紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程

1紫外、可見、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程本規(guī)程適用于波長(zhǎng)范圍190nm～2600nm,波長(zhǎng)連續(xù)可調(diào)的可見、紫外-可見、紫外-可見-近紅外分光光度計(jì)的首次檢定、后續(xù)檢定和使用中檢驗(yàn)。2.引用文獻(xiàn)本規(guī)程引用下列文獻(xiàn)：國(guó)際法制計(jì)量組織(OIML)國(guó)際建議R135《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室分光光度計(jì)》(InternationalrecommendationOIMLR135Edition2004Spectrophotometersformedicallaboratories)JJF1001—1998《通用計(jì)量術(shù)語及定義》JJF1059—1999《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》使用本規(guī)程時(shí)，應(yīng)注意使用上述引用文獻(xiàn)的現(xiàn)行有效版本。3概述紫外可見近紅外分光光度計(jì)(以下簡(jiǎn)稱儀器)是根據(jù)物質(zhì)的分子對(duì)紫外、可見、近紅外區(qū)輻射(光)的選擇性吸收和朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析和定性鑒別的儀器。郎伯-比爾定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式為：式中：A——物質(zhì)的吸光度；I?！?入射的單色光強(qiáng)度；I——透射的單色光強(qiáng)度；T——物質(zhì)的透射比；k——物質(zhì)的吸光系數(shù)；l——被分析物質(zhì)的光程；c——物質(zhì)的濃度。儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測(cè)器、信號(hào)處理和顯示與存儲(chǔ)系統(tǒng)組成。4計(jì)量性能要求為便于描述計(jì)量性能要求，將儀器的工作波長(zhǎng)劃分為三段，分別是A段(190nm~340nm)、B段(340nm～900nm)、C段(900nm～2600nm)。按照計(jì)量性能的高低將儀器劃分為I、Ⅱ、Ⅲ、IV共4個(gè)級(jí)別。4.1波長(zhǎng)最大允許誤差儀器波長(zhǎng)最大允許誤差應(yīng)符合表1的要求。2表1波長(zhǎng)最大允許誤差nmA段IⅡ十0.5Ⅲ4.2波長(zhǎng)重復(fù)性儀器波長(zhǎng)重復(fù)性應(yīng)滿足表2要求。A段IⅡⅢ4.3噪聲與漂移儀器噪聲與漂移應(yīng)符合表3的要求。%表3儀器噪聲與漂移的要求%透射比為100%噪聲注：非掃描儀器不作漂移指標(biāo)。4.4最小光譜帶寬儀器的最小光譜帶寬誤差應(yīng)不超過標(biāo)稱光譜帶寬的士20%。4.5透射比最大允許誤差儀器透射比最大允許誤差應(yīng)滿足表4要求。%表4透射比最大允許誤差%I士0.3土0.3Ⅱ土0.5士0.5Ⅲ士2.0士2.034.6透射比重復(fù)性儀器透射比重復(fù)性應(yīng)滿足表5要求。A段IⅡⅢ4.7基線平直度儀器基線平直序地象光度表示，應(yīng)符合表6要求士0.001士0.002Ⅱ士成土0.002士0.005Ⅲ士0.005士0.005任士0.010M十0.01Cd士0.020電源電日適應(yīng)性儀器的射示值變化應(yīng)滿電流違壓的適應(yīng)性7要求。%級(jí)透射比示值變1士0.2Ⅲ士1儀器雜散光應(yīng)符合表8要IⅡⅢ44.10吸收池的配套性吸收池配套性應(yīng)符合表9要求。表9吸收池配套性要求%吸收池類別波長(zhǎng)配套誤差石英玻璃5通用技術(shù)要求5.1安全性能儀器的絕緣電阻應(yīng)不低于20MΩ。5.2標(biāo)志儀器應(yīng)有下列標(biāo)志：名稱、型號(hào)、編號(hào)、制造廠名、出廠日期、工作電源電壓、頻率。國(guó)產(chǎn)儀器應(yīng)有制造生產(chǎn)許可標(biāo)志及編號(hào)。5.3外觀儀器各緊固件均應(yīng)緊固良好，各調(diào)節(jié)旋鈕、按鍵和開關(guān)均能正常工作，電纜線的接插件均能緊密配合且接地良好。儀器應(yīng)能平穩(wěn)地置于工作臺(tái)上，樣品架定位正確。指示器刻線粗細(xì)均勻、清晰，數(shù)字顯示清晰完整，可調(diào)節(jié)部件不應(yīng)有卡滯、突跳及顯著的空回。5.4吸收池吸收池不得有裂紋，透光面應(yīng)清潔，無劃痕和斑點(diǎn)。6計(jì)量器具控制計(jì)量器具控制包括首次檢定、后續(xù)檢定和使用中檢驗(yàn)。