臨床檢驗儀器學(xué)-復(fù)習(xí)大綱

第一章概論

1、一個優(yōu)良的檢驗儀器應(yīng)具有(P3)：靈敏度、分辨率和精度高，噪音和誤差小，可靠性、

穩(wěn)定性和重復(fù)性好，響應(yīng)時間短，測量范圍、示值范圍、頻率響應(yīng)范圍和線性范圍寬等性能

指標(biāo)。

2、最小檢測量與分辨率的區(qū)別？(P5)

答：①分辨率：儀器設(shè)備能感覺、識別或探測的輸入量(或能產(chǎn)生、能響應(yīng)的輸入量)的最

小值。

3、精確度與靈敏度的區(qū)別？(P3)

答：①靈敏度：檢驗儀器在穩(wěn)態(tài)下輸出量變化與輸入量變化之比，即檢驗儀器對單位濃度或

質(zhì)量的被檢物質(zhì)通過檢測器是所產(chǎn)生的響應(yīng)信號值變化大小的反應(yīng)能力，他反應(yīng)儀器能夠檢

測的最小被測量。②精確度：對檢測可靠度或檢測結(jié)果可靠度的--種評價，是指檢測值偏離

真值的程度。精度是一個定性的概念，其高低是用誤差來衡量的，誤差大則精度低，誤差小

則精度高。③區(qū)別：

4、精確度(P5)：對檢測可靠度或檢測結(jié)果可靠度的-一種評價，是指檢測值偏離真值的程度。

精度是一個定性的概念，其高低是用誤差來衡量的，誤差大則精度低，誤差小則精度高。

5、重復(fù)性(P5)：在同一檢測方法和檢測條件(儀器、設(shè)備、檢測者、環(huán)境條件)下，在一

個不太長的時間間隔內(nèi)，連續(xù)多次檢測同一參數(shù)，所得到的數(shù)據(jù)的分散程度。重復(fù)性與精密

度密切相關(guān)，重復(fù)性反映一臺設(shè)備固有誤差的精密度。

6、準(zhǔn)確度和精確度的區(qū)別。(P5)

第二章離心機

1、簡述分析型超速離心機的工作原理。(P26)

答：分析型超速離心機主要由一個橢圓形的轉(zhuǎn)子、一套真空系統(tǒng)和一套光學(xué)系統(tǒng)所組成。該

轉(zhuǎn)子通過一個柔性的軸聯(lián)接成一個高速的驅(qū)動裝置，此軸可使轉(zhuǎn)子在旋轉(zhuǎn)時形成自己的軸。

轉(zhuǎn)子在一個冷凍的真空腔中旋轉(zhuǎn)，其容納了兩個小室：分析室和配衡室。配衡室是一個經(jīng)過

精密加工的金屬塊，作為分析室的平衡用。分析室的容量一般為1ml,呈扇形排列在轉(zhuǎn)子中，

其工作原理與一個普通水平轉(zhuǎn)子相同。分析室有上下兩個平面的石英窗，離心機中裝有的光

學(xué)系統(tǒng)可保證在整個離心期間都能觀察小室中正在沉降的物質(zhì)，可以通過對紫外光的吸收

(如對蛋白質(zhì)和DNA)或折射率的不同對沉降物進行監(jiān)測。在分析室中物質(zhì)沉降時重粒子和

輕粒子之間形成的界面就像一個折射的透鏡，在檢測系統(tǒng)的照相底板上產(chǎn)出一個“峰工

由于沉降不斷進行，界面向前推進，“峰”也在移動，從峰移動的速度可以得到物質(zhì)沉降速

度的指標(biāo)。

2、什么是離心力及相對離心力？（P17）

答：離心力：當(dāng)物體所受外力小于運動所需要的向心力時，物體將向遠(yuǎn)離圓心的方向運動。

物體遠(yuǎn)離圓心運動的現(xiàn)象稱為離心現(xiàn)象也叫離心運動。離心運動是由于向心力消失或不足而

造成的。

相對離心力：是指在離心場中，作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù)，單位是重力加

速度"g"。

3、離心力計算式（每個符號的含義）。（P17）

答：離心作用是根據(jù)在一定角速度下作圓周運動的任何物體都受到一個向外的離心力進行

的。離心力（Fc）的大小等于離心加速度32r與顆粒質(zhì)量m的乘積，即：

22

27lN247tNrm

Fc=m(o2r=m(

3600

式中3是旋轉(zhuǎn)角速度，N是每分鐘轉(zhuǎn)頭旋轉(zhuǎn)次數(shù)，r為離心半徑，m是質(zhì)量。

4、離心機的主要部件。（P19）

答：低速離心機結(jié)構(gòu)較簡單，由電動機、離心轉(zhuǎn)盤（轉(zhuǎn)頭）、調(diào)速器、定時器、離心套管與

底座等主要部件構(gòu)成。

高速（冷凍）離心機由轉(zhuǎn)動裝置、速度控制系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、離心室、離心

轉(zhuǎn)頭及安全保護裝置等。

超速（冷凍）離心機結(jié)構(gòu)主要由一個橢圓形轉(zhuǎn)子，一套真空系統(tǒng)和一套光學(xué)系統(tǒng)所組成。

5、差速離心法的優(yōu)點，特點。（P23）

答:采用不同的離心速度和離心時間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法,稱為差速離心.

操作時，將含有兩種不同顆粒的混懸液，以常速離心，使大的顆粒下沉，將上清液傾倒于另一

離心管中，再加大離心力，離心一定時間，分離小的顆粒，反復(fù)多次分離，達(dá)到分離目的。

差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。

差速離心法的優(yōu)點是：操作簡單，離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開，并可使用容量

較大的角式轉(zhuǎn)子；分離時間短、重復(fù)性高；樣品處理量大。

缺點是：分辨率有限、分離效果差，沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級內(nèi)的各種粒子不容易分開，不

能一次得到純顆粒；壁效應(yīng)嚴(yán)重，特別是當(dāng)顆粒很大或濃度很高時，在離心管一側(cè)會出現(xiàn)沉

淀；顆粒被擠壓，離心力過大、離心時間過長會使顆粒變形、聚集而失活。

向心IWMWfl網(wǎng)一次分離一Wt一分MJ

第三章顯微鏡

1、光學(xué)顯微鏡的性能參數(shù)。（P31）

答：顯微鏡的性能參數(shù)主要有放大率、數(shù)值孔徑、分辨率、視場、景深、鏡像亮度、鏡像清

晰度、工作距離和機械筒長。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比u,與分辨率、景深

成反比，它的平方與圖像亮度成正比。因此，使用較大數(shù)值孔徑的物鏡，其放大率和分

辨本領(lǐng)較高，淡視場、景深、工作距離較小。

①數(shù)值孔徑：又叫鏡口率，是物體與物鏡間媒質(zhì)的折射率n與物鏡孔徑角的一半（B）正弦值

的乘積，通常縮寫為NA,即NA=nsinB。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比，與分辨率、

景深成反比，它的平方與圖像亮度成正比。

②分辨率：顯微鏡的最重要參數(shù)，指透鏡能分辨兩點之間的最小距離。N與D成反比，X

與D成正比。D=您1（D：分辨率；X：光波的波長；N：介質(zhì)折射率；a:物鏡鏡口

角）。提高顯微鏡分辨率的方法：增大物鏡的數(shù)值孔徑；用短波長的光照射。

③放大率:或稱放大倍數(shù)是指顯微鏡經(jīng)多次成像后最終所成（放大的）像的大小相對于原物體

大小的比值，常記作M。M=maq（M是顯微鏡的總放大倍數(shù)；m是物鏡的放大倍數(shù)；a是目鏡

的放大倍率，一般表達(dá)為明視距離（正常視力者為25cm）與目鏡焦距之比；q為在雙目顯微鏡

中所增設(shè)的棱鏡所起的放大倍數(shù)，一般取值為1.6倍。）

④視野：稱視場，是指通過顯微鏡所能看到標(biāo)本所在空間的范圍。

⑤景深與焦長：景深又稱焦點深度，是指在成一幅清晰像的前提下，像平面不變，景物沿光

軸前后移動的距離稱“景深二景物不動，像平面沿光軸前后移動的距離稱“焦長”。

⑥鏡像亮度和清晰度：鏡像亮度即顯微鏡的圖像亮度的簡稱。高倍率工作條件下的喑場、偏

光、攝影顯微鏡等都需要足夠的亮度，與照明及物鏡的性能參數(shù)相關(guān)。鏡像清晰度是指圖像

的輪廓清晰、襯度適中的程度。

⑦工作距離：工作距離是指從物鏡前表面中心到被觀察標(biāo)本間滿足工作要求的距離范圍，與

物鏡的數(shù)值孔徑成反比。一般情況下，物鏡的數(shù)值孔徑越大，其工作距離越小。

2、簡述掃描電子顯微鏡的工作原理。（P37）

答：掃描電子顯微鏡的工作原理是用一束極細(xì)的電子束掃描樣品，在樣品表面激發(fā)出次級

電子，次級電子由探測體收集，并在那里被閃爍器轉(zhuǎn)變?yōu)楣庑盘?，再?jīng)光電倍增管和放大器

轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘杹砜刂茻晒馄辽想娮邮膹姸?，顯示出與電子束同步的掃描圖像。

