牛羊繁殖技術(shù)（牛羊生產(chǎn)課件）

雌性動物的發(fā)情課時(shí)教學(xué)計(jì)劃教學(xué)目標(biāo)：使學(xué)生了解雌性動物的性成熟、適配年齡等概念，卵子發(fā)生、成熟及排卵的規(guī)律。掌握主要家畜的排卵類型特點(diǎn)。教學(xué)內(nèi)容：1）雌性動物生殖機(jī)能的發(fā)育；2）卵泡發(fā)育和卵子的發(fā)生。教學(xué)重點(diǎn)：雌性性成熟概念、卵子結(jié)構(gòu)；卵泡發(fā)育及排卵的規(guī)律。教學(xué)難點(diǎn)：卵母細(xì)胞的成熟；卵泡發(fā)生波。教學(xué)方法：講授與討論帶著問題學(xué)后備母畜是不是一旦發(fā)情即可配種？為什么？動物初情期的發(fā)情有何特點(diǎn)？卵原細(xì)胞的增殖在什么時(shí)候停止？牛出生時(shí)大約有多少個(gè)卵母細(xì)胞？母牛一生排卵大約多少個(gè)？為什么可以進(jìn)行超數(shù)排卵？一個(gè)卵母細(xì)胞最后生成卵子多少個(gè)？卵子的結(jié)構(gòu)是怎樣的？大小約有多大？卵巢上的卵泡發(fā)育形態(tài)分哪幾個(gè)階段？兔子是不是要交配才能排卵？發(fā)情母牛不交配能不能排卵？4.1雌性動物生殖機(jī)能的發(fā)育雌性動物性發(fā)育的概念性發(fā)育指動物出生后與性發(fā)育開始至性成熟、性衰老有關(guān)的一系列生理過程，包括性行為及其調(diào)節(jié)。雌性動物性發(fā)育過程包括：初情期、性成熟期、體成熟期及繁殖機(jī)能停止期。初情期初情期概念：雌性動物第一次出現(xiàn)發(fā)情表現(xiàn)并排卵的時(shí)期，稱為初情期。機(jī)理：雌性動物在初情期前卵泡發(fā)育，但會中途閉鎖，達(dá)到初情期時(shí)，在激素的作用下，卵泡才能發(fā)育成熟直至排卵。此時(shí)生殖道和身體在雌激素、孕激素等作用下，急劇發(fā)育并出現(xiàn)第二性征。初情期特點(diǎn)：第一次發(fā)情有時(shí)為安靜發(fā)情，因沒有孕酮分泌，所以只出現(xiàn)排卵而不表現(xiàn)發(fā)情征象。初情期發(fā)情排卵不夠規(guī)律。主要?jiǎng)游锎菩缘某跚槠冢号?~12月齡、馬12月齡、羊4~6月齡、豬3~6月齡、兔4月齡。初情期出現(xiàn)遲早的影響因素：品種、溫度、出生季節(jié)及飼養(yǎng)水平、管理方式等。性成熟期性成熟概念：雌性動物在初情期后經(jīng)過一段時(shí)間，生殖器官發(fā)育成熟、發(fā)情和排卵正常并具有正常的生殖能力，則稱為達(dá)到性成熟。性成熟特征：生殖器官發(fā)育成熟、性周期規(guī)律、性行為模式完全、身體其他器官還在繼續(xù)發(fā)育。主要?jiǎng)游锏拇菩孕猿墒炱冢号?0~14月齡、馬15~18月齡、羊6~10月齡、豬5~8月齡、兔5~6月齡。適配年齡也叫配種適齡。即適宜配種的年齡。一般以體重達(dá)到成年母性體重的70%時(shí)為宜。主要?jiǎng)游锎菩缘倪m配年齡：牛18~20月齡、馬30~36月齡、羊12~18月齡、豬8~10月齡、兔6~7月齡。體成熟動物達(dá)到成年體重的年齡。雌性動物在產(chǎn)下2－3胎以后，才能達(dá)到成年體重。繁殖能力停止期雌性動物繁殖能力消失的時(shí)期。在繁殖能力消失之前有一個(gè)衰退期，雖能生殖但飼養(yǎng)價(jià)值已下降。因此要適時(shí)淘汰。4.2卵泡發(fā)育和卵子的發(fā)生卵子的發(fā)生雌性生殖細(xì)胞分化和成熟的過程稱為卵子發(fā)生。卵子的發(fā)生過程包括卵原細(xì)胞的增殖、卵母細(xì)胞的生長和卵母細(xì)胞的成熟三個(gè)階段。1）卵原細(xì)胞的增殖：動物在胚胎期，性別分化后，雌性胎兒原始生殖細(xì)胞分化為卵原細(xì)胞，通過有絲分裂，數(shù)量增多。這就是增殖期。通常動物在出生前或出生后不久即停止。牛、羊在胚胎前半期結(jié)束。豬出生后7天。兔出生后10天才結(jié)束。增殖時(shí)間長短與卵原細(xì)胞產(chǎn)生數(shù)量有關(guān)。最后一次分裂后，發(fā)育成為初級卵母細(xì)胞，并進(jìn)入成熟分裂前期，并被卵泡細(xì)胞包圍形成原始卵泡。許多卵母細(xì)胞此后閑鎖、退化。最終排卵、成熟的是極少數(shù)。因此有很大潛力，超數(shù)排卵和胚胎移植就是發(fā)掘優(yōu)良母畜的排卵潛力。2）卵母細(xì)胞的生長：指卵母細(xì)胞發(fā)育成初級卵母細(xì)胞并形成卵泡后，初級卵母細(xì)胞的繼續(xù)生長。特點(diǎn)：①卵黃顆粒增多，體積增大②透明帶形成（卵泡細(xì)胞分泌液）③卵泡的顆粒細(xì)胞增殖（單層→多層）生長卵泡生長卵泡原始卵泡生長卵泡3）卵母細(xì)胞的成熟：主指經(jīng)過兩次成熟分裂：第一次在排卵前不久開始進(jìn)行，第二次在排卵之后，受精過程中。第一次成熟分裂：（排卵前進(jìn)行至排卵后）分裂前期：細(xì)線、偶（合）線、粗線、雙線及終變期，多數(shù)動物到雙線期即進(jìn)入持續(xù)很久的靜止期。持續(xù)到排卵后不久才結(jié)束，第一次成熟分裂繼續(xù)進(jìn)行（復(fù)始）。分裂中、后、末期：卵母細(xì)胞核仍移向卵黃膜，核仁膜，消失，染色體聚集成致密狀態(tài)，然后中心小體分成兩個(gè)中心小粒，并在周圍出現(xiàn)星體，這些星體，分開形成紡垂體，成對的染色體排在赤道板上，在第一次成熟分裂末期，紡垂體旋轉(zhuǎn)，排出含一半染色質(zhì)及少量細(xì)胞質(zhì)的極體，稱為第一極體。而含大部分細(xì)胞質(zhì)的為次級卵母細(xì)胞，每個(gè)子細(xì)胞所含染色體數(shù)目僅為初級卵母細(xì)胞的一半。第二次成熟分裂在精子入透明帶后，才激活卵母細(xì)胞，放出第二極體。次級卵母細(xì)胞→卵細(xì)胞和第二極體，透明帶中可能1~3個(gè)極體。