發(fā)酵工程期末考試重點(diǎn)終極

●發(fā)酵工程：以微生物、動(dòng)植物細(xì)胞為生物作用劑進(jìn)展工業(yè)化生產(chǎn)的工程，包括發(fā)酵工藝和發(fā)酵設(shè)備?！裰饕獱幷搩?nèi)容：菌種選育與構(gòu)建、大規(guī)模培育基和空氣的滅菌、大規(guī)模細(xì)胞培育過程、細(xì)胞生長和產(chǎn)物形成動(dòng)力學(xué)、生物反響器的優(yōu)化設(shè)計(jì)和操作、發(fā)酵產(chǎn)品的分離純化過程中的技術(shù)問題等。●發(fā)酵工程原理：指導(dǎo)發(fā)酵產(chǎn)品爭論與開發(fā)，發(fā)酵工廠設(shè)計(jì)與建設(shè)以及發(fā)酵生產(chǎn)實(shí)踐的理論?！癯跫壌x：是很多生物都具有的生物化學(xué)反響，蛋白質(zhì)、核酸的合成等，均稱為初級代謝。初級代謝。●初級代謝產(chǎn)物●初級代謝產(chǎn)物如氨基酸、多糖等?！翊渭壌x：微生物以初級代謝產(chǎn)物為前提合成的對微生物本身的生命活動(dòng)沒有明確功能的物質(zhì)的過程。確功能的物質(zhì)的過程。●自然選育：不經(jīng)過人工處理，利用菌種的自然突變而進(jìn)展菌種篩選的過程?！耠s交育種：將兩個(gè)基因型不同的菌株經(jīng)吻合使遺傳物質(zhì)重組合，分別和篩選具有性狀的菌株?！裾T變育種：利用物理、化學(xué)等誘變劑處理均勻而分散的微生物細(xì)胞群，在促進(jìn)其突變率顯著提高的根底上，承受簡便、高效的篩選方法，從中選擇出少數(shù)符合目的的突變株，以供科學(xué)試驗(yàn)或生產(chǎn)實(shí)踐使用?！裨|(zhì)體融合育種：兩個(gè)親本的原生質(zhì)體在高滲條件下混合，由聚乙二醇作為助融劑，使它們相互凝集，發(fā)生細(xì)胞融合，接著兩個(gè)親本基因組由接觸到交換，從而實(shí)現(xiàn)遺傳重組?！袂绑w：某些化合物參加發(fā)酵培育基中，能直接被微生物在生物合成過程中結(jié)合到產(chǎn)物中去，而自身構(gòu)造并沒有明顯變化，產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因前體的參加而有較大的提高。●抑制劑：某些化合物可以抑制特定代謝途徑的進(jìn)展，使另一種代謝途徑活潑，獲得人們所需產(chǎn)物的積存。如生產(chǎn)甘油加抑制劑亞硫酸鈉，它與代謝過程中的乙醛生成加成物。這樣使乙醇代謝途徑中的乙醛不能成為NADH

(復(fù)原型輔酶I)NADH2

在細(xì)胞中積存，從而激活α－NADH2

的受氫體而復(fù)原為α－磷酸甘油，其水解后即形成甘油。●促進(jìn)劑：指那些既不是養(yǎng)分物質(zhì)又不是前體，但卻能提高產(chǎn)量的添加劑，如加巴比妥鹽能使利福霉素單位增加，并能使鏈霉菌推遲自溶，延長分泌期。●滅菌：用化學(xué)或物理的方法殺滅或除掉物料及其器皿中全部的生命體。消毒是指殺死病原微生物的過程。●分批滅菌：培育基置于發(fā)酵罐中加熱，到達(dá)預(yù)定溫度后維持一段時(shí)間，再冷卻到發(fā)酵所需溫度的滅菌?！襁B續(xù)滅菌：在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進(jìn)展加熱、維持和冷卻，同時(shí)把滅完菌的培育基通入已滅過菌的發(fā)酵罐的滅菌方式。●對數(shù)殘留定律：在微生物死亡過程中的任一時(shí)刻，活菌數(shù)的削減速率與該時(shí)刻殘留的活菌數(shù)成正比，這就是微生物死亡的對數(shù)殘留定律。微分式為：-dN/dτ=kN；菌數(shù)。