3、顯微鏡的核心部件(心臟)。(P31)

答：光學(xué)系統(tǒng)是顯微鏡的主體部分，有包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等組成的照明裝置。

物鏡，目鏡，光源。物鏡是顯微鏡中最重要的和最復(fù)雜的部分，被稱為顯微鏡的心臟，其性

能直接關(guān)系到顯微鏡的成像質(zhì)量和技術(shù)性能。

4、光學(xué)顯微鏡的照明設(shè)置主要部件(4個)。(P34)

答：照明裝置的主要部件有光源、濾光器、聚光鏡和玻片等。

第四章紫外-可見分光光度計

1、什么是光的吸收定律？(P51)

答：在朗伯-比爾定律中，比例常數(shù)k稱為吸光系數(shù)。如果溶液濃度以物質(zhì)的量的濃度表示

時，此常數(shù)稱為摩爾吸光系數(shù)(。)，它表示在一定波長下測得的液層厚度為1cm、溶液濃

度c為Imol/L時的溶液吸光度值。如果溶液濃度以質(zhì)量體積比表示時，此常數(shù)稱為比吸光

系數(shù)(。)，它表示當(dāng)溶液濃度為lg/L、液層厚度為1cm時，在一定波長下測得的吸光度值。

摩爾吸光系數(shù)￡和比吸光系數(shù)”可相互換算。

2、紫外-可見分光光度計有哪些基本類型？各自有什么特點？

答：紫外-可見分光光度計可以按儀器的使用光波長分類；也可按儀器的光學(xué)系統(tǒng)分類。按

使用波長分類可分為：紫外分光光度計(0.Inm?200nm)；可見分光光度計(360nm?800nm)；

紫外-可見分光光度計(200nm-1000nm)；紫外-可見-紅外分光光度計(200nm-2500nm)等。

按光學(xué)系統(tǒng)分類可分為：單光束分光光度計；雙光束分光光度計；雙波長分光光度計；雙波

長一雙光束分光光度計；動力學(xué)分光光度計等。根據(jù)目前分光光度計的應(yīng)用情況，主要介紹

單光束、雙光束和雙波長等三種分光光度計。

特點：單光束分光光度計是一類結(jié)構(gòu)簡單，使用、維護比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度

計。雙光束分光光度計在其出射狹縫和樣品吸收池之間增加了一個光束分裂器或斬波器，作

用是以一定的頻率將一個光束交替分成兩路，使一路經(jīng)過參比溶液，另一路經(jīng)過樣品溶液，

然后由一個檢測器交替接收或由兩個檢測器分別接收兩路信號，這是目前國內(nèi)外使用最多，

性能較為完善的一類分光光度計。雙波長分光光度計不用參比溶液，只用一個待測溶液，能

較好的解決由于非特征吸收信號(如試樣的渾濁、吸收池與空氣界面以及吸收池與溶液界面

的折射差別等)影響而帶來的誤差，大大提高檢測的準(zhǔn)確度。

3、朗伯比爾定律。

答：光照射到物質(zhì)可發(fā)生折射、反射和透射，一部分光會被物質(zhì)吸收。不同的物質(zhì)會吸收不

同波長的光。改變?nèi)肷涔獾牟ㄩL，并依次記錄物質(zhì)對不同波長光的吸收程度，就得到該物質(zhì)

的吸收光譜。每一種物質(zhì)都有其特定的吸收光譜，因此可根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜來分析物質(zhì)的

結(jié)構(gòu)、含量和純度。紫外-可見分光光度計的工作原理遵循朗伯-比爾定律。設(shè)入射光強度為

Io,當(dāng)透過濃度為C、液層厚度為6的溶液后，透射光強度為7,透射光強度與入射光強度

的比值稱為透光度，也叫透射率，以「表示。當(dāng)液層厚度方或溶液濃度C按算術(shù)級數(shù)增加時,

T=-L=I()3

透光度T按幾何級數(shù)減少，數(shù)學(xué)表達(dá)式為：。式中4為比例常數(shù)。

在光譜分析中，常常用吸光度表示溶液對入射光的吸收程度。吸光度與透光度的關(guān)系是:

吸光度等于透光度的負(fù)對數(shù)，用A表示吸光度，有下列公式關(guān)系。

/=7g7=_lgZ=lg4=lgl=kbc該公式表明，當(dāng)用一束單色光照射吸收溶液時，其

吸光度與液層厚度及溶液濃度的乘積成正比。此即朗伯-比爾定律。

4、紫外光區(qū)波段范圍。(P51)

答：200-400nm。

5、單色光分光光度計的特點。(P54)

答：單光束分光光度計是一類結(jié)構(gòu)簡單，使用、維護比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度計。其

設(shè)計原理和結(jié)構(gòu)具有以下特點：①單光束光路，從光源到試樣至接收器只有一個光通道，使

用中依次對參考樣品和待測試樣進行測定，然后將二次測定數(shù)據(jù)進行比較、計算，獲得最終

結(jié)果；②只有一個色散元件，工作波長范圍較窄；③通常采用直接接收放大顯示的簡單電子

系統(tǒng)，用電表或數(shù)字顯示；④結(jié)構(gòu)簡單、附件少、功能范圍小，不能做特殊試樣測定。

第五章臨床血液常規(guī)檢驗儀器

1、電阻抗型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計數(shù)原理及要點。(P64)

答：電阻抗法血細(xì)胞檢測原理(庫爾特原理)血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對

的不良導(dǎo)體；電阻值大于稀釋液的電阻值：當(dāng)細(xì)胞通過檢測器微孔的孔徑感受區(qū)時，在內(nèi)外

電極之間恒流源電路上，電阻值瞬間增大，產(chǎn)生一個電壓脈沖信號；產(chǎn)生的脈沖信號數(shù)，等

于通過的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號幅度大小與細(xì)胞體積大小成正比。電阻抗法白細(xì)胞的檢測、紅細(xì)

胞和血小板的檢測。

2、聯(lián)合檢測型血細(xì)胞分析儀檢測原理(VCS技術(shù))(P65)

答：主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類，實質(zhì)是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細(xì)

胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。共有特點是：均使用了鞘流技術(shù)。

每個細(xì)胞接受三維分析，定義到三維散點圖的相應(yīng)位置

體積(V)電阻抗原理測定細(xì)胞體積和數(shù)量。

電導(dǎo)性(C)高頻電磁探針，測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例。

光散射(S)細(xì)胞內(nèi)粗顆粒的光散射強度要比細(xì)顆粒更強。

3、凝固法原理。（P74）

答：是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量（光、電、超聲、機械運動等）

的變化，再由計算機分析所得最終結(jié)果，稱生物物理法。按測量原理分為電流法、超聲分析

法、光學(xué)法和磁珠法四種。光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化，導(dǎo)致光

強度變化來測定相關(guān)因子。磁珠法原理：是根據(jù)磁珠運動的幅度隨血漿凝固過程中黏度的增

加而變化來測量凝血功能的方法。根據(jù)儀器對磁珠運動測量原理的不同，又可分為光電探測

法和電磁珠探測法。

電流法_纖維蛋白原一纖維蛋白一^導(dǎo)電

會第散射比濁法_凝畫過程中散射涯化

「（）箍固法透射比濁法~凝國過程中吸光度變化

血Y光電四法一用光探測颯運動度的謝

凝

儀雙道路成需去一電磁探淵網(wǎng)恫酸;成程度

檢超聲波法~超聲波衰閭程度判晚冬點

測V

原（-）底物顯色法:以觸解放產(chǎn)色基團里順陽澆定有關(guān)因子

理

“^ar雌

火箭電泳

（三）免疫學(xué)&雙向免疫電泳

.比濁「直接比濁一散射比濁

L乳膠比濁L透射比濁

<ELISA^

第六章臨床血液流變學(xué)檢驗儀器

1,血沉：紅細(xì)胞沉降率（ESR）是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度，簡稱血沉。

