（高清版）GBZT 334-2024 尿中亞硫基二乙酸測定標(biāo)準(zhǔn) 離子色譜法

ICS13.100CCSC52中華人民共和國國家職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)代替WS/T63—1996Determinationstandardofthiodiglycolicacidinurine—IonchromatographicIGBZ/T334—2024本標(biāo)準(zhǔn)為推薦性標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)代替WS/T63—1996《尿中亞硫基二乙酸的氣相色譜測定方法》，與WS/T63—1996相比，主要技術(shù)變化如下：——?jiǎng)h除了尿中亞硫基二乙酸的氣相色譜法（見1996年版——增加了尿中亞硫基二乙酸離子色譜法（見第4章）。本標(biāo)準(zhǔn)由國家衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)職業(yè)健康標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)負(fù)責(zé)技術(shù)審查和技術(shù)咨詢，由中國疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)性和格式審查，由國家衛(wèi)生健康委職業(yè)健康司負(fù)責(zé)業(yè)務(wù)管理、法規(guī)司負(fù)責(zé)統(tǒng)籌管本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京市化工職業(yè)病防治院（北京市職業(yè)病防治研究院）、中國疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所、國家衛(wèi)生健康委職業(yè)安全衛(wèi)生研究中心、深圳市職業(yè)病防治院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：潘興富、劉曉東、牛東升、丁曉文、郭啟芬、趙瑋、崔師偉、鄭玉橋、李添娣、贠建培。本標(biāo)準(zhǔn)及其所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：——1996年首次發(fā)布為WS/T63—1996；——本次為第一次修訂。1GBZ/T334—2024尿中亞硫基二乙酸測定標(biāo)準(zhǔn)離子色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了尿中亞硫基二乙酸的離子色譜測定法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于職業(yè)接觸氯乙烯人員尿中亞硫基二乙酸濃度的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本標(biāo)準(zhǔn)必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GBZ/T210.5職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)制定指南第5部分：生物材料中化學(xué)物質(zhì)測定方法GBZ/T224職業(yè)衛(wèi)生名詞術(shù)語GBZ/T295職業(yè)人群生物監(jiān)測方法總則3術(shù)語和定義GBZ/T224及GBZ/T295界定的術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。4原理尿樣用固相萃取小柱凈化，經(jīng)陰離子交換色譜柱分離，電導(dǎo)檢測器檢測，以保留時(shí)間定性，測定峰面積或峰高，采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。5儀器5.1純水機(jī)。5.2離心機(jī)。5.3渦旋振蕩器。5.4尼龍濾膜過濾頭：0.22μm。5.5電子天平：感量0.01mg。5.6尿比重折射儀。5.7固相萃取小柱ODS-C18（200mg，3mL），或等效萃取柱。5.8離心管：50mL、15mL。5.9離子色譜儀：配備電導(dǎo)檢測器和陰離子抑制器。儀器操作參考條件：a)色譜柱：IonPacAS19陰離子交換色譜柱（250mm×4mm），或其他等效離子交換色譜柱；b)淋洗液：氫氧化鉀溶液；c)梯度淋洗模式：0min～10min，20.0mmol/L；10min～20min，20.0mmol/L～30.20min～30min，30.0mmol/L～60.0mmol/L；30min～36min，60.0mmol/L。d)淋洗液流速：1.0mL/min；2GBZ/T334—2024e)抑制器：抑制電流150mA；f)進(jìn)樣體積：25μL。6試劑6.1亞硫基二乙酸：純度≥99.5%。6.2甲醇：色譜純。