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關(guān)于唾液淀粉酶的影響因素背景酶具有催化效率高,專一性強(qiáng),作用條件溫和等特點(diǎn),目前在科研、食品加工、飼料生產(chǎn)、醫(yī)療等方面具有廣泛的應(yīng)用。唾液淀粉酶存在于唾液中,是一種有催化活性的蛋白質(zhì),可將淀粉水解為麥芽糖。影響其活性的因素有很多,除了本身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和結(jié)構(gòu)功能特點(diǎn)影響之外,還主要包括PH值、溫度、重金屬離子、抑制劑、激活劑及酶濃度等。(唾液淀粉酶:ptyalin;salivaryamylase)實(shí)驗(yàn)背景第2頁,共12頁,2024年2月25日,星期天實(shí)驗(yàn)原理麥芽糖、葡萄糖遇碘不顯色淀粉水解產(chǎn)物與碘液反應(yīng)生成不同的顏色反應(yīng)淀粉+碘生成藍(lán)色糊精+碘根據(jù)水解程度,由紫色到橙色,水解越徹底,顏色越淺,直到生成無色糊精(碘不顯色)第3頁,共12頁,2024年2月25日,星期天實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)儀器:控溫水浴鍋、制冰機(jī)、電磁灶、不銹鋼鍋白瓷板、試管、滴管、移液管(1-2ml)實(shí)驗(yàn)試劑:蒸餾水、1%淀粉液、1%蔗糖、0.1%尿素液
大豆尿素酶溶液、0.1%CuSO4、0.1%HgCl2
0.1%NaCl、1MNaOH、0.5MH2SO4、碘液
各種pH緩沖液:5.0;6.8;8.0第4頁,共12頁,2024年2月25日,星期天實(shí)驗(yàn)步驟第5頁,共12頁,2024年2月25日,星期天
一溫度對(duì)唾液淀粉酶的影響1.稀釋唾液的準(zhǔn)備。2.準(zhǔn)備好37℃水浴、冰水浴及沸水浴,點(diǎn)滴板加碘液各1滴,備用。3.取小試管4支,編號(hào),各加1%淀粉溶液30滴,pH
6.8緩沖液10滴。1號(hào)管作對(duì)照,2號(hào)管放37℃水浴,3號(hào)管放冰水浴,4號(hào)管放沸水浴中,各預(yù)溫10min。4.向1號(hào)管加蒸餾水10滴,向2,3和4號(hào)管各加稀釋唾
液10滴,混勻放原水浴中。第6頁,共12頁,2024年2月25日,星期天5.5min后由2號(hào)管每隔一定時(shí)間(1min或2min),取
液1滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng),觀察并記錄顏色變
化情況,到碘反應(yīng)接近淺紅色時(shí),取出各管,包括
1號(hào)管,分別各取1滴做碘反應(yīng),觀察對(duì)比結(jié)果。6.把4支試管放入37℃水浴下,5~10min后取出,向各
管內(nèi)加碘液2滴,混勻,觀察結(jié)果。綜合分析所測(cè)
三種溫度下的酶活性情況,并以1號(hào)管為對(duì)照說明
冰水浴及沸水浴兩溫度對(duì)酶活性影響的異同。
試管號(hào)
1
2
3
4第一次碘反應(yīng)
第二次碘反應(yīng)
第7頁,共12頁,2024年2月25日,星期天
二pH對(duì)唾液淀粉酶的影響第8頁,共12頁,2024年2月25日,星期天4.5號(hào)管加稀釋唾液10滴,放37℃水浴中,記錄時(shí)間,每隔1min或2min,由第5號(hào)試管中取出1滴溶液做碘反應(yīng),待碘反應(yīng)呈淺紅色或橙黃色時(shí),取出試管記錄保溫時(shí)間。5.1~4號(hào)試管放入37℃水浴中,向1號(hào)管加10滴蒸餾水。以1min間隔,并記錄時(shí)間,依次向2~4號(hào)試管中加入稀釋唾液10滴,搖勻,按照5號(hào)管的保溫時(shí)間,以1min間隔,依次取出各管,并立即加碘液2滴,混勻。向1號(hào)管加2滴碘液。觀察各管顏色,判斷在同pH條件下淀粉被水解的程度,分析pH對(duì)淀粉酶活性的影響,確定其最適pH。
時(shí)間(min)試管號(hào)
1
2
34
1
2
3
4
第9頁,共12頁,2024年2月25日,星期天
三抑制劑對(duì)唾液淀粉酶的影響試劑(滴)
管
號(hào)
1
2
34
1%淀粉
30
3030
30
pH=6.8緩沖液101010100.1%CuSO410———0.1%NaCl—10——蒸餾水——10—
0.1%HgCl2—
—
—10
稀釋唾液的準(zhǔn)備取點(diǎn)滴板1個(gè),向白瓷凹板內(nèi)各加碘液1滴,準(zhǔn)備好37℃水浴取小試管3支,如下表加入試劑第10頁,共12頁,2024年2月25日,星期天5min后由2號(hào)試管每隔1min,取液滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng),觀察記錄顏色變化情況,至反應(yīng)為淺色時(shí),取出各試管,分別取1滴做碘反應(yīng),對(duì)比結(jié)果。實(shí)驗(yàn)記錄
試管號(hào)1
2
34
反應(yīng)顏色
時(shí)間(min)5
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