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文檔簡介
臨床血液標本采集指南
臨床血液標本采集指南
質控環(huán)節(jié)
一、檢驗申請
規(guī)范填寫檢驗申請單,項目填寫齊全,用詞規(guī)范、字跡清楚、避免涂改。對于被檢者的特殊情況,應當在申請單上注明,供檢驗人員判斷結果參考。檢驗科要求檢驗人員加強與臨床醫(yī)護人員溝通,及時解決檢驗項目申請和送檢標本存在的問題及疑問;
二、病人準備
醫(yī)護、檢驗人員指導病人做好準備??紤]飲食、運動、生理周期、疾病及藥物等對檢驗結果可能產生的影響,指導病人正確采集標本。
(一)控制飲食
(1)大多數檢驗項目都要求在早晨空腹采血,咖啡、濃茶、高糖及可樂類飲料也應禁食。
(2)肝功、血脂、凝血項目要求禁食12-16小時,且提前一天的晚餐應當避免飲酒、禁食高脂肪、高蛋白飲食。
(3)飲食對血脂檢驗影響重大,至少應當在抽血前的3天以內注意保持正常飲食。
(二)避免藥物影響
許多藥物(如VitC、雌激素、降血脂藥等)對檢驗結果尤其是血、尿、便的生化檢驗結果產生影響,抗生素應用將對微生物培養(yǎng)檢驗結果產生直接的影響。申請檢驗前醫(yī)生應該了解待檢者近期及當前相關藥物使用情況并給予適當指導,在對檢驗結果可能產生明顯的影響時,應當在檢驗申請單上注明。如不能停藥,應記錄用藥情況,恰當評估藥物對檢驗結果的影響。
(三)避免運動影響
(1)劇烈運動可以使許多血液成份發(fā)生改變,甚至持續(xù)24小時以上,因此劇烈運動之后不應立即抽血;快步行走之后,至少應休息10~15分鐘然后再抽血。
(2)應在平靜狀態(tài)抽血,避免情緒激動。
(四)注意生理差異
臨床醫(yī)生申請檢驗項目及評估檢驗報告時,應考慮性別、年齡、晝夜節(jié)律、季節(jié)變動、生理周期(如懷孕、月經)等因素對檢驗結果的影響,并給予必要指導。
(五)注意體位要求
(1)許多血漿生化成份在站、坐、臥三種不同體位時有明顯的濃度差異。
(2)靜坐5~10分鐘后以坐位(從肘靜脈)采血為最佳。
(3)臥床患者可臥位采血。三、器材選擇
(1)一般采血可采用質量合格的一次性塑料注射器。從動脈采集血氣標本,以采用玻璃注射器為佳,可以減少血液中氧氣的彌散。
(2)采用注射器采血時,7號(22G)或8號針(21G)為標準抽血用針,針頭過細容易產生溶血。
(3)采用真空采血管-采血針已成為國際標準,可以有效減少溶血、凝集及采血量不準的差錯。
(4)采集抗凝血液標本時,血標本管采用的抗凝劑的種類及濃度、體積必須正確無誤。
四、采血操作
(一)正確選擇血標本種類
(1)大多數檢驗項目(生化、免疫、凝血、血培養(yǎng)、交叉配血等)采用靜脈血標本。
(2)血氣分析最好采用動脈血標本,也可從動脈化毛細血管采血(如新生兒)。
(3)血常規(guī)檢驗(血細胞分析)可以采用靜脈血或手指末梢血,但除非靜脈抽血確實存在困難者(如:新生兒、幼兒、老人、肥胖者、嚴重燒傷患者、出血傾向嚴重的患者、病?;颊撸?,或者必須為治療保留靜脈者(如腫瘤化療患者)可考慮采用手指末梢血外,其他人應采用靜脈血。
(二)正確選擇采血部位
(1)末梢血標本可從手指采集,采用耳垂末梢血作為血常規(guī)檢驗標本的做法已經廢止。新生兒可以從足跟、大趾采集。
(2)動脈血標本常從股動脈、肱動脈、橈動脈采血,新生兒及嬰兒可從頭皮動脈或臍動脈采血。
(3)靜脈血標本常從肘前靜脈、腕背靜脈采血,小兒和新生兒有時從頸靜脈和前囟靜脈采血。
(4)禁止從輸液三通管采血(輸液成份回流、輸液管內殘留輸液成份都將極大地影響檢驗結果)。
(三)盡量避免輸液時采血
(1)一般應在輸液結束30分鐘以后再采血。
(2)搶救過程中必須一邊輸液一邊采血時,應避免從正在輸液的肢體上采血,應避免輸液成份混入血液標本。
(3)輸液時采血應當遵從“遠端原則”:
a選擇在輸液的對側肢體或無輸液的其他肢體(如足部)靜脈采血。
b在四肢靜脈都輸液時,可以選擇在輸液靜脈的遠心端(靜脈血流的上游)采血。
