關(guān)于藥物質(zhì)量研究的一些問題

藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一般包括哪三個方面的內(nèi)容？藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一般包括包括性狀、鑒別、檢查和含量含量測定等幾個方面。藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是藥品的純度、成分含量、組分、生物有效性、療效、毒副作用、熱原度、無菌度、物理化學(xué)性質(zhì)以及雜質(zhì)的綜合表現(xiàn)。對于仿制藥的質(zhì)量研究，其核心是什么研究？具體包括哪些方面？對于仿制藥研究核心是對中試三批樣品和對比制劑進(jìn)行各個項目的研究，一般包括以下項目的檢測：(1)形狀和外觀；(2)鑒別：包括理化鑒別和色譜鑒別項目；(3)檢查：包括一般檢查項、微生物限度檢測、片劑的溶出度、有關(guān)物質(zhì)、含量測定等。對于起始原料的質(zhì)量研究，我們應(yīng)收集哪些資料？如何制定起始原料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)？對于起始原料的質(zhì)量研究，我們需要收集提供來源廠家的企業(yè)營業(yè)執(zhí)照、組織機(jī)構(gòu)代碼、生產(chǎn)許可、廠家COA、供應(yīng)商企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，自檢COA，合同，發(fā)票這等資料。起始物料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一般包括外觀、鑒別、水分、有關(guān)物質(zhì)（對映異構(gòu)體）、純度（含量）這些檢測項。關(guān)于純度（含量），可以使用HPLC或者GC控制純度的就用純度檢測，檢測項目寫成純度；不能使用HPLC或者GC控制質(zhì)量就用滴定法、原子吸收等方法，檢測項目寫成含量；一般用面積歸一化法測試純度，如果工藝有較高要求，可以考慮用外標(biāo)法制定含量測定項。對于限度的制定，以工藝的要求為主。對于有關(guān)物質(zhì)，起始物料里面的雜質(zhì)可能會在后續(xù)的反應(yīng)中生成API的雜質(zhì)，所以要在起始物料中進(jìn)行控制，可根據(jù)工藝要求制定限度。如果在起始物料中有手性控制，可用HPLC、GC手性方法。關(guān)于水分，若對合成工藝有影響，則需制定這個檢測項。其他某些會影響到工藝反應(yīng)或者對后續(xù)反應(yīng)有影響的物料，可根據(jù)工藝實際的要求增定相關(guān)檢測項目。一般常選用哪些樣品來進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)分析方法的開發(fā)？判斷該方法可行最重要的判斷標(biāo)準(zhǔn)是什么？關(guān)于有關(guān)物質(zhì)的分析檢測，要先分析可能的雜質(zhì)，比如說合成過程中的中間體、起始原料、副產(chǎn)物等，降解產(chǎn)物等；利用可獲得的雜質(zhì)先初步建立方法，一般大于0.1%的雜質(zhì)要定性，經(jīng)分析可能產(chǎn)生遺傳毒性雜質(zhì)的要嚴(yán)加控制。判斷該方法是否可行需要對該方法進(jìn)行驗證，確保該方法在樣品分析的一定范圍內(nèi)準(zhǔn)確、重現(xiàn)、可靠、耐用性。其次是對方法進(jìn)行確認(rèn)，即是對該方法在使用環(huán)境中適用性評估，包括人員、儀器、樣品和試劑?？捎靡粋€確定的方法老挑戰(zhàn)現(xiàn)實的分析環(huán)境，一般可對專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、LOQ、LOD項目進(jìn)行確認(rèn)。最后對該方法進(jìn)行方法轉(zhuǎn)移。最終即可確定該方法的可行性。為了確保一個有關(guān)物質(zhì)分析方法能順利通過正式驗證，在建立好的有關(guān)物質(zhì)分析方法通常應(yīng)滿足什么條件？