/Ns)N0

開頭滅菌時(shí)的活菌數(shù)Ns●單種法：一個(gè)種子灌接種一只發(fā)酵罐的接種方法。●雙種法：用兩只種子灌接種一只發(fā)酵罐的接種方法?！竦狗N法：從一只發(fā)酵罐中倒出適宜的，適量的發(fā)酵液給另一個(gè)發(fā)酵罐做種子的方法。●生長關(guān)聯(lián)型：產(chǎn)物生成與菌體生長之間有平行的準(zhǔn)量關(guān)系。這樣的產(chǎn)品或?yàn)榫w本身或初級代謝產(chǎn)物?！窬植可L關(guān)聯(lián)型：菌體生長消滅兩個(gè)頂峰，第一個(gè)生長頂峰與產(chǎn)物合成無平行的準(zhǔn)量關(guān)系，其次個(gè)生長頂峰與產(chǎn)物合成有平行的準(zhǔn)量關(guān)系?！穹巧L關(guān)聯(lián)型：細(xì)胞生長與產(chǎn)物合成無平行的準(zhǔn)量關(guān)系，只與菌體的總量有關(guān)。大局部次級代謝產(chǎn)物屬于這一類?！穹稚ⅲ菏窃谥行喳}作用下，由于雙電層排斥電位的降低，而使膠體體系不穩(wěn)定的現(xiàn)象。絮凝：在某些高分子絮凝劑存在下，基于架橋作用，使膠粒形成粗大的絮凝團(tuán)的過程，是一種以物理的集合為主的過程?！袢绾螐囊粋€(gè)菌種得到另一個(gè)菌種〔如從生產(chǎn)菌種獲得缺陷型或菌絲過濾法。生長譜法進(jìn)展。●如何從土壤中篩選芽孢桿菌〔微生物〕？采樣---預(yù)處理---增殖培育---純種分別---菌落選擇---初篩---復(fù)篩---野生菌株---性能鑒定〔生產(chǎn)性能試驗(yàn)、毒性試驗(yàn)、菌種鑒定〕---菌種保藏采樣用取樣鏟，將表層5cm左右的浮土除去，取5-25cm處的土樣10～25?g，裝入事先準(zhǔn)預(yù)備好的塑料袋內(nèi)扎好、編號并記錄地點(diǎn)、土壤土質(zhì)、植被名稱、時(shí)間及其他環(huán)境條件。懸液稀釋預(yù)處理從土壤中分別芽孢桿菌時(shí) ,由于芽孢具有耐高溫特性,100℃很難殺死,要在121℃才能徹底死亡。分別：培育基養(yǎng)分成分、PH、選擇性抑制劑；培育：留意溫度、PH、氧氣需求及培育時(shí)間；●菌種保藏原理、常用方法原理：菌種保藏主要是依據(jù)菌種的生理生化特點(diǎn)，人工制造條件，使孢子或菌體的生長代謝活動(dòng)盡量降低，以削減其變異。一般可以通過保持培育基養(yǎng)分成分在最低水平，缺氧狀態(tài)，枯燥和低溫，使菌種處于休眠狀態(tài)，抑制其生殖力量。常用方法〔1〕〔2〕〔3〕〔4〕真空冷凍枯燥保藏法：需要肯定設(shè)備，要〔5〕液氮超低溫保藏法：通常在微生物孢子或養(yǎng)分細(xì)胞培育物中參加20%的甘油，將其保存在液氮或-80℃冰箱中，可保藏?cái)?shù)年而不死?！