紅細(xì)胞沉降率的傳統(tǒng)測定方法是（Westergren）魏氏法。

紅細(xì)胞沉降曲線方程：H=_2_。其中，是血漿層的極限高度（7—8）,

1+&。”

f5G是血漿高度為“8/2的時刻，夕為常數(shù)（夕>1）。沉降速度則表示為V=力，求極

限便可得紅細(xì)胞的最大沉降速度。影響紅細(xì)胞沉降的因素很多，主要包括紅細(xì)胞的形態(tài)和大

小、紅細(xì)胞的變形性、紅細(xì)胞的聚集性、紅細(xì)胞間的相互作用，血細(xì)胞比容，血漿介質(zhì)和上

升流動，沉降管的傾斜度等。對于紅細(xì)胞沉降這一非線性過程而言，自動血沉分析儀可完整

記錄紅細(xì)胞沉降的全過程。

第七章臨床尿液檢驗儀器

1、試劑帶的結(jié)構(gòu)與應(yīng)用。（P95）

答：①試劑帶的結(jié)構(gòu)單項試劑帶以濾紙為載體，將各種試劑成分浸漬后干燥，作為試劑層,

再在其表面覆蓋一層纖維素膜作為反射層。一般把這樣一條上面附有試劑塊的塑料條叫做試

劑帶。尿液浸入試劑帶后，與試劑發(fā)生反應(yīng)，可產(chǎn)生顏色變化。多聯(lián)試劑帶是將多種項目試

劑塊集成在一個試劑帶上，使用多聯(lián)試劑帶，浸入一次尿液可同時測定多個項目。

②試劑帶的應(yīng)用不同型號的尿液分析儀一般使用自己配套的專用試劑帶。試劑塊要比測試

項目多一個空白塊，有些儀器還多一個位置參考塊。各試劑塊與尿液中被測定成分反應(yīng)而呈

現(xiàn)不同顏色?？瞻讐K是為了消除尿液本身的顏色及試劑塊分布的狀態(tài)不均等產(chǎn)生出測試誤

差，提高測量準(zhǔn)確度而設(shè)置的。固定塊是為了消除在測試過程中為免每次測定試劑塊的位置

不同產(chǎn)生測試誤差設(shè)置的，每次測定前，檢測頭都會移到參考位置進行自檢，必要時，自動

調(diào)整發(fā)光二極管的亮度和靈敏度，以提高檢測的信噪比。

2、尿液分析儀的檢測原理及結(jié)構(gòu)。（P97）

答：①檢測原理：把試劑帶浸入尿液中后，除了空白塊外，其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了

化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生了顏色的變化。試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān)，顏色越深，

相應(yīng)某種成分濃度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率也越??；反之，反射率

越大。因為顏色的深淺與光的反射率成比例關(guān)系，而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度

成比例關(guān)系，所以只要測得光的反射率即可以求得尿液中各種成分的濃度。

②結(jié)構(gòu)：尿液分析儀一般由機械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。機械系統(tǒng)：機械

系統(tǒng)的主要功能是將待檢的試劑帶傳送到位，檢測后將試劑帶排送到廢物盒。光學(xué)系統(tǒng)：光

學(xué)系統(tǒng)通常包括光源、單色處理、光電轉(zhuǎn)換三部分。電路系統(tǒng)：光電檢測器將試劑帶所反射

的信號的強弱轉(zhuǎn)換成電信號的大小，送往前置放大器進行放大。

3、流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀的工作原理。（P102）

答：流式細(xì)胞術(shù)全自動尿有形成分分析儀的測定是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗的原理進行的。

當(dāng)一個尿液標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色液染色后，靠液壓作用通過鞘液流動池。反應(yīng)樣品從樣品噴

嘴出口進入鞘液流動室時，被一種無粒子顆粒的鞘液包圍，使每個細(xì)胞以單個縱列的形式通

過流動池的中心（豎直）軸線，在這里每個尿液細(xì)胞被菽激光光束照射。每個細(xì)胞有不同程

度的熒光強度，從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光，主要反映細(xì)胞的定量特性，如細(xì)胞膜、核膜、

線粒體和核酸）、前向散射光強度，它成比例地反映細(xì)胞的大小和電阻抗的大小（電阻抗電

信號主要與細(xì)胞的體積成正比）。儀器是將這種熒光、散射光等光信號轉(zhuǎn)變成電信號，并對

各種信號進行分析，最后得到每個尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖和散射圖。通過分析這些圖形，

即可區(qū)分每個細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。

第九章臨床電化學(xué)分析儀器

1、臨床電化學(xué)分析儀器的設(shè)計概念。（P125）

答：臨床電化學(xué)分析儀器是利用電化學(xué)分析技術(shù)而設(shè)計的臨床分析儀器。

2、維持人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的三要素。（P125）

答：水、電解質(zhì)和酸堿平衡。

3、血氣分析儀的利用電極對人體哪些指標(biāo)進行測定？

答：測量樣品中的指標(biāo)：pH,PCO2、PO2、AB、SB、BB、TCO2、BEblood.BEECF、SO2等。根

據(jù)所測得的pH,PCOz、P02參數(shù)及輸入的血紅蛋白值，血氣分析儀可進行計算而求出血液中

的其他參數(shù)，如：實際碳酸氫根濃度（AB）,標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫根濃度（SB）,血液緩沖堿（BB）,

血漿二氧化碳總量（T-C02）,血液堿剩余（BEblood）,細(xì)胞外液堿剩余（BE.）

血氧飽和度（S02）

4,血氣分析儀的基本種類。

答：血氣分析儀種類型號很多，其基本結(jié)構(gòu)均可分為三大部分：電極系統(tǒng)、管路系統(tǒng)、電路

系統(tǒng)。

5、血氣分析儀的電極的分類。

答：電極主要包括兩大類,即離子型（主要有K'、Na'、Li\Ca2\Cl、pH和PCO2）和伏安

型傳感器（主要是P0。。一般的血氣分析儀使用四支電極，分別是pH、PCO2、PO2電極和pH

參比電極。

①pH電極和pH參比電極：血氣分析儀使用毛細(xì)管pH玻璃電極和甘汞電極測量溶液的酸堿

度。②PCOz電極：/COz電極是一個氣敏電極，其前端有一層半透膜，只允許CO2分子通過，

其內(nèi)部有一玻璃電極和參比電極。③POz電極：P0,電極是一種氣敏電極，其工作原理是基

于電解氧的過程中產(chǎn)生的電極電流，P0?電極電流信號大小正比于滲透到陰極表面氧的濃度，

后者又決定于膜外的P0”

6、概念：

①電極：電極是血氣分析儀的電化學(xué)傳感器。電極主要包括兩大類，即離子型（主要有K'、

Na\Li\Ca2\Cl、pH和PCO2）和伏安型傳感器（主要是P01。

②PC02電極：氏。2電極是一個氣敏電極，其前端有一層半透膜，只允許COz分子通過，其內(nèi)

部有一玻璃電極和參比電極。

7、電解質(zhì)分析儀的結(jié)構(gòu)框圖。（P127）

答：電解質(zhì)分析儀由離子選擇性電極、參比電極、分析箱、測量電路、控制電路、驅(qū)動電機

和顯示器等組成。

①板面系統(tǒng)：電解質(zhì)分析儀在儀器板面上具有人機對話的操作鍵。板面上具有“Yes”或“No”

兩個鍵，其中“Yes”鍵用來接收顯示屏上的提問，“No”鍵用來否定顯示屏上的問句。

②電極系統(tǒng)：分析儀的電極系統(tǒng)是測定樣品結(jié)果的關(guān)鍵，決定測定結(jié)果的準(zhǔn)確度和靈敏度。

電極系統(tǒng)包括指示電極和參比電極。指示電極包括pH、Na\K\Li\Cl\Ca2\Mg"等離子

選擇性電極。參比電極一般是銀/氯化銀電極。

③液路系統(tǒng)：液路系統(tǒng)直接影響到樣品濃度測定的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。分析儀的液路系統(tǒng)通常

