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不同產(chǎn)地新疆圓柏不同部位中總多糖含量比較研究目錄TOC\o"1-3"\h\u10915摘要: 2324991實(shí)驗(yàn)材料 3154531.1實(shí)驗(yàn)儀器 3256641.2實(shí)驗(yàn)試劑 3242271.3藥材 387132實(shí)驗(yàn)方法 4261332.1總多糖含量測(cè)定 4157202.1.1對(duì)照品的制備 488272.1.2溶液的顯色 4291342.1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 423382.1.4供試品的制備 4287802.1.5精密度實(shí)驗(yàn) 5151452.1.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 5327242.1.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 538682.1.8加樣回收率考察 596263結(jié)果及分析 6165323.1不同產(chǎn)地新疆圓柏,圓柏葉、枝干中總多糖含量的差異比較 646023.2新疆烏魯木齊南山圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖含量的差異比較 7158003.3新疆昌吉市圓柏中柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較 714993.4新疆阿勒泰市圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較 725093.5新疆昭蘇縣圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較 8280593.6不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)總多糖含量差異比較 995243.7不同產(chǎn)地新疆圓柏枝與圓柏葉總多糖含量差異比較 9326504討論 10119244.1不同產(chǎn)地新疆圓柏的圓柏葉、枝干對(duì)總多糖含量的影響 10253494.2不同產(chǎn)地新疆圓柏不同部位對(duì)總多糖含量的影響 10199584.3不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)對(duì)總多糖的影響 10198465結(jié)論 1116926參考文獻(xiàn) 12摘要:目的不同產(chǎn)地新疆圓柏中圓柏葉和枝干中總多糖以及4個(gè)同產(chǎn)地圓柏不同部位總多糖含量對(duì)比。方法以葡萄糖為對(duì)照品采用苯酚-硫酸比色法,在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定了總多糖的含量。結(jié)果8個(gè)產(chǎn)地圓柏葉中總多糖含量最高的是新源縣為10.589%,最低的為昭蘇縣3.114%;8個(gè)產(chǎn)地圓柏枝干中總多糖含量最高的是阿勒泰市4.943%,最低的為瑪納斯縣2.188%;4個(gè)產(chǎn)地圓柏果實(shí)中總多糖含量最高的為昭蘇縣6.932%,最低的為阿勒泰市2.054%。由本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知除了阿勒泰市以外的三個(gè)產(chǎn)地圓柏果實(shí)總多糖含量均高于圓柏葉和圓柏枝干。由此可判斷,圓柏果實(shí)總多糖含量高,枝干總多糖含量低。不同產(chǎn)地新疆圓柏不同部位中總多糖含量最高的是新源縣圓柏葉為10.589%,總多糖含量最低的是瑪納斯縣圓柏枝干為2.188%。結(jié)論不同產(chǎn)地新疆圓柏不同部位中總多糖的含量差異顯著,說明環(huán)境、海拔、氣候?qū)π陆畧A柏中總多糖含量具有一定的影響。關(guān)鍵詞:新疆;圓柏;總多糖新疆圓柏(JuniperussabinaL.)屬柏科匍匐灌木,主要分布于我國(guó)西北天山、祁連山等干旱貧瘠環(huán)境中具有適應(yīng)性強(qiáng)護(hù)坡固沙岸邊防護(hù)城區(qū)凈化空氣等用途。圓柏枝葉入藥,能祛風(fēng)濕、活血止痛,主治風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、皮膚瘙癢等[1]功效。其藥理作用為抗炎抗菌、抗腫瘤、抗腫瘤、抗紅細(xì)胞氧化[5]等作用。近幾年來研究表明,圓柏中含有揮發(fā)油、黃酮類、多糖類,有機(jī)酸,微量元素等[2]化學(xué)成分。近年來,人們對(duì)圓柏多糖的研究進(jìn)展并不多,總多糖作為圓柏中的一種生物大分子化合物,目前認(rèn)為圓柏中含有的多糖種類由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖半乳糖和半乳糖醛酸等組成[4],多糖具有降血脂[8]、抗氧化、抗病毒[9]、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫力[10]、抗腫瘤、保護(hù)精原細(xì)胞[6]等功效。