卵子的形態(tài)和結(jié)構(gòu)1）卵子的形態(tài)和大小哺乳動物的卵子為圓球形。橢圓、扁圓、有大型極體或卵黃內(nèi)有大空泡的、特別大或特別小的屬于畸形卵子。卵子較一般細(xì)胞含有多量的細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)中含有卵黃，所以卵子比一般細(xì)胞大得多。不含透明帶的卵子直徑大約為70~140μm。2）卵子的結(jié)構(gòu):卵子結(jié)構(gòu)由以下幾部分組成：放射冠透明帶卵黃膜卵黃核核仁（1）放射冠：剛排出的卵被數(shù)層放射冠細(xì)胞及卵泡液基質(zhì)包圍，在輸卵管液的作用下，細(xì)胞的突起收縮、退化，接著引起壞死，使卵泡細(xì)胞剝落，卵子裸露。牛、綿羊運(yùn)行至輸卵管膨大部完成以上過程；馬排卵時(shí)卵子周圍已沒有放射冠細(xì)胞，但有一層不整齊的膠狀物，約排卵2天內(nèi)分離掉；豬、兔、鼠卵子在精子進(jìn)入后才脫落。（2）透明帶：是卵母細(xì)胞周圍均質(zhì)而明顯的半透膜。主要由糖蛋白組成。（3）卵黃膜：與體細(xì)胞的質(zhì)膜基本相同結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。透明帶與卵黃膜是卵子明顯的兩層被膜，它們具有保護(hù)卵子完成正常的受精過程，使卵子有選擇吸收無機(jī)離子和代謝產(chǎn)物，對精子具有選擇作用。（4）卵黃：因卵黃膜內(nèi)的卵黃和脂肪小滴的含量，各動物不一致，因而顏色不同。馬、豬含卵黃多于牛和綿羊，馬卵子還充滿折光性強(qiáng)的脂肪小滴，所以，馬卵黃顏色稍黑，豬深灰，牛和綿羊呈灰色，山羊、虎卵黃顆粒細(xì)，分布均勻，核清晰，易觀察分裂。（5）核和核仁：核有明顯的核膜，核內(nèi)有一個(gè)或多個(gè)核仁。卵泡的發(fā)育卵泡是位于卵巢上皮、包裹卵母細(xì)胞或卵子的特殊結(jié)構(gòu)。1）卵泡的發(fā)育過程和形態(tài)特征卵泡發(fā)育是卵泡由原始卵泡發(fā)育成為成熟卵泡的生理過程。卵泡發(fā)育從形態(tài)上依次為原始卵泡、初級卵泡、次級卵泡、三級卵泡和成熟卵泡。初級卵泡、次級卵泡和三級卵泡階段，統(tǒng)稱為生長卵泡。根據(jù)卵泡出現(xiàn)泡腔與否，分為無腔卵泡和有腔卵泡。三級卵泡以前的卵泡尚未出現(xiàn)泡腔，統(tǒng)稱為無腔卵泡。三級卵泡和成熟卵泡因?yàn)榇嬖诼雅萸?，所以又稱為有腔卵泡。（1）原始卵泡排列在卵巢皮質(zhì)外周，其核心為一卵母細(xì)胞，周圍為一層扁平狀的卵泡上皮細(xì)胞，沒有卵泡膜，沒有卵泡腔。（2）初級卵泡排列在卵巢皮質(zhì)外周，由一卵母細(xì)胞和周圍的一層立方形卵泡細(xì)胞組成，卵泡膜尚未形成，也無卵泡腔。（3）次級卵泡移向卵巢皮質(zhì)的中央，有多層圓柱狀、體積較小的顆粒細(xì)胞，形成透明帶、放射冠，無泡腔。（4）三級卵泡形成卵泡腔、卵丘和二層卵胞膜。（5）成熟卵泡卵泡腔很大，突出于卵巢表面。在發(fā)情時(shí)，能發(fā)育成熟的卵泡數(shù)：牛、馬1個(gè)；豬：10-25個(gè)；綿羊1-3個(gè)；小鼠8個(gè)。成熟卵泡的直徑：牛12-19mm；豬8-12mm；綿羊5-10mm；山羊7-10mm。2）卵泡的發(fā)生波卵泡發(fā)育是動態(tài)過程，即在任何時(shí)期檢查動物的卵巢，均可發(fā)現(xiàn)處于兩種或兩種以上不同發(fā)育階段的卵泡。每個(gè)發(fā)情周期，卵泡通過征集、選擇和優(yōu)勢化三個(gè)階段發(fā)育成熟。這種反映從原始卵泡發(fā)育至初級、次級、三級以至成熟卵泡動態(tài)變化過程所組成的圖形，即為卵泡發(fā)生波。相對于其他卵泡具有發(fā)育優(yōu)勢性的卵泡為優(yōu)勢卵泡。其他卵泡則稱為劣勢卵泡或從屬卵泡。優(yōu)勢卵泡對劣勢卵泡的生長發(fā)育具有抑制作用。原始卵泡庫啟動卵泡生長形成卵泡腔促性腺激素反應(yīng)性促性腺激素依賴性排卵卵泡排卵閉鎖閉鎖單排卵動物多排卵動物卵泡的閉鎖和退化動物出生前，卵巢上就有很多原始卵泡，但只有少數(shù)卵泡能夠發(fā)育成熟和排卵，絕大多數(shù)卵泡不破裂、排卵，而發(fā)生閉鎖和退化。卵泡的閉鎖和退化包括顆粒細(xì)胞和卵母細(xì)胞的一系列形態(tài)學(xué)變化。閉鎖卵泡之所以發(fā)生閉鎖，可能是由于垂體分泌FSH數(shù)量不夠，或者是卵泡細(xì)胞對于FSH的反應(yīng)性差所致。排卵和黃體形成1）排卵類型根據(jù)卵巢排卵特點(diǎn)和黃體的功能分為自發(fā)排卵和誘發(fā)排卵。自發(fā)排卵：卵泡發(fā)育成熟后自行破裂排卵并自動形成黃體。（大鼠、小鼠和倉鼠等如不交配，所形成的黃體是沒有功能的。）誘發(fā)性排卵：必須通過交配或其他途徑使子宮頸受到機(jī)械性刺激后才能排卵，并形成功能性黃體。駱駝、兔、貓等。誘發(fā)排卵的動物可通過注射促排卵的LH或hCG，或類似交配的機(jī)械性刺激子宮頸的方法誘發(fā)排卵。2）排卵的過程排卵前，卵泡經(jīng)歷著三大變化:①即卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核成熟;②卵丘細(xì)胞聚合力松懈，顆粒細(xì)胞各自分離;③卵泡膜變薄、破裂。所有這些變化都是由于LH和FSH的釋放量驟增并達(dá)到一定比例時(shí)引起的。3）排卵時(shí)間和排卵數(shù)：排卵是成熟卵泡在LH峰作用下產(chǎn)生的，從排卵前LH峰至排卵的間隔時(shí)間，因動物種類而異，但在同種動物幾乎是一定的。見下表。動物種類排卵前LH峰至排卵的間隔時(shí)間（h）排卵數(shù)動物種類排卵前LH峰至排卵的間隔時(shí)間（h）排卵數(shù)牛28~321大鼠12~1510豬40~4210~25小鼠12~258馬1山羊1~3綿羊24~261~3犬3~12兔9~115貓2~104）排卵部位除卵巢門外，在卵巢表面的任何部位都可發(fā)生排卵，馬屬動物的排卵僅限于卵巢中央的排卵窩。