由標(biāo)本盤、溶液瓶、吸樣針、三通閥、電極系統(tǒng)、蠕動泵等組成。蠕動泵為各種試劑的流動

提供動力，標(biāo)本盤、三通閥和蠕動泵的轉(zhuǎn)動、轉(zhuǎn)換均由微機自動控制。液路系統(tǒng)中的通路由

定標(biāo)液/沖洗液通路、標(biāo)本通路、廢液通路、回水通路、電磁閥通路等組成。

④電路系統(tǒng)：各種分析儀的電子部件各有相同，通常由測量電路將電極產(chǎn)生的微弱信號經(jīng)

反對數(shù)放大器放大，然后進入A/D轉(zhuǎn)換，最后送到三位LED數(shù)字顯示器顯示并打印結(jié)果。

⑤軟件系統(tǒng)：各種分析儀的軟件系統(tǒng)，是控制儀器運作的關(guān)鍵。它提供儀器微處理系統(tǒng)操

作、儀器設(shè)定程序操作、儀器測定程序操作和自動清洗等操作程序。

附：

1、概念。

①電解質(zhì)分析儀（P126）：采用離子選擇性電極（ISE）測量體液中離子濃度的儀器。

②血氣分析儀（P129）：利用電極對血樣中的酸堿度（pH）、二氧化碳分壓（PC02）和氧分壓

（P02）進行測定的儀器。

2、電解質(zhì)分析儀的工作原理框圖。（P127）

答：當(dāng)樣品通過測量毛細(xì)管時，各離子選擇電極膜與其相應(yīng)的離子發(fā)生作用，與參比電極產(chǎn)

生相關(guān)的電位差E,經(jīng)放大處理后，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線與待測離子電位差值對照，即可求得各離

子的濃度值，并顯示或打印出來。儀器將測量電極與測量毛細(xì)管做成一體化的結(jié)構(gòu)，使各電

極對接在一起自然形成測量毛細(xì)管。參比電極采用甘汞電極。

3、血氣分析儀的管路組成。(P131)

答：管路系統(tǒng)通常由氣瓶、溶液瓶、連接管道、電磁閥、正壓泵、負(fù)壓泵和轉(zhuǎn)換裝置等部分

組成。

第十章臨床微生物檢測儀器

1、第三代血培養(yǎng)系統(tǒng)的工作原理。(P138)

答：第三代血培養(yǎng)系統(tǒng)即連續(xù)監(jiān)測血培養(yǎng)系統(tǒng)。其工作原理主要是通過自動監(jiān)測培養(yǎng)基(液)

中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO?的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢

測微生物的存在。

2、微生物自動鑒定系統(tǒng)的工作原理。(P147)

答：采用微生物數(shù)碼鑒定原理。數(shù)碼鑒定是指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)

換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫或編成檢索本。通過對未

知菌進行有關(guān)生化試驗并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字(編碼)，查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫，得到

細(xì)菌名稱。其基本原理是計算并比較數(shù)據(jù)庫內(nèi)每個細(xì)菌條目對系統(tǒng)中每個生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻

率總和。

3、ESP系列自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的檢測原理。(P139)

答:根據(jù)檢測標(biāo)本的數(shù)量分為128、256及384型。以128型為例，有8個孵育器，4個用

于需氧菌振蕩培養(yǎng)，4個用于厭氧菌不振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶頂部的連接裝置與儀器的感壓探測

器相接，探測器每12分鐘監(jiān)測一次需氧瓶，每24分鐘監(jiān)測一次厭氧瓶，并將氣體壓力數(shù)據(jù)

傳到計算機。計算機軟件以氣體壓力對時間的變化制成生長曲線圖，按照特有的方法處理曲

線。當(dāng)培養(yǎng)瓶頂部壓力改變達(dá)到一定值時，則判斷為陽性，即有細(xì)菌生長；否則為陰性，即

無細(xì)菌生長。

4、BioArgos系統(tǒng)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的工作原理。(P140)

答：該系統(tǒng)利用紅外分光計檢測CO?產(chǎn)生。系統(tǒng)由標(biāo)本裝載部分、檢測部分、孵育部分和計

算機部分組成。操作時.，將已接種標(biāo)本的血培養(yǎng)瓶放入標(biāo)本裝載區(qū)，然后有機械臂自動將培

養(yǎng)瓶移入檢測區(qū)。有紅外分光計對培養(yǎng)瓶進行初次掃描，獲得初始讀數(shù)。血培養(yǎng)瓶被振蕩

12秒后再移入孵育器進行培養(yǎng)，紅外分光光度計連續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)瓶內(nèi)C02的產(chǎn)生情況，通過

C02水平的變化來判斷有無微生物生長。

5、BacT/Alert系統(tǒng)自動血培養(yǎng)系統(tǒng)。（P140）（選擇）

答：陽性瓶的判斷有三個標(biāo)準(zhǔn)：①C02初始值超過生物指數(shù)基數(shù)；②C02產(chǎn)生的速率持續(xù)增

加；③C02生長速率異常高。

6、微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的性能特點。（P148）

答：①自動化程度較高?？勺詣蛹訕印⒙?lián)機孵育、定時掃描、讀數(shù)、分析、打印報告等。②

功能范圍大。包括需氧菌、厭氧菌、真菌鑒定及細(xì)菌藥物敏感試驗、最低抑菌濃度（MIC）

測定。③檢測速度快?？焖贌晒鉁y試板的鑒定時間一般為2?4小時，絕大多數(shù)細(xì)菌的鑒定

可在4~6小時內(nèi)得出結(jié)果，常規(guī)測試板的鑒定時間一般為18小時左右。④系統(tǒng)具有較大的

細(xì)菌資料庫。鑒定細(xì)菌種類可達(dá)100?700余種不等，可進行數(shù)十甚至100多種不同抗菌藥

物的敏感性測試。⑤使用一次性測試卡或測試板。可避免由于洗刷不潔而造成人為誤差。⑥

數(shù)據(jù)處理軟件功能強大，可根據(jù)用戶需要，自動對完成的鑒定樣本及藥敏試驗作出統(tǒng)計和組

成多種統(tǒng)計學(xué)報告。⑦軟件和測試卡（板）大多可不斷升級更新。檢測功能和數(shù)據(jù)統(tǒng)計功能

不斷增強。⑧設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng)。保證儀器的正常運轉(zhuǎn)。

附：老師上課畫的重點。

1、微生物鑒定的自動化系統(tǒng)的主要功能。（P138）

答：將培養(yǎng)基上分離的可疑致病菌配制成純菌液，放入自動微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)中，

通過計算機自動掃描、讀數(shù)、分析、最后報告鑒定及藥敏結(jié)果。

2、自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的工作原理。（P138）

答：工作原理主要是通過自動監(jiān)測培養(yǎng)基（液）中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO?的濃度、

熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢測微生物的存在。

根據(jù)檢測原理的不同分三類：

①以檢測培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓為基礎(chǔ)的血培養(yǎng)系統(tǒng):血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一

定導(dǎo)電性。微生物在生長代謝的過程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團（例如在液

體培養(yǎng)基內(nèi)COz轉(zhuǎn)變成C03「），通過電極檢測培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無微生物生長。

②應(yīng)用測壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)：許多細(xì)菌生長過程中，常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象，如很多

需氧菌在胰酶消化大豆肉湯中生長時，由于消耗培養(yǎng)瓶中的氧氣，故首先表現(xiàn)為吸收氣體。

而厭氧菌生長時最初均無吸收氣體現(xiàn)象，僅表現(xiàn)為產(chǎn)生氣體（主要為CO。，因此可利用培養(yǎng)

瓶內(nèi)壓力的改變檢測微生物的生長情況。

③采用光電原理監(jiān)測的血培養(yǎng)系統(tǒng)：是目前國內(nèi)外應(yīng)用最廣泛的自動血培養(yǎng)系統(tǒng)。其工作原

理是微生物在代謝過程中必然會產(chǎn)生終代謝產(chǎn)物C02,引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改