為了確保有關(guān)物質(zhì)分析方法能順利通過正式驗證，建立好的有關(guān)物質(zhì)分析方法常應(yīng)滿足一下幾個條件：理論塔板數(shù)：大于3000或4000；分離度：一般要求大于1.8;拖尾因子：0.8-1.2之間；待測五保留時間：最好調(diào)至20min左右。一般常選用哪些樣品來進(jìn)行溶劑殘留分析方法的開發(fā)？為了確保一個溶劑殘留分析方法能順利通過驗證，建立的分析方法通常應(yīng)該滿足什么指標(biāo)？溶劑殘留分析方法的開發(fā)需要對反應(yīng)溶劑，合成原料來源的有機(jī)溶劑和反應(yīng)副產(chǎn)物有機(jī)溶劑種類進(jìn)行研究。查閱文獻(xiàn)，根據(jù)合成路線，逐步確定需檢測的種類；若原料藥為購買產(chǎn)品，可咨詢廠家合成過程中使用的相關(guān)溶劑，然后確定。有關(guān)物質(zhì)分析方法驗證項目包括哪些？具體應(yīng)如何驗證？接收標(biāo)準(zhǔn)是什么？方法驗證內(nèi)容包括方法的專屬性、線性、范圍、準(zhǔn)確度、精密度、檢出限、定量限、耐用性和系統(tǒng)適用性等。專屬性是指分析方法能夠?qū)a(chǎn)品和雜質(zhì)分開的特性，也稱為選擇性。對于純度檢測，可在標(biāo)準(zhǔn)品中加入產(chǎn)品中的已知雜質(zhì)，或者直接用粗品，考察產(chǎn)品峰是否受到雜質(zhì)的干擾。一般要求產(chǎn)品和雜質(zhì)之間的分離度大于2.0。線性是在設(shè)定的范圍內(nèi)，檢測結(jié)果與樣品中原料或產(chǎn)品的濃度呈線性關(guān)系的程度。一般用貯備液經(jīng)過精密稀釋，制備得到一系列被測物質(zhì)的濃度(5個以上)，按濃度從小到大運(yùn)行序列，以峰面積和濃度的函數(shù)作圖，再進(jìn)行線性回歸計算，線性相關(guān)系數(shù)R應(yīng)大于0.998。范圍指在能夠達(dá)到一定的準(zhǔn)確度、精密度和線性時，樣品中被分析物的濃度區(qū)間。需要定量檢測的分析方法都需要對范圍進(jìn)行驗證，純度檢測時，范圍應(yīng)為測試濃度的80%～120%。精密度是指在規(guī)定條件下，同一均勻樣品經(jīng)多次取樣進(jìn)行一系列檢測所得結(jié)果之間的接近程度。精密度一般用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，取樣檢測次數(shù)應(yīng)至少6次。精密度可以從三個層次考察：重復(fù)性、中間精密度、進(jìn)樣精密度。a、重復(fù)性是在相同的操作條件下、較短時間間隔內(nèi)，由同一分析人員測定所得結(jié)果的精密度。一般是用100%濃度水平的樣品測定6次的結(jié)果進(jìn)行評價。b、中間精密度：同一實驗室，在日期、分析人員、儀器等內(nèi)部條件改變時，測定結(jié)果的精密度。c、進(jìn)樣精密度：指同一樣品連續(xù)進(jìn)樣至少6次測的結(jié)果的精密度。檢出限是指樣品中的被分析物能夠被檢測到的最低量，不需要準(zhǔn)確定量?？砂岩阎獫舛葮悠返男盘柵c噪聲信號進(jìn)行比較，S/N在3-5范圍內(nèi)為檢出限，一般要求能夠達(dá)到進(jìn)樣濃度的0.05%。S/N在10-15范圍內(nèi)為定量限。耐用性是指測定條件發(fā)生小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，耐用性主要表明方法的抗干擾能力，主要的變動因素包括：流速、色譜柱、柱溫等。經(jīng)試驗，應(yīng)說明小的變動能否符合系統(tǒng)適用性試驗要求，以確保方法有效。系統(tǒng)適用性便是對整個系統(tǒng)進(jìn)行評估的指標(biāo)。一般系統(tǒng)適應(yīng)性的要求為：分析方法能夠達(dá)到0.05%的檢出限，主峰的拖尾因子0.8-<2-0，主峰與雜質(zhì)的分離度大于1.5，空白無干擾，主峰處無系統(tǒng)峰干擾。當(dāng)原料藥合成工藝發(fā)生改變時，可能引入新的雜質(zhì)，就需要對雜質(zhì)檢查方法和含量測定方法的專屬性再進(jìn)行驗證，以證明有關(guān)物質(zhì)檢查方法能夠檢測新引入的雜質(zhì)，且新引入的雜質(zhì)對主成份的含量測定應(yīng)無干擾。當(dāng)分析方法發(fā)生部分改變時，如檢測波長發(fā)生改變，則需要重新進(jìn)行檢測限、專屬性、準(zhǔn)確度、精密度、線性等內(nèi)容的驗證，以證明改變后的分析方法的合理性、可行性。