在牛、馬和綿羊，不管卵巢上有無黃體，排卵在兩個(gè)卵巢可隨機(jī)發(fā)生。很多哺乳動物一般都是兩個(gè)卵巢交替排卵，但排卵率并不完全相同。牛右側(cè)卵巢排卵率為60％。產(chǎn)后第一次排卵多發(fā)生在孕角對側(cè)的卵巢上。5）黃體形成與退化（1）黃體形成成熟卵泡破裂、排卵后，卵泡液排出，卵泡壁塌陷皺縮，從破裂的卵泡壁血管流出血液和淋巴液，聚積于卵泡腔內(nèi)形成血凝塊，稱為紅體。顆粒細(xì)胞在LH作用下增生肥大，并吸收類脂質(zhì)黃素而變成黃體細(xì)胞，構(gòu)成黃體主體部分。同時(shí)，卵泡內(nèi)膜分生出血管，布滿于發(fā)育中的黃體，隨著這些血管的分布，卵泡內(nèi)膜細(xì)胞也移入黃體細(xì)胞之間，參與黃體的形成，此為卵泡內(nèi)膜細(xì)胞來源的黃體細(xì)胞。黃體是一種暫時(shí)性的分泌器官。（2）黃體類型周期黃體：雌性動物如果沒有妊娠，所形成的黃體在黃體期末退化。周期黃體通常在排卵后維持一定時(shí)間才退化。退化時(shí)間:牛為第14－15d，羊?yàn)榈?2－14d，豬為第13d，馬為第17d。妊娠黃體：如果雌性動物妊娠，則轉(zhuǎn)化為妊娠黃體，此時(shí)黃體的體積稍大。大多數(shù)動物妊娠黃體一直維持到妊娠結(jié)束才退化。而馬例外，妊娠黃體一般維持到妊娠期第160d左右退化，然后依靠胎盤分泌的孕酮來維持妊娠。（3）黃體退化黃體退化時(shí)，由顆粒細(xì)胞轉(zhuǎn)化的黃體細(xì)胞退化很快，表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)空泡化及核萎縮。隨著微血管退化，供血減少，黃體體積逐漸變小，黃體細(xì)胞的數(shù)量也顯著減少，顆粒層細(xì)胞逐漸被纖維細(xì)胞所代替，黃體細(xì)胞間結(jié)締組織侵入、增殖，最后整個(gè)黃體細(xì)胞被結(jié)締組織所代替，形成一個(gè)斑痂，顏色變白，稱為白體，殘留在卵巢上。復(fù)習(xí)思考題卵子的形狀、卵子的結(jié)構(gòu)。卵泡發(fā)育的階段劃分。卵子形成與精子形成相比有哪些特點(diǎn)？什么是自發(fā)排卵和誘發(fā)排卵？哪些動物是自發(fā)排卵的、哪些是誘發(fā)排卵的？雌性動物的發(fā)情課時(shí)教學(xué)計(jì)劃教學(xué)目標(biāo)：使學(xué)生了解主要家畜的發(fā)情表現(xiàn)、周期特點(diǎn)，初步掌握發(fā)情鑒定的方法要領(lǐng)。教學(xué)內(nèi)容：1）發(fā)情與發(fā)情周期；2）發(fā)情鑒定。教學(xué)重點(diǎn)：發(fā)情與發(fā)情周期；發(fā)情鑒定。教學(xué)難點(diǎn)：直腸檢查法進(jìn)行牛的發(fā)情鑒定；外部觀察法、試情法進(jìn)行豬的發(fā)情鑒。教學(xué)方法：講授與討論帶著問題學(xué)母畜的卵子產(chǎn)生及排卵是內(nèi)在變化，母畜發(fā)情還有一定的外在表現(xiàn)，發(fā)情有哪些表現(xiàn)？為什么羊的發(fā)情持續(xù)期很短？為什么狗、貓的發(fā)情持續(xù)期很長，發(fā)情征狀會很明顯？為什么初情期、繁殖季節(jié)開始時(shí)、出現(xiàn)環(huán)境應(yīng)激時(shí)，雌性動物常出現(xiàn)異常發(fā)情？生產(chǎn)中進(jìn)行發(fā)情鑒定可以從哪些方面去鑒定？不同種類的動物發(fā)情鑒定的方法有什么不同？4.3發(fā)情與發(fā)情周期發(fā)情的概念及征狀1）發(fā)情的概念雌性動物生長到一定年齡后，在垂體促性腺激素的作用下，卵巢上的卵泡發(fā)育并分泌雌激素，引起生殖器官和性行為的一系列變化，并產(chǎn)生性欲，雌性動物所處的這種生理狀態(tài)稱為發(fā)情。2）發(fā)情征狀發(fā)情征狀包括三個(gè)方面：卵泡發(fā)育及排卵、外生殖器充血粘液增多、性欲明顯。（1）卵巢變化：發(fā)情開始前3-4d卵泡開始生長;發(fā)情前2-3d卵泡迅速發(fā)育。發(fā)情征象消失時(shí)卵泡發(fā)育成熟，在激素作用下排卵。（2）性行為變化：在雌激素和少量孕酮作用下，刺激神經(jīng)中樞，引起性興奮。常表現(xiàn)興奮不安、十分敏感，鳴叫，舉尾拱背，頻頻排尿，食欲減退，泌乳量減少，放牧?xí)r常離群獨(dú)自行走。（3）生殖道變化：主要表現(xiàn)為外陰部充血、水腫、松軟，陰蒂充血且有勃起；陰道黏膜充血、潮紅；子宮和輸卵管平滑肌蠕動加強(qiáng)，子宮頸松弛，子宮黏膜上皮細(xì)胞和子宮頸黏膜上皮杯狀細(xì)胞增生，腺體增大，分泌機(jī)能增強(qiáng)，有黏液分泌。發(fā)情前期，黏液量少；發(fā)情盛期粘液量多而稀薄透明；發(fā)情末期，黏液量少而濃稠。發(fā)情周期概念：指雌性動物在繁殖季節(jié)及未懷孕時(shí)發(fā)情現(xiàn)象呈現(xiàn)出周期性變化，此周期性的性活動叫發(fā)情周期。計(jì)算法:從一次發(fā)情開始到下一次發(fā)情開始的間隔時(shí)間；或從一次發(fā)情期結(jié)束到下次發(fā)情期結(jié)束。牛、水牛、豬、山羊、馬、驢平均為21d，綿羊?yàn)?6－17d。1）發(fā)情周期的類型（1）季節(jié)性發(fā)情周期：某此動物只在一定時(shí)期才表現(xiàn)發(fā)情，這個(gè)時(shí)期稱發(fā)情季節(jié)。①季節(jié)性多次發(fā)情：在一個(gè)發(fā)情季節(jié)有多次發(fā)情（馬、驢、綿羊、駱駝）。馬、綿羊均在春季產(chǎn)仔，而馬春季發(fā)情、綿羊秋季發(fā)情?？赏ㄟ^人為措施（控光和激素）改變繁殖季節(jié)。②季節(jié)性單次發(fā)情：一個(gè)發(fā)情季節(jié)只有一次發(fā)情周期（狗、貓、狐貍、貂）。