變。利用光電比色檢測血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變，可判斷有無微生物生長。

3、自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)。（P142）

答：通常自動血培養(yǎng)系統(tǒng)主要由：①培養(yǎng)瓶、②培養(yǎng)儀、③數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)三部分組成。

4、自動血培養(yǎng)系統(tǒng)的性能特點。（P144）

答：1）培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富；2）以連續(xù)、恒溫、振蕩方式培養(yǎng)；3）培養(yǎng)瓶多采用不易碎材料

制成；4）采用封閉式非侵入性的瓶外監(jiān)測方式；5）自動連續(xù)監(jiān)測；6）陽性結(jié)果報告及時，

并經(jīng)打印顯示或報警提示；7）培養(yǎng)瓶多采用雙條形碼技術(shù)；8）培養(yǎng)瓶可在隨時放入培養(yǎng)系

統(tǒng)并進行追蹤檢測；9）數(shù)據(jù)處理功能較強；10）設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng)；11）用途廣泛。

5、微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)鑒定原理。（P147）

答：采用微生物數(shù)碼鑒定原理。數(shù)碼鑒定是指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)

換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫或編成檢索本。通過對未

知菌進行有關(guān)生化試驗并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字（編碼），查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫，得到

細(xì)菌名稱。其基本原理是計算并比較數(shù)據(jù)庫內(nèi)每個細(xì)菌條目對系統(tǒng)中每個生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻

率總和。

6、微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)抗菌藥物敏感性試驗的檢測原理。（P147）

答：自動化抗菌藥物敏感性試驗使用藥敏測試板（卡）進行測試，其實質(zhì)是微型化的肉湯稀

釋試驗。將抗菌藥物微量稀釋在條孔或條板中，加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接

孵育，儀器每隔一定時間自動測定細(xì)菌生長的濁度，或測定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強度或熒

光原性物質(zhì)的水解，觀察細(xì)菌的生長情況。

7、微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的主要功能。（P146）

答:主要功能包括微生物鑒定、抗菌藥物敏感性試驗（AST）及最低抑菌濃度（MIC）的測定

等。

8、微生物自動鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)。（P148）

答：①測試卡（板）；②菌液接種器；③培養(yǎng)和監(jiān)測系統(tǒng)；④數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。

第十一章臨床免疫檢測儀器

1、均相酶免疫分析法（HEI）的測定對象。（P154）

答：均相酶免疫分析法（HEI）的測定，以激素、藥物等小分子抗原或半抗原為主。均相酶

免疫分析主要有酶擴大免疫測定技術(shù)和克隆酶供體免疫測定兩種方法。

2、最適合進行熒光免疫分析的物質(zhì)。

答：

3、電化學(xué)免疫分析法的工作原理。(P157)

答：待測標(biāo)本與包被了抗體的順磁性微粒和發(fā)光劑標(biāo)記的抗體共同溫育，形成磁性微珠包被

抗體一抗原一發(fā)光劑標(biāo)記抗體復(fù)合物。吸人流動室，緩沖液沖洗。磁性微粒流經(jīng)電極表面時,

被電極下的磁鐵吸引，而游離的發(fā)光劑標(biāo)記抗體被沖洗走。同時在電極加電壓，啟動電化學(xué)

發(fā)光反應(yīng)，使發(fā)光試劑標(biāo)記物三氯聯(lián)毗咤釘[Ru(bpy)3]2+TPA在電極表面進行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)

生電化學(xué)發(fā)光。光的強度與待測抗原的濃度成正比。

4,散射比濁法和透射比濁法的特異性分別是什么？

答：

5、名詞解釋：

發(fā)光免疫分析技術(shù)檢測：將發(fā)光反應(yīng)與免疫反應(yīng)相結(jié)合，產(chǎn)生一種很有發(fā)展前途的的免疫分

析方法。

散射免疫比濁法：

6、酶免疫分析技術(shù)的分類。(P154)

答：①酶標(biāo)儀；②)半自動微孔板式ELISA分析儀；③全自動微孔板式ELISA分析儀；④管

式固相酶免疫測定儀；⑤微粒固相酶免疫測定儀；⑥磁微粒固相酶免疫測定儀。

7、免疫濁度分析技術(shù)的基本原理及分類。

答：①免疫透射比濁度測定可分為沉淀反應(yīng)免疫透射比濁測定和免疫膠乳濁度測定法。免

疫透射比濁測定原理：抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁

度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過剩時，形成的復(fù)合物隨抗原增加而增加，反應(yīng)液的濁度亦隨之增

加。免疫膠乳濁度測定法原理：選擇一種大小適中、均勻一致的膠乳顆粒，吸附抗體后，當(dāng)

遇到相應(yīng)抗原時，則發(fā)生凝集。單個膠乳顆粒在入射光波長之內(nèi)，光線可透過。當(dāng)兩個膠乳

顆粒凝集時，則使透過光減少，這種減少的程度與膠乳凝聚成正比。

②激光散射濁度測定按測試的方式不同分二種比濁法：即終點散射比濁法和速率散射比濁

法。激光散射濁度的基本原理是：激光散射光系沿水平軸照射，通過溶液時碰到小顆粒的抗

原一抗體免疫復(fù)合物時，導(dǎo)致光線被折射，發(fā)生偏轉(zhuǎn)。偏轉(zhuǎn)角度可以從0°~90°,這種偏轉(zhuǎn)的

角度可因光線波長和離子大小不同而有所區(qū)別。散射光的強度與抗原一抗體復(fù)合物的含量成

正比，同時也和散射夾角成正比，和波長成反比。

附：老師上課畫的重點。

1、定義：(P154)

①均相酶免疫分析法(HEI)均相酶免疫分析主要有酶擴大免疫測定技術(shù)和克隆酶供體免疫

測定兩種方法。

②非均相酶免疫分析法(heterogeneousenzymeimmunoassay)常用的酶免疫分析法多為

非均相法，又可分為液相酶免疫法和固相酶免疫法兩種，以后者最常用，稱為酶聯(lián)免疫吸附

測定(ELISA)oELISA是臨床上最常用的免疫分析方法，目前常用的酶免疫分析儀都是基于

ELISA技術(shù)，稱為酶免疫分析儀。

2、酶免疫分析技術(shù)的分類。(P154)

答：①酶標(biāo)儀；②)半自動微孔板式ELISA分析儀：③全自動微孔板式ELISA分析儀；④管

式固相醐免疫測定儀；⑤微粒固相酶免疫測定儀；⑥磁微粒固相酶免疫測定儀。

3、酶免疫分析儀的性能評價。(P156)

答：包括：1)濾光片波長精度檢查及其峰值測定；2)靈敏度和準(zhǔn)確度；3)通道差與孔間

差檢測；4)零點飄移；5)精密度評價；6)線性測定；7)雙波長評價。

4、發(fā)光免疫技術(shù)根據(jù)示蹤物檢測的不同而分為熒光免疫測定、化學(xué)發(fā)光免疫測定及電化學(xué)

發(fā)光免疫測定三大類。(P156)

5、發(fā)光免疫分析技術(shù)采用微量倍增技術(shù)。(P156)

6、全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)儀器測定原理。(P157)

答：該類分析技術(shù)有兩種方法，小分子抗原物質(zhì)測定采用的是競爭法，而大分子抗原物質(zhì)

測定采用的是夾心法。儀器所用固相磁粉顆粒極微小，其直徑僅LOum。這樣大大增加了

包被表面積，增加抗原或抗體的吸附量，使反應(yīng)速度加快，也使清洗和分離更簡便。其反應(yīng)

基本過程有：競爭反應(yīng)；夾心法。

7、全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)儀器組成。(P157)

答：一般由主機和微機兩部分組成。主機部分是儀器的運行反應(yīng)測定部分，包括原材料配備

部分、液路部分、機械傳動部分、光路檢測部分。微機系統(tǒng)是儀器的核心部分，是指揮控制

中心，其功能有程控操作、指示判斷、數(shù)據(jù)處理、故障診斷、自動監(jiān)測等。

8、免疫比濁分析儀的種類及其臨床應(yīng)用。(P162)

