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整合訓(xùn)練(十七)生物技術(shù)實(shí)踐全員必做題1.[2024·湖南師大附中三模]自生固氮菌是土壤中能獨(dú)立固定空氣中N2的細(xì)菌,將玉米種子用自生固氮菌拌種后播種,可顯著提高產(chǎn)量并降低化肥的運(yùn)用量??蒲腥藛T進(jìn)行了土壤中自生固氮菌的分別和固氮實(shí)力測定的探討,部分試驗(yàn)流程如下圖?;卮鹣铝袉栴}:(1)步驟①土樣應(yīng)取自表層土壤的緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)下表為兩種培育基的配方,步驟④應(yīng)選其中的________培育基,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。培育基類型培育基組分Ashby培育基甘露醇(C6H14O6)、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸餾水、瓊脂LB培育基蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸餾水、瓊脂(3)步驟④所用的接種工具是________,若在④的平板上統(tǒng)計(jì)的菌落的平均數(shù)量為126個,則每克土壤中含有的固氮菌為________個。(4)將純化的固氮菌置于完全培育液中擴(kuò)大培育48小時(shí),經(jīng)離心后收集下層細(xì)胞并轉(zhuǎn)移至特定培育基中進(jìn)行固氮實(shí)力的測定,篩選出固氮實(shí)力最強(qiáng)的菌種CM12,為進(jìn)一步鑒定其固氮實(shí)力,科研人員選用發(fā)芽一樣的玉米種子進(jìn)行3組盆栽試驗(yàn),30天后測定土壤微生物有機(jī)氮含量,結(jié)果如圖。注:CK:比照處理組;N:尿素處理組(每盆土壤中50mL有氮全養(yǎng)分液:成分為在1000mL無氮植物養(yǎng)分液中加入0.12g尿素);CM12:自生固氮菌CM12處理組(每盆土壤澆50mL,接種自生固氮菌的無氮植物養(yǎng)分液)。①比照組(CK)的處理為________________________________。②試驗(yàn)結(jié)果表明:施用尿素處理和接種固氮菌CM12處理均能顯著增加土壤微生物有機(jī)氮含量。與CK組相比,CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加了約____%。③自生固氮菌較共生固氮菌(如根瘤菌)的應(yīng)用范圍更廣,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2.[2024·湖南長郡中學(xué)模擬預(yù)料]甘肅某地由于TNT(主要成分為2,4-二硝基甲苯磺酸鹽)紅水蒸發(fā)池滲漏,對土壤造成嚴(yán)峻污染,威逼到黃河上游的水質(zhì)平安。因此,TNT紅水污染土壤修復(fù)是目前亟待解決的環(huán)境問題。某試驗(yàn)小組欲通過生物修復(fù)分別有效降解2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的菌株,進(jìn)行了如下試驗(yàn)。請回答下列問題:(1)LB培育基的制備:取胰蛋白胨、NaCl和酵母提取物溶于蒸餾水中,此過程中胰蛋白胨供應(yīng)的養(yǎng)分物質(zhì)是____________,用NaOH調(diào)整pH至7.2,用________________在121℃條件下滅菌15分鐘。若要獲得本探討所用的固體培育基,需在上述培育基中加入________。(2)菌株分別與鑒定:取____________________________土壤放入裝有100mL無菌LB液體培育基的錐形瓶中,在30℃和120rpm的恒溫?fù)u床上振蕩24小時(shí),此過程的目的是____________。取1mL培育液,接受____________法分別純化菌株。(3)該試驗(yàn)小組欲進(jìn)一步探究菌株對2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解實(shí)力,請幫助設(shè)計(jì)試驗(yàn),寫出試驗(yàn)思路:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)探究鹽度對菌株生長的影響探討發(fā)覺,純化的菌株在NaCl濃度為0%~3%之間對2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時(shí)后達(dá)到90%,但當(dāng)NaCl濃度達(dá)到5%后,降解率幾乎為0。