狗有春、秋兩個(gè)發(fā)情季節(jié)。（2）無季節(jié)性發(fā)情周期：有些動物（牛、豬、兔、湖羊等），全年均可發(fā)情，當(dāng)然季節(jié)也產(chǎn)生一定的影響。2）發(fā)情周期的階段劃分（1）四期方法：①發(fā)情前期：發(fā)情前的準(zhǔn)備期。黃體退化萎縮；新的卵泡開始生長發(fā)育;陰道和陰門黏膜輕度充血、腫脹;子宮頸略為松弛，子宮腺體略有生長，腺體分泌活動逐漸增加，分泌少量稀薄黏液，陰道黏膜上皮細(xì)胞增生；但尚無性欲表現(xiàn)。②發(fā)情期（發(fā)情持續(xù)期）:母畜性欲達(dá)到高潮時(shí)期，是發(fā)情征狀集中表現(xiàn)時(shí)期。卵巢上的卵泡迅速發(fā)育；陰道及陰門黏膜充血腫脹明顯，子宮黏膜顯著增生，子宮頸充血，子宮頸口開張，子宮肌層蠕動加強(qiáng)，腺體分泌增多，有大量透明稀薄黏液排出；性欲達(dá)到高潮的時(shí)愿意接受雄性動物交配。牛1~2d，豬2~3d，羊1~1.5d，馬4~7d，犬13~14d。③發(fā)情后期:是指排卵后，黃體開始形成時(shí)期，發(fā)情表現(xiàn)恢復(fù)期。卵泡破裂排卵后，黃體開始形成并分泌孕酮；動物由性欲激動逐漸轉(zhuǎn)入安靜狀態(tài)；生殖道充血腫脹逐漸消退，子宮肌層蠕動逐漸減弱，腺體活動減少，黏液量少而稠;子宮頸管逐漸封閉，子宮內(nèi)膜逐漸增厚。④休情期(間情期):黃體活動期,從黃體形成到黃體萎縮。性欲已完全停止，精神狀態(tài)恢復(fù)正常。間情期的前期子宮粘膜增厚，子宮腺體高度發(fā)育及分泌增強(qiáng)，分泌子宮乳供胚胎發(fā)育。（2）二期方法：①卵泡期：卵泡開始發(fā)育并逐漸成熟，分泌雌激素，刺激生殖道變化并產(chǎn)生性欲，最后卵泡破裂排卵。包括發(fā)情前期與發(fā)情期。②黃體期：卵泡破裂后形成黃體，直到黃體萎縮退化為止。它包括發(fā)情后期和休情期。發(fā)情周期的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)雌性動物發(fā)情周期的循環(huán)，是通過下丘腦-垂體-卵巢軸所分泌的激素，相互調(diào)節(jié)的結(jié)果。下丘腦分泌GnRH，促性垂體分泌FSH，經(jīng)血液循環(huán)運(yùn)送到卵巢，刺激卵泡生長發(fā)育，垂體分泌的LH與FSH協(xié)同作用，促進(jìn)卵泡進(jìn)一步生長并分泌雌激素，刺激生殖道發(fā)育。雌激素及少量孕酮刺激雌性動物性中樞，引起雌性動物發(fā)情。當(dāng)雌激素分泌到一定數(shù)量時(shí)，作用于丘腦下部或垂體前葉，抑制FSH分泌，同時(shí)刺激LH釋放。出現(xiàn)排卵前LH峰，引起卵泡進(jìn)一步成熟、破裂、排卵。排卵后，卵泡顆粒層細(xì)胞在少量LH的作用下形成黃體并分泌孕酮。當(dāng)孕酮分泌達(dá)到一定量時(shí)，對下丘腦和垂體產(chǎn)生負(fù)反饋?zhàn)饔?，抑制FSH的分泌，卵泡不再發(fā)育，抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的性中樞，使雌性動物不再表現(xiàn)發(fā)情。若排出的卵子未受精，則黃體維持一段時(shí)間后，在子宮內(nèi)膜產(chǎn)生的PGF2α的作用下，黃體逐漸萎縮退化，于是，孕酮分泌量急劇下降，下丘腦逐漸脫離孕酮的抑制作用。垂體前葉又釋放FSH，使卵巢上新的卵泡又開始生長發(fā)育。發(fā)情周期中的生殖激素變化發(fā)情周期中的生殖激素變化發(fā)情周期中的生殖激素變化異常發(fā)情、乏情和產(chǎn)后發(fā)情1）異常發(fā)情異常發(fā)情指：由于內(nèi)外因素的影響,引起生殖激素調(diào)節(jié)失調(diào),而打亂母畜正常的發(fā)情規(guī)律,而表現(xiàn)出種種不規(guī)律或不明顯的發(fā)情現(xiàn)象。①初情期后，性成熟前，易發(fā)生。②繁殖季節(jié)剛開始時(shí),接近結(jié)束時(shí),易出現(xiàn)。③繁殖季節(jié)中，外界因素的突然刺激易發(fā)生（條件變化，勞役過度，營養(yǎng)不良）。（1）安靜發(fā)情（隱性發(fā)情或安靜排卵）發(fā)情時(shí)缺乏外表征象，但卵巢上有卵泡發(fā)育、成熟并排卵。（2）短促發(fā)情動物發(fā)情持續(xù)時(shí)間短，如不注意觀察，往往錯(cuò)過配種時(shí)機(jī)。（3）斷續(xù)發(fā)情發(fā)情延續(xù)很長，且發(fā)情時(shí)斷時(shí)續(xù)，多見于早春或營養(yǎng)不良的母馬。（4）持續(xù)發(fā)情慕雄狂的癥狀之一，常見于牛和豬，馬也可能發(fā)生，表現(xiàn)為持續(xù)強(qiáng)烈的發(fā)情行為。發(fā)情周期不正常，發(fā)情期長短不一。（5）孕后發(fā)情(妊娠發(fā)情或假發(fā)情)是指在懷孕期仍有發(fā)情表現(xiàn)。2）乏情指長期不發(fā)情，卵巢處于相對靜止?fàn)顟B(tài)，無周期性的功能活動。乏情有生理性乏情與病理性乏情之分。（1）季節(jié)性乏情在非繁殖季節(jié)，卵巢上的卵泡無周期性活動，生殖道無周期性變化。（2）泌乳性乏情有些動物在產(chǎn)后泌乳期間，由于卵巢周期性活動機(jī)能受到抑制而不發(fā)情。（3）營養(yǎng)性乏情日糧營養(yǎng)水平對卵巢機(jī)能活動有明顯影響。（4）應(yīng)激性乏情如氣候惡劣、畜群密集、使役過度、欄舍衛(wèi)生不良、長途運(yùn)輸?shù)榷伎梢种瓢l(fā)情。（5）衰老性乏情動物因衰老使下丘-垂體-性腺軸的功能減退，導(dǎo)致垂體GTH分泌減少，或卵巢對激素的反應(yīng)性降低，不能激發(fā)卵巢機(jī)能活動而不表現(xiàn)發(fā)情。3）產(chǎn)后發(fā)情是指動物分娩后的第一次發(fā)情。