(4)急診、搶救過程中在輸液的同時采血,應在檢驗申請單上注明。
(四)避免消毒酒精引起溶血
靜脈穿刺處消毒酒精未干就采血,容易引起標本溶血。
(五)合理使用止血帶
(1)止血帶不應扎得太緊,使用時間應盡量縮短。抽血時,見到回血應立即松開止血帶,減少血行阻滯時間(也不應鼓勵被抽血者長時間、用力攥拳)。
(2)血脂項目、出凝血項目、血常規(guī)項目抽血時止血帶使用應限定在1分鐘以內。
(3)止血帶束縛太緊、時間過長(如超過3分鐘),會造成血行阻滯時間過長,因溶血、血小板激活、纖溶系統激活等原因將使以上檢驗項目的結果產生偏差,甚至誘導錯誤診治。
(4)需要重新采血時,在止血帶束縛時間太長的情況下,應當在對側手臂重新采血。
(六)“一針見血”、抽血順暢
(1)許多檢驗項目,尤其是涉及出凝血機能的項目(如血小板計數、出凝血項目等)均要求做到“一針見血”、抽血順暢。
(2)“一針見血”、采血順暢,可以有效防止溶血、減少血管及組織細胞損傷導致血液成份改變對檢驗結果的影響。溶血造成紅細胞內成份的釋放、血管損傷導致凝血機制的激活,對很多檢驗項目將產生明顯影響。
(七)控制抽血力度
(1)用注射器抽血應避免大力拉、推針拴,以免血細胞因受過度擠壓而增加溶血。
(2)抽血時大力抽拉針拴,還易使血液產生氣泡。氣泡是導致溶血、蛋白酶失活的重要原因之一。
(3)從動脈采集血氣分析標本,應讓血液自動流入針筒,不要用負壓抽取血液,以免增加血液中氣體揮發(fā)及產生溶血。
(八)血液標本采集順序
(1)注射器采血可以一次采集足量血液,然后立即依如下順序分裝各標本管:血常規(guī)、出凝血、生化、免疫。
(2)使用配套的真空采血管-采血針時,第一管最好不作為凝血檢驗標本(最大限度降低血管及組織細胞損傷造成血液成份改變對檢驗結果的影響,臨床醫(yī)生申請凝血檢驗項目時最好考慮與血常規(guī)或其他生化項目一起采血)。
(3)使用配套的真空采血管-采血針時,采血順序應當是:血培養(yǎng)、不含添加劑的采血管(血清標本管,紅色、桔紅色或黃色)、凝血標本管(淺藍色)、其他標本管。
(九)減少針頭導致的溶血
(1)如果使用注射器抽血,應先卸除針頭,再沿試管壁將血液輕緩地注入試管。
(2)通過針頭將血液推入試管(血液細胞二次通過針頭),尤其是用力推送,將增加血液細胞受擠壓而破碎的機會,導致溶血。
(十)準確控制標本量
(1)抗凝血液標本的體積必須準確——真空采血管的標簽紙上都有體積標志(黑色小方塊);抗凝血液標本的體積誤差應控制在5%以內(如2ml凝血標本管的血液體積誤差應不大于0.1ml)。
(2)抗凝血液標本的體積不合要求可能產生的主要影響:血液體積太多—一抗凝劑比例太少,易產生血凝塊;血液體積太少——抗凝劑體積相對剩余,血液成分過度稀釋,且易使血細胞因滲透壓降低而產生變形或溶血,PT和APTT時間將假性延長。
(十一)盡快與抗凝劑徹底混合
(1)需要抗凝的血液標本,抽血后應立即將血液注入含抗凝劑的標本管,并使血液與抗凝劑徹底混合,避免血液凝固。
(2)真空采血管以顛倒5~8次為標準操作,動作應迅速而輕柔。用力振蕩、產生氣泡都不可避免產生溶血。
(3)如果管中抗凝劑為液體,應當使粘附在管壁、管蓋上的抗凝劑能夠全部與血液混合。
(4)對于出凝血項目、血常規(guī)項目、白細胞表面抗原分類檢測等項目,血液標本出現凝固(即使少量細胞凝集)均為不合格。
五、血液標本保存
(一)血液標本的保存要求
(1)采血后應將標本管直立、靜置,避免振蕩、摔落。
(2)所有標本最好都采用有蓋容器盛放,防止灰塵、雜物混入,減少水分、氣體蒸發(fā),避免標本濺灑、污染。
(3)標本應保存于蔭涼處,避免陽光直射。某些檢驗項目要求避光保存血液標本。
(4)標本一般應室溫保存,避免過高或過低溫度影響。
(5)特定項目的血液標本需要低溫保存(如血氣標本應將封閉的血液立即冷凍至4℃然后送檢)。
(二)血液標本應立即送檢
(1)血液標本不應在臨床科室保留,應盡可能立即送往檢驗科室。
(2)檢驗人員應根據不同檢驗項目的要求及時處理標本(立即檢驗、低溫保存、分離血清后低溫或常溫保存等)。