總多糖的測(cè)定方法有很多相關(guān)的研究,其中苯酚-硫酸法是最常用的方法。多糖在濃硫酸作用下水解成單糖,迅速脫水形成糠醛衍生物,與苯酚縮合合成顯色化合物,用比色法測(cè)定含量。該方法操作簡(jiǎn)單,速度快,重復(fù)性好,顯色后穩(wěn)定性好。本次實(shí)驗(yàn)通過苯酚-硫酸法測(cè)定不同產(chǎn)地新疆圓柏中總多糖的含量,并對(duì)其進(jìn)行分析,為不同產(chǎn)地的野生新疆圓柏的研究提供理論依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)材料1.1實(shí)驗(yàn)儀器表1-1儀器儀器名稱儀器型號(hào)廠家紫外可見分光光度計(jì)T6新世紀(jì)型北京普析通用儀器有限責(zé)任公司高速中藥粉碎機(jī)LK-200B浙江省溫嶺市創(chuàng)新藥材器械廠電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱DHG-9240A型上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司超聲波藥品處理器JBT/C-YCL400/3P(D)型濟(jì)寧金百特工程機(jī)械有限公司萬分之一電子天平AB204-S/ASwitzerland1.2實(shí)驗(yàn)試劑D(+)-無水葡萄糖(成都曼思特生物科技有限公司,批號(hào):MUST-12122601,純度≥98%(HPLC)、5%苯酚、濃硫酸。1.3藥材與2019年8月中旬至10月下旬分別在新疆不同產(chǎn)地采摘圓柏,經(jīng)新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院馬生軍老師鑒定均為新疆圓柏。見表1-2。表1-2新疆圓柏樣品樣品編號(hào)采摘地點(diǎn)海拔/m采摘時(shí)間代號(hào)1新疆烏魯木齊南山15002019/10/15A12新疆昌吉市阿什里鄉(xiāng)努爾加村27562019/9/10A23新疆瑪納斯縣塔西河鄉(xiāng)草原2902019/10/7A34新疆布爾津縣喀納斯旅游景點(diǎn)38502019/8/23A45新疆阿勒泰市15002019/10/3A56新疆昭蘇縣薩爾闊步鄉(xiāng)28602019/8/30A67新疆霍城縣大西溝鄉(xiāng)阿克蘇村29602019/10/20A78新疆新源縣那拉提鎮(zhèn)阿爾善村36502019/10/5A82實(shí)驗(yàn)方法2.1總多糖含量測(cè)定參照孫娟娟[3]的方法并微做調(diào)整,測(cè)定圓柏總多糖的含量。2.1.1對(duì)照品的制備略2.1.2溶液的顯色略2.1.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2-2。圖2-2D(+)-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線2.1.4供試品的制備略2.1.5精密度實(shí)驗(yàn)精密度結(jié)果見表2-1表2-1精密度實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)量次數(shù)12345吸光度A0.3700.3790.3740.3830.3850.377RSD(%)0.0162.1.6重復(fù)性實(shí)驗(yàn)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2-2。表2-2重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果供試品編號(hào)12345吸光度A0.3430.3340.3450.3410.345含量(%)4.881RSD(%)1.272.1.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2-3表2-3穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)定時(shí)間(h)01246吸光度A0.4270.4150.4170.4210.423含量(%)6.024RSD(%)1.142.1.8加樣回收率考察加樣回收率結(jié)果見表2-4。表2-4加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果編號(hào)樣品量(μg)加入量(μg)測(cè)得量(μg)回收率(%)平均值(%)RSD(%)128.128.1555.2298.0798.161.08228.2428.2455.6198.46328.1728.1754.9597.59428.1028.1055.8799.41528.2228.2254.4396.44628.2828.2856.0099.013結(jié)果及分析129593.1不同產(chǎn)地新疆圓柏,圓柏葉、枝干中總多糖含量的差異比較見下文表3-1,比較不同產(chǎn)地新疆圓柏葉和枝干中多糖的總含量。