（1）母豬一般在分娩后3－6d內(nèi)出現(xiàn)發(fā)情，但不排卵;在仔豬斷乳后1周之內(nèi)出現(xiàn)第一次正常發(fā)情。（2）母馬往往在產(chǎn)駒后6－12d發(fā)情，一般發(fā)情表現(xiàn)不太明顯，甚至無發(fā)情表現(xiàn)，有卵泡發(fā)育且可排卵，因此可配種，俗稱“配血駒”。（3）母牛一般可在產(chǎn)后40－50d發(fā)情。（4）母羊大多在產(chǎn)后2－3月發(fā)情，不哺乳產(chǎn)后20天左右發(fā)情。（5）母兔在產(chǎn)后1－2d就有發(fā)情，卵泡發(fā)育成熟并排卵。（6）實(shí)驗(yàn)動物大鼠和小鼠一般在產(chǎn)后2－3周左右表現(xiàn)第一次發(fā)情。4.4發(fā)情鑒定發(fā)情鑒定的意義發(fā)情鑒定是動物繁殖工作中一項(xiàng)重要的技術(shù)環(huán)節(jié)。其意義主要有兩方面：①通過發(fā)情鑒定，可以判斷動物的發(fā)情階段，預(yù)測排卵時(shí)間，以確定適宜配種期，及時(shí)進(jìn)行配種或人工授精，從而達(dá)到提高受胎率的目的。減少輸精次數(shù)，防止產(chǎn)生精子免疫。②還可以發(fā)現(xiàn)動物發(fā)情是否正常，以便發(fā)現(xiàn)問題（如產(chǎn)后發(fā)情），發(fā)現(xiàn)生殖道疾病（如子宮炎、卵巢襄炎），予以及時(shí)解決。外部觀察法主要以外表的精神、性欲表現(xiàn)程度，外生殖器的變化來判斷。發(fā)情動物常表現(xiàn)為精神不安、鳴叫、食欲減退、外陰部充血腫脹、濕潤，有黏液流出，對周圍環(huán)境和雄性動物的反應(yīng)敏感。不同動物往往還有特殊的表現(xiàn)，如母牛爬跨；母豬鬧圈、壓背時(shí)出現(xiàn)靜立反射；母馬揚(yáng)頭嘶叫，陰唇不斷外翻，露出陰蒂等。這些特征表現(xiàn)隨發(fā)情進(jìn)程由弱到強(qiáng)，再由強(qiáng)到弱，發(fā)情結(jié)束后消失。試情法試情方法：①用結(jié)扎輸精管的公畜放群試情。②牽引試情。③對母豬，可采用氣味，叫聲等來刺激。發(fā)情時(shí)，通常表現(xiàn)為愿意接近雄性，弓腰舉尾，后肢開張，頻頻排尿，有求配種動作等。而不發(fā)情或發(fā)情結(jié)束后則表現(xiàn)為遠(yuǎn)離雄性，當(dāng)強(qiáng)行牽引接近時(shí)，往往會出現(xiàn)躲避，甚至踢、咬等抗拒行為：拒絕交配。陰道檢查法將陰道開張器或陰道擴(kuò)張筒插入并擴(kuò)張陰道，借用光源觀察陰道黏膜顏色、充血程度，子宮頸松弛狀態(tài)、外口顏色、充血腫脹程度及開口大小，分泌液的顏色、黏稠度及量的多少、有無黏液流出。檢查時(shí)要將開膣器消毒，防感染；插入時(shí)要慢，不要損傷陰道。直腸檢查法主要應(yīng)用于牛、馬等大家畜。將手臂伸入母畜直腸內(nèi)，隔著直腸壁用手指觸摸卵巢及卵泡發(fā)育情況，如卵巢的大小、形狀、質(zhì)也卵泡發(fā)育的部位、大小、彈性、卵泡壁厚薄以及卵泡是否破裂，有無黃體等。在間情期，卵巢上有大小不等的黃體突出于表面；在發(fā)情期，卵巢上則有發(fā)育的卵泡，卵泡由小變大，由硬變軟，由無彈性變?yōu)橛袕椥浴ＥＶ蹦c檢查尋找卵巢卵泡的方法:將手掌伸進(jìn)直腸狹窄部之后，手指并攏，手心向下，輕輕下壓并左右撫摸，在骨盆底上方摸到子宮頸，然后沿子宮頸向前移動，便可摸到子宮體、子宮角間溝和子宮角，再向前伸至角間溝分叉處。將手移到一側(cè)子宮角上，手指向前并向下，在子宮角彎曲處即可摸到卵巢。此時(shí)可用手指仔細(xì)觸診感覺卵巢大小、形狀、質(zhì)地和卵泡的發(fā)育情況。觸摸完一側(cè)后，按同樣的順序觸摸另一側(cè)子宮角及卵巢。生殖激素檢測法應(yīng)用激素測定技術(shù)，通過測定體液(血漿、血清、乳汁、尿液等)中生殖激素(FSH、LH、雌激素、孕酮等)水平，依據(jù)發(fā)情周期中生殖激素的變化規(guī)律來判斷發(fā)情的方法。已有多種激素ELISA檢測試劑盒用于發(fā)情鑒定。仿生學(xué)法模擬公畜的聲音（放錄音磁帶）和氣味（天然或人工合成的氣霧制劑）刺激母畜的聽覺和嗅覺器官，觀察其受到刺激后的反應(yīng)情況，判斷母畜是否發(fā)情的方法。電測法應(yīng)用電阻表測定雌性動物陰道黏液的電阻值來進(jìn)行發(fā)情鑒定的方法。黏液和黏膜的總電阻變化與卵泡發(fā)育程度以及黏液中的鹽類、糖、酶等含量有關(guān)。一般地說，在發(fā)情期電阻值降低，而在周期其他階段則趨升高。生殖道黏液pH測定法生殖道黏液pH一般在發(fā)情盛期為中性或偏堿性，黃體期偏酸性。母牛子宮頸液pH在6.0－7.8之間，當(dāng)經(jīng)產(chǎn)母牛pH在6.7－6.8時(shí)輸精受胎率最高，處女牛的pH在6.7時(shí)輸精受胎率最高。其他方法：顏色標(biāo)記法、子宮頸黏液透析法、離子選擇性電極法、宮頸黏液結(jié)晶法和陰道上皮細(xì)胞抹片法等。復(fù)習(xí)思考題豬、牛、羊的發(fā)情周期、發(fā)情持續(xù)期。豬的發(fā)情外部表現(xiàn)有哪些？牛的發(fā)情鑒定直腸檢查法的操作及判別要點(diǎn)。牛的發(fā)情鑒定

一、母牛發(fā)情的特點(diǎn)1、發(fā)情持續(xù)時(shí)間短（18h）、2、發(fā)情結(jié)束后排卵（性欲結(jié)束后的5～16h）3、子宮頸開張度小、生殖道排出的黏液量大4、發(fā)情結(jié)束后生殖道出血5、發(fā)情時(shí)接受其它牛爬跨、安靜發(fā)情率高二、母牛的發(fā)情鑒定1、外部觀察法觀察母牛的神態(tài)、采食情況、外陰部變化以及黏液的數(shù)量和粘稠度等。根據(jù)母牛發(fā)情表現(xiàn)將發(fā)情期分為三期：發(fā)情初期：爬跨其它母牛，黏膜粉紅，清水樣黏液發(fā)情中期：愿意接受其它牛爬跨，鳴叫，黏膜充血潮紅，透明黏液黏性強(qiáng)，不易拉斷發(fā)情后期：不爬跨也不接受爬跨，不再鳴叫，黏膜淡紅色，半透明黏液，黏性減退二、母牛的發(fā)情鑒定A、發(fā)情母牛被它牛嗅聞B、發(fā)情母牛接受爬跨C、發(fā)情母牛被爬不動

