高考生物二輪復習 第一部分 專題八 現(xiàn)代生物科技專題 命題源17 基因工程與細胞工程-人教版高三生物試題

基因工程與細胞工程1．(2015·江蘇兩市一模)為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉運肽基因相連，導入油菜細胞并獲得了轉基因油菜品種。(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設計引物，采用________法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉運肽基因，所含三種限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切點如圖一所示。則用____________和________酶處理兩個基因后，可得到_____端與_____端(填圖中字母)相連的融合基因。(2)將上述融合基因插入圖二所示Ti質粒的T-DNA中，構建____________并導入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含________的固體平板上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉化的侵染液。(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是______________________________，進一步篩選后獲得轉基因油菜細胞，該細胞通過________________技術，可培育成轉基因油菜植株。(4)用____________法可檢測轉基因油菜植株中的融合基因是否成功表達。解析：(1)由題中“已知序列設計引物”可想到PCR擴增DNA的做法。由圖示中酶D基因和轉運肽基因都有ClaⅠ酶切位點，想到用ClaⅠ酶酶切后，酶D基因的A端和轉運肽基因的D端可用DNA連接酶將其連成融合基因。(2)將融合基因插入Ti質?？尚纬芍亟M質?；蛘呋虮磉_載體。由Ti質粒上具有四環(huán)素抗性基因，所以想到在培養(yǎng)基上添加四環(huán)素以實現(xiàn)目的基因的篩選和鑒定。(3)油菜的葉片放入侵染液中一段時間后能篩選獲得轉基因油菜，說明侵染液中有農(nóng)桿菌，用農(nóng)桿菌轉化法將融合基因導入油菜細胞中。轉基因油菜細胞培育為轉基因油菜植株，用植物組織培養(yǎng)技術。(4)檢測轉基因油菜植株中的融合基因是否成功表達，即檢查轉基因油菜中是否合成了融合基因相應蛋白，所以用抗原—抗體雜交技術。答案：(1)PCRClaⅠDNA連接AD(2)基因表達載體(或“重組質?！?四環(huán)素(3)利用農(nóng)桿菌將融合基因導入油菜細胞植物組織培養(yǎng)(4)抗原—抗體雜交2．(2015·寧夏銀川三模)轉基因抗蟲棉是人們應用較早的基因重組技術推廣項目，目前轉基因技術有了新的改進，如下圖所示，請根據(jù)所學知識回答：(1)圖中轉基因過程通常選擇的限制酶是____________________，啟動子的作用是與________________識別和結合，從而驅動基因的轉錄過程。目的基因與載體結合主要依靠二者含有共同的________________。(2)需要進行離體組織培養(yǎng)的過程是________(用標號)。由棉株1獲得單倍體苗的途徑為：花粉通過誘導首先形成________進而再分化為試管苗。一般試管苗的形成，先誘導生成________(“叢芽”或“根”)，說明原因________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)棉株1、2、3中各隨機取出一個葉肉細胞，其細胞核中含有的目的基因個數(shù)分別為________。解析：(1)分析圖示可知，目的基因的兩側以及質粒上都有EcoRⅠ和BamHⅠ限制酶的識別位點，所以圖中轉基因過程通常選擇的限制酶是EcoRⅠ和BamHⅠ。啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，所以啟動子的作用是與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動基因的轉錄過程。目的基因與載體結合主要依靠二者含有共同的黏性末端。(2)由棉株1獲得單倍體苗的①過程為花藥離體培養(yǎng)，需要用到植物組織培養(yǎng)技術，由受體細胞培養(yǎng)成棉株2的③過程也需用到植物組織培養(yǎng)技術，所以需要進行離體組織培養(yǎng)的過程是①和③。棉株1的花粉通過誘導首先形成愈傷組織進而再分化為試管苗。試管苗的形成，一般先誘導其生成叢芽，有利于進行光合作用合成有機物，進而利于生長。(3)圖示顯示目的基因導入的受體細胞來源于單倍體幼苗，由受體細胞通過③過程培養(yǎng)成的棉株2為單倍體，由棉株2通過④過程培養(yǎng)成棉株3，需要人工誘導染色體加倍，目的基因也隨之加倍，所以，棉株1、2、3中各隨機取出一個葉肉細胞，其細胞核中含有的目的基因個數(shù)分別為0、1、2。答案：(1)EcoRⅠ和BamHⅠRNA聚合酶黏性末端(2)①和③愈傷組織叢芽進行光合作用合成有機物，利于生長(3)0、1、23．(2015·山東文登二模)下面是科學家利用現(xiàn)代生物技術研制用于癌癥治療的鼠—人嵌合抗體的流程圖。請回答：(1)利用蛋白質工程技術對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據(jù)預期________________，設計________________，進一步推測應有的氨基酸序列，最終通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠—人嵌合抗體基因，然后導入鼠淋巴細胞中使其________。