探討中偶然發(fā)覺菌株B1在NaCl濃度達(dá)到5%后,降解率卻達(dá)到50%,說明________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3.[2024·重慶市育才中學(xué)一模]楊梅果實(shí)風(fēng)味獨(dú)特,酸甜適中,具有很高的養(yǎng)分價(jià)值和保健價(jià)值。下圖是制作楊梅酒和楊梅醋的流程圖。請回答下列問題。制取發(fā)酵液:向楊梅汁中加入白砂糖,將糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)調(diào)至8%,滅菌冷卻→酒精發(fā)酵:接種酵母菌,恒溫發(fā)酵→果醋發(fā)酵:加入酒精,接種醋酸菌→取樣檢測:對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行檢測(1)傳統(tǒng)發(fā)酵中,發(fā)酵液雖然未經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌處理,但雜菌卻不能正常生長繁殖,這是由于果酒發(fā)酵的____________條件抑制了雜菌的生長。(2)果酒制作過程中,酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精的場所是____________,該階段應(yīng)當(dāng)將溫度限制在____________;溫度相宜時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)間較短,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)楊梅醋的發(fā)酵過程中,除去必需的養(yǎng)分物質(zhì)外,還須要往發(fā)酵液中持續(xù)地通入____________________,發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)式是:__________________________________。(4)下圖表示果酒發(fā)酵過程中,發(fā)酵液的糖度(葡萄糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù))和酒精度(酒精的體積分?jǐn)?shù))隨時(shí)間變更的關(guān)系。發(fā)酵前24h,糖度變更很小,酒精度上升很慢,其緣由是____________________________________________。96h后酒精度和糖度的變更都趨于平緩,其緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4.[2024·黑龍江哈爾濱三中一模]下表是某同學(xué)列出的分別土壤中微生物的培育基配方,據(jù)此回答下列問題:培育基配方含量KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g瓊脂15.0g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL(1)從作用上看,該培育基屬于________培育基,供應(yīng)氮源的物質(zhì)是________,細(xì)菌能利用該氮源是由于體內(nèi)能合成________酶。(2)在對分別的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí),還需在培育基中加入________指示劑。若指示劑變________,說明有目的菌株存在。(3)為了測定微生物的數(shù)量,接種時(shí)應(yīng)接受________________法,某同學(xué)在4個培育基上分別接種稀釋倍數(shù)為106的土壤樣液0.1mL,培育后菌落數(shù)分別為180、155、176、129個,則每毫升原土壤樣液中上述微生物的數(shù)量為________個,測定的活菌數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)________(填“低”“高”或“基本一樣”)。重點(diǎn)選做題5.[2024·江西南昌二模]酶是高效的生物催化劑,在現(xiàn)代生活中具有廣泛的應(yīng)用?