發(fā)情母牛爬跨過程二、母牛的發(fā)情鑒定二、母牛的發(fā)情鑒定2、陰道檢查法3、直腸檢查法4、計(jì)步器發(fā)情鑒定法比未發(fā)情母牛高2-4倍牛的配種和妊娠鑒定

三、牛的配種技術(shù)1、適宜的配種時(shí)間性欲結(jié)束后第一次輸精，間隔8～12h第二次輸精；早爬跨，下午配種，第二天上午復(fù)配，下午爬跨，次日早晨配種，下午復(fù)配2、配種方法-直腸把握輸精法（視頻）三、牛的配種技術(shù)四、牛的妊娠診斷1、早期妊娠診斷陰道檢查法：陰道黏膜干燥、蒼白無光，有子宮頸塞直腸檢查法：子宮角不對稱、增粗、有液體波動感、卵巢增大有黃體激素診斷法：乙烯雌酚注射，妊娠母牛無發(fā)情表現(xiàn)，未妊娠母牛有發(fā)情表現(xiàn)鞏膜血管診斷法：鞏膜表面有明顯縱向血管1～2條，細(xì)而清晰，顏色鮮紅7%碘酒法：在母牛鮮尿中滴入2ml7%碘酒溶液，混合5～6分鐘，暗紫色為妊娠，不變色為未妊娠四、牛的妊娠診斷B超、血液孕檢血檢操作簡便，在血樣送檢4小時(shí)后可以檢測出結(jié)果避免人員孕檢技術(shù)水平的限制導(dǎo)致誤檢，并造成系統(tǒng)信息的更改；降低早期胚胎因外力死亡的幾率；縮短牛只空懷天數(shù)：直腸檢查40天開始，B超檢查35天開始，血液檢測28天開始四、牛的妊娠診斷五、接產(chǎn)、助產(chǎn)1、妊娠期與預(yù)產(chǎn)期推算黃牛妊娠期275～285天水牛妊娠期300～328天牦牛妊娠期226～289天黃牛預(yù)產(chǎn)期推算：月減3，日加6五、接產(chǎn)、助產(chǎn)2、臨產(chǎn)征狀乳房增大、外陰部腫脹、骨盆韌帶松弛、產(chǎn)前1周體溫升高0.5～1℃，分娩前12h又下降0.4～1.2℃，行為發(fā)生改變，不安、頻頻排尿、頭向腹部回顧等3、分娩過程開口期、胎兒產(chǎn)出期、胎衣排出期產(chǎn)前漏乳產(chǎn)前坐骨韌帶松弛產(chǎn)前乳房水腫產(chǎn)前陰戶水腫母牛努責(zé)羊膜破裂，羊水流出胎兒頭和前肢露出初生犢牛胎衣排出惡露五、接產(chǎn)、助產(chǎn)4、接產(chǎn)、助產(chǎn)方法（視頻）5、母牛產(chǎn)后護(hù)理休息、喂給溫?zé)猁熎}水湯、防止吃胎衣、胎衣不下的處理6、初生犢牛處理擦凈黏液、假死現(xiàn)象處理、處理臍帶、剝軟蹄、稱重、編號、吃初乳胚胎工程

胚胎移植

胚胎移植概述1）胚胎移植的概念胚胎移植就是采用一定的方法將良種母畜的多枚早期胚胎從體內(nèi)取出，移植到相同生理狀態(tài)的另一頭母畜（受體）的子宮內(nèi)或輸卵管內(nèi)的過程，也叫借腹懷胎。提供胚胎的個(gè)體為供體。接受胚胎的個(gè)體為受體。胚胎移植實(shí)際上是產(chǎn)生胚胎的供體和養(yǎng)育胚胎的受體分工合作共同繁殖后代的過程。供體決定著后代的遺傳特性（基因型），受體只影響它的體質(zhì)發(fā)育。胚胎移植2）胚胎移植的意義（1）充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛力，加快品種改良和育種的進(jìn)程。（2）加快某一特定品種擴(kuò)群速度。（3）有利于瀕危動物的保護(hù)與利用。保存動物的品種資源。（4）誘發(fā)肉畜懷雙胎，提高生產(chǎn)效率。胚胎移植（5）通過胚胎的運(yùn)輸代替種畜進(jìn)出口。（6）培育無特異病原體（SPF）畜群，向封閉群引進(jìn)新的個(gè)體時(shí)，作為控制疾病的一種措施，采用胚胎移植技術(shù)則可以代替剖腹取仔的方法。（7）克服不孕。對于能正常發(fā)情排卵但不能妊娠的雌性，可以用胚胎移植生育后代。（8）作為發(fā)育生物學(xué)和其他胚胎生物技術(shù)的研究手段。胚胎移植

胚胎移植的原理1）胚胎移植的生理基礎(chǔ)（1）母畜發(fā)情后生殖器官的孕向性變化（2）胚胎在發(fā)育的早期階段處于游離狀態(tài)（3）移植的胚胎具有免疫耐受作用（4）胚胎的遺傳特性不受受體母畜的影響胚胎移植2）胚胎移植的操作原則（1）胚胎移植前后所處環(huán)境的同一性。①供體和受體須屬于同一物種。②受體和供體在發(fā)情時(shí)間上的同期性，一般要求相差24h以內(nèi)。③移植后的胚胎與移植前，所處的空間環(huán)境相似性。（2）胚胎移植的時(shí)限應(yīng)在周期性黃體退化之前。通常在供體發(fā)情配種后3～8d收集胚胎，受體同時(shí)接受移植。（3）避免不良因素對胚胎的損害，保證胚胎的質(zhì)量。必須經(jīng)過鑒定確認(rèn)為發(fā)育正常者。（4）供體的生產(chǎn)性能、經(jīng)濟(jì)價(jià)值均須大于受體，受體數(shù)量要多；兩者均須健康無??；移植對供、受體以后生殖不造成損害。胚胎移植

胚胎移植的程序胚胎移植技術(shù)主要包括胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)保存和移植等幾個(gè)步驟。由于進(jìn)行胚胎移植時(shí)希望一次從供體母畜得到多個(gè)胚胎，所以要對其進(jìn)行超數(shù)排卵處理。同時(shí)，胚胎移植成功的先決條件是供體和受體必須同時(shí)發(fā)情，故需對其進(jìn)行發(fā)情同期化處理。胚胎移植1）供體與受體的選擇（1）供體的選擇①應(yīng)選擇生產(chǎn)性能高，經(jīng)濟(jì)價(jià)值大的優(yōu)良品種的母畜作為供體。②具有良好的繁殖能力，既往繁殖史正常，易配易孕，沒有遺傳缺陷，分娩順利正常無難產(chǎn)。最好為第二胎以上的成年母畜。③健康無病，特別是無繁殖疾病和傳染性疾病。產(chǎn)后60d以上。④營養(yǎng)良好，體質(zhì)健壯。