衽嘤饕B(yǎng)分成份及其生理功能培育基的成分：分為碳源、氮源、生長因子、無機(jī)鹽及微量元素、水和能源。碳源，細(xì)胞及其產(chǎn)物的碳架構(gòu)造和能量的來源。氮源：主要用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)〔如氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸等〕和含氮代謝物等的氮素來源。生長因子：微生物代謝必不可少且不能用簡潔的碳源或氮源自行合成。無機(jī)鹽元素：P、S、Ca、Mg、Na、K、Fe、ClP：核酸、ATP著重要作用。S：蛋白質(zhì)、輔酶、生物素、谷光甘肽等組成成分。是含硫氨基酸的組成成分和某些輔酶的活性基。Fe：細(xì)胞色素、過氧化氫酶的組成成分。Mg、Ca：酶的輔基、激活劑。K、Na：調(diào)整滲透壓。微量元素：Zn、Co、Mn、Cu的輔基和激活劑。水分：是養(yǎng)分物質(zhì)，由于離開水生命活動(dòng)即停頓；參與代謝活動(dòng)，如水解與合成多糖、蛋白質(zhì)等均有水參與反響；是環(huán)境條件，很多反響需要在水中進(jìn)展；是細(xì)胞物質(zhì)的連續(xù)相。能源：為微生物供給生長代謝所需的能源。微生物依據(jù)其生理類群的不同，其能源物質(zhì)也不同，有時(shí)能源物質(zhì)是獨(dú)立于碳源之外的?！癜l(fā)酵工業(yè)中常用碳源及其優(yōu)缺點(diǎn)〔如碳源貧乏時(shí)蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或氨基酸等也可被某些菌種作為碳源使用。糖類：a：速效碳源，如葡萄糖等。優(yōu)點(diǎn)：易于利用。缺點(diǎn)：高濃度會(huì)造成抑pH以致影響某些酶的活性，從而抑制微生物的生長和產(chǎn)物的合成。b.長效碳源，如淀粉等，優(yōu)點(diǎn)是長效，邊糖化邊利用，不會(huì)造成高濃度抑制，且價(jià)格較廉價(jià)。缺點(diǎn)是增大培育基的粘度且有些微生物不具有淀粉酶和糖化酶，不能利用這類碳源。油脂:優(yōu)點(diǎn)是高復(fù)原態(tài)能源和碳源，同時(shí)也是消沫劑。缺點(diǎn)是脂肪的分解利用，pH有機(jī)酸鹽：如乙酸鹽等，也可做速效碳源，缺點(diǎn)是本錢較高，利用后pH上升。醇類：如乙醇，低濃度是可被少數(shù)微生物作碳源，缺點(diǎn)是本錢高。烴類：石油微生物的碳源，其他微生物一般不能利用。近年來隨著石油工業(yè)的進(jìn)展，微生物工業(yè)的碳源也有所擴(kuò)大，一些烴類物質(zhì)已用于發(fā)酵工業(yè)中。●如何使培育基有一個(gè)適當(dāng)?shù)腜H生理酸性、堿性鹽和pH緩沖劑的參加和搭配，以使pH值在發(fā)酵過程中不易超過肯定〔在微生物的生長、代謝過程中會(huì)產(chǎn)生引起培育基pH轉(zhuǎn)變的代謝產(chǎn)物，如不準(zhǔn)時(shí)調(diào)整，就會(huì)抑制甚至殺死其自身，因而在設(shè)計(jì)培育基時(shí)，就要考慮培育基成pH●培育基主要無機(jī)鹽及其生理功能甘肽等組成成分。