GB∕T 20552-2023 長(zhǎng)牡蠣（正式版）

2023-12-28發(fā)布國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替GB/T20552—2006《太平洋牡蠣》,與GB/T20552—2006相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：a)更改了分類(lèi)地位(見(jiàn)4.2,2006年版的3.2);b)更改了可量性狀比值(見(jiàn)5.2,2006年版的4.1.2.1);c)刪除了殼高與殼長(zhǎng)、殼長(zhǎng)與體重的關(guān)系式(見(jiàn)2006年版的4.1.2.3);d)刪除了生化遺傳學(xué)特征及檢測(cè)方法(見(jiàn)2006年版的第7章、8.2);e)增加了分子遺傳學(xué)特性描述及檢測(cè)方法(見(jiàn)第8章、9.5);f)增加了判定規(guī)則(見(jiàn)第10章)。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出。本文件由全國(guó)水產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC156)歸口。本文件起草單位：中國(guó)海洋大學(xué)。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——2006年首次發(fā)布為GB20552—2006,2017年轉(zhuǎn)為推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T20552—2006;——本次為第一次修訂。1本文件界定了長(zhǎng)牡蠣[Crassostreagigas(Thunberg,1793)]的術(shù)語(yǔ)和定義，確立了學(xué)名與分類(lèi)，規(guī)定了主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征、生長(zhǎng)與繁殖特性、細(xì)胞遺傳學(xué)特性與分子遺傳學(xué)特性，描述了相應(yīng)的檢測(cè)方本文件適用于長(zhǎng)牡蠣的種質(zhì)鑒定和檢測(cè)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T18654.2養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)種質(zhì)檢驗(yàn)第2部分：抽樣方法GB/T22213水產(chǎn)養(yǎng)殖術(shù)語(yǔ)GB/T32757貝類(lèi)染色體組型分析3術(shù)語(yǔ)和定義GB/T22213界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。殼頂至殼腹緣的最大距離。殼長(zhǎng)shelllength垂直于殼高、與兩殼絞合線(xiàn)平行方向的前后緣間最寬部分的長(zhǎng)度。4學(xué)名與分類(lèi)4.2分類(lèi)地位gigas(Thunberg,1793)。軟體動(dòng)物門(mén)(Mollusca),雙殼綱(Bivalvia),牡蠣目(Ostreida),牡蠣科(Ostreidae),巨蠣屬(Cras-sostrea)。5主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征5.1外部形態(tài)2明顯。殼頂腔深，并常具有白堊色的沉積物。殼表白堊色到紫褐色。長(zhǎng)牡蠣外形見(jiàn)圖1。//h標(biāo)引序號(hào)說(shuō)明：1——右殼；l——?dú)らL(zhǎng)；h——?dú)じ摺?齡～2齡長(zhǎng)牡蠣的殼高為53mm～162mm,殼長(zhǎng)為26mm～92mm,殼高與殼長(zhǎng)的比值為5.3.3鰓：左右各1對(duì)，共4片。6生長(zhǎng)與繁殖特性1齡長(zhǎng)牡蠣殼高為53mm～114mm,殼長(zhǎng)為26mm～68mm,質(zhì)量為8g～53g;2齡長(zhǎng)牡蠣殼高為78mm～162mm,殼長(zhǎng)為46mm～92mm,質(zhì)量為53g～214g。3數(shù)百萬(wàn)粒至數(shù)千萬(wàn)粒。7細(xì)胞遺傳學(xué)特性7.1染色體數(shù)染色體組型見(jiàn)圖2,染色體核型公式為：2n=20m,NF=40,其中，m指中部著絲粒染色體，NF指XKXKX×8×<XXXKKNXXKX下圖2長(zhǎng)牡蠣染色體組型8分子遺傳學(xué)特性線(xiàn)粒體COI基因堿基參考序列如下(621bp):ATAGTATTTGGATTTTGAGCTGTTCTTGCGGGAACTAGGTTATTCGTTGGAGACTTTATAACCCTGGAGCTAAGTTTTTAGACCCCGTGA100GCTTCTAGTAGCAGACATGCAATTTCCTCGATTAAATGCATTTAGATTTT250GAGTTTTGCCAGGGTCTCTTTATCTTATGCTTATGTCTAACATTGTAGAA300AACGGAGTTGGGGCAGGGTGAACAATTTACCCTCCTTTATCAACTTACTC3504TTATCATGGAGTTTGTATAGACCTTGCAATTCTAAGCCTTCACCTTGCTG400GTATTAGCTCTATTTTCAGGTCAATTAATTTCATAGTAACGATTAGAAAT450ATGCGATCTGTTGGGGGCCATTTACTAGCACTATTCCCTTGATCTATTAA500GGTTACTTCATTCTTGCTTTTGACTACTCTCCCAGTTTACTATACTTTTGACTGATCGTCATTTTAATACCTCTTTTTTTGACCCT600GTCGGAGGGGGGGACCCTGT621種內(nèi)K2P遺傳距離小于2%。9檢測(cè)方法按照GB/T18654.2的規(guī)定執(zhí)行。9.2主要形態(tài)結(jié)構(gòu)特征在充足光線(xiàn)下肉眼觀察。殼高和殼長(zhǎng)按照定義用游標(biāo)卡尺測(cè)量。用游標(biāo)卡尺測(cè)量殼高和殼長(zhǎng)，用電子秤稱(chēng)量質(zhì)量。查詢(xún)養(yǎng)殖記錄。通過(guò)顯微鏡觀察生殖細(xì)胞分辨性別。通過(guò)顯微鏡觀察排放的生殖細(xì)胞判斷生殖方式。肉眼觀察性腺的發(fā)育程度并結(jié)合顯微鏡觀察生殖細(xì)胞判斷繁殖季節(jié)。卵的濃度，進(jìn)而計(jì)算懷卵量，測(cè)3次取平均值。5在顯微鏡下觀察卵的形態(tài)。9.4細(xì)胞遺傳學(xué)特性采用成體鰓組織法，將長(zhǎng)牡蠣在0.005%的秋水仙素海水中處理10h,取鰓組織用含0.05%秋水仙素的海水處理45min,其余操作按照GB/T32757的規(guī)定執(zhí)行，其中，低滲時(shí)間為30min～45min,解離時(shí)間為50min,熱滴片法滴片。9.5分子遺傳學(xué)特性按附錄A執(zhí)行。10判定規(guī)則10.1當(dāng)檢測(cè)結(jié)果符合第5章和第7章的要求，可判定該種質(zhì)時(shí)，按第5章和第7章的要求判定。10.2當(dāng)出現(xiàn)下列情況之一時(shí)，增加檢測(cè)第6章和第8章要求的內(nèi)容，依據(jù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行輔助鑒定：a)第5章和第7章的項(xiàng)目無(wú)法進(jìn)行檢測(cè)或者判定時(shí)；b)第三方提出要求時(shí)。6(規(guī)范性)取閉殼肌100mg,按照標(biāo)準(zhǔn)的酚-三氯甲烷抽提法或者使用試劑盒進(jìn)行DNA提取。COI-F:5'-GGTCAACAAATCATAAAGATATTGG-3',COI-R:5'-TAAACTTCAGGGTGAC-A.3PCR擴(kuò)增KCl;100mmol/L(NH)?SO?;15μL的10×PCR緩沖液[200mmol/LTris-HCl,pH8.4;200mmol/Lmmol/LMgCl?],加