答：①臨床上測定微量蛋白(如Ig等)由最初的試管沉淀反應(yīng)、瓊脂凝膠擴散試驗，發(fā)展到

現(xiàn)代自動免疫分析技術(shù)，其靈敏度逐步提高，檢測水平由微克(ug)發(fā)展到納克(ng),甚至

皮克(pg)水平。微量蛋白免疫分析隨著自動化程度不斷提高，在臨床上得到廣泛應(yīng)用，其自

動化檢測方法主要為免疫比濁法。根據(jù)檢測原理的不同，又分為透射比濁法和散射比濁法。

免疫透射比濁法分為免疫透射濁度測定法和免疫膠乳濁度測定法；免疫散射比濁法分為終點

散射比濁法和速率散射比濁法。

②免疫比濁分析的臨床應(yīng)用：免疫功能監(jiān)測；心血管疾病檢測；炎癥狀況監(jiān)測；類風(fēng)濕性關(guān)

節(jié)炎的檢測；腎臟功能監(jiān)測；營養(yǎng)狀態(tài)監(jiān)測；新生兒體檢；凝血及出血性疾病的檢測；貧血

監(jiān)測；血腦屏障監(jiān)測等。

9、IMMAGE免疫分析測定儀主要部件。(P162)

答：儀器主要部件：1)散射測濁儀；2)加液系統(tǒng)；3)試劑和樣品盤；4)閱讀器。

10、時間分辨熒光免疫分析儀(TR-FIA)檢測原理。(P163)

答：用錮系三價稀土離子及其螯合物作為示蹤物標(biāo)記抗原、抗體、核酸探針等物質(zhì)。當(dāng)免

疫反應(yīng)發(fā)生后，根據(jù)稀土離子螯合物的熒光光譜的特點，用時間分辨熒光分析儀延緩測量時

間，排除標(biāo)本中非特異性熒光的干擾，所得信號完全是稀土元素螯合物發(fā)射的特異熒光，測

定免疫反應(yīng)最后產(chǎn)物的特異性熒光信號。

第十二章臨床即時檢測儀器

1、即時檢測的主要技術(shù)有哪幾種？(P168)

答：POCT的主要技術(shù)：

①簡單顯色(干化學(xué)法測定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑干燥、固定在紙片上，加上檢驗標(biāo)

本后產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用肉眼觀察定性或儀器檢測(多為半定量)。

②多層涂膜(干化學(xué)法測定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑依次涂布在片基上，制成干片，

用儀器檢測，可準(zhǔn)確定量。

③免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡

下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點,

這一反應(yīng)可通過銀顆粒的沉積被放大。

④免疫熒光技術(shù)通過檢測板條上激光激發(fā)的熒光，定量檢測以pg/ml為單位的檢測

板條上單個或多個標(biāo)志物。

④生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物

檢測器進行分析檢測。

④生物芯片技術(shù)其特點是在小面積的芯片上同時測定多個項目。

⑦紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于無創(chuàng)性檢測儀器。

⑧其他技術(shù)

2、即時檢測(POCT)的檢驗特點。(P169)

表1萬］床實檢室檢測與POCT的主要不同點

時賴目POCT

周轉(zhuǎn)時間慢快

標(biāo)本鑒定復(fù)雜簡單

標(biāo)本處理通常需要不需要

血標(biāo)本血清、血漿多為全血

校正頻繁不頻繁

試劑需要配制隨時可用

消耗品相對少相對多

檢測儀器復(fù)雜簡單

對操作者的要求專業(yè)人員普通人亦可以

每個試臉花費低高

答：試蛤結(jié)果質(zhì)量高一般

3、快速血糖、血氣分析儀的質(zhì)量校準(zhǔn)的方法。(P174)

答：血糖儀的校準(zhǔn)：利用模擬血糖液檢查血糖儀和試紙條相互運作是否正常。當(dāng)出現(xiàn)以下幾

種情況時需要對血糖儀進行校準(zhǔn)：①第一次使用新購的血糖儀；②使用新的一盒試紙條時；

③懷疑血糖儀和試紙條出現(xiàn)問題時；④測試結(jié)果未能反映出患者感覺的身體狀況時；⑤血

糖儀不小心摔落后。

附：老師上課畫的重點。

1、即時檢測的概念。(P167)

答：即時檢測(POCT)也稱床邊檢測，是檢驗醫(yī)學(xué)發(fā)展的新領(lǐng)域。關(guān)于POCT有多種解釋，

指在患者身邊，由非檢驗專業(yè)人員(臨床人員或病人)利用便攜式儀器快速分析患者標(biāo)本并

準(zhǔn)確獲取結(jié)果的分析技術(shù)，或者說測試不在主實驗室而在一個可移動的系統(tǒng)內(nèi)進行。

2、即時檢測的基本原理和主要技術(shù)。(P168)

答：1)POCT的基本原理：POCT技術(shù)的基本原理大致可分為四類：把傳統(tǒng)方法中的相關(guān)液體

試劑浸潤于濾紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合的干燥試劑塊，然后將其固定于硬質(zhì)

型基質(zhì)上，成為各種形式的診斷試劑條；把傳統(tǒng)分析儀器微型化，操作方法簡單化，使之成

為便攜式和手掌式的設(shè)備；將上述兩者整合為統(tǒng)一的系統(tǒng)；應(yīng)用生物感應(yīng)技術(shù)，利用生物感

應(yīng)器檢測待測物。

2)POCT的主要技術(shù)

①簡單顯色(干化學(xué)法測定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑干燥、固定在紙片上，加上檢驗標(biāo)

本后產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用肉眼觀察定性或儀器檢測(多為半定量)。

②多層涂膜(干化學(xué)法測定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑依次涂布在片基上，制成干片，

用儀器檢測，可準(zhǔn)確定量。

③免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡

下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚集時，肉眼可見紅色或粉紅色斑點，

這一反應(yīng)可通過銀顆粒的沉積被放大。

④免疫熒光技術(shù)通過檢測板條上激光激發(fā)的熒光，定量檢測以pg/ml為單位的檢測

板條上單個或多個標(biāo)志物。

④生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物

檢測器進行分析檢測。

④生物芯片技術(shù)其特點是在小面積的芯片上同時測定多個項目。

⑦紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于無創(chuàng)性檢測儀器。

⑧其他技術(shù)

3、即時檢測儀器的特點。(P172)

答：理想的POCT儀器應(yīng)具備以下特點：①儀器小型化，便于攜帶；②操作簡單化、一般3~4

個步驟即可完成檢測；③縮短檢驗周期，報告即時；④能獲得權(quán)威機構(gòu)的質(zhì)量認(rèn)證；⑤儀器

和配套試劑中應(yīng)配有質(zhì)控品，可監(jiān)控儀器和試劑的工作狀態(tài)；⑥儀器檢驗項目具備臨床價值

和社會學(xué)意義；⑦儀器的檢測費用合理；⑧儀器試劑的應(yīng)用不會造成對病人和工作人員的健

康損害或?qū)Νh(huán)境污染等不利影響。

第十三章PCR核酸擴增儀

1、PCR技術(shù)的本質(zhì)及反應(yīng)步驟。(P181)

答:①PCR技術(shù)的本質(zhì)是核酸擴增技術(shù)。重復(fù)''變性(denature)—?退火(anneal)—引物

(primer)延伸(extension)”過程至25-40個循環(huán)，呈指數(shù)級擴大待測樣本中的核酸拷貝數(shù)，

達(dá)到體外擴增核酸序列的目的。

②基本步驟：DNA的變性；模板DNA與引物的退火(復(fù)性)；引物的延伸。

2、PCR核酸擴增儀的溫度控制方式。(P182)

答：PCR核酸擴增儀工作關(guān)鍵是溫度控制。①水浴鍋控溫：以不同溫度的水浴鍋串聯(lián)成一個

控溫體系。②壓縮機控溫：由壓縮機自動控溫，金屬導(dǎo)熱，控溫較第一代PCR核酸擴增儀方

便，但壓縮機故障率高，邊緣效應(yīng)及溫度overshooting現(xiàn)象嚴(yán)重。③半導(dǎo)體控溫：由半導(dǎo)

體自動控溫，金屬導(dǎo)熱，控溫方便，體積小，相對穩(wěn)定性好。④離心式空氣加熱控溫：由金

屬線圈加熱，采用空氣作為導(dǎo)熱媒介，溫度均一性好，各孔擴增效率高度一致，滿足熒光定

量PCR的高要求。

3、PCR擴增儀的種類。(P183)