硫存在于細(xì)胞的蛋白質(zhì)中，是含硫氨基酸的組成成分和某些輔酶的活性基；Fe：細(xì)胞色素、過氧化氫酶的組成成分，是菌體有氧氧化必不行少的元素。Mg、Ca：酶的輔基、激活劑。K、Na：調(diào)整滲透壓。與維持細(xì)胞的滲透壓有關(guān)，是微生物發(fā)酵培育基的必要成分。Cl：在一般微生物中不具有養(yǎng)分作用，但對一些噬鹽菌來講是有用的。●開發(fā)一個(gè)菌株的培育基配方：1.爭論思路與原則：A〕先要了解該菌的養(yǎng)分類型和生態(tài)類型。B〕確定培育基的類菌的養(yǎng)分需要，包括生長需要和合成產(chǎn)物的需要。(b)比例范圍，如C：N比。(c)培育基物態(tài)。(d)pH緩沖力量。(e)培育溫度。(f〔g〕原料價(jià)格、來源、加工方式。2.〔A〕選擇因子與水平，先選因子后選水平〔B〕〔C〕填寫表格，配制培育基，預(yù)備培育〔D〕建立檢驗(yàn)指標(biāo)與方法。3.操作及留意事項(xiàng)：搖瓶規(guī)格要全都，培育基要準(zhǔn)確。不能染菌。種子液要混勻，加量要準(zhǔn)確。檢驗(yàn)結(jié)果要準(zhǔn)確。4.計(jì)算與分析：確定培育基配方與環(huán)境條件掌握指標(biāo)。5.驗(yàn)證試驗(yàn)與適當(dāng)調(diào)整●分批滅菌的簡要步驟分批滅菌的操作要點(diǎn)a)配料：將培育基在配制罐中配好后，通過專用管道輸入發(fā)酵罐中。b)升溫階段：開動(dòng)攪拌系統(tǒng)，先用夾套或蛇管預(yù)熱(尾氣開)，當(dāng)溫度升溫到90-100℃時(shí)，停頓攪拌，三路進(jìn)氣，同時(shí)三路排氣。升溫過程應(yīng)盡可能快一些，以利于養(yǎng)分物質(zhì)的保持。c)保溫階段：溫度到達(dá)預(yù)定溫度后，關(guān)小進(jìn)汽、排汽閥門，依據(jù)罐溫變化狀況調(diào)整各路進(jìn)汽與排汽量，使罐溫維持在預(yù)定滅菌溫度之上1~2度范圍內(nèi)。d)冷卻階段：滅菌時(shí)間到達(dá)后，關(guān)閉全部與發(fā)酵罐直接相通的閥門，馬上引入無菌空氣保壓，開攪拌、排氣閥，引入冷卻水冷卻。●典型空氣除菌的工藝流程：采氣---前置過濾器---空壓機(jī)---儲(chǔ)氣管---冷卻器---油水分別器---加熱器---總過濾器---分過濾器---發(fā)酵罐10氣。前置過濾：除去大顆粒沙土、纖維等雜物，以防損傷空壓機(jī)?？諌簷C(jī)：這是一個(gè)空氣驅(qū)動(dòng)設(shè)備，需要的能耗很大。儲(chǔ)氣罐：消退往復(fù)式空壓機(jī)產(chǎn)生的氣流脈沖。冷卻器：空氣經(jīng)冷卻后才能通入發(fā)酵罐。油水分別器：冷卻后的空氣溫度低于漏點(diǎn)后，即有水滴析出。加熱器：通過加溫使相對濕度降下來?？傔^濾器：為過濾除菌的主要設(shè)備，分過濾器：為了保險(xiǎn)起見，還要進(jìn)展一次過濾。則空氣的無菌度、溫度、濕度即可到達(dá)要求。●常用的滅菌方法及其適應(yīng)性如何一些化學(xué)藥劑能使微生物中的蛋白質(zhì)、酶及核酸發(fā)生反響而具有殺菌作用。常用的化學(xué)藥劑有甲醛、氯、高錳酸鉀等?