(三)血液標本的有效檢驗時限
(1)血氣分析——必須立即送檢,應當在30分鐘內完成檢驗。
(2)凝血項目、電解質項目、肝功及多數血液酶類生化項目——應盡快送檢,在2小時內檢驗。
(3)血常規(guī)項目——應在4小時內完成檢驗
(4)血培養(yǎng)項目——應在采血后盡快放入35℃培養(yǎng)箱中,超過2小時可能降低微生物培養(yǎng)的陽性率。
(5)多數抗原-抗體檢測項目——全血室溫(4℃為佳)可保存24小時,或分離血清-20℃保存。
(6)在環(huán)境溫度超過30℃的條件下,所有標本都應盡快送往檢驗科室。
(7)有些臨床科室早晨抽血時間太早,至送檢時標本已室溫放置超過2小時,標本因細胞代謝、溶血、蒸發(fā)等原因造成許多項目的結果偏差,如:鉀、乳酸脫氫酶、谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、血紅蛋白、酸性磷酸酶等升高,鈉、血糖等降低。檢驗科建議:住院病房早晨抽血時間應控制在6:30以后,標本應在8:00左右送至檢驗科。
(四)血培養(yǎng)標本的特殊要求
(1)確保無菌采血,嚴防標本被污染。
(2)血培養(yǎng)瓶接種的血液量一般為:成人10ml,兒童4ml,幼兒1~2ml。接種的血液過多易引起假陽性。
(3)作厭氧培養(yǎng)的血液標本,應避免接觸空氣,立即注入專用厭氧培養(yǎng)瓶內。
(4)如果同時作厭氧培養(yǎng)和需氧培養(yǎng),應先將血標本接種厭氧培養(yǎng)瓶,然后再接種需氧培養(yǎng)瓶。
六、血液標本運送
(1)標本應從采集地點直接送往檢驗科室,不應在其他地點放置。
(2)以上血液采集、保存過程對標本質量的要求應當得到滿足。必須避免劇烈振蕩、血液濺灑、光線照射、異物混入等情況的發(fā)生。
(3)交叉配血的受血者血液樣本,必須由臨床醫(yī)護人員或專職運送人員直接送往檢驗科(血庫)。禁止其他人員(包括受血者家屬)執(zhí)行血樣運送任務。
(4)外送檢驗標本應當接受檢驗人員對標本種類(全血、血清或血漿)、標本容器、生物防護要求以及運送保存溫度等方面的指導。
七、其他
(一)正確處理不合格標本
(1)檢驗科室在核收送檢標本時,對不合格檢驗標本應當拒收。
(2)臨床科室在證實標本不合格之后應當重新采集標本送檢。嚴禁諸如“將因出現凝集而被拒收的血常規(guī)標本在挑出血凝塊之后重新送檢”之類的嚴重錯誤發(fā)生。
(二)標本濺灑事故的處理
(1)從標本管濺灑出來的血液標本不能再放回標本管作為標本送檢。
(2)嚴禁將同一個待檢者含不同抗凝劑的血液標本進行混合,嚴禁將不同待檢者的血液標本進行混合。
(3)如果發(fā)生標本濺灑事故,應當立即對被污染物(體表、衣物、臺面、地面等)進行有效的消毒處理。尿分析和尿標本的收集、運送和保存;批準準則尿分析定義為在快速,可靠、準確、安全、收費合理方式下,以通常的操作方法對尿液進行檢驗。
由此"尿分析"一詞包括下列某些或全部內容
·肉眼評價(如顏色和透明度)
·物理學檢測(如體積和比重)
·化學試紙條或試劑片檢測
·顯微鏡檢查
每個實驗室應確定使用哪些程序及應作檢查的范圍。根據已有的評價結果及發(fā)表的研究成果;病人群體的類型(如無癥狀病人群體篩選產生極少的陽性結果,而住院腎科病人的陽性率較高)來確定程序和范圍;程序的內容是否合適,應向有關的醫(yī)生進行咨詢。是否進行顯微鏡檢查應由各個實驗室根據他們的病人群體來決定。
尿分析檢測有如下一些目的:
·疾病的輔助診斷
·對無癥狀人群進行的先天性或遺傳性疾病的篩查
·疾病進展的監(jiān)測
·治療效果或并發(fā)癥的監(jiān)測
濫用藥物檢測信息請參見NCCLS文件T/DM8-P,臨床實驗室的尿藥物檢測,推薦準則。
注:分委會推薦在處理和丟棄病人標本、質控品、校準品、能力比對檢驗樣品,以及尿分析中使用的其它材料時均應采取全面的防護措施,參見NCCLS文件M29-T2,實驗室工作人員來自血液、體液和組織感染傳染病的防護,第二版,暫行準則的相應部份,并應參考地區(qū)、州及聯邦政府關于醫(yī)用廢物棄置的法規(guī)。[dvnews_page=材料及設備]2.材料及設備