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)制作果汁要解決兩個主要問題:一是果肉的________________,二是榨取的果汁________________,易發(fā)生沉淀。人們可以運(yùn)用________________來解決上述兩個問題。(2)洗衣粉中加入酶,可以有更好的去污實(shí)力。其中,______________和______________是最常用的兩種酶。洗衣粉中的酶運(yùn)用過后難以重復(fù)運(yùn)用,增加了生產(chǎn)成本。將酶固定在________的載體上,可以提高酶的運(yùn)用率,降低成本。假如將生產(chǎn)酶的細(xì)胞固定,理論上也能起到類似的效果,固定細(xì)胞常用的載體有____________________________________________等,固定細(xì)胞常接受________法。6.[2024·福建廈門一中??家荒蘋果樹腐爛病由真菌感染引起,為了開發(fā)生物防治該病的途徑,探討者擬從土壤中分別篩選出能抑制蘋果樹腐爛病菌生長的芽孢桿菌,試驗(yàn)流程如下圖。(1)配制培育基時(shí),培育基的滅菌應(yīng)當(dāng)在調(diào)pH________(填“之前”或“之后”),培育基滅菌的常用方法是____________。(2)圖中①過程取5g土壤加入________mL無菌水中,②③過程用______________法獲得芽孢桿菌單菌落,若10-1、10-2懸液對應(yīng)平板上菌落完全覆蓋培育基,10-3、10-4、10-5對應(yīng)平板平均菌落數(shù)分別為589、112、12個,則取樣土壤中芽孢桿菌總數(shù)約________個。(3)目的菌篩選時(shí),應(yīng)取直徑為5mm的蘋果腐爛病菌菌落移置于________(填“A”或“B”)處,將芽孢桿菌接種________(填“A”或“B”)處。(4)檢測各抗菌株發(fā)酵濾液的抑菌效果進(jìn)行進(jìn)一步篩選,嘗試用于蘋果樹腐爛病防治。與化學(xué)防治相比,該方法的優(yōu)勢是______________________________________。7.[2024·西藏日喀則統(tǒng)考一模]Ⅰ.無花果果肉綿軟、不易長期貯藏,因此將無花果加工成果酒,無疑為無花果的深加工供應(yīng)了一條新的途徑。用無花果榨取果汁并制作果酒的簡要流程如下:(1)利用無花果制作果汁時(shí),運(yùn)用果膠酶的目的是____________________________。(2)酵母菌是志向的酒精發(fā)酵菌種,其細(xì)胞內(nèi)將葡萄糖分解為酒精的酶存在于____________。依據(jù)實(shí)際閱歷,添加適量的糖能夠增加酒精度,緣由是____________________________________________________________________。Ⅱ.釀制勝利的無花果果酒暴露在空氣中酒味會漸漸消逝而出現(xiàn)醋酸味,愛好小組想要通過培育細(xì)菌的方法驗(yàn)證醋酸桿菌的代謝類型。(3)對培育基常用的滅菌方法是__________,接種細(xì)菌常用的方法是____________________________。(4)該試驗(yàn)小組勝利分別出醋酸桿菌后,用移液器設(shè)定1mL的接種量并分別接種于三個盛有等量液體培育基的錐形瓶中,放置在搖床上培育,設(shè)定搖床轉(zhuǎn)速分別為210r/min、230r/min、250r/min,檢測結(jié)果如圖所示。從圖中數(shù)據(jù)你可以得出什么結(jié)論:______________________________________________________。由此可知醋酸桿菌的代謝類型為________(填“需氧型”或“厭氧型”或“兼性厭氧型”)。8.[2024·四川成都石室中學(xué)校考模擬]泡菜是一種獨(dú)特且具有悠久歷史的發(fā)酵蔬菜制品,回答下列問題:(1)泡菜發(fā)酵的原理是____________________________________。(2)泡菜制作中,需留意限制食鹽用量以及________________,否則簡潔造成______________而導(dǎo)致亞硝酸鹽增加,影響泡菜品質(zhì)。(3)泡菜發(fā)酵過程中,乳酸菌的呼吸作用原來無氣體產(chǎn)生,但是在實(shí)際腌制過程中,從外觀上可以看到泡菜瓶中有間歇性的氣泡沖出,壇蓋有響聲,其有氣泡的緣由可能是__________________________________________________________。(4)泡菜發(fā)酵過程中,為確定最佳取食時(shí)間,需檢測亞硝酸鹽含量?;卮鹣铝袉栴}:補(bǔ)充檢測步驟:①配置溶液;②________;③制備樣品處理液;④__________。