胚胎移植（2）受體的選擇①受體母畜數(shù)量多，一般為非優(yōu)良品種的個(gè)體。②具有良好的繁殖性能和健康體況。③體型中等偏上。以經(jīng)產(chǎn)母畜為好。④如選擇自然發(fā)情的母畜為受體，與供體發(fā)情同步差不超過±24小時(shí)。一般進(jìn)行發(fā)情同期化處理。胚胎移植2）供體和受體發(fā)情同期化、供體的超數(shù)排卵處理（1）供、受體的發(fā)情同期化只有當(dāng)供、受體的生殖器官處于相同的生理狀態(tài)，移植的胚胎才能正常發(fā)育。若不同期，胚胎處于不同生理環(huán)境，受體母畜不能產(chǎn)生促黃體作用，不能分泌足量的孕酮，胚胎就不能附植。一般供受體同期化發(fā)情時(shí)間不得超過一天。同期發(fā)情藥物通常使用前列腺素及其類似物，其用量根據(jù)藥物的種類和用法而有不同。在注射PGF2α后24小時(shí)，配合注射促進(jìn)卵泡發(fā)育的PMSG或FSH，可明顯提高同期發(fā)情效果。（2）供體超數(shù)排卵處理并配種或人工授精胚胎移植3）胚胎采集采胚是指借助工具利用沖胚液將胚胎由生殖道（輸卵管或子宮角）中沖出，并收集在器皿中。胚胎采集有手術(shù)法和非手術(shù)法兩種方法，手術(shù)法適用于各種動物，非手術(shù)法僅適用于牛、馬等大動物，且只能在胚胎進(jìn)入子宮后進(jìn)行。胚胎移植（1）胚胎采集前的準(zhǔn)備①沖胚液、培養(yǎng)液的配制為了保證胚胎在離體條件下不受損傷，沖胚液必須符合一定的滲透壓和PH值?，F(xiàn)在多采用杜氏磷酸緩沖液（PBS）、布林斯特氏液、合成輸卵管液（SOF）以及199培養(yǎng)液（TCM199）等，它們除含各種鹽類外，還含有多種有機(jī)成分，不但可用于沖洗、采胚，還可用于體外培養(yǎng)、冷凍保存和解凍胚胎等。沖胚液和培養(yǎng)液在使用前都要加入血清白蛋白，含量一般為0.3~1%，也可用犢牛血清代替，犢牛血清需加熱（56℃水浴30分鐘）滅活，使血清中的補(bǔ)體失去活性，以利胚胎存活。沖胚血清含量一般為3%（1~5%），培養(yǎng)血清含量為20%（1~50%）。胚胎移植②采胚時(shí)間的確定采胚時(shí)間的確定應(yīng)根據(jù)配種時(shí)間、發(fā)生排卵的大致時(shí)間、胚胎的運(yùn)行速度、胚胎的發(fā)育階段、畜種、胚胎所處部位、采胚方法等因素來確定。胚胎移植排卵時(shí)間發(fā)育速度（排卵后天數(shù)）2C4C8C16C進(jìn)入子宮胚泡形成脫離透明帶附植開始牛結(jié)束后10~11h1~1.52~3343~47~89~1122綿羊開始后24~30h1.51.5~22.532~46~77~815豬開始后35~45h1~21~32~33.5~52~2.55~6613馬結(jié)束前1~2d11.534~4.54~66837兔交配后10~11h11~1.51.5~222.5~43~4胚胎移植（2）采胚方法①手術(shù)法采胚：羊多用手術(shù)法采胚，仰臥保定，術(shù)部乳房前腹中線旁，兩條乳靜脈間。術(shù)前停食24~48h，肌注靜松靈0.5ml，局麻用0.5%普卡。也可2%普卡2~3ml或多卡因2ml尾薦硬膜外麻醉。羊在排卵后2~3d輸卵管采胚或4~7d子宮角手術(shù)法采胚。胚胎移植輸卵管法：按照外科手術(shù)要求在腹中線作一切口，找到輸卵管和子宮，引出切口外，觀察卵巢上的排卵情況與數(shù)量，再用注射器把沖胚液20~30ml注入子宮角前端，在輸卵管傘部插入一根玻璃管或塑料導(dǎo)管，把沖洗液接入器皿內(nèi)，等待檢胚。子宮角法：在子宮角基部插入二路式?jīng)_胚管，并充氣固定，再用沖卵針頭從子宮角尖端插入，推入沖卵液（50~60ml），回收胚胎。胚胎移植②非手術(shù)法采胚：目前牛的采胚多在配種后6~8d桑椹胚晚期或胚泡早期用非手術(shù)法采集。母牛在采胚前要禁水禁食一天；采胚前10min進(jìn)行麻醉（如注射靜松靈1~1.5ml）。胚胎移植操作者按直把輸精法將采胚管插入一側(cè)子宮角小彎附近，由助手抽出不銹鋼導(dǎo)桿，從進(jìn)氣口注入18~20ml空氣，堵住子宮角；再由助手用注射器從進(jìn)水口注入事先準(zhǔn)備好加溫至37℃的沖胚液，反復(fù)沖冼5~6次，將回收的沖胚液收入集胚器內(nèi)，置于37℃恒溫箱或無菌室內(nèi)等待檢查。一側(cè)子宮角沖洗完后，按上法再沖另一側(cè)子宮角。結(jié)束后向子宮內(nèi)注入抗生素以防感染。胚胎移植4）胚胎檢查（1）檢胚將收集的沖卵液于37℃溫箱內(nèi)靜置10一15分鐘。胚胎沉底后，移去上層液。取底部少量液體移至平皿內(nèi)，靜置后，在實(shí)體顯微鏡下先在低倍（10一20倍）下檢查胚胎數(shù)量，然后在較大倍數(shù)（50—100倍）下觀察胚胎質(zhì)量。（2）洗胚將胚胎在洗液中轉(zhuǎn)移清洗、處理胚胎。吸卵可用1毫升的注射器裝上特別的吸頭進(jìn)行，也可使用自制的吸卵管。胚胎移植（3）胚胎質(zhì)量鑒定：正常發(fā)育的胚胎，其中細(xì)胞（卵裂球）外形整齊，大小一致，分布均勻，外膜完整。無卵裂現(xiàn)象（未受精）和異常卵（外膜破裂、卵裂球破裂等）都不能用于移植。胚胎鑒定的方法有以下幾種：①形態(tài)學(xué)法在30—60倍的實(shí)體顯微鏡下或120—160倍的生物顯微鏡下對胚胎進(jìn)行評定，評定的內(nèi)容包括：a.卵子是否受精。b.透明帶的形狀、厚度、有無破損。c.卵裂球的致密程度，卵黃周隙內(nèi)是否有游離的細(xì)胞或細(xì)胞碎片，細(xì)胞大小是否有差異。d.以及胚胎的結(jié)構(gòu)和發(fā)育程度等。根據(jù)胚胎的形態(tài)特征可將胚胎分為A（優(yōu)）、B（良）、C（中）、D（差）。胚胎移植胚胎移植②熒光活體染色法將二醋酸熒光素（FAD）加入待鑒定的胚胎中，培養(yǎng)3—6分鐘，活胚胎顯示熒光，死胚胎無熒光。