰的是___________________________,判斷的依據(jù)是:_________________________________________________________________________________。11.(14分)基因定點整合可替換特定基因,該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的,將正常PKU基因定點整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上,替換突變基因,可用來研究該病的基因治療過程。定點整合的過程是:從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2,根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2,再將兩者分別與基因、連接,中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因,構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換,導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換,如圖所示。(1)構(gòu)建重組載體時,常用的工具酶有________。該實驗用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠,除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外,還因為胚胎干細(xì)胞_________。(2)為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞,可將小鼠囊胚中的_________取出,并用_________處理使其分散成單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長,這種現(xiàn)象稱為___________。(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時,會出現(xiàn)PKU基因錯誤整合。錯誤整合時,載體的兩個中至少會有一個與一起整合到染色體DNA上。已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性,、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),在雙重選擇下存活下來的是__________的胚胎干細(xì)胞,理由是_________。(4)將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠,從個體生物學(xué)水平檢測,若小鼠__________,說明PKU基因成功表達(dá)。12.菠菜為雌雄異株的二倍體植物,屬于XY型性別決定。性染色體上的基因有些僅位于X染色體上,有些僅位于Y染色體上,而有些位于X染色體上的基因在Y染色體上也存在相應(yīng)的等位基因。菠菜抗病和感病為一對相對性狀,由等位基因A、a控制。研究人員利用菠菜純合抗病品種與純合感病品種進(jìn)行雜交試驗,如下表。請回答:雜交組合親本表現(xiàn)型及比例一抗病(♀)×感?。ā幔┛共。ā猓嚎共。ā幔?1:1二感?。ā猓量共。ā幔┛共。ā猓嚎共。ā幔?1:1(1)據(jù)雜交結(jié)果分析,菠菜抗病性狀的遺傳不屬于伴X染色體遺傳,理由是______________。(2)利用已有的菠菜純合品種及F1,設(shè)計通過一次測交實驗判斷菠菜抗病性狀是否屬于常染色體遺傳的方案。寫出測交親本組合,并預(yù)期支持菠菜抗病性狀不屬于常染色體遺傳的結(jié)果。①測交親本組合:____________×____________。②支持菠菜抗病性狀不屬于常染色體遺傳的結(jié)果是______________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】
閱讀題干可知,本題是與兩對相對性狀的遺傳實驗的比例相關(guān)的題目,根據(jù)選項涉及的內(nèi)容回憶相關(guān)的比例關(guān)系進(jìn)行判斷。【詳解】①在兩對相對性狀的遺傳實驗中,F(xiàn)1雜種自交后代的性狀分離比為9:3:3:1,①錯誤;②F1產(chǎn)生配子類別的比例是1:1:1:1,②正確;③F1測交后代的表現(xiàn)型比例是1:1:1:1,③正確;④F1測交后代的基因型比例是1:1:1:1,④正確;⑤F1自交后代基因型的比例為1:2:2:4:1:2:2:1:1,⑤錯誤。綜上所述,A、B、C均錯誤,D正確。故選D。2、C【解析】