溶劑殘留分析方法驗證項目包括哪些？具體應(yīng)如何驗證？接收標(biāo)準(zhǔn)是什么？溶劑殘留分析方法驗證項目包括8大項目：專屬性、精密度、檢測限、定量限、線性、線性范圍、回收率、耐用性。專屬性，應(yīng)該是各種測定的成分之間分離度達(dá)到1.5以上，并且溶劑系統(tǒng)、內(nèi)標(biāo)物質(zhì)之間應(yīng)該沒有相互干擾的現(xiàn)象。線性，研究范圍為LOQ，10%，20%，40%，60%，80%，120%殘留溶劑限度水平進(jìn)行線性研究。需要列出列出以下內(nèi)容：(1)殘留溶劑濃度與峰面積的線性回歸方程，要求相關(guān)系數(shù)不小于0.99；(2)

Y軸截距絕對值與100%線性濃度水平響應(yīng)值比值應(yīng)小于5%。(3)

計算殘差平方和；

(4)

報告Y軸截距95%置信區(qū)間；(5)

每個濃度水平三次重復(fù)進(jìn)樣峰面積RSD不大于10%。準(zhǔn)確度，取100%樣品進(jìn)行6次平行進(jìn)樣或選取80%、100%、120%

三種濃度，每一濃度配制3份，用9次測定結(jié)果評價方法的回收率。殘留溶劑的回收率需在80%-120%內(nèi)。精密度，(a)重復(fù)性，在限度值的50～150％范圍內(nèi)，測定成分的回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)差為“15％以下”就可以了。(b)中間精密度，多個試驗者、多根試驗用色譜柱、改變試驗日期等各種因素進(jìn)行6次以上的試驗，從不同試驗日的方差分析結(jié)果來評價中間精密度。一般采用判定標(biāo)準(zhǔn)為“各測定值平均值的偏差（％）在±15%以內(nèi)”。檢測限，信噪比3：1的濃度作為檢測限。定量限，采用回收率達(dá)到90～110％的最小進(jìn)樣量進(jìn)行確定即可。范圍，選用限度值的1~150％即可。耐用性，將試驗條件中各參數(shù)進(jìn)行變化，就可以得到耐用性評價的結(jié)果了。改變檢測器溫度、分流比、柱溫，如果此時各測定組分之間的分離狀態(tài)良好，各溶劑的定量值與在標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)定的條件下得到的數(shù)值沒有統(tǒng)計學(xué)差異，就說明該試驗方法耐用性良好。重量含量分析方法驗證項目包括哪些？具體應(yīng)如何驗證？接收標(biāo)準(zhǔn)是什么？(1)準(zhǔn)確度，該指標(biāo)主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求分別配制濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各濃度下的平均回收率均應(yīng)在98.0%-102.0%之間，9個回收率數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）應(yīng)不大于2.0%。(2)線性，線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：在80％至120％的濃度范圍內(nèi)配制6份濃度不同的供試液，分別測定其主峰的面積，計算相應(yīng)的含量。以含量為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行線性回歸分析?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：回歸線的相關(guān)系數(shù)（R）不得小于0.998，Y軸截距應(yīng)在100％響應(yīng)值的2％以內(nèi)，響應(yīng)因子的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。(3)精密度1）重復(fù)性：配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進(jìn)行測試，所得6份供試液含量的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。