檢測亞硝酸鹽含量的原理是:在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與____________發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________色染料。9.[2024·江西宜春統(tǒng)考模擬]生物技術(shù)實(shí)踐會涉及微生物的篩選、物質(zhì)的提取等內(nèi)容。請回答下列問題:(1)若以簇新的泡菜濾液為試驗(yàn)材料分別純化乳酸菌,分別純化時(shí),首先須要用蒸餾水對泡菜濾液進(jìn)行________,在所用________培育基中因含有碳酸鈣而不透亮,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培育基中的碳酸鈣。推想培育基中加入碳酸鈣的作用有鑒別乳酸菌和______________________,分別純化時(shí)應(yīng)挑出________的菌落作為候選菌。(2)若以茉莉花瓣為原料,接受水蒸氣蒸餾法可以提取茉莉油。假如在蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則茉莉油提取量會下降,緣由是______________________________。水蒸氣蒸餾后得到油水混合物,在油水混合物中加入氯化鈉的目的是______________________。(3)β-胡蘿卜素即維他命A,存在于在各種水果和蔬菜。胡蘿卜素可分別從胡蘿卜或產(chǎn)生胡蘿卜素的微生物體中提取獲得。從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和________,以提高萃取效率,萃取過程中宜接受水浴方式加熱以防止溫度過高。自然胡蘿卜素可醫(yī)治維生素A缺乏癥,是因?yàn)開_________________________。10.[2024·四川內(nèi)江統(tǒng)考模擬]梔子果實(shí)因含有梔子黃而呈現(xiàn)橙黃色。梔子黃的主要成分是一類少有的水溶性類胡蘿卜素,可作為抗氧化劑和著色劑應(yīng)用于食品工業(yè)中?;卮鹣铝袉栴}:(1)試驗(yàn)中,提取梔子黃可選擇的萃取劑是________(填“乙醇”或“石油醚”),理由是______________________。(2)萃取的效率主要取決于萃取劑的__________________________。為了提高萃取梔子黃的效率,萃取前需對梔子果實(shí)進(jìn)行的處理是____________。(3)萃取過程中,應(yīng)當(dāng)避開明火加熱,接受水浴加熱,緣由是____________________;同時(shí)還需在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置,目的是______________________。11.[2024·四川遂寧射洪中學(xué)校考模擬]探討顯示溶藻細(xì)菌對限制水華有特別重要的作用。探討人員從某池塘中采集水樣,加入無菌錐形瓶中,用搖床在37℃條件下振蕩培育20min,使其勻整分散成菌懸液,再通過分別、純化、鑒定得到了溶藻細(xì)菌。請回答下列問題:(1)分別前需用無菌移液管從菌懸液中吸取菌液1mL,將其進(jìn)行梯度稀釋100倍的詳細(xì)操作是__________________________________________________________。(2)水華為藍(lán)藻等暴發(fā)所致。探討人員嘗試?yán)萌茉寮?xì)菌限制藍(lán)藻數(shù)量,相關(guān)試驗(yàn)如圖甲所示(圖中①~⑥表示試驗(yàn)步驟)。試驗(yàn)組中每個培育皿做三個重復(fù)試驗(yàn)。請指出本試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案的不合理之處:____________,并補(bǔ)充完善:________________________________________。(3)科研人員發(fā)覺溶藻細(xì)菌中富含果膠酶,通過酶解法和吸水漲破法釋放出其中的果膠酶,分別該酶的方法有____________和電泳法,其中電泳法的原理是依據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________________、大小以及形態(tài)的不同,在電場中的________________不同而實(shí)現(xiàn)分別。