；瘜W(xué)滅菌法不用于培育基的滅菌。但染菌后的培育基可以用化學(xué)藥劑處理。利用紫外線、高能電磁波或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的γ射線進(jìn)展滅菌的方法。最但紫外線的穿透力低，所以僅用于外表消毒和空氣的消毒。微波滅菌設(shè)備的興起，為滅菌供給了的選擇。干熱滅菌：干熱滅菌常用的干熱條件為在160℃下保溫1h：干熱滅菌不如濕熱滅菌有效。一些要求保持枯燥的試驗(yàn)器具和材料(如培育皿、接種針等)可以用于熱滅菌，濕熱滅菌即利用飽和水蒸氣進(jìn)展滅菌。簡潔使蛋白質(zhì)凝固而殺火各種微生物，同時(shí)，蒸汽的價(jià)格低廉，來源便利，滅菌效果牢靠。所以培育基滅菌、發(fā)酵設(shè)備及管道的滅菌，普遍承受濕熱滅菌。過濾除菌：過濾除菌即利用過濾方法截留微生物，到達(dá)除菌的目的。只適用于澄清流體的除菌?！袢绾瓮茢嗑N的質(zhì)量。A〕pH；B)〔染色鏡檢：形態(tài)均一，染色均一，深色較安康。如：酵母菌，絲狀真菌邊緣的光滑完整程度，假設(shè)在液態(tài)培育中假設(shè)分支較多則比較安康〔需要在小的范圍內(nèi)波動(dòng)；C)培育基外觀、氣味〔憑閱歷來看；D)酶活力；E)●生長關(guān)聯(lián)型、局部生長關(guān)聯(lián)型、非生長關(guān)聯(lián)型發(fā)酵生長關(guān)聯(lián)型：產(chǎn)物生成與菌體生長之間有平行的準(zhǔn)量關(guān)系。產(chǎn)物直接來源于產(chǎn)能的初級代謝〔自身生殖所必需的代謝，菌體生長與產(chǎn)物形成不分開。氯霉素、桿菌肽等次級代謝產(chǎn)物的發(fā)酵也屬此類。局部生長關(guān)聯(lián)型：菌體生長消滅兩個(gè)頂峰，第一個(gè)生長頂峰與產(chǎn)物合成無平行丙酸、延胡索酸、谷氨酸等。。產(chǎn)物的形成和初級代謝是分開的。大局部次級代謝產(chǎn)物屬于這一類。如多數(shù)抗生素、色素、毒素、超量分泌的維生素等?！穹峙l(fā)酵、補(bǔ)料分批發(fā)酵、連續(xù)發(fā)酵分批發(fā)酵：指在一封閉培育系統(tǒng)內(nèi)含有初始限制量的基質(zhì)的發(fā)酵方式。在這一過程中，除了氧氣、消泡劑及掌握pH的酸或堿外，不再參加任何其它物質(zhì)。發(fā)酵過程中培育基成分削減，微生物得到生殖。優(yōu)點(diǎn)：(1)操作簡潔、操作引起染菌的概率低；(2)設(shè)備一次性投資低；(3)一般不會(huì)產(chǎn)生菌種老化和變異等問題。缺點(diǎn)：(1(2)非生產(chǎn)時(shí)間較長、設(shè)備利用率低。發(fā)酵過程從移種后開頭，一般分為：延滯期、對數(shù)期、穩(wěn)定期及衰亡期，也有分為：停滯期、加速期、對數(shù)期、減速期、靜止期和死亡期，一般發(fā)酵不允許進(jìn)入衰亡期。分批發(fā)酵的分類對實(shí)踐的指導(dǎo)意義：假設(shè)生產(chǎn)的產(chǎn)品是生長關(guān)聯(lián)型，則宜承受有利于細(xì)胞生長的培育條件，延長與產(chǎn)物合成有關(guān)的對數(shù)生長期；假設(shè)產(chǎn)品是非生長關(guān)聯(lián)型，則宜縮短對數(shù)生長期，并快速獲得足夠量的菌體細(xì)胞后延長穩(wěn)定期，以提高產(chǎn)量。