1、細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞自動結(jié)束生命的過程,貫穿于整個生命歷程。2、細(xì)胞分化是指在個體發(fā)育中,由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代,在形態(tài),結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。3、癌細(xì)胞的主要特征:(1)無限增殖;(2)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化;(3)細(xì)胞表面發(fā)生變化?!驹斀狻緼、細(xì)胞的壽命與分裂能力之間沒有對應(yīng)關(guān)系,即細(xì)胞的壽命與細(xì)胞分裂無直接關(guān)系,A錯誤;B、細(xì)胞生長使細(xì)胞體積增大,相對表面積減小,物質(zhì)運輸效率降低,B錯誤;C、細(xì)胞凋亡的速率與它們的功能有關(guān)系,如白細(xì)胞的功能是吞噬病菌等,所以其凋亡的速率很快,有助于內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,C正確;D、人體正常細(xì)胞中存在與癌變有關(guān)的原癌基因和抑癌基因,D錯誤。故選C。3、C【解析】
四種育種方法的比較如下表:雜交育種誘變育種單倍體育種多倍體育種方法雜交→自交→選優(yōu)輻射誘變、激光誘變、化學(xué)藥劑處理花藥離體培養(yǎng)、秋水仙素誘導(dǎo)加倍秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗原理基因重組基因突變?nèi)旧w變異(染色體組先成倍減少,再加倍,得到純種)染色體變異(染色體組成倍增加)【詳解】A、雜交育種的原理是基因重組,A錯誤;B、多倍體育種得到的三倍體個體不能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂,B錯誤;C、單倍體育種比誘變育種的目的性強,比雜交育種的年限短,C正確;D、基因突變是不定向的,通過人工誘變育種盲目性大,D錯誤。故選C。4、C【解析】
所有生物體內(nèi)的生物大分子都是以碳鏈為骨架的,每一個單體都是以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架,由許多單體連接成多聚體。在人體內(nèi)不能合成,只能從食物中獲得的氨基酸稱為必需氨基酸,能在體內(nèi)合成的氨基酸稱為非必需氨基酸?!驹斀狻緼、蛋白質(zhì)、核酸、多糖(纖維素、糖原等)都是以碳鏈作為基本骨架,A正確;B、組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸分為必需氨基酸和非必需氨基酸,必需氨基酸需從食物中獲得,B正確;C、人體細(xì)胞不能分泌分解纖維素的酶,C錯誤;D、人體中的膽固醇既參與血液中脂質(zhì)的運輸,也是細(xì)胞膜的重要組成成分,D正確。故選C。5、D【解析】
雄蜂由卵細(xì)胞發(fā)育形成,故基因型為AA而缺少B、b基因的雄蜂由基因型為AA的卵細(xì)胞發(fā)育而成?!驹斀狻繐?jù)上分析可知,基因型為AA的雄蜂是由基因型為AA的卵細(xì)胞發(fā)育而成。母本的基因型為AaBb,卵細(xì)胞中出現(xiàn)兩個A基因的原因:1號染色體的兩條姐妹染色單體在減數(shù)第二次分裂時未分離,兩個A基因進(jìn)入卵細(xì)胞。缺少B、b基因的可能原因:一是2號染色體在減數(shù)第一次分裂時未分離,形成了不含2號染色體的次級卵母細(xì)胞,最終產(chǎn)生的卵細(xì)胞中不含B、b基因;二是減數(shù)第一次分裂正常,減數(shù)第二次分裂時兩個b基因或B基因進(jìn)入極體,產(chǎn)生了不含2號染色體的卵細(xì)胞。綜上所述,②③正確。故選D?!军c睛】本題主要考查減數(shù)分裂,考查學(xué)生的理解能力和獲取信息的能力。6、D【解析】
分析題圖:圖示表示無子西瓜的培育過程,首先①用秋水仙素(抑制紡錘體的形成)處理二倍體西瓜的幼苗,獲得四倍體植株;②用該四倍體西瓜和二倍體進(jìn)行雜交得到種子發(fā)育成的即是三倍體西瓜;③三倍體西瓜結(jié)的種子再種植即可獲得三倍體無籽西瓜?!驹斀狻緼、①過程用秋水仙素處理或者低溫處理,它的作用是抑制有絲分裂過程中紡錘體的形成,A錯誤;B、由三倍體種子發(fā)育成無子西瓜,涉及到細(xì)胞的有絲分裂和分化,而高等植物細(xì)胞不存在中心體,B錯誤;C、由于二倍體西瓜與四倍體西瓜之間雜交產(chǎn)生的三倍體西瓜是高度不育的,因此二倍體西瓜與四倍體西瓜之間存在生殖隔離,C錯誤;D、四倍體植株所結(jié)的西瓜中所含的胚是由四倍體的母本產(chǎn)生的卵細(xì)胞和二倍體的父本產(chǎn)生的精子結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而來的,因此胚細(xì)胞內(nèi)含有3個染色體組,D正確。故選D。7、D【解析】