(4)本試驗(yàn)中用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳對所提取的酶進(jìn)行鑒定。依據(jù)如上圖的電泳結(jié)果,某同學(xué)得出“所提取的酶具有兩條鏈”的結(jié)論,此結(jié)論是否牢靠,理由是____________________________________________________________________。12.[2024·廣東惠州二模]果膠酶在食品、醫(yī)藥和紡織等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,科研人員從蘆葦植株中分別篩選出高產(chǎn)果膠酶的菌株4株,編號為Z1~Z4,并分別對菌株所產(chǎn)果膠酶的酶學(xué)特性進(jìn)行了探討,酶活力測定結(jié)果如下表所示。依據(jù)資料回答下列問題:菌株平板篩選(Dp/Dc)果膠酶活力/(U·mL-1)Z11.5024.89Z21.4022.57Z31.1637.04Z41.5640.52注:Dp/Dc為透亮圈的直徑(Dp)與菌落直徑(Dc)的比值,比值越大代表產(chǎn)生的果膠酶的量越多。(1)為篩選產(chǎn)果膠酶的菌株,將蘆葦根部中間部分浸出液接種至以________為唯一碳源的固體培育基上進(jìn)行培育,該培育基從功能上分類屬于________培育基。配制的培育基必需進(jìn)行滅菌處理,目的是__________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)由表可知,最志向的產(chǎn)果膠酶的菌株是________,依據(jù)是________________________________________。(3)用果膠酶處理果泥時(shí),須要限制反應(yīng)的溫度,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)探討表明,目的菌株所產(chǎn)果膠酶在30~80℃都是穩(wěn)定且有活性的,如下圖所示?,F(xiàn)要縮小溫度范圍進(jìn)一步探究果膠酶的最適溫度,請補(bǔ)充完善試驗(yàn)思路:①探究范圍:在40~50℃范圍內(nèi),設(shè)置一系列溫度梯度;②試驗(yàn)處理:___________________________________________________________________________________________________________________________________,其他條件相同且相宜;③結(jié)果與結(jié)論:一段時(shí)間后檢測各試管中果膠的剩余量,______________________________________即為最適溫度。整合訓(xùn)練(十七)1.解析:(1)固氮菌一般是異養(yǎng)需氧型,所以在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的固氮菌生長,故步驟①土樣取自當(dāng)?shù)乇韺油寥馈?2)表格為兩種培育基的配方,步驟④應(yīng)選其中的Ashby培育基,緣由是該培育基不含氮源,具有選擇作用,自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,LB培育基中的蛋白胨可以供應(yīng)氮源,不具有選擇作用。(3)試驗(yàn)接受的是稀釋涂布平板法,所以步驟④中所用的接種工具是涂布器。若在④的平板上統(tǒng)計(jì)的菌落的平均數(shù)量為126個,則每克土壤中含有的固氮菌為126÷0.1×104=1.26×107個。(4)①比照組的目的是解除無關(guān)變量對試驗(yàn)的影響,故比照組(CK)的處理為每盆土壤澆50mL無氮植物養(yǎng)分液。②由柱狀圖可知,空白比照組中土壤微生物有機(jī)氮含量為10,CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量為22,故與比照組相比,CM12處理組土壤微生物有機(jī)氮含量增加值或許為(22-10)÷10×100%=120%。③自生固氮菌比共生固氮菌(如根瘤菌)的應(yīng)用范圍更廣,緣由是自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮,不受宿主的限制。