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報(bào)告人：馮姣PCR技術(shù)簡(jiǎn)介PCR技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的應(yīng)用PCR技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)PCR技術(shù)在食品微生物檢測(cè)中的存在問題目錄熒光定量PCR常規(guī)PCR檢測(cè)多重PCR檢測(cè)熒光定量PCR檢測(cè)IMS-PCR檢測(cè)PCR-DGGE在熱穩(wěn)定DNA聚合酶的催化下，常規(guī)PCR檢測(cè)原理是在存在DNA模板、dNTP、引物、適當(dāng)緩沖液與MgCl溶溶液的反應(yīng)混合物中，對(duì)一對(duì)寡核苷酸引物所界定的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增。多重PCR(multiplexPCR)的檢測(cè)原理與傳統(tǒng)PCR相同，如果存在與各引物對(duì)特異性互補(bǔ)的模板，只不過是在同一反應(yīng)體系中加入1對(duì)以上的特異性引物，那么就可以同時(shí)在同一個(gè)反應(yīng)管中擴(kuò)增出1條以上的目的DNA片段。使用這一方法可以同時(shí)檢測(cè)1個(gè)以上目的基因或者借助其交叉限制進(jìn)行確認(rèn)。與常規(guī)的PCR相比，還具有擴(kuò)增效率高、產(chǎn)物特異性高和經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，特別適合食品中多種致病菌的快速檢測(cè).PCR操作過程準(zhǔn)確性用傳統(tǒng)的方法檢測(cè)食品中微生物要分離出所有的微生物很困難，那是因?yàn)?，食品中污染微生物種類相當(dāng)多，即使是同一種食品中微生物種類也相當(dāng)多。快捷性一般的腐敗菌檢測(cè)至少需要2～5d，甚至7d以上，由此可見，傳統(tǒng)的檢測(cè)方法最大的缺點(diǎn)就是檢測(cè)需要時(shí)間太長(zhǎng)了。檢驗(yàn)結(jié)果出來時(shí)通常產(chǎn)品已經(jīng)流向市場(chǎng)，對(duì)實(shí)際生產(chǎn)具有嚴(yán)重的滯后性。而PCR技術(shù)檢測(cè)食品微生物可以在1d之內(nèi)檢測(cè)出結(jié)果，甚至在幾個(gè)小時(shí)就可以得出檢測(cè)結(jié)果，對(duì)食品工業(yè)生產(chǎn)具有相當(dāng)好的指導(dǎo)作用。1.食品成分復(fù)雜，如果不能有效的排除各因素的干擾，可能會(huì)出現(xiàn)假陰性。2.PCR反應(yīng)靈敏度高，操作時(shí)要求嚴(yán)格，稍不注意有外界DNA

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