SPSS17.0用于分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表3-1不同產(chǎn)地新疆圓柏,圓柏葉、枝干中中總多糖的比較圓柏產(chǎn)地總多糖(%,n=3)圓柏葉枝干烏魯木齊南山3.963±0.058Aa3.901±0.057Aa昌吉市5.908±0.074Ba4.518±0.075Ba瑪納斯縣5.086±0.053Ca2.188±2.155Cb布爾津縣7.662±0.024Da2.281±0.071Db阿勒泰6.424±0.048Ea4.943±0.068Ea昭蘇縣3.114±0.109Fa3.315±0.068Fc霍城縣6.900±0.046Ga4.292±0.065Ga新源縣10.589±0.039Ha3.337±0.044Hc注:同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),同列數(shù)據(jù)后不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下同從表3-1可以看出,新疆不同產(chǎn)地圓柏總多糖含量都具有極顯著性差異(p<0.01),新源縣圓柏葉總多糖含量最高為10.589%,昭蘇縣圓柏葉總多糖含量最低為3.114%。新源縣圓柏葉是昭蘇縣圓柏葉的3.400倍。圓柏葉中總多糖含量最高的三個(gè)產(chǎn)地是新源縣>布爾津縣>霍城縣。同時(shí)圓柏枝干總多糖含量也存在極顯著性差異(p<0.01),其中,瑪納斯縣與布爾津縣存在顯著性差異(p<0.05),昭蘇縣與新源縣存在顯著性差異(p<0.05)。阿勒泰市圓柏枝干含量最高為4.943%,瑪納斯縣圓柏枝干含量最低為2.188%,阿勒泰市圓柏枝干是瑪納斯縣圓柏枝干的2.259倍。圓柏枝干中總多糖含量最高的三個(gè)產(chǎn)地是阿勒泰市>昌吉市>霍城縣。由上表可以看出,除了昭蘇縣圓柏葉總多糖含量低于圓柏枝干,其他產(chǎn)地圓柏葉總多糖含量均高于圓柏枝干,由此可知,圓柏葉總多糖含量高于圓柏枝干。158663.2新疆烏魯木齊南山圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖含量的差異比較下表3-2顯示了新疆烏魯木齊南山圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的含量差異,并運(yùn)用spss17.0對(duì)所獲得的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析表3-2新疆烏魯木齊南山圓柏柏葉、枝干、果實(shí)總多糖含量比較部位總多糖(%,n=3)圓柏葉3.963±0.058Ab枝干3.901±0.057Bb果實(shí)4.912±0.125Ca從表3-2可以看出,新疆烏魯木齊圓柏不同部位總多糖含量存在顯著性差異(p<0.05)其中圓柏果實(shí)中總多糖的含量最高為4.912%,其次是圓柏葉為3.963%,總多糖含量最低的是圓柏枝干為3.901%,圓柏果實(shí)是圓柏枝干的1.259倍。284453.3新疆昌吉市圓柏中柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較見下表3-3,運(yùn)用SPSS17.0對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)新疆昌吉市圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。表3-3新疆昌吉市圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖含量比較部位總多糖(%,n=3)圓柏葉5.908±0.074Ab枝干4.518±0.075Ba果實(shí)6.695±0.258Cb從表3-3,可以看出新疆昌吉市圓柏不同部位總多糖含量存在顯著性差異(p<0.05),其中圓柏果實(shí)中總多糖的含量最高為6.695%,其次是圓柏葉為5.908%,總多糖含量最低的是圓柏枝干為4.518%,圓柏果實(shí)是圓柏枝干的1.481倍。169583.4新疆阿勒泰市圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較見下表3-4,運(yùn)用SPSS17.0對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)16958新疆阿勒泰市圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。表3-4新疆阿勒泰市圓柏中柏葉、枝干、果實(shí)總多糖含比較部位總多糖(%,n=3)圓柏葉6.424±0.048Aa枝干4.943±0.068Ba果實(shí)2.056±0.056Ca從表3-4可以看出,新疆阿勒泰市圓柏不同部位總多糖含量存在極顯著性差異(p<0.01),其中圓柏葉中總多糖的含量最高為6.424%,其次是圓柏枝干為4.943%,總多糖含量最低的是圓柏果實(shí)為2.056%,圓柏葉是圓柏果實(shí)的3.124倍。3.5新疆昭蘇縣圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較見下表3-5,運(yùn)用SPSS17.0對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)新疆昭蘇縣圓柏中圓柏葉、枝干、果實(shí)總多糖的差異比較進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。