光學(xué)顯微鏡的認(rèn)識(shí)使用及動(dòng)植物細(xì)胞的鏡下觀察

實(shí)驗(yàn)原理

1、表面為曲面的玻璃或其他透明材料制成的光學(xué)透鏡可以使物體放大成像，光學(xué)顯微鏡就是利用這一原理將微小的物體放大到人眼足以觀察的尺寸。我們所用的顯微鏡采用兩級(jí)放大，分別由焦距很短的物鏡和焦距較長(zhǎng)的目鏡組成。被觀察的物體位于物鏡的前方，被物鏡做第一級(jí)放大后成一倒立的實(shí)像，然后這一實(shí)像再被目鏡二級(jí)放大，成一虛像，人眼看到的就是虛像。其放大的倍數(shù)為物鏡放大倍數(shù)于目鏡放大倍數(shù)的乘積。第1頁(yè)/共28頁(yè)第2頁(yè)/共28頁(yè)第3頁(yè)/共28頁(yè)第4頁(yè)/共28頁(yè)第5頁(yè)/共28頁(yè)2、玻片標(biāo)本類型按照制作標(biāo)本保存時(shí)間長(zhǎng)短，分為永久玻片標(biāo)本和臨時(shí)玻片標(biāo)本。臨時(shí)玻片標(biāo)本的制作方法有三種，即切片、涂片、裝片。3、生物簡(jiǎn)圖要求作者從科學(xué)研究的角度出發(fā)，用科學(xué)的觀點(diǎn)去觀察所畫(huà)的生物材料，繪圖必須符合實(shí)際，實(shí)事求是。第6頁(yè)/共28頁(yè)實(shí)驗(yàn)器材顯微鏡鑷子解剖針刀片載玻片蓋玻片毛筆玻璃皿牙簽繪圖筆繪圖紙吸管小西紅柿新鮮菠菜胡蘿卜第7頁(yè)/共28頁(yè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法一、正置顯微鏡1、安放右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩(wěn)，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側(cè)，距離桌邊3～4厘米處。

2、清潔檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機(jī)械部分可用干凈軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭，如有膠或粘污，可用少量二甲苯清潔之。第8頁(yè)/共28頁(yè)3、對(duì)光鏡筒升至距載物臺(tái)1～2厘米處，低倍鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。調(diào)節(jié)光圈和反光鏡，光線強(qiáng)時(shí)用平面鏡，光線弱時(shí)用凹面鏡，反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動(dòng)。若使用的為帶有光源的顯微鏡，可省去次步驟，但需要調(diào)節(jié)光亮度的旋鈕。