2）中間精密度：配制6份相同濃度的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進(jìn)行測試，所得12個含量數(shù)據(jù)的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。(4)專屬性，可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：空白對照應(yīng)無干擾，主成分與各有關(guān)物質(zhì)應(yīng)能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測器進(jìn)行純度分析時，主峰的純度因子應(yīng)大于980。(5)檢測限，主峰與噪音峰信號的強(qiáng)度比應(yīng)在3-5之間。(6)定量限，主峰與噪音峰信號的強(qiáng)度比應(yīng)應(yīng)在10-15。另外，配制6份定量限濃度的溶液，所測6份溶液主峰的保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。(7)耐用性，柱溫變化±5℃、流速相對值變化±20％時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次。可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%。(8)系統(tǒng)適應(yīng)性，配制6份相同濃度的供試品溶液進(jìn)行分析，主峰峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%，主峰保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質(zhì)峰必須達(dá)到基線分離，主峰的理論塔板數(shù)應(yīng)符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。自制標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)化通常包括哪些檢項？是否有標(biāo)準(zhǔn)？含量的計算公式是什么？自制標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)化通常包括有關(guān)物質(zhì)，殘留溶劑的種類和含量，結(jié)構(gòu)確證（包括對骨架結(jié)構(gòu)、構(gòu)型、結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑、晶型的確證），熾灼殘渣及重金屬，無機(jī)鹽。無論創(chuàng)新藥還是已有國家標(biāo)準(zhǔn)藥品，研發(fā)的根本原則都應(yīng)圍繞安全、有效和質(zhì)量可控進(jìn)行充分的研究。如果研制的已有國家標(biāo)準(zhǔn)藥品與已上市產(chǎn)品的藥學(xué)基礎(chǔ)相同，即原料藥的合成路線、工藝條件以及所用原材料、試劑和溶劑的來源、規(guī)格等均一致，并經(jīng)驗證研制產(chǎn)品與已上市產(chǎn)品質(zhì)量一致、生物等效，則研制產(chǎn)品可以橋接已上市產(chǎn)品的安全性、有效性以及質(zhì)量控制信息。含量=API的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的限度應(yīng)如何制定？API質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)限度應(yīng)能保證用此API的生產(chǎn)制劑產(chǎn)品能在整個效期內(nèi)符合其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。但是，如果之際中存在與API相同的降解雜質(zhì)，需考慮為API制訂更為嚴(yán)格的內(nèi)部質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。在PII階段的API最好能進(jìn)行破壞性降解實驗，這些數(shù)據(jù)有助于將來進(jìn)行穩(wěn)定性研究時穩(wěn)定性測試項目的選擇；在PIII階段的API要對于有可能支持為生物生長的無菌產(chǎn)品建立合適的微生物限度；適用于臨床使用的產(chǎn)品最大的允許雜志限度不得超過于非臨床毒理研究中產(chǎn)品的量；API中大于0.1%的雜質(zhì)必須進(jìn)行定性。