補(bǔ)料分批發(fā)酵但不取動(dòng)身酵液。優(yōu)點(diǎn)：(1)使發(fā)酵系統(tǒng)中維持很低的基質(zhì)濃度，節(jié)氣及攪拌；(2)和連續(xù)發(fā)酵比無菌條件要求較低；(3)與連續(xù)發(fā)酵比較少有菌種老化和變異等問題；(4)產(chǎn)物濃度高，濃縮比小，提取本錢低。缺點(diǎn)：(1)存在肯定的非生產(chǎn)時(shí)間；(2)和分批發(fā)酵比，流加穎培育基增加了染菌連續(xù)發(fā)酵：是培育基料液連續(xù)微生物在近似恒定狀態(tài)下生長的發(fā)酵方式。優(yōu)點(diǎn)：(1)能維持低基質(zhì)濃度；(2)可以提高設(shè)備利用率和單位時(shí)間的產(chǎn)量；(3)便于自動(dòng)掌握。缺點(diǎn)：(1)菌種發(fā)生變異的可能性較大；(2)要求嚴(yán)格的無菌條件；(3)發(fā)酵液中產(chǎn)物濃度低，濃縮比大?！衽菽绾握莆眨?1)預(yù)防泡沫的形成：A選擇不產(chǎn)泡沫的培育基成分；B選擇適宜的滅菌條件；C選育不產(chǎn)泡沫的菌株；(2)掌握泡沫的方法：A機(jī)械消沫：釘、耙、離心式消沫器；B消沫劑消沫；溶氧缺乏如何處理●溶氧濃度對發(fā)酵的影響：1、厭氧發(fā)酵：溶氧濃度>0，有害；以無機(jī)或有機(jī)氧化物作為呼吸鏈的電子最終受體。2為呼吸鏈的電子最終受體。當(dāng)dc/dt<0,供小于需時(shí)，實(shí)行以下措施：供氧方面：A提高罐壓〔可能會(huì)影響菌的代謝B增加通氣量〔即增加通氣速率C通入純氧；D增加攪拌功率〔液體的混合和循環(huán)；需氧方面：A降低培育溫度〔即供氧方程的推動(dòng)力；B補(bǔ)水稀釋培育液〔掌握菌體量，使發(fā)酵液中有較高的氧濃度。發(fā)酵過程中，一旦溶氧電極探測到發(fā)酵液中的溶氧低于設(shè)定值，一般會(huì)承受報(bào)警的形式提示操作人員留意并實(shí)行上述一種或幾種措發(fā)酵過程中溶氧常常會(huì)成為限制性因素，因此，需要操作人員隨時(shí)留意溶氧是否正常?！裼绊懗瑸V的因素有哪些，如何提超群濾速度？因素：膜兩側(cè)的壓力差，膜面流速，料液粘度，溫度，溶質(zhì)的集中系數(shù)和料液濃度。方法：流速增大，溫度上升，料液濃度降低，錯(cuò)流操作。pH發(fā)酵過程中培育液的pH重要的發(fā)酵參數(shù)。它對菌體的生長和產(chǎn)品的積存有很大的影響。因此，必需把握發(fā)酵過程中pH的變化規(guī)律，準(zhǔn)時(shí)監(jiān)測并加以掌握，使它處于最正確的狀態(tài)。盡管多數(shù)微生物能在3~4個(gè)pH單位的pH范圍內(nèi)生長，但是在發(fā)酵工藝中，為了到達(dá)高生長速pHpH：微生物生長和產(chǎn)物合成的最適pH：大多數(shù)細(xì)菌6.3-7.5；霉菌和酵母菌3-6；放線菌7-8；微生物生長階段和產(chǎn)物合成階段的最適pH特性有關(guān)，也取決于產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)。