4、安裝標(biāo)本將玻片放在載物臺(tái)上，注意有蓋玻片的一面一定朝上。用彈簧夾將玻片固定，轉(zhuǎn)動(dòng)平臺(tái)移動(dòng)器的旋鈕，使要觀察的材料對(duì)準(zhǔn)通光孔中央。第9頁(yè)/共28頁(yè)5、調(diào)焦調(diào)焦時(shí)，先旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕慢慢降低鏡筒，并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到物鏡貼近玻片標(biāo)本，然后左眼自目鏡觀察，左手旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本物像時(shí)停止，再用細(xì)調(diào)焦旋鈕回調(diào)清晰。操作注意：不應(yīng)在高倍鏡下直接調(diào)焦；鏡筒下降時(shí)，應(yīng)從側(cè)面觀察鏡筒和標(biāo)本間的間距；要了解物距的臨界值。若使用雙筒顯微鏡，如觀察者雙眼視度有差異，可靠視度調(diào)節(jié)圈調(diào)節(jié)。另外雙筒可相對(duì)平移以適應(yīng)操作者兩眼間距。第10頁(yè)/共28頁(yè)6、觀察若使用單筒顯微鏡，兩眼自然張開(kāi)，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。光強(qiáng)的調(diào)節(jié)：一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無(wú)色或未染色標(biāo)本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。除調(diào)節(jié)反光鏡或光源燈以外，虹彩光圈的調(diào)節(jié)也十分重要。第11頁(yè)/共28頁(yè)（1）低倍鏡觀察觀察任何標(biāo)本時(shí)，都必須先使用低倍鏡，因?yàn)槠湟曇按?，易發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定要觀察的部位。（2）高倍鏡觀察從低倍鏡轉(zhuǎn)至高倍時(shí)，只需略微調(diào)動(dòng)細(xì)調(diào)焦旋鈕，即可使物像清晰。使用高倍鏡時(shí)切勿使用粗調(diào)焦旋鈕，否則易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器時(shí)，不可用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，這樣容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜，轉(zhuǎn)換器螺紋受力不均勻而破壞，最后導(dǎo)致轉(zhuǎn)換器就會(huì)報(bào)廢。第12頁(yè)/共28頁(yè)（3）油鏡的觀察先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央后，再換油鏡觀察。油鏡觀察前，應(yīng)將顯微鏡亮度調(diào)整至最亮，光圈完全打開(kāi)。使用油鏡時(shí)，先在蓋玻片上滴加一滴香柏油（鏡油），然后降低鏡筒并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到油鏡浸入香柏油并貼近玻片標(biāo)本，然后用目鏡觀察，并用細(xì)調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本的焦段時(shí)停止并調(diào)節(jié)清晰。香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢后一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦鏡紙擦去多余二甲苯。第13頁(yè)/共28頁(yè)7、結(jié)束操作觀察完畢，移去樣品，扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使鏡頭V字型偏于兩旁，反光鏡要豎立，降下鏡筒，擦抹干凈，并套上鏡套。若使用的是帶有光源的顯微鏡，需要調(diào)節(jié)亮度旋鈕將光亮度調(diào)至最暗，再關(guān)閉電源按鈕，以防止下次開(kāi)機(jī)時(shí)瞬間過(guò)強(qiáng)電流燒壞光源燈第14頁(yè)/共28頁(yè)二、臨時(shí)裝片的制作

1、擦片用潔凈的紗布（吸水紙）將載玻片和蓋玻片擦拭干凈。將擦拭干凈的載玻片和蓋玻片放在干凈的培養(yǎng)皿中，取時(shí)用鑷子，不要用手，避免污染。

2、滴水或染液

3、取材剖開(kāi)番茄，用解剖針挑取其中少許成熟的果肉細(xì)胞。去菠菜葉下表皮時(shí)，用鑷子輕輕撕下。去口腔上皮細(xì)胞時(shí)，用消毒牙簽的鈍端在淑凈的口腔任一側(cè)的頰部輕刮幾下，次數(shù)不應(yīng)過(guò)多。第15頁(yè)/共28頁(yè)4、展平將取下的材料迅速放入載玻片的水滴中，用解剖針展平。番茄果肉細(xì)胞和人的口腔上皮細(xì)胞應(yīng)用解剖針攪散。

5、蓋上蓋玻片用鑷子夾起蓋玻片，讓其一端先接觸載玻片上的水滴端，再輕輕地蓋上，以免產(chǎn)生氣泡。

6、鏡下觀察并畫(huà)圖第16頁(yè)/共28頁(yè)二、徒手切片的制作

1、準(zhǔn)備夾持物夾持物用刀從一端的中線縱向劈開(kāi)，但不要劈到底，以加持葉片。

2、切取觀察材料將準(zhǔn)備好的新鮮的葉子切去葉莖葉尖和葉緣，切成長(zhǎng)寬都小于夾持物劈縫的長(zhǎng)方片，放入夾持物劈縫中。

3、握夾持物和持刀用左手的拇指和食指捏緊夾有葉片的夾持物，并使劈縫與自己身體本身平行，拇指低于食指。夾持物上端略高于手指。右手拿刀，刀口朝自己，刀身放平，拇指壓緊刀身，捏緊刀片右下角。第17頁(yè)/共28頁(yè)4、拉切拉切的刀先蘸水，在夾持物上端橫切一刀，使其表面平整。然后刀口對(duì)著夾持物，繼續(xù)拉切。拉切方向向著操作者，保持水平，速度要快，才能切的又薄又平。連續(xù)拉切后，將切下的薄片迅速刷入清水中備用。