在Ig基因表達載體構建的過程中，人和鼠的基因要用____________切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(2)圖中嵌合載體啟動子位于基因的首端，它是______識別和結合的部位，終止子是________的終點；嵌合載體中還應含有________________，以便重組DNA的鑒定和篩選。(3)圖中的“抗體分泌細胞”名稱是________，檢測目的基因在淋巴細胞中是否得到表達可采用________________技術。(4)在制備單克隆嵌合抗體過程中要進行篩選，第二次篩選的目的是________________________________________________________________________。解析：(1)蛋白質工程的基本途徑是：從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核糖核苷酸序列(DNA)。所以，利用蛋白質工程技術對鼠源雜交瘤抗體進行改造時，首先必須根據(jù)預期嵌合抗體的功能，設計嵌合抗體的結構，進一步推測應有的氨基酸序列，最終通過基因拼接，將鼠源抗體基因改造成鼠—人嵌合抗體基因，然后導入鼠淋巴細胞中使其表達。在基因表達載體構建的過程中，人和鼠的基因要用同種限制酶切割核苷酸之間的磷酸二酯鍵，以產(chǎn)生相同的黏性末端。(2)啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，終止子是轉錄終止的信號；基因表達載體由啟動子、終止子、目的基因和標記基因等組成，其中標記基因用于重組DNA的鑒定和篩選。(3)圖中的“抗體分泌細胞”的名稱是漿細胞；檢測目的基因在受體細胞中是否表達，常采用抗原—抗體雜交技術。(4)制備單克隆抗體時要經(jīng)過兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞。答案：(1)嵌合抗體的功能嵌合抗體的結構表達同種限制酶(2)RNA聚合酶轉錄標記基因(3)漿細胞抗原—抗體雜交(4)獲得能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞4．(2015·吉林三模)目前栽培的主要香蕉品種是三倍體或多倍體，不結種子，因此無性繁殖成了主要種植方式。長期以來，香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴重威脅，制約了其發(fā)展，為提高其產(chǎn)量，某生物小組利用轉基因技術培育抗病香蕉。培育過程如圖所示：(1)獲得抗病基因后，常利用________技術進行擴增，該技術的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成________。該技術需要的酶是____________________。(2)將目的基因導入植物細胞常用的方法有多種，圖中所示方法為____________________。欲檢測轉基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因，可采用____________________技術。(3)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體A中含有________________，作為標記基因。(4)香蕉的抗病性狀主要存在野生的二倍體香蕉品種中，但絕大多數(shù)香蕉抗病性狀的分子背景尚不清楚。小組同學認為還可以利用________________技術將三倍體香蕉體細胞與二倍體香蕉體細胞進行融合培育抗病香蕉，該技術常用的化學誘導劑是____________。解析：(1)抗病基因為基因工程中的目的基因，可用PCR技術進行擴增；PCR技術的前提是要有一段已知的目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，該技術需要TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)。(2)圖示中將目的基因導入植物細胞的方法為農(nóng)桿菌轉化法。檢測轉基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因，可采用DNA分子雜交技術。(3)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該物質培養(yǎng)篩選已導入抗病基因的香蕉細胞，應使基因表達載體A中含有卡那霉素抗性基因，作為標記基因。(4)將三倍體香蕉體細胞與二倍體香蕉體細胞進行融合培育抗病香蕉，可采用植物體細胞雜交技術，該技術常用的化學誘導劑是聚乙二醇(PEG)。答案：(1)PCR引物TaqDNA聚合酶(2)農(nóng)桿菌轉化法DNA分子雜交(3)抗卡那霉素基因(或答卡那霉素抗性基因)(4)植物體細胞雜交聚乙二醇(PEG)5．(2015·黑龍江哈爾濱期末)細胞融合技術有著廣泛應用。下圖為細胞融合的簡略過程，據(jù)圖回答相關問題：(1)若a、b分別是基因型為yyRr和YYrr兩個玉米品種的花粉，且這兩對基因分別位于兩對同源染色體上?？茖W家分別將它們的花粉除去細胞壁，然后誘導其融合，再把這些融合細胞進行培養(yǎng)，培育出了玉米新品種。①這兩個品種的花粉可用化學誘導劑____________誘導融合，共可產(chǎn)生____種基因型的融合細胞(僅考慮兩兩融合)，這些融合細胞經(jīng)過脫分化形成____________，再經(jīng)培養(yǎng)可以得到____種不同于親本表現(xiàn)型的玉米新品種。