6.1檢定條件6.1.1波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)6.1.1.1汞燈；6.1.1.2附有1,2,5nm三個(gè)光譜帶寬下波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)值的氧化鈥、鐠釹、鐠鉺濾光片；6.1.1.3氧化鈥溶液，質(zhì)量濃度為40g/L;6.1.1.41,2,4-三氯苯(分析純);6.1.1.5干涉濾光片：峰值波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)不確定度≤1nm,光譜帶寬<15nm。6.1.2透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)6.1.2.1質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.06000/1000重鉻酸鉀的0.001mol/L高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液；6.1.2.2紫外光區(qū)透射比濾光片；6.1.2.3光譜中性濾光片，其透射比標(biāo)稱值為10%,20%,30%。6.1.3雜散光標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)6.1.3.1截止濾光片，使用波長(zhǎng)分別為220,360,420nm,半高波長(zhǎng)分別為260,5400,470nm,截止波長(zhǎng)分別不小于225,365,430nm,截止區(qū)吸光度不小于3,透光區(qū)平均透射比不低于80%;6.1.4標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池：規(guī)格為10.0mm,其透射比配套誤差不大于0.2%。6.1.5.1調(diào)壓變壓器：輸出功率不小于500W,輸出電壓(0～250)V;6.1.5.2兆歐表：試驗(yàn)電壓500V,10級(jí)；6.1.5.3萬用表：不低于2.5級(jí)；6.1.6.2相對(duì)濕度不大于85%;表10.檢定項(xiàng)目一覽表序號(hào)檢定項(xiàng)目首次檢定后續(xù)檢定123456789通用技術(shù)要求波長(zhǎng)示值誤差與重復(fù)性噪聲與漂移光譜帶寬透射比示值誤差與重復(fù)性基線平直度電源電壓的適應(yīng)性雜散光吸收池的配套性十十十一十十十十十一十十.注：“十”為應(yīng)檢項(xiàng)目，“一”為可不檢項(xiàng)目。6.3檢定方法6.3.1.1安全性能用500V兆歐表，測(cè)量?jī)x器電源進(jìn)線端與機(jī)殼(或接地端子)間的絕緣電阻。測(cè)試時(shí)電源插頭不接入電網(wǎng)，電源開關(guān)置于接通位置，用導(dǎo)線將電源插頭的相線與零線短路，用兆歐表讀取電源插頭的相線與儀器接地端子之間的絕緣電阻。6.3.1.2外觀、標(biāo)志及吸收池66.3.2波長(zhǎng)最大允許誤差及波長(zhǎng)重復(fù)性6.3.2.1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的選擇根據(jù)儀器選擇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，參見表11?？晒┻x擇的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是：①低壓石英汞燈②氧化鈥濾光片，③氧化鈥溶液，④標(biāo)準(zhǔn)干涉濾光片，⑤鐠釹濾光片，⑥錯(cuò)鉺濾光片⑦1,2,4-三氯苯(分析純),⑧儀器的氘燈，⑨高壓汞燈。表11波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)器的選擇I①、②、(⑨、⑦Ⅱ⑨、⑦Ⅲ⑧⑨、⑦⑨、⑦根據(jù)儀器的工作速長(zhǎng)施圍正確選一個(gè)波長(zhǎng)檢定點(diǎn)，↓根據(jù)儀器的波長(zhǎng)長(zhǎng)檢定點(diǎn)。根據(jù)儀器的工作速長(zhǎng)施圍正確選一個(gè)波長(zhǎng)檢定點(diǎn)，↓根據(jù)儀器的波長(zhǎng)長(zhǎng)檢定點(diǎn)。a)非自動(dòng)掃描似器或吸光度測(cè)量方式，在測(cè)量的波使用溶液或慧光片標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，長(zhǎng)點(diǎn)用空氣作空河整儀器透射比為后將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)垂直面于樣品光路中，標(biāo)準(zhǔn)物擋光板調(diào)整透測(cè)量值，重復(fù)或吸光度測(cè)量方式，在測(cè)量的波使用溶液或慧光片標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，長(zhǎng)點(diǎn)用空氣作空河整儀器透射比為后將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)垂直面于樣品光路中，標(biāo)準(zhǔn)物擋光板調(diào)整透測(cè)量值，重復(fù)檢定點(diǎn)附近單向連則出標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透比或吸光度，求出相應(yīng)的透射用本值或吸光度峰值波長(zhǎng)λ,連續(xù)源重3次。