5、在清水中選取最薄的切片制成臨時(shí)裝片。

6、鏡下觀察并繪圖。第18頁(yè)/共28頁(yè)三、繪圖

1、鏡下觀察

2、起草按實(shí)體外形輪廓定一個(gè)比例分割點(diǎn)，并在紙上的適當(dāng)位置畫(huà)出這個(gè)點(diǎn)，通過(guò)這個(gè)點(diǎn)做一條對(duì)稱虛線，然后按照實(shí)體外形輪廓各部到虛線的距離遠(yuǎn)近分別定出各個(gè)點(diǎn)，然后用細(xì)的鉛筆將各個(gè)點(diǎn)連起來(lái)，即得到一個(gè)外形圖，內(nèi)部再按比例繪出。先得到略圖，然后再近一步詳繪加工使線條明晰、光滑、整潔。圖形應(yīng)偏左，以便右邊做標(biāo)注。第19頁(yè)/共28頁(yè)3、點(diǎn)點(diǎn)襯陰將畫(huà)好的草圖，根據(jù)實(shí)體的薄厚、光線的明暗用鉛筆垂直在紙面上點(diǎn)出許許多多疏密不同粗細(xì)均勻的小圓點(diǎn)來(lái)表現(xiàn)。實(shí)體厚、光線暗，用多而密的點(diǎn)來(lái)表現(xiàn)，反之用少而稀疏的點(diǎn)表現(xiàn)。明暗有過(guò)渡。打點(diǎn)時(shí)應(yīng)注意，手握筆中部，保持筆桿與紙面垂直，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)筆桿可以畫(huà)出大小均勻的圓點(diǎn)。點(diǎn)要圓，筆尖要細(xì)，不要畫(huà)出逗號(hào)或者短線，不涂陰影，只能用鉛筆作圖。4、圖題及標(biāo)注圖繪成之后在圖的下方或上方適當(dāng)?shù)奈恢脴?biāo)明圖形題目，包括放大倍數(shù)，并在右方做標(biāo)注。第20頁(yè)/共28頁(yè)作業(yè)：

1、分別菠菜葉片細(xì)胞與人口腔上皮鏡下顯微結(jié)構(gòu)的不同。

2、繪菠菜葉片橫切面鏡下顯微結(jié)構(gòu)圖。第21頁(yè)/共28頁(yè)實(shí)驗(yàn)原理

1、表面為曲面的玻璃或其他透明材料制成的光學(xué)透鏡可以使物體放大成像，光學(xué)顯微鏡就是利用這一原理將微小的物體放大到人眼足以觀察的尺寸。我們所用的顯微鏡采用兩級(jí)放大，分別由焦距很短的物鏡和焦距較長(zhǎng)的目鏡組成。被觀察的物體位于物鏡的前方，被物鏡做第一級(jí)放大后成一倒立的實(shí)像，然后這一實(shí)像再被目鏡二級(jí)放大，成一虛像，人眼看到的就是虛像。其放大的倍數(shù)為物鏡放大倍數(shù)于目鏡放大倍數(shù)的乘積。第22頁(yè)/共28頁(yè)第23頁(yè)/共28頁(yè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法一、正置顯微鏡1、安放右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩(wěn)，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側(cè)，距離桌邊3～4厘米處。

2、清潔檢查顯微鏡是否有毛病，是否清潔，鏡身機(jī)械部分可用干凈軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭，如有膠或粘污，可用少量二甲苯清潔之。第24頁(yè)/共28頁(yè)5、調(diào)焦調(diào)焦時(shí)，先旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕慢慢降低鏡筒，并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到物鏡貼近玻片標(biāo)本，然后左眼自目鏡觀察，左手旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本物像時(shí)停止，再用細(xì)調(diào)焦旋鈕回調(diào)清晰。操作注意：不應(yīng)在高倍鏡下直接調(diào)焦；鏡筒下降時(shí)，應(yīng)從側(cè)面觀察鏡筒和標(biāo)本間的間距；要了解物距的臨界值。若使用雙筒顯微鏡，如觀察者雙眼視度有差異，可靠視度調(diào)節(jié)圈調(diào)節(jié)。另外雙筒可相對(duì)平移以適應(yīng)操作者兩眼間距。第25頁(yè)/共28頁(yè)7、結(jié)束操作觀察完畢，移去樣品，扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使鏡頭V字型偏于兩旁，反光鏡要豎立，降下鏡筒，擦抹干凈，并套上鏡套。若使用的是帶有光源的顯微鏡，需要調(diào)節(jié)亮度旋鈕