12、中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如何制定？對于API來說，其強(qiáng)制降解實驗的意義何在？包括哪些內(nèi)容？對于實驗結(jié)果的判斷，主要應(yīng)關(guān)注哪些方面？強(qiáng)制降解試驗是指將原料藥或制劑置于比較劇烈的試驗條件下，考察其穩(wěn)定性的一系列試驗。強(qiáng)制降解試驗的目的主要就是為了驗證降解產(chǎn)物分析方法的專屬性。一般而言，該試驗的目的主要有以下兩方面。一是通過考察藥品在一系列劇烈條件下的穩(wěn)定性，了解該藥品內(nèi)在的穩(wěn)定特性及其降解途徑與降解產(chǎn)物。例如，通過高溫降解試驗，可以了解所考察的藥品在高溫條件下是否穩(wěn)定，如果不穩(wěn)定，大致在何種條件下不穩(wěn)定，該藥品又是通過何種降解途徑得到何種降解產(chǎn)物。其二，這些試驗也能在一定程度上對有關(guān)物質(zhì)分析方法用于檢查降解產(chǎn)物的專屬性進(jìn)行驗證。根據(jù)強(qiáng)制降解試驗的目的，該項試驗一般應(yīng)考察藥品在酸、堿、高溫、強(qiáng)光、氧化等因素影響下的穩(wěn)定性。對固體狀態(tài)的原料藥而言，一般還需分別考察該原料藥在固體和溶液狀態(tài)下的穩(wěn)定性。另外，為全面了解該藥品的穩(wěn)定特性及其降解途徑，還可根據(jù)情況進(jìn)行以上因素綜合存在時的強(qiáng)制降解試驗，例如，可以考察樣品溶液分別在中性、酸性或堿性條件下對高溫或強(qiáng)光的穩(wěn)定性等。對于實驗結(jié)果的判斷要注意一下幾個方面：(1)對于采用HPLC法測定降解產(chǎn)物時，以主成分計算一般降解10％即可。并需要采用有效的方法對降解產(chǎn)物進(jìn)行檢測，需要報告測定的回收量，通常應(yīng)達(dá)到90％左右，以證明檢測方法的有效性。(2)對于破壞性試驗時降解量較大的降解產(chǎn)物，建議結(jié)合穩(wěn)定性研究中加速試驗和長期試驗的具體雜質(zhì)數(shù)據(jù)，參考ICH對新原料藥中雜質(zhì)的規(guī)定（每日服用最大劑量不超過2克時，鑒定閾值為0.10％；每日服用最大劑量超過2克時，鑒定閾值為0.05％），必要時進(jìn)行定性分析，并作為已知雜質(zhì)，根據(jù)安全性數(shù)據(jù)，采用已知雜質(zhì)對照，確定合理的限度，訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。不能采用已知雜質(zhì)進(jìn)行對照時，可通過測定降解產(chǎn)物、主成分在測定波長處的吸收系數(shù)，分析兩者的差異。若兩者吸收系數(shù)相差較大時，建議采用響應(yīng)因子校正后進(jìn)行有效控制；如果兩者吸收系數(shù)相差較小，建議采用自身對照法或峰面積歸一化法進(jìn)行有效控制。(3)破壞性試驗產(chǎn)生的降解產(chǎn)物的個數(shù)比較多，采用HPLC法測定時，需考慮主成分與降解產(chǎn)物之間、降解產(chǎn)物相互之間的分離度，保證降解產(chǎn)物峰與主峰、降解產(chǎn)物峰之間有良好的分離度。另外，對于原料藥，分離度符合要求也應(yīng)考慮到主藥與起始原料、各合成中間體是否有良好的分離度；對于制劑，應(yīng)注意輔料、輔料降解產(chǎn)物的干擾。需要值得一提的是色譜條件的確定通常以最難分離的兩個降解產(chǎn)物或降解產(chǎn)物與主成分之間的分離度符合要求作為依據(jù)之一。(4)對于創(chuàng)新藥物的破壞性試驗來說，峰純度分析非常重要，一是可以了解降解產(chǎn)物的特性；二是可以有效地檢出和控制雜質(zhì)。檢測峰純度通常采用二級管陣列檢測器或者液質(zhì)連用技術(shù)分析測定各色譜峰的純度，說明在主峰中、各降解產(chǎn)物峰中有沒有包含其它峰。簡單地通過觀察峰形判斷峰的純度沒有說服力。14、原料藥穩(wěn)定性實驗通常包括哪些實驗？分別所用樣品批次？考察項目通常包括哪些？時間點(diǎn)如何設(shè)置？原料藥穩(wěn)