2.1材料
容器、試管和玻片上應有標記,以保證對病人有特定的標識,用于尿分析的所有材料均應無顆粒。
2.1.1收集裝置
合適的尿收集和運送容器的描述以及其它有關的信息,參見第8.6節(jié)。
2.1.2離心管
適用于尿離心的試管具下列特點
·潔凈的的塑料或玻璃管可作肉眼檢查,并有足夠的強度避免離心時破損。
·有體積刻度,確保尿液標準化。
·有蓋。以減少因尿液濺出或離心形成氣霧的危險。
·是尖底管以濃集沉淀物。
·無化學干擾物
·具標簽,保證有特定的標識
注:不推薦重復使用離心管。
2.1.3移液管
推薦使用一次性移液管,以減少在重新懸浮和取出尿沉渣時具有的生物危險;不推薦重復使用移液管。移液管應清潔,無顆粒。
2.1.4顯微鏡玻片/觀察裝置
最好使用市售的一次性標準化顯微鏡載玻片或經校準過計數室的觀察裝置。不鼓勵使用一般的顯微鏡載玻片及蓋片,因為得不到標準化和可重復的結果。
注:不推薦重復使用玻片。
2.1.5試紙條
試紙條的塑料底片上有一個或多個化學檢測塊,以多種形式組成。盡管試紙條沒有明顯的失效表現、聯邦政府的規(guī)定要求不使用超過失效期的試紙條。為保持試紙條的反應性,要求注意必要的儲存要求,為得到良好的檢測結果,需做到下列各點:
·按照廠商的要求將試紙條貯存于原裝容器內,短暫地暴露于直射光和室內濕度都會使試紙條產生錯誤的結果。
·保持容器蓋緊,并保存于廠商推薦的溫度下。
·一次只取出少量試紙條,并立即重新蓋緊容器。取出未用的試紙條不能再放回容器。
·不要合并各容器內的試紙條?!げ挥|摸試紙條上的化學檢測塊。2.1.6防腐劑和標本的貯存
尿分析不推薦使用化學防腐劑。建議在收集標本2小時內作尿分析。如延誤檢驗,將標本置冰箱保存,適宜于一些化學成份的檢測(膽紅素和尿膽原除外),但會沉淀無晶形尿酸鹽和磷酸鹽,使顯微鏡視野模糊,如果同時做培養(yǎng),在運送及處理過程中應保存于冷藏條件下,如作多項分析應將充分混勻的尿分作幾份,按用途作不同處理。作為防腐措施冰箱保存的時間長度要根據各個尿檢測項目,作為防腐措施的冷藏時間沒有統一規(guī)定。(用于定時尿標本防腐的詳盡信息參閱第9.0節(jié))
2.1.7尿分析申請單
應設計申請單和計算機化的輸入系統,以說明被收集尿標本的類型及要求收集的日期和時間。
申請單應可填寫以下信息:
·標本收集的實際日期和時間
·運送前是否需冷藏
·實驗室收到標本的時間及進行檢驗的時間
·申請的檢測項目
申請單也應包括說明影響分析結果特殊情況的填寫內容(如屬長途運輸標本加入的防腐劑;用藥如阿司匹林、維生素或抗生素;月經期;收集標本前強烈運動及任何有關的臨床信息)。與標本識別有關的其他病人信息參照第3.1節(jié)。
2.2設備
2.2.1顯微鏡
在尿分析實驗室,應使用具有下列特點的新式的高質量顯微鏡:
·雙目鏡筒,可用雙眼觀察標本。
·內置光源。
·機械載物臺,使玻片易于平穩(wěn)移動
·基本的物鏡組(例如10×和4×)及目鏡組(如10×或12.5×)。
·如使用多臺顯微鏡時,應用相同的物鏡和目鏡。
2.2.2試紙條判讀器
干試劑化學結果,可用目測方法將反應的試劑條和不同顏色強度的模塊標準圖比較而確定。而現有的儀器可檢測這些反應的強度,消除由反應時間和顏色判讀所引起的差異。這些儀器是反射光度計,檢測試條塊表面反射的光量。
將許多質量保證的要求整合到系統內(如定時,校準和誤差代碼)。使用這些儀器按下列要求進行是很重要的:
·閱讀并按照操作手冊的要求進行操作
·建立并遵行保養(yǎng)計劃
·保持儀器清潔,保證濺出液即刻擦去,按照統一要求(參見NCCLS文件29-T2,實驗室工作人員預防來自血液、體液和組織傳染病的感染--第二版?zhèn)溆弥改?。?/p>
判讀器的校準
需按儀器廠商的手冊中推薦的方案。
判讀器的維護保養(yǎng)