分析題圖:出現(xiàn)富營養(yǎng)化的水體流經(jīng)稻田時,為水稻生長提供了一定的N、P等元素營養(yǎng)。稻田中的好氧、厭氧、兼性厭氧微生物分解了大量有機物。流出稻田的水含的有機物大量減少,出現(xiàn)藻類水華的魚塘尾水流經(jīng)稻田后,水稻與藻類競爭光照和營養(yǎng)、同時動物攝食、微生物等產(chǎn)生殺藻物質(zhì)等因素導(dǎo)致藻類數(shù)量減少。【詳解】A、出現(xiàn)富營養(yǎng)化的水體流經(jīng)稻田時,為水稻生長提供了一定的N、P等元素營養(yǎng),A正確;B、藻類與稻田生態(tài)系統(tǒng)的其他生物存在捕食、競爭的關(guān)系,B正確;C、稻田生態(tài)系統(tǒng)凈化魚塘尾水的過程實現(xiàn)了水資源循環(huán)利用,C正確;D、魚塘尾水中的可溶性有機物主要是被稻田中的分解者利用,D錯誤。故選D。8、C【解析】
RNA分為mRNA、tRNA和rRNA,其中mRNA是翻譯的模板,tRNA能識別密碼子并轉(zhuǎn)運相應(yīng)的氨基酸,rRNA是組成核糖體的成分。此外,還有少數(shù)RNA具有催化功能?!驹斀狻緼、tRNA的組成單位是核糖核苷酸,含有C、H、O、N、P五種元素,A錯誤;B、通常情況下,在翻譯過程中,tRNA可以反復(fù)使用,B錯誤;C、tRNA是單鏈結(jié)構(gòu),但形成的三葉草結(jié)構(gòu)中存在堿基互補配對,C正確;D、密碼子存在于mRNA上,tRNA上的是反密碼子,D錯誤。故選C。二、非選擇題9、熱能加強藍(lán)紫光和紅光活躍的化學(xué)能上部葉片吸收藍(lán)紫光和紅光較多,使樹冠下生長的植物(草)能利用的藍(lán)紫光和紅光較少,光合速率低,生長較慢提高光合色素的光能捕獲效率高光【解析】
1、有氧呼吸全過程:第一階段:在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,一分子葡萄糖形成兩分子丙酮酸、少量的[H]和少量能量,這一階段不需要氧的參與。第二階段:丙酮酸進(jìn)入線粒體的基質(zhì)中,與水反應(yīng)生成為二氧化碳、大量的[H]和少量能量,這一階段不需要氧的參與。第三階段:在線粒體的內(nèi)膜上,[H]和氧氣結(jié)合,形成水和大量能量,這一階段需要氧的參與。2、光合作用包括光反應(yīng)和暗反應(yīng)兩個階段。光反應(yīng)發(fā)生場所在葉綠體的類囊體薄膜上,葉綠體中色素吸收光照,吸收光能、傳遞光能,并將一部分光能用于水的光解生成[H]和氧氣,另一部分光能用于合成ATP。暗反應(yīng)發(fā)生場所是葉綠體基質(zhì)中,首先發(fā)生二氧化碳的固定,即二氧化碳和五碳化合物結(jié)合形成兩分子的三碳化合物,三碳化合物利用光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP被還原。【詳解】(1)在細(xì)胞呼吸過程中,有機物氧化分解釋放的能量,一部分儲存在ATP中,一部分以熱能的形式散式。分布在植物細(xì)胞線粒體內(nèi)膜上的交替氧化酶(AOX)催化O2與[H]生成水,導(dǎo)致生成ATP所占的比例下降,說明該酶使細(xì)胞呼吸釋放的能量更多地轉(zhuǎn)化為熱能。在寒冷早春,某些植物的花細(xì)胞中AOX基因的表達(dá)有利于花序溫度升高,說明產(chǎn)生的熱能增多,進(jìn)而推知這些植物的花細(xì)胞中AOX基因的表達(dá)會加強。(2)①在光合作用的光反應(yīng)階段,葉綠體中的色素吸收紅光和藍(lán)紫光,并將其轉(zhuǎn)化為ATP中活躍的化學(xué)能;在暗反應(yīng)階段,ATP中活躍的化學(xué)能轉(zhuǎn)化為最終儲存在有機物中的穩(wěn)定的化學(xué)能?!按髽涞紫聼o豐草”的原因是上部葉片吸收藍(lán)紫光和紅光較多,使樹冠下生長的植物(草)能利用的藍(lán)紫光和紅光較少,光合速率低,生長較慢。②圖2顯示:在光照強度相同的條件下,用AOX途徑抑制劑處理的A組和C組葉片的左側(cè),其光合色素的光能捕獲效率分別低于B組和D組,但A組和B組的光合色素的光能捕獲效率的差值明顯低于C組和D組的光合色素的光能捕獲效率的差值。由此說明,AOX途徑的作用是提高光合色素的光能捕獲效率,在周圍受到高光照射的葉片組織中作用更明顯。【點睛】解答本題的前提是識記并理解有氧呼吸過程、葉綠體中色素的作用、光合作用的過程及其影響的環(huán)境因素的相關(guān)知識。在此基礎(chǔ)上,從題意和圖示中提取有效信息,進(jìn)而對各問題情境進(jìn)行分析解答。10、將ADP和Pi合成ATP細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體、葉綠體青岡青岡的光補償點較低,更適應(yīng)弱光環(huán)境【解析】