選擇汞燈時(shí)，將形燈置于光源室使、單色器入射狹組選取儀器的能量測(cè)量方式，設(shè)定合后的增益，調(diào)酸表的位管使能達(dá)到最大，在峰值波長(zhǎng)附近單向逐點(diǎn)測(cè)出能量最人值對(duì)應(yīng)的明b)自動(dòng)掃描儀器波長(zhǎng)根據(jù)選擇的檢定波長(zhǎng)設(shè)定儀器的波長(zhǎng)掃描范圍(如果波長(zhǎng)臺(tái)范圍較寬允許分段掃波長(zhǎng)采樣間隔，應(yīng)選取較慢的掃描之件人。例用容光片標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，采用透射比或吸光度測(cè)量方式，根據(jù)設(shè)定的掃描參數(shù)用空氣作空白進(jìn)行儀器的基線校正，用擋光板進(jìn)行暗電流校正，然后將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)垂直置于樣品光路中，設(shè)置合適的記錄范圍，連續(xù)掃描3次，分別檢出(或測(cè)量)透射比谷值或吸光度峰值波長(zhǎng)λ;。使用低壓石英汞燈時(shí)，按6.3.2.2a)連續(xù)掃描3次，分別檢出(或測(cè)量)能量的6.3.2.3結(jié)果計(jì)算將每個(gè)測(cè)量波長(zhǎng)按照式(1)計(jì)算波長(zhǎng)示值誤差：7式中：λ——3次測(cè)量的平均值；按照式(2)計(jì)算波長(zhǎng)重復(fù)性：分別為3次測(cè)量波長(zhǎng)的最大值與最小值。6.3.3噪聲與漂移根據(jù)儀器的工作波段范圍選取A段250nm,B段500nm,C段1500nm作為噪聲的測(cè)量波長(zhǎng)，500nm為漂移的測(cè)量波長(zhǎng)設(shè)置儀器的掃描參數(shù)為而掃指入S成方人長(zhǎng)掃描),光譜帶寬2nm(固定光譜帶寬的儀器不設(shè)),時(shí)間采樣間隔(或積分時(shí)間，光度測(cè)量方式為透射比，記錄范圍99%～101%(共掃描儀器不設(shè)),在每個(gè)測(cè)量波民眾青參比光束與樣品光束皆為(非掃描儀器，訂是二min內(nèi)的最光路中插入擋半板調(diào)整儀器透射差(非掃描儀部記泉2min內(nèi)的真波長(zhǎng)切允許見光穩(wěn)定5值與最小值nin,測(cè)量和蘭上最大值與最小值之即為儀器透用華○%噪聲。自動(dòng)掃鹽心器，按上述要求測(cè)試透射比0%和100%噪聲后，置于500nm處，掃描30mir,讀出掃描圖譜包100%線漂本。6.3.4最小實(shí)譜帶寬具有氘的儀器選擇氘燈中心線的最大值和最小值之差訓(xùn)為儀器的透射比工56.11譜線，沒有氘5的儀器選擇汞燈546.1nm(或253.7nm)的特征增，選擇最小無譜帶寬，按照b32.2方法記錄氘燈或汞燈的特往部線圖譜，測(cè)量半6.3.5透射比最大允許誤差和重a透射比三次。在235313,350nm處測(cè)量也可用6.1.2.2的紫外區(qū)透射比濾光片測(cè)量。b)用透射比標(biāo)稱值出G30光中住濾光片，分別在440,546,635nm處，以空氣為參比，測(cè)血透射M6.3.5.2結(jié)果計(jì)算按式(3)計(jì)算透射比示值誤差：式中：T——3次測(cè)量的平均值；T,——透射比標(biāo)準(zhǔn)值。按照式(4)計(jì)算透射比重復(fù)性：δr=Tmx—Tmin式中：Tmx,Tmin——3次測(cè)量透射比的最大值與最小值。86.3.6基線平直度按儀器要求進(jìn)行基線校正后，設(shè)置儀器光譜帶寬2nm(無光譜帶寬調(diào)整擋的儀器不設(shè)),掃描速度中速，取樣間隔1nm,參照儀器說明書設(shè)定合適的吸光度量程，在波長(zhǎng)下限加10nm,波長(zhǎng)上限減50nm進(jìn)行掃描，測(cè)量圖譜中起始點(diǎn)的吸光度與偏離起始點(diǎn)的吸光度(取最大偏離點(diǎn))之差即為基線平直度(在更換光源或接收器時(shí)允許有瞬間6.3.7電源電壓的適應(yīng)性用調(diào)壓器輸入220V電壓，在選擇波長(zhǎng).250,500,1500nm處，調(diào)整透射比示值為100%,改變輸入電壓，分別記錄儀器在198V和242V時(shí)的透射比示值，并計(jì)算與100%的差值即為電源電壓的適應(yīng)性。6.3.8雜散光選擇6.1.3規(guī)定的雜散光測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，在相應(yīng)波長(zhǎng)處測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比，其透射比值即為儀器在該波長(zhǎng)處的雜散光。a)A段用碘化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(或截止濾光片)于220nm,亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(或截止濾光片)于360nm(鎢燈),10nm標(biāo)準(zhǔn)石英吸收池，蒸餾水作參比，光譜帶寬2nm(無光譜帶寬調(diào)整擋的儀器不設(shè))測(cè)量其透射比示值。