光路和機械部件應確保最佳操作,可參閱儀器手冊判讀器部份,并按照廠商推薦的方法。
2.2.3比重測定裝置
折射計測定液體內溶解的固體總量,按溶液折射指數對溶液比重進行評價(參閱第3.4節(jié))。
2.2.4離心機
特征
作尿沉渣時應使用下列特征的離心機
·當轉子旋轉時具備鎖蓋子的功能。
·環(huán)境溫度(15至25℃)
校準和保養(yǎng)
驗證離心機可否提供400×g的相對離心力(RCF),參閱廠商儀器手冊中推薦的方案。實驗室根據使用的需要確定定期驗證的周期。
2.3質量控制
依據所有當地、州立和聯邦法規(guī),以及廠家說明開展質量控制。
2.3.1尿液化學分析
推薦使用兩個不同水平的多項質控品,來確認每個化學檢測項目檢測的性能。每天至少要做一次質控,凡新開瓶試紙條應做質控。推薦用新、老批號的試紙條平行地對質控物及標本進行測定。
一般使用市售質控品,另外可在工作中留取尿標本分為若干份,在不同時間檢驗,作為精密度的核查。
質控品的測定值應在實驗室確定的限值內。
推薦參加室間的尿分析能力比對檢驗以評價化學分析的性能。
2.3.2尿液顯微鏡分析
市售質控品不適用于所有沉渣項目的檢測。對病人新鮮標本的重復檢測,可建立室內和室間二者的顯微鏡分析可重復性。對任何檢測項目,檢測結果允許落在上或下一檔的報告范圍內。
對鏡下成份的有無或數量存在分歧,應重復做檢查。如必要主管技師或實驗室領導應解決存在的問題。每個實驗室應建立復查異常沉渣結果的規(guī)定。也推薦參閱教科書,圖譜,掛圖及圖片。[dvnews_page=尿液肉眼觀察/物理學分析]
3.尿液肉眼觀察/物理學分析
3.1標本的識別
尿分析申請/報告單提供的信息包括下列內容:病人姓名,年齡或出生日期,性別;病人所在區(qū)域(住院或門診);標識號碼;標本類型(如導尿,中段尿或其它);申請醫(yī)生;填寫申請單人的簽字;診斷和主要癥狀;服用的藥物(如維生素C);收集尿液的日期和時間,實驗室收到時間(詳細內容參見第8.6.6節(jié))。3.2標本可接受性
由于尿分析的準確性取決于送檢標本的質量,所以應重視尿標本的收集和運送(參見第8.0節(jié))。尿標本應迅速送達實驗室,收到后盡快進行分析。通常公認在室溫中放置2小時后尿化學成份有改變,有形成份開始變性。如不能在標本收集2小時內分析,標本應放冰箱保存(2-8℃)。標本在進行分析前應先在室溫預溫。若尿標本未能及時檢測,應將延遲時間及溫度的情況寫明。不能接受無標簽或標簽不完整的標本。應在通知醫(yī)生后棄去。
能同作肉眼和顯微鏡檢查的最小尿量通常為12ml,(50ml更好)。嬰兒尿標本可以用較少的量。
尿標本應收集在潔凈、防漏的一次性容器內。標本應無糞便污染,無手紙或其它異物。達不到這些規(guī)定,應通知申請醫(yī)生或指定的人員,要求另送標本。
3.3顏色、透明度和氣味
尿顏色、透明度和氣味的臨床意義雖較少,但仍應在報告單上注明任何不正常的顏色、透明度和氣味。氨味最常見于細菌降解尿素所致,表明為陳舊標本或尿路感染。為減少報告尿標本的顏色,透明度和氣味時的模糊性和主觀性,實驗室應建立標準的方法和術語。3.4比重
尿比重(SG)是在相同溫度下,標本重量和同體積蒸餾水重量的比值。比值用數值表達。人尿正常值的范圍在1.003到1.035。常用的測定比重的方法是間接測定法,利用數學計算或相關的關系估計比重值,一些實驗室以滲透壓代替比重測定。
常使用折射儀測定比重。該方法依據光的折射與液體內溶解的固體總量成比例。在尿分析中,折射儀應有用于尿液測定的校準量度關系。折射儀使用較普遍,因為在60°F(15℃)至100°F(38℃)間使用,溫度可被補償,而且它需要的尿量較少,當尿液含X-光線反差介質、血漿擴容物及大量的葡萄糖或蛋白可使結果增高。含有大量葡萄糖或蛋白的標本須對折射儀的結果進行糾正,因兩者都是高分子量物質,與腎濃縮能力無關,但將增高標本的密度。用折射儀測定,每克/分升蛋白將增高比重0.003,每克/分升葡萄糖將增高比重0.004。對含X-光線反差介質或血漿擴容物的標本,可使用滲透壓計或試紙條進行測定。因為它們不受這些高分子量物質的影響