發(fā)酵過程中pH的變化規(guī)律.生長階段：pH上升或下降；生產(chǎn)階段：pH比較平穩(wěn)；自溶階段：pHpH的影響主要是影響酶的活性和膜的透性。引起各種酶活力轉(zhuǎn)變，影響菌對基質(zhì)的利用速度和細(xì)胞構(gòu)造，以致影響菌體生長和產(chǎn)物合成。影響菌體細(xì)胞膜電荷狀況，引起膜的滲透性的變化，從而影響菌對養(yǎng)分的吸取和代謝產(chǎn)物的形成。●最適pH的選擇：原則：有利于菌體生長和產(chǎn)物的合成，以獲得較高的產(chǎn)量。一般依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定。最適pH與菌株，培育基組成，發(fā)酵工藝有關(guān)。應(yīng)按發(fā)酵過程的不同階段分別掌握不同的pH范圍。pH的掌握：A在根底培育基配方中考慮到pH的緩沖力量；B通過補(bǔ)料調(diào)pH，如pHpHC加酸堿調(diào)整pH?！袢绾瓮茢喟l(fā)酵終點(diǎn)：依據(jù)不同的發(fā)酵目的和如何獲得最正確經(jīng)濟(jì)效益來確定，具體的指標(biāo)有菌絲形態(tài)，產(chǎn)物濃度，濾速，PH值，培育基外觀，粘度等，發(fā)酵終點(diǎn)要綜合這些因素考慮。產(chǎn)物濃度為首要考慮，需要進(jìn)展實(shí)時(shí)化驗(yàn)菌形及菌體形態(tài)，通過鏡檢防止菌體自溶，菌體自溶前的跡象：氨基氮上升，PH上升，菌絲碎片增多，粘度增大，過濾速度降低。濾速由培育基內(nèi)粘度打算，是加工需要泡沫及培育基外觀為表現(xiàn)觀看，作為參考，PHPH〔1雜菌的檢出(a〔檢出形態(tài)差異大的雜菌〕;(b)平板檢查法〔依菌落不同，檢出雜菌〕;(c)肉湯檢查法〔只能檢出細(xì)菌雜菌〔2〕染菌緣由的分析(a)種子帶菌〔可追溯；(b)培育基滅菌不徹底〔芽孢桿菌；(c)空氣系統(tǒng)帶菌〔球菌；(d)泡沫冒頂〔有跡可循；(e)夾套及〔加壓檢測(f)操作不慎〔3染菌后的處理(a);(b)發(fā)酵罐染菌：前期〔加料滅菌；中期〔偏離雜菌最適生長條件；后期〔放罐●污染噬菌體如何推斷處理：〔1〕污染噬菌體的覺察和檢查：(a)發(fā)酵液變??；(b)消滅噬菌斑；(c)電鏡覺察噬菌體〔2〕消滅噬菌體污染后的處理(a)滅菌放罐；(b)清理生產(chǎn)環(huán)境；(c)調(diào)換生產(chǎn)菌株；(d)停產(chǎn)整頓；(e)選育抗噬菌體菌株?！袢绾翁岣哌^濾速度。1.選擇適宜的預(yù)處理方法對發(fā)酵液進(jìn)展預(yù)處理。2.參加助濾劑，助濾劑是一種不行3.參加一些反響劑，它們相互作用，或和某些溶解性鹽類發(fā)生反響生成不溶解的沉淀〔GaSO4，AlPO4等。生成的沉淀能防止菌絲體粘結(jié)，使菌絲具有塊狀構(gòu)造，沉淀本身也可以作為助濾劑，并且還能使膠狀物和懸浮物〔大多為蛋白〕凝固。4.參加酶制劑，分解粘性多糖等物質(zhì)?！窆I(yè)上常用的膜過程有哪些，各自的適用性如何？透析是以膜兩側(cè)的濃度差為傳質(zhì)推動(dòng)力，從溶液中分別出小分子物質(zhì)的過程。