②若想培育出基因型為yyRR的玉米植株，也可直接用yyRr植株的花粉培養(yǎng)，再經(jīng)過________________處理并篩選獲得，這種方法叫做________________。(2)若a、b表示番茄和馬鈴薯兩種植物的體細胞，請據(jù)圖回答：①在“番茄—馬鈴薯”的培育過程中，運用了植物細胞工程中的________________________技術，植物體細胞融合完成的標志是________________________。②a、b細胞融合之前，要用到的酶是________________，酶處理后得到________________。(3)若a、b分別為骨髓瘤細胞和已免疫的B淋巴細胞，請據(jù)圖回答：為了能充分發(fā)揮上述兩種細胞各自的特點，經(jīng)特殊處理，在促細胞融合因子的作用下，使兩種細胞發(fā)生融合，形成圖中的d細胞，d細胞的特點是______________________________________________。由d細胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較，具有________________________________等特點。解析：(1)①誘導細胞融合的常用化學試劑是聚乙二醇(PEG)。由于a、b兩個玉米品種基因型分別為yyRr和YYrr，所以它們產(chǎn)生的花粉的基因型分別有yR、yr、Yr，僅考慮兩兩融合，可產(chǎn)生6種基因型的融合細胞，即yyRR、yyrr、YYrr、yyRr、YyRr、Yyrr。融合細胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)培養(yǎng)可以得到2種不同于親本表現(xiàn)型的玉米新品種。②若想培育出基因型為yyRR的玉米植株，也可直接用yyRr植株的花粉培養(yǎng)，再經(jīng)過秋水仙素處理即染色體加倍，并篩選獲得，這種方法叫做單倍體育種。(2)①在“番茄—馬鈴薯”的培育過程中，運用了植物體細胞雜交技術，植物體細胞融合完成的標志是再生出細胞壁。②a、b細胞融合之前，需要去除細胞壁，所以要用的酶是纖維素酶和果膠酶，得到原生質體。(3)①若a、b分別為骨髓瘤細胞和已免疫的B淋巴細胞，融合得到圖中的d細胞，其特點是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。由d細胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比較，具有特異性強、靈敏度高、并可大量制備等特點。答案：(1)①聚乙二醇(PEG)6愈傷組織2②染色體加倍(秋水仙素處理)單倍體育種(2)①植物體細胞雜交再生出細胞壁②纖維素酶和果膠酶原生質體(3)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體特異性強、靈敏度高、并可大量制備6．(原創(chuàng)題)微載體是由天然葡聚糖等組成的顆粒，其直徑很小，常用于貼壁生長的細胞培養(yǎng)。微載體大規(guī)模細胞培養(yǎng)技術已廣泛應用于科研生產(chǎn)，其流程圖如下：(1)微載體加入培養(yǎng)罐中后，通過攪動使其保持懸浮狀態(tài)，這樣不僅能讓細胞與培養(yǎng)液充分接觸，而且便于細胞的________，所以選用的微載體顆粒直徑應盡可能小。(2)圖中過程a的處理是__________________。(3)培養(yǎng)罐培養(yǎng)所需的條件是__________________________________(至少答出三項)。(4)在產(chǎn)生單克隆抗體過程中，雜交瘤細胞在加入培養(yǎng)罐前，需進行篩選，其目的是篩選出____________________的細胞群。(5)工程菌和動物細胞均能用于生產(chǎn)乙肝疫苗，它們的根本區(qū)別在于導入的受體不同，前者是導入能高效快速表達的____________，而后者是導入倉鼠卵巢細胞。解析：圖中過程a是用胰蛋白酶處理，將組織塊分解成單個細胞；培養(yǎng)罐培養(yǎng)所需條件，也就是細胞培養(yǎng)的條件，應從營養(yǎng)成分、溫度、pH、氧氣等方面回答；雜交瘤細胞在加入培養(yǎng)罐前需要進行篩選，其目的是獲得既能產(chǎn)生特異性抗體，又能迅速大量增殖的細胞群；轉基因工程中，導入的“能高效快速表達”的受體細胞，一般是工程菌(或細菌、酵母菌等)。答案：(1)附著(固著)(2)用胰蛋白酶分解成單個細胞(3)充足的營養(yǎng)、適宜的溫度、適宜的pH和氣體環(huán)境、無菌無毒(答對任意三項均可)(4)既能產(chǎn)生特異性抗體，又能迅速大量增殖(5)工程菌(細菌、酵母菌等)7．(2015·河北唐山三模)下圖是利用單克隆抗體技術制備三聚氰胺特異性抗體的過程，請據(jù)圖回答：(1)單克隆抗體的制備過程中要用到____________和____________技術。(2)由于三聚氰胺分子量過小，不足以激活高等動物的免疫系統(tǒng)，因此在制備抗體前必須對其進行①過程，下列物質中不適合作“擴容”抗原分子的是()A．蛋白質 B．多糖C．磷脂 D．核苷酸(3)②過程會使小鼠產(chǎn)生能分泌相應________的B淋巴細胞，此過程屬于特異性免疫中的________免疫。(4)單克隆抗體的制備所基于的免疫學基本原理是____________________________________________。(5)③過程動物細胞特有的促融方法是用____________，④過程用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，會使____________________________________的細胞死亡；選出的雜交瘤細胞還需進行__________________