諧波振蕩也可用于比重測定。使用該技術的儀器可買到。測定諧波振蕩并計算相對密度,該測定基于聲音速度與密度間的良好相互關系。這些裝置提供自動化的便利并與折射儀的測定有良好的相關性,且不需要凈化混濁的標本。溶解于尿液中的物質與重力計測定密切相關。比色測定試紙條可作比重的估計,該方法檢測離子濃度,依據隨比重增加離子濃度也增加的關系。此紙條檢測尿比重以0.005的增量遞增,從1.000到1.030。堿性尿標本會影響指示劑系統,對pH堿性的尿液肉眼觀察試紙條時其比重結果應加0.005。儀器判讀試紙條時,儀器可自動按pH調整結果。中量蛋白(100至750mg/dl)可輕微增高試紙條的比重結果。非離子物質如葡萄糖或X-光線反差介質,不影響試紙條的檢測結果。
液體比重計也正用于測定尿比重。液體比重計用置換法測定比重。經校正用于尿的液體比重計稱為尿比重計。該裝置有諸多不便;包括需要較多的尿液(10到15ml),用比重計需要漂浮在容器內,容器必須寬到比重計不碰觸其壁。溫度影響尿比重計判讀,須作糾正;判讀尿液新月形面有困難;尿比重計可能不準確,購買后需要標化。因此尿比重計不是尿比重測定的選擇方法。
所有這些方法都存在影響因素,不僅受到分子數目的影響,而且受其大小和/或離子電荷帶來的影響,大分子可比小分子的鈉和氯離子得出較高的比重讀數。因評價腎濃縮能力時尿素的價值小于鈉或氯,所以在某些情況下需要確定尿標本的滲透壓。3.4.1質量保證
對比重試驗的質量保證程序應包括每天使用質控品,按廠商質量保證建議進行。按照州和聯邦的法規(guī),建立文件保證對操作進行核查。[dvnews_page=尿液化學分析]
4.尿液化學分析
尿化學分析用尿"浸漬條"進行,不同廠商提供許多種類"浸漬條"供選擇。這些"浸漬條"或試紙條為一個塑料條,上有一個或多個富含化學物質的反應塊,尿與試劑塊接觸后產生顯色反應。試紙條是一種簡單快速、對尿液半定量檢測的方法。下列各類型的試紙條較常用:
·酮體(如乙酰乙酸和/或丙酮)
·白蛋白
·葡萄糖
·白細胞酯酶
·血/血紅蛋白
·亞硝酸鹽
·膽紅素
·pH
·尿膽原
·比重
4.1推薦使用的標本
雖然隨機標本可用試紙條作尿化學分析,但較好的尿標本是混合均勻的第一次晨尿(濃縮8小時),不離心、保存于15至25℃。應在采集后2小時內檢測。如標本不能立即運送和檢測,采集后應置冰箱(2-8℃)。尿的組分如膽紅素和尿膽原不穩(wěn)定,細菌可消耗葡萄糖,如尿放置不用,其pH會改變。
4.2尿試紙條使用的防護
參閱2.1.5節(jié)中的有關說明。
4.3試紙條的使用
在使用某種試紙條時應對人員進行培訓。不同廠商的試紙條不能交互使用。
試驗前應認真閱讀包裝內附的廠商說明書。不同的產品方法可能不同。每一新批號廠商說明書,方法是否改變。
每項檢測的反應塊進行顯色反應所需的時間不同,應按廠商說明書要求進行。用肉眼判讀需要有秒針的計時裝置,自動試紙條判讀器可按照廠商說明,設置固定時間判讀反應塊。
了解使用的試紙條中每個項目試驗敏感性和特異性是很重要的,這些信息在包裝說明中。
肉眼判讀試紙條,由于各人對不同顏色的判讀有某種程度的差異。試紙條應靠近比色板在適當光源下判讀。尿內存在有些物質能干擾化學反應,導致假陰性或假陽性結果。這些干擾物質或任何其它的局限制可閱讀廠商說明了解,若尿試紙條結果和預期值不同,須按廠商方法和實驗室手冊尋找問題。
4.4確認試驗
確認尿化學分析試驗,用相同的或更敏感和/或更特異的方法檢出相同的物質或用不同的反應或方法學檢出此物質。重復試紙條反應或分析不是確認試驗,通常用的確認尿化學分析試驗包括硫柳酸試驗證實,白蛋白尿,試劑片試驗證實膽紅素的測定結果。
除化學分析,手工和自動濕顯微鏡尿分析系統代表確認試驗,可證實試紙檢出的血白細胞酯酶和亞硝酸鹽。微生物學研究是尿道感染的確認試驗。試紙條顯示白細胞酯酶和亞硝酸鹽陽性,確認濕顯微鏡尿分析顯示舊細菌尿和白細胞。通常常規(guī)尿細胞學和細胞診斷尿分析能用于濕顯微鏡尿分析指示異常的確認試驗。諸如炎癥、感染、腫瘤等,影象細胞計數和Feulgen染色的脫氧核糖核酸(DNA)分析,正被接受為尿乳頭腫瘤的確認染色方法。[dvnews_page=尿的顯微鏡檢查]