答案:(1)在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層,有更多的固氮菌生長(或固氮菌一般為需氧型,生活在土壤表層)(2)Ashby培育基該培育基不含氮源,具有選擇作用,自生固氮菌可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈矗琇B培育基中的蛋白胨可以供應(yīng)氮源,不具有選擇作用(3)涂布器1.26×107(4)每盆土壤澆50mL無氮植物養(yǎng)分液120自生固氮菌能在土壤中獨(dú)立固氮,不受宿主的限制2.解析:(1)蛋白胨既可以供應(yīng)碳源,也可以供應(yīng)氮源;用NaOH調(diào)整pH至7.2,在121℃條件下用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌15分鐘;若要獲得本探討所用的固體培育基,需在上述培育基中加入瓊脂。(2)自然界中目的菌株的篩選依據(jù):依據(jù)它對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)的環(huán)境中去找尋,本試驗(yàn)要分別有效降解2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的菌株,因此取甘肅某TNT紅水污染場地污染土壤放入裝有100mL無菌LB液體培育基的錐形瓶中,在30℃和120rpm的恒溫?fù)u床上振蕩24小時(shí),此過程的目的是富集培育,讓微生物的數(shù)目增加;取1mL培育液,接受稀釋涂布平板法分別純化菌株。(3)要分析菌株對2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解實(shí)力,可以取人工配制的確定濃度的2,4-二硝基甲苯磺酸鹽(TNT)溶液加入錐形瓶中,之后再在錐形瓶中加入確定量的純化菌液,每隔確定時(shí)間取樣,測定2,4-二硝基甲苯磺酸鹽濃度。(4)由題干可知,純化菌株在NaCl濃度為0%~3%之間對2,4-二硝基甲苯磺酸鹽的降解率在96小時(shí)后達(dá)到90%,但當(dāng)NaCl濃度達(dá)到5%后,降解率幾乎為0。而偶然發(fā)覺菌株B1在NaCl濃度達(dá)到5%后,降解率達(dá)到50%,說明菌株B1具有確定的耐鹽實(shí)力,能在較高鹽濃度條件下降解2,4-二硝基甲苯磺酸鹽。答案:(1)碳源和氮源高壓蒸汽滅菌鍋瓊脂(2)甘肅某TNT紅水污染場地污染富集培育稀釋涂布平板(3)取人工配制的確定濃度的2,4-二硝基甲苯磺酸鹽(TNT)溶液加入錐形瓶中,之后再在錐形瓶中加入確定量的純化菌液,每隔確定時(shí)間取樣,測定2,4-二硝基甲苯磺酸鹽濃度(4)菌株B1具有確定的耐鹽實(shí)力,能在較高鹽濃度條件下降解2,4-二硝基甲苯磺酸鹽3.解析:(1)分析題意可知,果酒發(fā)酵時(shí)須要無氧條件,且發(fā)酵液pH值會漸漸降低,即發(fā)酵液變酸,這種缺氧、酸性條件能抑制雜菌的生長。(2)酵母菌是真核生物,其無氧呼吸產(chǎn)生酒精的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)。利用酵母菌進(jìn)行發(fā)酵時(shí),應(yīng)將溫度限制在18~25℃,在此溫度條件下,酵母菌內(nèi)與果酒發(fā)酵相關(guān)的酶活性高,發(fā)酵速度快。(3)醋酸菌是一種好氧細(xì)菌,故楊梅醋的發(fā)酵過程中,須要向發(fā)酵液中持續(xù)通入無菌氧氣(無菌空氣),此時(shí)發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)式是C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。(4)分析題圖可知,隨著發(fā)酵的進(jìn)行,發(fā)酵液的糖度漸漸降低,酒精度漸漸上升然后保持相對穩(wěn)定。發(fā)酵前24h,酵母菌主要進(jìn)行有氧呼吸,大量增殖,消耗葡萄糖較少,因此糖度變更很小,酒精度上升很慢。隨著發(fā)酵的進(jìn)行,酵母菌進(jìn)行無氧呼吸消耗葡萄糖產(chǎn)生酒精,96h后,養(yǎng)分物質(zhì)消耗殆盡,高濃度的酒精和代謝廢物會抑制酵母菌的代謝而影響發(fā)酵,導(dǎo)致酒精度和糖度的變更都趨于平緩。答案:(1)無氧、酸性(2)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)18~25℃此時(shí)與果酒發(fā)酵相關(guān)的酶活性高,發(fā)酵速度快(3)無菌氧氣(無菌空氣)C2H5OH+O2CH3COOH+H2O(4)此階段酵母菌主要進(jìn)行有氧呼吸,大量增殖養(yǎng)分物質(zhì)消耗殆盡,高濃度的酒精和代謝廢物會抑制酵母菌的代謝而影響發(fā)酵4.