③測定代謝活性法將待鑒定的胚胎放入含有葡萄糖的培養(yǎng)液中，培養(yǎng)1小時(shí)后，測定葡萄糖的消耗量，每培養(yǎng)1小時(shí)消耗葡萄糖2—5ug以上者為活胚胎。應(yīng)注意的是在撿胚及進(jìn)行胚胎分類時(shí)，胚胎均應(yīng)保持在不低于25。C的溫度下。胚胎移植5）胚胎的培養(yǎng)與保存培養(yǎng)是在體溫的條件下，于培養(yǎng)液中使胚胎繼續(xù)發(fā)育。在體外發(fā)育的同時(shí)，當(dāng)然也延長了體外存活的時(shí)間，間接地達(dá)到了保存的目的，但時(shí)間一般只能持續(xù)數(shù)日。保存是使胚胎在體外一定條件下（降溫）停止發(fā)育，延長其在體外的生存時(shí)間，當(dāng)需要時(shí)升溫后進(jìn)行移植。胚胎的保存方法目前有三種：常溫保存、低溫保存和冷凍保存。胚胎移植（1）常溫保存：是指胚胎在常溫（15~25℃）下保存。通常采用含20%犢牛血清的PPS保存液，可保存胚胎4~8小時(shí)。（2）低溫保存：是指在0~10℃的較低溫度下保存胚胎的方法。在此溫度下，胚胎細(xì)胞分裂暫停，新陳代謝速度減慢。但細(xì)胞的一些成分特別是酶處于不穩(wěn)定狀態(tài)，因此在此溫度下保存胚胎也只能維持有限的時(shí)間。各種哺乳動物低溫保存胚胎的合適溫度是：小鼠5~10℃，兔10℃，山羊5~10℃，牛0~6℃。胚胎移植（3）冷凍保存：冷凍保存一般是指在干冰和液氮中保存胚胎。其最大的優(yōu)點(diǎn)是胚胎可以長期保存，而對其活力無影響。胚胎冷凍的方法很多，可以歸納為緩慢降溫法、快速冷凍法和一步冷凍法（直接冷凍法）三種：①緩慢降溫法：為最早采用的方法。加入保護(hù)劑后，以0.2~0.8℃/分的速率降至-196℃后投入液氮。同樣解凍也需要緩慢升溫。此法冷凍解凍過程耗時(shí)太長，現(xiàn)已淘汰。胚胎移植②快速冷凍法：為目前最成熟的方法。與一步法相比，雖然操作比較繁雜，需要專門的冷凍儀，但胚胎解凍后存活率及移植成功率較高，為目前生產(chǎn)中最常用的方法。其具體操作步驟為：A．胚胎采集和洗滌B．加入冷凍液C．裝管和標(biāo)記D．冷凍和誘發(fā)結(jié)晶（植冰）E．解凍和脫除保護(hù)劑胚胎移植③玻璃化法：采用25%的甘油、丙二醇、乙二醇中的任何兩種保護(hù)劑組成高濃度的玻璃化液。胚胎分兩步移入低、高濃度的保護(hù)劑中，裝入細(xì)管并在4℃平衡10分鐘，然后直接或在液氮中放置1~2分鐘投入液氮。解凍后可分兩步法脫去保護(hù)劑。此法操作簡單，不需要專門的冷凍儀，為將來發(fā)展的方向，但成功率還有待提高。胚胎移植6）胚胎的移植為保證胚胎輸入輸卵管或子宮角時(shí)，防止胚胎粘到吸管內(nèi)丟失，因此用吸管吸取胚胎的程序?yàn)椋合任胍欢伪４嬉?，一段空氣，然后再吸一段含有胚胎的保存液，一段空氣，最后吸少量保存液，吸管的尖端再留一段空隙。胚胎移植?）手術(shù)法移植：在進(jìn)行采胚和檢查的同時(shí)或之后，立即在受體腹部作一切口，找到排卵一側(cè)的卵巢，用注射器或移植器將胚胎注入同側(cè)的子宮角或輸卵管內(nèi)。（2）非手術(shù)法移植：適用于牛馬等大動物。移植前將可移植的胚胎吸入0.25ml塑料細(xì)管內(nèi)，隔著細(xì)管在實(shí)體顯微鏡下檢查，確定胚胎已吸入細(xì)管內(nèi)，然后將細(xì)管裝入移植器中移植。如果向一頭受體移植兩個(gè)或兩個(gè)以上胚胎時(shí)，應(yīng)按胚胎數(shù)均等地分別注入到兩個(gè)子宮角或輸卵管內(nèi)。胚胎生物工程技術(shù)簡介

體外受精技術(shù)體外受精技術(shù)是動物胚胎工程的一項(xiàng)重要技術(shù)，是指通過人為操作使精子和卵在體外環(huán)境中完成受精過程。其操作步驟如下：1）精子采集與獲能處理2）卵母細(xì)胞采集與成熟培養(yǎng)3）精卵體外受精4）受精的判定5）體外受精卵（早期胚胎）的培養(yǎng)發(fā)育胚胎生物工程技術(shù)簡介胚胎生物工程技術(shù)簡介胚胎性別控制及性別鑒定技術(shù)1）胚胎性別控制技術(shù)（1）X、Y精子的分離精于分離主要依據(jù)是X、Y精子在DNA含量、大小、比重、活力、膜電荷、酶類、細(xì)胞表面、移動速度、抵抗力上等均有差異，但差異甚小。其主要分離方法有沉降法、離心沉降法、密度梯度離心法、過濾法、層析法、電泳法及免疫學(xué)方法等。但目前均沒有取得穩(wěn)定可靠的結(jié)果。從研究現(xiàn)狀看，分離X、Y精子還存在相當(dāng)大的困難，與生產(chǎn)應(yīng)用尚有一定距離。胚胎生物工程技術(shù)簡介流式細(xì)胞器分離儀器XY種畜(天津)有限公司由新疆生物股份有限公司和美國亞達(dá)出口公司合資組建，主要引進(jìn)美國XY公司的精子細(xì)胞分類儀和技術(shù)。2004年7月一期引進(jìn)40臺。分離X精子速度4000個(gè)/秒以上，解凍后活力達(dá)到0.4以上，每臺分離儀每月生產(chǎn)4500支（含X精子200萬個(gè)），分離準(zhǔn)確率93%。利用高產(chǎn)奶牛種公牛的性控精液，使母牛的出生率達(dá)到90％以上。胚胎生物工程技術(shù)簡介（2）改變受精環(huán)境雄性動物產(chǎn)生X或Y精子，有支配性別的決定權(quán)；而雌性動物有支配性別的選擇權(quán)，改變母畜受精的環(huán)境，有可能改變性比例。利用5％精氨酸（生母液）1mL輸精前15min子宮頸灌注，然后輸精，使牛的母犢控制率達(dá)80％。北京三牛興業(yè)科技發(fā)展有限責(zé)任公司生產(chǎn)奶牛性控膠囊，用0.9%生理鹽水2ml稀釋一粒膠囊，在人工輸精前40min輸入母牛子宮，母犢率穩(wěn)定在70%-75%。cm處，產(chǎn)雌率76%左右。胚胎生物工程技術(shù)簡介2）胚胎的性別鑒定對胚胎的性別進(jìn)行鑒定，選擇（淘汰）某一性別的胚胎，仍不失為一種控制后代性別較為理想的方法。（1）組織學(xué)方法通過取胚胎細(xì)胞