5.尿的顯微鏡檢查
大量的文章建議需做尿沉渣顯微鏡檢查,由于試紙條附加有白細胞酯酶和亞硝酸鹽試驗,理化結果正常的尿標本做顯微鏡檢查的價格功效被提出質疑。進行顯微鏡檢查應由各個實驗室按其特殊的病人群體決定。通常在下列情況下作顯微鏡檢查。
·醫(yī)生要求
·實驗室檢查程序的要求(如有免疫抑制表現,泌尿-腎臟疾患,糖尿病或懷孕病人)
·理化結果異常
5.1標本的要求
尿標本的類型和質量極大地影響顯微鏡檢查結果。為顯微鏡檢查選擇的標本是第一次晨尿。此尿是最濃縮的,為最大回收沉渣成份,關于尿標本類型,留取時間,伴隨申請顯微鏡檢查的尿理化結果等信息是非常重要的。
未放冰箱而超過了兩小時的尿標本,不能接受作顯微鏡檢查,管形、紅、白細胞特別容易溶于低比重(<1.010)和堿性(pH>7)的尿標本中。
5.2顯微鏡檢查的類型
大多數尿沉渣檢查是用濕片和明視野顯微鏡檢查,染色能極大地聯系站長鑒定細胞和管型,通?;罴毎旧m于濕片染色包括SternheimerMalbin(結晶紫和沙黃O)和0.5%甲苯胺蘭(核染色)參閱廠家說明或適當參考特殊染色法。
檢查尿沉渣應使用現代的高質量的顯微鏡(見2.2.1節(jié))。相差顯微鏡可增強沉渣的鑒別,對異常沉渣大力推薦偏振光顯微鏡用以鑒別脂類和結晶。
用自動或半自動儀器取代手工顯微鏡方法檢測尿沉渣,該系統觀察標本不用手工制備樣本,并有助分析的分類,這些系統固有的特性可增加各次操作間的可重復性。
5.3顯微鏡檢查
下列要求適用于離心尿液
顯微鏡檢查結果的一致性是最基本的要求。一份書寫適當,且關于進行各程序的操作手冊,有助于保證實驗室內全體人員以相同方式進行顯微鏡檢查。每個人必須以同樣方法檢測沉渣,尋找存在的同樣沉渣物,并用同樣的標準去鑒定。
推薦實驗室使用標化的商品系統,它能報告每單位體積異常沉淀物含量以代替每高倍或低倍視野的個數,用于實驗室間的比較。實驗室內需要標化的特殊因素,及每個相關的值列于下。
商品系統檢測技術能提供相同的結果,這些技術可使用較小的量,并用不同的時間和速度進行檢測,特殊系統廠商的建議應遵守。
如下的要求是根據傳統方法學的知識定出的。
5.3.1檢測的尿量
在研究所內用于檢測的尿量必須標準化(如10-12及15ml是常用的量),如用更小的量(如兒科、新生兒),在最終報告時應注明。
5.3.2離心時間
為保證所有標本有同樣的沉淀物,推薦離心時間為5分鐘。
5.3.3離心速度
推薦的相對離心力(RCF)大約為400。如用每分鐘轉數(RPM)計算特定的離心機相對離心力(RCF)用下式計算:
RCF=1.118×10-5×r×N2
此處
RCF=相對離心力
r=半徑,單位:厘米(從旋轉中心到試管底部)
N=每分鐘轉數
5.3.4沉渣的濃縮因素
所有尿標本都應濃縮到相同體積,有標化的商品系統,使用特殊的試管或吸管,保留特定體積的尿沉渣。
5.3.5被檢沉渣的體積
有標化的商品系統提供,具有一定體積計數室的玻片,可裝填特定量的濃縮沉渣。
5.3.6玻片及蓋片
如使用玻璃的顯微鏡載片及蓋片,推薦下列的尿沉渣檢測和計算方法。
(1)測量已混勻準備離心的尿體積。
(2)標化離心條件(時間和速度)
(3)測量留在管內的尿沉渣體積
(4)檢測放到玻片上的沉渣量
(5)使用一標化的蓋片
(6)記錄顯微鏡高倍鏡的放大率
(7)記錄高倍視野的直徑
(8)計算并報告每毫升尿液的成份。例如用15ml尿
·高倍視野直徑=0.35mm
·高倍視野的面積=0.096mm2
·蓋片下的面積=484mm2
·=5040蓋片下的高倍視野
·測定0.020ml在玻片上的沉渣≈1.2ml尿
·5040高倍視野≈1.2ml尿≈4000高倍視野/ml
因此
(數量/高倍視野)×4000=計數值/ml
5.3.7報告格式
在一定指定研究所每一個做顯微鏡檢查的人都應采用相同的術語,報告格式和參考范圍。并于哪種有形成份應該報告和計數,應由各個實驗室根據病人群體和做試驗人員的職業(yè)熟練程度作出決定。5.4鏡檢內容的審察