6.3去離子水：電阻率≥18.2MΩ?cm。6.4亞硫基二乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取亞硫基二乙酸標(biāo)準(zhǔn)品50.0mg于50mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，所得濃度為1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，于冰箱4℃冷藏，可保存7d。臨用時(shí)用去離子水稀釋成濃度為100.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。7樣品的采集、運(yùn)輸和保存7.1按照GBZ/T295的要求進(jìn)行尿樣采集和運(yùn)輸。7.2樣品采集：采集氯乙烯接觸者班后2h～10h的尿，或下一個(gè)班前尿，采樣時(shí)防止污染。尿樣的采集應(yīng)大于20mL。必要時(shí)采集雙份樣品，一份作為備份樣品。7.3樣品空白：在樣品采集的過程中，同時(shí)制備3份樣品空白。模擬采集去離子水，并與樣品同時(shí)運(yùn)輸和儲(chǔ)存。7.4樣品采集后，2h內(nèi)用尿比重折射儀測尿樣比重。7.5樣品運(yùn)輸：將采集后的樣品和樣品空白置于清潔容器中4℃冷鏈運(yùn)輸。7.6樣品保存：樣品在4℃下可保存5d；樣品在-20℃下可保存14d。8分析步驟8.1標(biāo)準(zhǔn)系列的配制和測定用標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液和去離子水配制成濃度分別為0.00μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、2.50μg/mL、10.00μg/mL、50.00μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。按照儀器操作參考條件，將離子色譜儀調(diào)節(jié)至最佳測定狀態(tài)，取25μL進(jìn)樣，測定標(biāo)準(zhǔn)系列，以保留時(shí)間定性，峰面積或峰高值對亞硫基二乙酸濃度(μg/mL）計(jì)算線性回歸方程。8.2活化小柱在固相萃取小柱中依次加入2mL甲醇和2mL去離子水，自然淋洗以活化固相萃取小柱，并用吸耳球吹掉柱內(nèi)殘液。8.3樣品處理尿樣放至室溫，取10mL加入15mL離心管中，3000r/min常溫離心10min；取上層尿樣2.5mL于10mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，渦旋振蕩1min；準(zhǔn)確量取2.0mL稀釋后的尿樣通過活化后的固相萃取小柱，用1.0mL去離子水淋洗小柱并用吸耳球吹出柱內(nèi)殘液，收集全部流出液，渦旋振蕩1min；用0.22μm尼龍濾膜過濾頭過濾后轉(zhuǎn)移到進(jìn)樣小瓶待測?；蚴褂米詣?dòng)固相萃取裝置處理。8.4樣品測定3GBZ/T334—2024用測定標(biāo)準(zhǔn)系列的儀器操作條件測定處理后的樣品及樣品空白溶液的峰面積或峰高，由回歸方程得亞硫基二乙酸的濃度(μg/mL）。當(dāng)樣品空白檢驗(yàn)結(jié)果大于方法檢出限時(shí)，應(yīng)對方法空白、采樣容器空白、容器空白、試劑空白和儀器空白等進(jìn)行檢驗(yàn)，以確定樣品空白結(jié)果的來源。樣品濃度超過測定范圍，可用去離子水稀釋后測定，計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù)。8.5質(zhì)量控制檢測過程質(zhì)量控制應(yīng)按照GBZ/T295的要求進(jìn)行。9計(jì)算9.1按式（1）計(jì)算尿樣中亞硫基二乙酸的濃度：1）式中：ρ——尿樣中亞硫基二乙酸質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mLρ0——由回歸方程計(jì)算的亞硫基二乙酸質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL6——稀釋系數(shù)；k——尿樣換算成標(biāo)準(zhǔn)比重（1.020）下的濃度校正系數(shù)。9.2按照GBZ/T295中的方法測定尿比重，對檢測結(jié)果進(jìn)行比重較正。10.1本標(biāo)準(zhǔn)按照GBZ/T210.5的方法和要求進(jìn)行研制。10.2本方法檢出限為0.1μg/mL，定量下限為0.3μg/mL；方法測定范圍為0.3μg/mL～300.0μg/mL；批內(nèi)精密度范圍為0.7%～5.0%；批間精密度范圍為0.5%～8.8%；加標(biāo)回收率為80.1%～104.2%。10.3尿樣應(yīng)在冷凍前測定比重，剔除尿比重低于1.010g/mL和大于1.030g/mL的尿樣。亞硝酸根離子（NO2-）、硝酸根離子（NO3-）、碳酸根離子（CO32-）、硫酸