表3-5新疆昭蘇縣圓柏中柏葉、枝干、果實(shí)總多糖含量比較部位總多糖(%,n=3)圓柏葉3.114±0.109Ab枝干3.315±0.068Bb果實(shí)6.932±0.046Ca注:同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),同列數(shù)據(jù)后不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。從表3-2可以看出,新疆昭蘇縣圓柏不同部位總多糖含量存在顯著性差異(p<0.05),其中圓柏果實(shí)中總多糖的含量最高為6.932%,其次是圓柏枝干為3.315%,總多糖含量最低的是圓柏葉為3.114%,圓柏果實(shí)是圓柏葉的2.226倍。3.6不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)總多糖含量差異比較圖3-1不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)總多糖含量差異比較由圖3-1可知,不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)總多糖含量具有極顯著性差異(p<0.01),其中昭蘇縣圓柏果實(shí)總多糖含量最高為6.932%,阿勒泰市圓柏果實(shí)總多糖含量最低為2.054%,昭蘇縣圓柏果實(shí)總多糖含量是阿勒泰市圓柏果實(shí)總多糖含量的3.374倍。3.7不同產(chǎn)地新疆圓柏枝與圓柏葉總多糖含量差異比較圖3-2不同產(chǎn)地新疆圓柏枝與圓柏葉總多糖含量差異比較由圖3-2可知,烏魯木齊南山圓柏葉總多糖含量與其他產(chǎn)地總多糖含量均存在極顯著性差異(P<0.01),昌吉市圓柏枝總多糖含量與其他產(chǎn)地總多糖含量存在顯著性差異(p<0.05).42754討論國(guó)內(nèi)有關(guān)新疆圓柏的研究集中在新疆圓柏的栽培以及綠化方面,研究藥用價(jià)值較少,研究總多糖類化合物方面的相關(guān)報(bào)道非常有限,而有關(guān)新疆圓柏藥用價(jià)值的研究文獻(xiàn)也非常少,因此,針對(duì)新疆圓柏的研究在藥用價(jià)值方面有著重要意義,需要深入的探討。12959129594.1不同產(chǎn)地新疆圓柏的圓柏葉、枝干對(duì)總多糖含量的影響總多糖為圓柏中主要的有效成分之一,其在圓柏中含量較高,近些年研究也較多。新疆圓柏葉總多糖含量相對(duì)較高的三個(gè)產(chǎn)地依次為新源縣>布爾津縣>霍城縣,根據(jù)含量的高低考慮,該三個(gè)產(chǎn)地更適合采摘圓柏葉。本文測(cè)定的圓柏葉中除了新源縣總多糖的含量比李遠(yuǎn)輝等[7]研究的側(cè)柏葉中總多糖含量高以外其他產(chǎn)地均低于側(cè)柏葉中的總多糖含量,總多糖含量可能與生源、生長(zhǎng)環(huán)境、和海拔等因素有關(guān)。新疆圓柏枝干總多糖含量相對(duì)較高的三個(gè)產(chǎn)地依次為阿勒泰市>昌吉市>霍城縣,根據(jù)含量的高低考慮,該三個(gè)產(chǎn)地更適合采摘圓柏枝干。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,圓柏葉中的總多糖含量比圓柏枝干中的總多糖含量高,由此可知,圓柏葉的藥用價(jià)值更高,為了避免資源的浪費(fèi)應(yīng)該合理應(yīng)用圓柏枝干的藥用價(jià)值。158664.215866不同產(chǎn)地新疆圓柏不同部位對(duì)總多糖含量的影響新疆烏魯木齊圓柏中不同部位總多糖含量圓柏果實(shí)>葉>枝干;新疆昌吉市圓柏中不同部位總多糖含量圓柏果實(shí)>葉>枝干;新疆阿勒泰市圓柏中不同部位總多糖含量圓柏葉>枝干>果實(shí);新疆昭蘇縣圓柏中不同部位總多糖含量圓柏果實(shí)>枝干>葉。除了阿勒泰市以外的三個(gè)產(chǎn)地圓柏果實(shí)總多糖含量均高于圓柏葉和圓柏枝干。由此可判斷,圓柏果實(shí)總多糖含量高,枝干總多糖含量低。4.3不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)對(duì)總多糖的影響不同產(chǎn)地新疆圓柏果實(shí)總多糖含量具有一定的差異,由此可知,產(chǎn)地不同可對(duì)圓柏果實(shí)中的總多糖含量產(chǎn)生影響,由本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可初步判斷,新疆昭蘇縣最適合采摘圓柏果實(shí)。85775結(jié)論不同產(chǎn)地新疆圓柏不同部位中總多糖含量最高的是新源縣圓柏葉為10.589%,總多糖含量最低的是瑪納斯縣圓柏枝干為2.188%;8個(gè)產(chǎn)地圓柏葉中總多糖含量最高的是新源縣為10.589%,最低的為昭蘇縣3.114%;8個(gè)產(chǎn)地圓柏枝干中總多糖含量最高的是阿勒泰市4.943%,最低的為瑪納斯縣2.188%;4個(gè)產(chǎn)地圓柏果實(shí)中總多糖含量最高的為昭蘇縣6.932%,最低的為阿勒泰市2.054%。本次試驗(yàn)對(duì)新疆圓柏8個(gè)不同地區(qū)圓柏葉和枝干,4個(gè)同地區(qū)圓柏葉、枝干、果實(shí)中總多糖
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