據(jù)題干和題圖分析可知:影響植物光合作用的因素主要是光照強度,光補償點時呼吸作用速率等于光合作用速率,光飽和點以后影響各種植物的光合作用速率的因素不再是自變量光照強度,而是溫度或二氧化碳濃度等。實驗設(shè)計應(yīng)遵循變量原則和對照原則?!驹斀狻浚?)光合作用的光反應(yīng)階段是水的光解,場所是葉綠體的類囊體薄膜;光反應(yīng)階段光合色素吸收的光能有兩方面用途:一是將水分解成氧氣和[H];二是將ADP和Pi合成ATP。(2)光照強度為39μmol?m-2?s-1是石櫟幼苗葉片的光補償點,植物同時進(jìn)行光合作用和呼吸作用,故葉肉細(xì)胞消耗ADP(合成ATP)的場所有細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體和葉綠體。(3)對比4種植物的光補償點和光飽和點可知,青岡的光補償點和光飽和點均最低,最適合在較弱的光照環(huán)境中生長,在4種植物中最適合在較弱的光照環(huán)境中生長?!军c睛】本題考查影響光合作用的主要環(huán)境因素,關(guān)鍵是要求學(xué)生能夠靈活運用所學(xué)知識,提高識圖識表能量和分析解決問題的能力。11、限制酶和DNA連接酶具有全能性內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞胰蛋白酶或膠原蛋白酶貼壁生長正確互換整合正確互換整合后的染色體上只有只有,無、,具有G418抗性,故能在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長,錯誤互換整合后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個,而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì),故在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中錯誤整合的細(xì)胞死亡尿液中霉臭味顯著降低【解析】
DNA重組技術(shù)至少需要三種工具:限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)、DNA連接酶、運載體。構(gòu)建重組載體時,首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運載體,再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,來源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)),因此獲取的胚胎干細(xì)胞應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。結(jié)合題圖可知,正?;Q后的染色體DNA上只有,而無、;錯誤整合時,載體的兩個中至少會有一個與一起整合到染色體DNA上,故由于正確互換后的細(xì)胞染色體上有,無、,故對G418有抗性,可在含G418的培養(yǎng)液中正常生活,而錯誤互換后的染色體DNA上由于含有至少1個,而、的產(chǎn)物都能使細(xì)胞死亡,故錯誤互換的細(xì)胞不能生存,據(jù)此分析?!驹斀狻浚?)構(gòu)建重組載體時,常用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)、DNA連接酶。實驗用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞,除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外,還因為胚胎干細(xì)胞具有全能性。(2)為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞,可將小鼠囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞取出,并用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使其分散成單個細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長,這種現(xiàn)象稱為貼壁生長。(3)已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性,、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡,據(jù)分析可知,正確互換后的染色體上只有只有,無、,錯誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個,因此,轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),在雙重選擇下存活下來的是正常互換整合的胚胎干細(xì)胞,原因是:正確互換后的染色體上只有只有,無、,具有G418抗性,故能在含有G418及同時含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長,錯誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個,而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)
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