解析:(1)該培育基從用途上屬于選擇培育基,其中供應(yīng)氮源的是尿素。尿素的分解須要脲酶催化,因此,能利用尿素為唯一氮源的分解菌能在細(xì)胞內(nèi)合成分解尿素的脲酶。(2)在對分別的能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行鑒定時(shí),還需在培育基中加入酚紅指示劑,若指示劑變紅,說明有目的菌株存在。(3)純化微生物可以用稀釋涂布法和平板劃線法,其中稀釋涂布平板法能用于微生物的計(jì)數(shù)。1毫升原土壤樣液中上述微生物數(shù)量=(180+155+176+129)÷4×106÷0.1=1.6×109個;用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù),但統(tǒng)計(jì)的數(shù)量比實(shí)際數(shù)量會偏低,緣由是當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時(shí),平板上視察到的只是一個菌落。答案:(1)選擇尿素脲(或催化尿素分解的)(2)酚紅紅(3)稀釋涂布平板1.6×109低5.解析:(1)制作果汁要解決兩個主要問題:一是果肉的出汁率低、耗時(shí)長,二是榨取的果汁渾濁、黏度高,易發(fā)生沉淀。人們可以運(yùn)用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁來解決上述兩個問題。(2)洗衣粉中須要加入的酶類有堿性蛋白酶、堿性脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶四類,其中堿性蛋白酶和堿性脂肪酶應(yīng)用最廣泛、效果最明顯。固定化酶技術(shù)是酶固定在不溶于水的載體上,這樣酶就可以反復(fù)利用,提高酶的運(yùn)用率,降低成本。假如將生產(chǎn)酶的細(xì)胞固定,理論上也能起到類似的效果,固定細(xì)胞常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、聚丙烯酰胺等。因?yàn)榧?xì)胞體積較大,難以被吸附或結(jié)合,故固定細(xì)胞常接受包埋法。答案:(1)出汁率低、耗時(shí)長渾濁、黏度高纖維素酶、果膠酶(2)堿性蛋白酶堿性脂肪酶不溶于水明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、聚丙烯酰胺包埋6.解析:(1)倒平板之前應(yīng)先將培育基進(jìn)行滅菌,培育基的滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。為避開混淆應(yīng)在培育皿的皿底做標(biāo)記,并將培育皿倒置培育。(2)要獲得稀釋了10倍的土壤懸液,應(yīng)當(dāng)將5g土壤加入45mL無菌水中充分振蕩。由圖可知在不同的稀釋度下取0.1mL接種到三個平板上,這種接種方法是稀釋涂布平板法。依據(jù)平板上的菌落計(jì)數(shù),選取菌落數(shù)為30~300的平板計(jì)數(shù),土壤中芽孢桿菌總數(shù)為1.12×106÷0.2÷0.1=5.6×107。(3)目的菌篩選時(shí),應(yīng)取直徑為5mm的蘋果腐爛病菌菌落移置于A處,將芽孢桿菌接種B處,以便篩選出目的菌株。(4)與化學(xué)防治相比,該生物防治方法的優(yōu)勢是:降低環(huán)境污染;削減化學(xué)試劑的殘留;對其他動物影響小等。答案:(1)之后高壓蒸汽滅菌法(2)45稀釋涂布平板法5.6×107(3)AB(4)降低環(huán)境污染;削減化學(xué)試劑的殘留;對其他動物影響小等7.解析:(1)果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱,可將構(gòu)成細(xì)胞壁的果膠分解為可溶性的物質(zhì),因此制作果汁時(shí)加入果膠酶的目的是增加果汁的體積和提高澄清度。(2)將葡萄糖分解成酒精是無氧呼吸,場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),因此將葡萄糖分解為酒精的酶存在于酵母菌的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。糖可為酵母菌的生長、繁殖供應(yīng)能源物質(zhì),還可作為酵母菌酒精發(fā)酵的原料,因此增大糖量有利于酵母菌的無氧呼吸,產(chǎn)生更多酒精。(3)對培育基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法;接種細(xì)菌常用的方法是平板劃線法、稀釋涂布平板法。