答：PCR擴增儀的種類總體來說，可以分成兩大類，即普通PCR擴增儀和實時熒光定量PCR擴

增儀。①普通PCR擴增儀即通常所謂的定性PCR擴增儀。水浴式PCR儀：變溫金屬塊式PCR儀：

變溫氣流式PCR儀;梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的核酸擴增儀;原位PCR

儀是由普通PCR儀衍生出的帶原位擴增功能的核酸擴增儀。②實時熒光定量PCR擴增儀：金屬

板式實時定量PCR儀；離心式實時定量PCR儀；各孔獨立控溫的定量PCR儀。

4、熒光實時定量PCR(RQ-PCR)的組成部分。(P183)

答：實時熒光定量PCR核酸擴增儀由兩部分組成：PCR系統(tǒng)和熒光檢測系統(tǒng)。熒光檢測系統(tǒng)

主要包括激發(fā)光源和檢測器。

5、PCR技術(shù)的原理。(P182)

答：加熱使雙鏈DNA解開螺旋，在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶,

dNTPs,Mg2+和合適pll緩沖液存在條件下延伸引物，重復(fù)“變性一退火一引物延伸”過程

至25?40個循環(huán)，呈指數(shù)級擴大待測樣本中的核酸拷貝數(shù)。

6、溫度overshooting現(xiàn)象。(P182)

答：升溫過程中，由于一些加熱元件，比如半導(dǎo)體、金屬塊本身會積蓄能量，雖然溫度探頭

探測溫度到達(dá)了設(shè)定溫度，但半導(dǎo)體、金屬塊上積蓄的能量仍然會傳給PCR體系，造成實際

的溫度高于設(shè)定的溫度，即溫度overshooting現(xiàn)象。

附：老師上課畫的重點。

1、PCR技術(shù)的原理。

2、PCR核酸擴增儀的溫度控制方式。

3、PCR核酸擴增儀的工作原理。

4、PCR技術(shù)的三個步驟。

第十四章全自動DNA測序儀和蛋白質(zhì)自動測序儀

1、全自動DNA測序儀的一、二、三階儀器結(jié)構(gòu)是什么？(P193)

答：不同類型全自動DNA測序儀的外觀有所差異，但基本結(jié)構(gòu)大致相同，主要由主機、

微型計算機和各種應(yīng)用軟件等組成。D主機功能主機具有自動灌膠、進樣、電泳、熒光檢

測等功能。2)微型計算機功能控制主機的運行，并對來自主機的數(shù)據(jù)進行收集和分析。3)

各類軟件功能承擔(dān)數(shù)據(jù)收集、DNA序列分析及DNA片段大小和定量分析等功能。

2、全自動DNA測序儀的工作原理有哪些方法？(P193)

答：DNA測序是指檢測其一級結(jié)構(gòu)一核甘酸的線性排列順序。目前DNA測序儀的工作原理主

要是利用Sanger雙脫氧鏈末端終止法或Maxam-GiIbert化學(xué)降解法。

3、熒光標(biāo)記DNA的檢測原理。（P193）

答：熒光標(biāo)記DNA的檢測原理：測序反應(yīng)產(chǎn)物加入測序儀后，兩極間極高的電勢差推動著各

個熒光DNA片段在凝膠高分子聚合物中從負(fù)極向正極泳動并達(dá)到相互分離，且依次通過檢測

窗口。由激光器發(fā)出的極細(xì)光束，通過精密的光學(xué)系統(tǒng)被導(dǎo)向檢測區(qū)，在這里激光束以與凝

膠垂直的角度激發(fā)熒光DNA片段。DNA片段上的熒光發(fā)色基團吸收了激光束提供的能量而發(fā)

射出特征波長的熒光。這種代表不同堿基信息的不同顏色熒光經(jīng)過光柵分光后再投射到CCD

攝像機上同步成像。經(jīng)計算機軟件分析后顯示測序結(jié)果。整個電泳過程結(jié)束時在檢測區(qū)某一

點上采集的所有熒光信號就轉(zhuǎn)化為一個以時間為橫軸坐標(biāo)，熒光波長種類和強度為縱軸的信

號數(shù)據(jù)的集合。經(jīng)測序分析軟件對這些原始數(shù)據(jù)進行分析，最后的測序結(jié)果以一種清晰直觀

的圖形顯示出來。

4、全自動DNA測序儀的分類。（P193）

答：目前使用的全自動DNA測序儀都是通過凝膠電泳技術(shù)進行DNA片段的分離。根據(jù)電泳方

式的不同又分為平板型電泳和毛細(xì)管電泳兩種儀器類型。平板型電泳的凝膠灌制在兩塊玻璃

板中間，聚合后厚度一般小于0.4mm或更少，因此又稱為超薄片層凝膠電泳。毛細(xì)管電泳技

術(shù)將凝膠高分子聚合物灌制于毛細(xì)管中（內(nèi)徑50卬1?100岬），在高壓及較低濃度膠的條件

下實現(xiàn)DNA片段的快速分離。

5、全自動DNA測序儀的主機分幾個功能區(qū)？（P194）

答：主機具有自動灌膠、進樣、電泳、熒光檢測等功能。主機主要包括電泳系統(tǒng)、激光器和

熒光檢測系統(tǒng)等。大致可分為以下幾個結(jié)構(gòu)功能區(qū)：1）自動進樣器區(qū)裝載有樣品盤、電極

（負(fù)極）、電極緩沖液瓶、洗滌液（蒸儲水）瓶和廢液管。2）凝膠塊區(qū)凝膠塊區(qū)包括注射

器驅(qū)動桿、樣品盤按鈕、注射器固定平臺、電極（正極）、緩沖液閥、玻璃注射器、毛細(xì)管

固定螺母和廢液閥等部件。3）檢測區(qū)檢測區(qū)內(nèi)有激光檢測器窗口及窗蓋、加熱板、毛細(xì)管、

熱敏膠帶。

6、與單色熒光標(biāo)記相比，多色熒光標(biāo)記有什么優(yōu)點？（P191）

答：多色熒光標(biāo)記技術(shù)檢測優(yōu)點：①一個樣本的四個測序反應(yīng)產(chǎn)物可以同時在一個泳道內(nèi)電

泳，避免單一標(biāo)記時四個泳道測序因泳道間遷移率不同對精確度的影響，提高了測序精度。

②一個樣品所有反應(yīng)產(chǎn)物只需進樣一次，所以一次實驗便可以處理較之手工方法更多的樣

品。在相同樣品數(shù)的情況下，加樣的工作量也大大減少。

單色熒光標(biāo)記法與多色熒光標(biāo)記法的異同點：

①均可分為熒光標(biāo)記引物法和熒光標(biāo)記終止底物法。②單色熒光標(biāo)記法需將A、C、G、T四

個反應(yīng)分別在不同擴增管中進行，電泳時各管產(chǎn)物也分別在不同泳道中電泳。③多色熒光標(biāo)

記引物法需將A、C、G、T四個反應(yīng)分別在不同擴增管中進行，電泳時可合并在同一泳道中

電泳。④多色熒光標(biāo)記終止底物法可將A、C、G、T四個反應(yīng)在同一擴增管中進行，電泳時

在同一泳道中電泳。

附：老師上課畫的重點。

1、目前DNA測序儀的的工作原理包括哪兩類？

答：DNA測序是指檢測其一級結(jié)構(gòu)一核甘酸的線性排列順序。目前DNA測序儀的工作原理主

要是利用Sanger雙脫氧鏈末端終止法或Maxam-Gilbert化學(xué)降解法。

2、熒光標(biāo)記DNA有哪幾種？

答：新生鏈的熒光標(biāo)記：1）多色熒光標(biāo)記法多色熒光標(biāo)記法的熒光染料摻入方式有兩種。

第一種方式是將熒光染料預(yù)先標(biāo)記在測序反應(yīng)所用引物的5'端，稱為熒光標(biāo)記引物法。第二

種摻入方式是將熒光染料標(biāo)記在作為終止底物的雙脫氧單核甘酸上，稱為熒光標(biāo)記終止底物

法。2）單色熒光標(biāo)記法也包括熒光標(biāo)記引物法和熒光標(biāo)記終止底物法兩種。與多色熒光

標(biāo)記法不同的是單色熒光標(biāo)記引物法和熒光標(biāo)記終止底物法均需將A、C、G、T四個反應(yīng)分

別在不同擴增管中進行，電泳時各管產(chǎn)物也分別在不同泳道中電泳。

第十五章流式細(xì)胞儀

1,流式細(xì)胞儀生物學(xué)顆粒分析原理。

答：生物學(xué)顆粒分析原理

①流式細(xì)胞技術(shù)是在單細(xì)胞水平上，對于處在快速直線流動狀態(tài)中的大量細(xì)胞或生物

顆粒進行多參數(shù)、快速的定量分析和分選的技術(shù)，現(xiàn)己成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究最先進的分析技術(shù)

