土壤硝態(tài)氮試劑盒說(shuō)明書(shū)

第第頁(yè)土壤硝態(tài)氮試劑盒說(shuō)明書(shū)土壤硝態(tài)氮試劑盒說(shuō)明書(shū)微量法100T/96S注意：正式測(cè)定之前選擇23個(gè)預(yù)期差別大的樣本做猜測(cè)定。測(cè)定意義：硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素，土壤中的有機(jī)物分解生成銨鹽，被氧化后變?yōu)橄鯌B(tài)氮。土壤中硝態(tài)氮是高等植物汲取氮的重要形式之一，其含量直接關(guān)系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。測(cè)定原理：在濃酸條件下，NO3與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸，硝基水楊酸在堿性條件下（PH12）呈黃色，在肯定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測(cè)定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。自備試驗(yàn)用品及儀器：蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀。試劑構(gòu)成和配制：試劑一：粉劑×2支，4℃避光保管。臨用前依據(jù)用量每支加1mL濃硫酸充分溶解。試劑二：液體50mL×1瓶，4℃保管。樣本處理：依照土壤質(zhì)量（g）：蒸餾水體積（mL）為1：5～10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g新鮮土樣，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，置于振蕩儀中振蕩提取1h，25℃，10000g離心10min，取上清待測(cè)。測(cè)定操作表：1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)整波長(zhǎng)至410nm，蒸餾水調(diào)零。2、操作表（于EP管中加入下列試劑）空白管測(cè)定管樣本（μL）10蒸餾水（μL）10試劑一（μL）2020充分混勻，25℃靜置30min試劑二（μL）475475混勻，渦旋振蕩，使顯現(xiàn)的沉淀充分溶解，轉(zhuǎn)移200uL至微量石英比色皿/96孔板中測(cè)定410nm處吸光值A(chǔ)，△A=A測(cè)定管A空白管計(jì)算公式：a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：y=0.0156x+0.0073，R2=0.9997NO3——N含量（mg/kg鮮重）=（△A0.0073）÷0.0156÷（W÷V樣總）=64.1×（△A0.0073）÷WV樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，gb.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：y=0.0078x+0.0073，R2=0.9997NO3——N（mg/kg鮮重）=（△A0.0073）÷0.0078÷（W÷V樣總）=128.2×（△A0.0073）÷WV樣總：加入提取液體積，1mL，W：樣本質(zhì)量，g注意事項(xiàng)：1.硝酸根不為土壤膠體吸附，且易溶于水，很容易在土壤內(nèi)部移動(dòng)，所以測(cè)定此指標(biāo)時(shí)應(yīng)注意采樣深度全都。2.土壤經(jīng)風(fēng)干或者烘干很容易引起NO3——N的變動(dòng)，所以最好采用新鮮土壤進(jìn)行測(cè)定，以準(zhǔn)確反映該指標(biāo)含量。3.試劑一配制好后盡快使用，4℃可