在生物分別中主要用于蛋白質(zhì)的脫鹽。反滲透：在高于溶液滲透壓的壓力作用下，只有溶液中的水透過膜，而全部溶液中大分子、小分子有機(jī)物級無機(jī)鹽全部被截留?。粔毫Σ钔ǔ?.1MPa用于海水淡化，藥物濃縮，純水制造。微濾和超濾都是利用膜的篩分性質(zhì)，以壓差為傳質(zhì)推動(dòng)力，主要用于截留固體微粒和高分子溶質(zhì)。微濾廣泛用于細(xì)胞、菌體等的分別和濃縮。超濾適用于1-50nm的生物大分子的分別，如蛋白質(zhì)、病毒等。電滲析：利用分子的荷電性質(zhì)和分子大小的差異進(jìn)展分別的膜分別法，可用于小分子電解質(zhì)的分別和溶液的脫鹽。以鏈霉素提取為例，簡述離子交換操作過程？吸附：適當(dāng)稀釋中性吸附濾液，用鈉型弱酸型樹脂吸附；漂洗：用碳酸溶液在加壓下進(jìn)展漂洗樹脂；洗脫：用0.1mol／L-1mol／L酸梯度鹽酸自鈉型弱酸型樹脂上洗脫鏈霉素；洗脫后樹脂為氫型，再轉(zhuǎn)型為鈉型可連續(xù)提取?！裼绊戨x子交換速度的因素有哪些，這些因素是如何影響的？顆粒大?。侯w粒減小有利于交換速度的提高；交聯(lián)度：交聯(lián)度越低樹脂越易膨脹，在樹脂內(nèi)部集中就越簡潔。溫度：隨著溫度的上升離子交速度提高；離子的化合價(jià)：離子的化合價(jià)越高，離子與樹脂骨架之間的庫倫引力越大，因此集中速度就愈小；離子的大?。盒‰x子與樹脂骨架的碰撞較少，交換速度比較快；攪拌速度：當(dāng)液膜掌握時(shí)，肯定范圍內(nèi)增加攪拌速度會(huì)使交換速度增加；溶液濃度：當(dāng)C<0.001mol／L時(shí)一般為外集中掌握；當(dāng)0.001mol／L<C<0.01mol／LC>0.01mol／L時(shí)，濃度再增加，交換速度就增加得較慢當(dāng)濃度再連續(xù)增加，交換速度到達(dá)極限值后就不再增大，此時(shí)已轉(zhuǎn)變?yōu)閮?nèi)集中掌握?！?〕〔2〕特性，選擇對欲提溶質(zhì)選擇性溶解的萃取溶劑；〔3〕要最大限度的分別欲提溶質(zhì)和雜質(zhì)，則是分別因素〔β〕越大越好；〔4〕要得到好的分別效果，不僅要求分別因素β高，還要求原溶劑和溶劑互溶性小，最好為互不相容；〔5〕原溶劑和溶劑互溶〔6〕〔7〕溶劑的毒性要低，溶劑可分為〔8〕〔9〕價(jià)廉易得?！癯Ｒ姵R界萃取工藝原理？超臨界萃取典型過程是由萃取階段和分別階段組合而成。在萃取階段，超臨界流體將所需組分從原料中提取出來。在分別階段，通過變化某個(gè)參數(shù)或其他方法，使萃取組分從超臨界流體中分別出來，并使萃取劑循環(huán)使用〔1〕等溫法：通過變化壓力而使萃取組分從超臨界流體中分別出來；〔2〕等壓法：利用溫度的變化來實(shí)現(xiàn)溶質(zhì)與萃取劑的分別；〔3〕吸附法：承受可吸附溶質(zhì)而不吸附萃取劑的吸附劑使兩者分別?！裰珜臃謩e的裝置及其操作：裝置有：蠕動(dòng)泵、層析柱、檢測器和局部收集器。操A.應(yīng)有進(jìn)料分布頭；柱底端有支持固定相的玻璃棉或砂孔玻璃板；高徑比為20～30；出口管應(yīng)盡量短。C.然后將漿料漸漸邊加邊攪拌，一次加完。D．加樣：樣品首先需用裝柱用的緩沖液平衡，除去柱上部過多的緩沖液，使液面剛到達(dá)床層頂面，然后關(guān)上出