之一。應(yīng)用流式細(xì)胞儀對于處在快速直線流動狀態(tài)中的細(xì)胞或生物顆粒進行快速的、多參數(shù)

的定量分析和分選的技術(shù)稱為流式細(xì)胞術(shù)。②生物學(xué)顆粒包括大的免疫復(fù)合物、DNA、RNA、

蛋白質(zhì)、病毒顆粒、脂質(zhì)體、細(xì)胞器、細(xì)菌、霉菌、染色體、真核細(xì)胞、雜交細(xì)胞、聚集細(xì)

胞等，所檢測的生物顆粒的理化性質(zhì)包括細(xì)胞大小、細(xì)胞形態(tài)、胞漿顆?；潭?、DNA含量、

總蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞膜完整性和酶活性等。③流式細(xì)胞儀是以激光為光源，集流體力學(xué)技

術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測量技術(shù)、計算機技術(shù)以及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為

一體的新型高科技儀器。④流式細(xì)胞儀是在熒光顯微鏡技術(shù)、血細(xì)胞計數(shù)儀和噴墨技術(shù)的

基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。⑤鞘液和樣品流在噴嘴附近組成一個圓柱流束，與水平方向的激

光束垂直相交，染色的細(xì)胞受激光照射后發(fā)出熒光，這些信號分別被光電倍增管熒光

檢測器和光電二極管散射光檢測器接收，經(jīng)過計算機儲存、計算、分析這些數(shù)字化

信息，就可得到細(xì)胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性質(zhì)等物理和生化指標(biāo)。

2、散射熒光分選。

答：散射光信號散射光分為前向角散射和側(cè)向角散射，散射光不依賴任何細(xì)胞樣品的制備

技術(shù)(如染色)，稱為細(xì)胞的物理參數(shù)

I前向角散射前向角散射與被測細(xì)胞的大小有關(guān)，確切地說與細(xì)胞直徑的平方密切相關(guān)。

n側(cè)向角散射側(cè)向角散射是指與激光束正交90°方向的散射光信號。側(cè)向散射光對細(xì)胞

膜、細(xì)胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感，可提供細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的信息。

第十八章色譜分析儀器

1、氣相色譜儀的核心。(P247)

答：分析柱是整個氣相色譜系統(tǒng)的核心，混合物各個組分的分離在此完成。在使用氣相色譜

儀的過程中，優(yōu)良的柱子應(yīng)該具有適當(dāng)?shù)某叽绾瓦m當(dāng)?shù)墓潭ㄏ唷?/p>

2、色譜分析的特征是什么？(P244)

答：色譜儀的主要特點是可以對混合物進行多組分分析或全分析。儀器結(jié)構(gòu)簡單，操作使用

方便，具有應(yīng)用范圍廣、樣品用量少、高選擇性、高效能、高速度以及高靈敏度等優(yōu)點。

3、常用的程序升溫法。(P247)

答：常用的程序升溫方式有兩種：線性程序(單階線性升溫)和非線性程序(多階線性升溫)。

程序升溫控制方式有機電式與電子式兩種，電子式最常用。

①線性程序：即柱溫T隨時間成比例地升高。可表示為1二川+這，式中T0為初溫，。C；t

表示時間，min；r代表升溫速度，℃/min。

②非線性程序：1)線性一恒溫適于高沸點組分較多的樣品的分離。2)恒溫一線性適于

低沸點組分較多的樣品的分離。3)恒溫一線性一恒溫適于組分沸點范圍很寬的樣品。4)

多種升溫速度適于復(fù)雜樣品。

4、高效液相最常用的……。(P251)

答：高效液相色譜儀中常用的高壓泵大致可分為兩類，一類是恒壓泵，常用的有直接氣動泵

和氣動放大泵等。另一類是恒流泵，如機械注射泵、機械往復(fù)式柱塞泵都屬于恒流泵。目前

最常用的高壓泵是機械往復(fù)式柱塞泵。

第十九章質(zhì)譜分析儀器

1、需要基質(zhì)的電離方式是？(P262)

答：快原子轟擊(FAB),樣品必須能溶于基質(zhì)?；|(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI),將樣品溶

液和基質(zhì)混勻。

2、只用磁場不用電場的質(zhì)譜分析儀是？(P264)

答：只用電場不用磁場的質(zhì)譜分析儀是離子阱分析器和四極桿分析器。只用磁場不用電場的

質(zhì)譜分析儀是……

3、質(zhì)譜儀的性能關(guān)于質(zhì)量范圍取決于什么？（P266）

答：質(zhì)量范圍的大小取決于質(zhì)量分析器。不同的分析器有不同的質(zhì)量范圍，彼此間比較沒任

何意義。同類型分析器則在一定程度上反映質(zhì)譜儀的性能。

分辨率、靈敏度、質(zhì)量范圍、質(zhì)量穩(wěn)定性、質(zhì)量精度。

附：老師上課畫的重點。

1、質(zhì)譜儀的工作原理。（P260）

答：質(zhì)譜儀離子源中的樣品，一般在極高的真空狀態(tài)下，在電子、電場、光、熱或激發(fā)態(tài)原

子等能量源作用下，將物質(zhì)氣化、電離成正離子束，經(jīng)電壓加速和聚焦導(dǎo)入質(zhì)量分析器中，

一般利用離子在電場、磁場中運動的性質(zhì)，按離子質(zhì)荷比（m/z）的大小順序進行收集和記錄,

縱坐標(biāo)一般為離子相對強度（以離子強度最強峰為100,其他的峰則以此為標(biāo)準(zhǔn)，確定其相

對強度，又稱相對豐度、豐度），或為離子強度（離子流強度），橫坐標(biāo)為質(zhì)荷比，得到質(zhì)譜

圖（圖19-1）。也可以按質(zhì)荷比一相對強度或離子強度列表，得到質(zhì)譜表。

2、質(zhì)譜儀有哪些組成部分？（P261）

答：質(zhì)譜儀主要由真空系統(tǒng)、進樣系統(tǒng)、離子源、加速區(qū)、質(zhì)量分析器、檢測器及計算機系

統(tǒng)組成，以離子源和質(zhì)量分析器為核心。

3、質(zhì)譜儀中最常見的離子源的電離方式有哪些？（P262）

答：常見的電離方式有電子電離（EI）、化學(xué)電離（CI）、場電離（FI）、場解吸（FD）、快原

子轟擊（FAB）、電噴霧電離（ESD、大氣壓化學(xué)電離（APCI）、基質(zhì)輔助激光解吸電離（MALDI）、

電噴霧解吸電離（DESI）等。其中，EI屬于硬電離，其他都屬于軟電離。軟電離方式易得到準(zhǔn)

分子離子峰，硬電離方式一般只能得到碎片離子。

第二十章磁共振波譜分析儀器

1、磁共振波譜分析儀設(shè)備的主要組成部分。（P272）

答：磁共振波譜分析儀的結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，但基本設(shè)備均由兩部分組成，一部分是磁共振信號的

發(fā)生與采集部分，主要包括磁體、射頻振蕩器、掃描發(fā)生器；另一部分包括射頻接收器以及

數(shù)據(jù)處理及圖象顯示。根據(jù)核磁共振的基本原理，任何一臺核磁共振儀都應(yīng)該包括磁體，射

頻發(fā)射系統(tǒng)和射頻接收系統(tǒng)三個基本組成部分。傅里葉變換核磁共振儀還包括ADC、DAC和

計算機組成的數(shù)據(jù)系統(tǒng)。

2、核磁成像的優(yōu)點。（P276）

答：①不破壞生物高分子結(jié)構(gòu)（包括空間結(jié)構(gòu)）；②在溶液中測定符合生物體的常態(tài)，也可

測定固體樣品，比較晶態(tài)和溶液態(tài)的構(gòu)象異同；③不僅可用來研究構(gòu)象而且可用來研究構(gòu)象

變化即動力