b)B段棱鏡式儀器，用截止濾光片，在波長(zhǎng)420nm處，以空氣為參比，測(cè)量其透c)C段用H?O于1420nm波長(zhǎng)處，測(cè)量其透射比示值，以空氣為參比。d)對(duì)于需要測(cè)量?jī)x器的低雜散光值時(shí)，使用衰減片，先測(cè)出衰減片的透射比值；再以衰減片為參比，測(cè)量上述標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)透射比值，兩者透射比值的乘積即為雜散光，6.3.9吸收池的配套性儀器所附的同一光徑吸收池中，裝蒸餾水于220nm(石英吸收池)、440nm(玻璃吸收池)處，將一個(gè)吸收池的透射比調(diào)至100%,測(cè)量其他各池的透射比值，其差值即為吸收池的配套性。對(duì)透射比范圍只有0～100%擋的儀器，可用95%代替100%。6.3.10對(duì)于測(cè)量方法沒有完全包括在本規(guī)程范圍內(nèi)的其他類型分光光度計(jì)，其主要技術(shù)指標(biāo)可參照上述檢定方法進(jìn)行檢定，技術(shù)要求可參照儀器出廠技術(shù)指標(biāo)要求。6.4檢定結(jié)果的處理6.4.1新制造的儀器應(yīng)全面按6.2表10中的首次檢定項(xiàng)目進(jìn)行檢定。后續(xù)檢定、使用中檢驗(yàn)，原則上按表10中的后續(xù)檢定和使用中檢驗(yàn)的內(nèi)容進(jìn)行，必要時(shí)按首次檢定要6.4.2按本規(guī)程檢定合格的儀器，發(fā)給檢定證書，并以檢定結(jié)果中最低級(jí)別注明儀器合格級(jí)別；若應(yīng)檢項(xiàng)目中(不包括4.10),有一項(xiàng)指標(biāo)不符合要求，即判為不合格，發(fā)給檢定結(jié)果通知書，并注明不合格項(xiàng)目。6.5檢定周期檢定周期一般不超過1年，在此期間內(nèi)，儀器經(jīng)修理或?qū)y(cè)量結(jié)果有懷疑時(shí)，應(yīng)及9附錄A波長(zhǎng)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的參考波長(zhǎng)表A.1汞燈參考波長(zhǎng)值nm編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)172839456注：當(dāng)光譜帶寬大于0.5nm時(shí)不要選擇365.02nm與365.48nm的譜線；當(dāng)光譜帶寬大于2.5nm時(shí)不要選擇365.02nm與365.48nm及576.96nm與579.00nm的譜線。表A.2低壓汞燈譜線強(qiáng)度(供參考)強(qiáng)度強(qiáng)度強(qiáng)度511注：譜線強(qiáng)度與光源和檢測(cè)器等因素有關(guān)。nmnm編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)1279.459484.52287.56418.737453.2637.548460.0注：不同廠家不同批次濾光片的參考波長(zhǎng)可能存在少許差異，參考波長(zhǎng)值應(yīng)以具有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)資格的機(jī)構(gòu)的校準(zhǔn)波長(zhǎng)為準(zhǔn)，并應(yīng)定期進(jìn)行校正。編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)編號(hào)波長(zhǎng)1357246附錄B重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液在相應(yīng)波長(zhǎng)下不同溫度、不同光譜帶寬時(shí)的透射比值表B.1重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液在相應(yīng)波長(zhǎng)下不同溫度時(shí)的透射比值%溫度/℃注：光譜帶寬2表B.2路酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液在20*下同光譜帶寬的近%C1)234562附錄C標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法稱取已干燥過的碘化鈉5.0g(稱準(zhǔn)至士0.1g)于燒杯中，用蒸餾水溶解，然后移入500mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻并避光保存。稱取已干燥過的亞硝酸鈉25.0g(稱準(zhǔn)至±0.1g),按上述方法配成500mL。稱取已干燥過的重鉻酸鉀60.00mg,移入1L容量瓶中，用蒸餾水溶解，加入1mL的1.0mol/L高氯酸溶液，再用蒸餾水稀釋溶液質(zhì)量為1000.0g,避光密封保存。稱取已干燥過的氧化鈥(基準(zhǔn)試劑)4g(準(zhǔn)確至±0.1g),放置100mL容量瓶中，再加入10%高氯酸溶液至刻度，待溶解搖勻后，避光密封保存。檢定證書內(nèi)頁(yè)格式4噪聲與漂移：透射比為100%噪聲