(4)據(jù)圖可知,在確定轉(zhuǎn)速范圍內(nèi),搖床轉(zhuǎn)速越高,該細(xì)菌種群密度越大,說明該細(xì)菌繁殖的速度和總量越大。依據(jù)題意,在確定轉(zhuǎn)速范圍內(nèi),搖床轉(zhuǎn)速越高,供應(yīng)的氧氣就越足夠,醋酸桿菌繁殖速度越快,說明其代謝類型為需氧型。答案:(1)增加果汁的體積和提高澄清度(2)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)糖可為酵母菌的生長、繁殖供應(yīng)能源物質(zhì),還可作為酵母菌酒精發(fā)酵的原料(3)高壓蒸汽滅菌法平板劃線法、稀釋涂布平板法(4)在確定轉(zhuǎn)速范圍內(nèi),搖床轉(zhuǎn)速越高,該細(xì)菌繁殖的速度和總量越大需氧型8.解析:(1)泡菜發(fā)酵的原理是在無氧狀況下,乳酸菌(厭氧菌)將葡萄糖分解成乳酸。(2)泡菜制作中,需留意限制食鹽用量以及腌制時(shí)間、溫度,否則簡潔造成細(xì)菌大量繁殖而導(dǎo)致亞硝酸鹽增加,影響泡菜品質(zhì),所以泡菜制作過程中須要定期測定亞硝酸鹽的含量,一般接受比色法,將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測對比,可以大致估算出亞硝酸鹽的含量。(3)在制作過程中,從外觀上可以看到泡菜瓶中有間歇性的氣泡沖出,壇蓋有響聲,其緣由可能是泡菜中除乳酸菌外,還有酵母菌和大腸桿菌等,酵母菌能將葡萄糖分解為乙醇和二氧化碳等物質(zhì),使得壇里的氣壓大于外界氣壓,從而會有多余的空氣排出壇子,造成聲響。(4)亞硝酸鹽含量測定的步驟:配制溶液→制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備樣品處理液→比色(目測比較)。測定原理是在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行目測比較,可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。答案:(1)在無氧狀況下,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸(2)腌制時(shí)間、溫度細(xì)菌大量繁殖(3)泡菜中除乳酸菌外,還有酵母菌和大腸桿菌等,酵母菌能將葡萄糖分解為乙醇和二氧化碳等(4)制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液比色(目測比較)對氨基苯磺酸玫瑰紅9.解析:(1)分別純化乳酸菌時(shí),由于泡菜濾液中乳酸菌的濃度高,干脆分別很難分別到單個菌落,因此須要先用無菌水對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋,且用固體培育基進(jìn)行分別純化。乳酸菌在代謝過程中會產(chǎn)生乳酸,在分別純化乳酸菌時(shí),可以用碳酸鈣中和乳酸菌代謝過程產(chǎn)生的乳酸。由題意可知,培育基中因含有碳酸鈣而不透亮,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培育基中的碳酸鈣,所以在平板上形成具有透亮圈的菌落,這樣有利于乳酸菌菌落的識別和分別,因此分別純化時(shí)應(yīng)選擇出在平板上有透亮圈的菌落作為候選菌。(2)茉莉油具有揮發(fā)性,所以假如在蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則茉莉油提取量會下降,緣由是部分茉莉油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失。為了將油水混合物分開,向油水混合物中加入NaCl,增加鹽濃度,可以使茉莉油與水出現(xiàn)明顯的分層。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥,以提高萃取效率。一分子的β-胡蘿卜素可氧化成兩分子維生素A,所以自然胡蘿卜素可醫(yī)治維生素A缺乏癥,是因?yàn)楹}卜素可被氧化為維生素A。答案:(1)梯度稀釋固體中和乳酸菌產(chǎn)生的乳酸具有透亮圈(2)部分茉莉油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失使茉莉油與水出現(xiàn)明顯的分層(3)干燥胡蘿卜素可被氧化為維生素A10.解析:(1)分析題意可知,梔子黃的主要成分是一類少有的水溶性類胡蘿卜素,
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