在報告顯微鏡檢查前對所得資料包括理化結果進行重新審察是必不可少的,這些報告所包含的數據應能證實顯微鏡檢查結果,反之亦然。任何相互矛盾的結果都應在最終報告送交醫(yī)生前解決。
5.4.1可識別的沉渣內容
能用尿顯微鏡檢查識別的沉渣內容包括下列各項:
·上皮細胞移形(尿路上皮細胞)
鱗狀
腎小管
·造血細胞紅細胞
白細胞
·管形透明
顆粒
臘樣
細胞
紅細胞
白細胞
細菌
寬幅
脂肪
·微生物細菌酵母菌寄生蟲
·結晶無晶形草酸鈣尿酸三價磷酸鹽
·其它精子粘液污染物
為了鑒定其它成份,需要作進一步的顯微鏡檢查
5.4.2染色
蘇氏染色不能充分鑒定或確認尿沉渣成份,用一種或多種特殊染色代替,實驗室進行的完全濕顯微鏡尿分析將能鑒定或確認下列成份:
·脂肪油紅O染色
蘇丹III染色
·橢圓形脂體同上
·細菌巴氏染色革蘭氏染色
·嗜酸細胞漢氏染色
瑞氏染色
姬姆薩染色
瑞一姬染色
巴氏染色
·血鐵質普魯氏蘭
通常使用特殊染色需要進一步制備,濃縮涂片,印制或細胞離心后涂片,有助于鑒定前面提到的成份。
巴氏染色是選擇用于觀察腎小管上皮細胞,異常尿路上皮,腺細胞和鱗狀細胞和造血情況特征的方法,建議漢氏染色用于嗜酸細胞尿和可能的過敏性腎炎的觀察。
5.5顯微鏡檢查的質量保證
5.5.1程序的質量控制(QC)
所有的人員應按照寫出的同樣的方法,用同樣的儀器,每個工作日必須進行質量控制,可用市售的含有紅、白細胞的質控物。雙份尿試驗可用于管形、腎細胞和其它有形成份的精密度測定。
5.5.2報告的質量控制
所有人員應使用同樣的術語并以標準格式報告結果,超出預期質控結果應進行分析,并采取適當的措施,同時應作記錄。[dvnews_page=自動尿分析]
6.自動尿分析
自動尿分析系統將對用戶提供最大的便利,可提高重復性,并減少標本的制備過程。
半自動尿分析儀可用來進行顯微鏡檢查試紙條化學檢查和比重測定(應用諧波振蕩),該儀器可定量和標化尿沉渣的分析,一個層流無玻片顯微鏡,流體力學聚集染色尿用影象系統及高速影象處理系統進行觀察。該系統自動分類發(fā)現一些成份,以便由合格的操作人員確認,該方法可提高測定結果的重復性且使用簡便。
另外一些儀器是用設計好的試管離心標本,直接用顯微鏡觀察。此系統可簡化標本制備過程或減少需要的尿量。雖然這些儀器用不同的方法學,所有的方法都可對標本進行過篩,并有助于減少玻片,離心管的使用并減少尿標本的手工處理。
半自動和全自動試紙條判讀器,也用于試紙條化學和比重測定,參閱2.2.2節(jié)。
自動尿分析儀仍在使用的初期階段,隨著技術的進步,未來自動尿分析儀將繼續(xù)不斷發(fā)展。[dvnews_page=質量保證]
8.單次采集尿標本的收集和運送
收集和運送尿標本到臨床實驗室的方法指南是重要的,因為進行診斷和治療,可能依靠尿分析的結果。收集方法,容器,運送,貯存等條件的改變是有很大意義的,因為這些可能影響分析結果。
8.1概論
從病人收集標本,運送他們到實驗室和貯存室,這些總的步驟作為例子首先與實驗室以及負責這些步驟的臨床人員進行討論。對于購買得到的收集系統應遵守廠商的決議。容器的適用性及尿分析中清單的信息也要考慮。試劑和容器廠商關注的是最終使用他們的產品。
8.2尿標本的類型
8.2.1病人自己收集尿標本
下列類型的尿標本只需經指導后病人合作,不需直接的監(jiān)管即可收集。
·隨機尿
·第一次晨尿或8小時尿標本
·定時標本,包括24小時尿標本
8.2.2須監(jiān)管尿標本的收集
收集下列標本可能需要經過臨床實驗人員參加留取或培訓的人來留取。
·清潔中段尿
·尿培養(yǎng)標本
8.2.3聯系站長病人收集的尿標本
收集下列類型標本時需受培訓人員的主動參加:
·導尿標本
·恥骨上抽取標本
8.3病人的指導
8.3.1標本描述
尿標本除去導尿和恥骨上抽取所得外,可通過病人排尿取得,在此情況下不要污染陰道分泌物,包皮垢,陰毛,粉沫,油、洗滌劑和其它外源物質,標本不能從手紙回收。
8.3.2對病人的指導
很多標本可由臨床實驗室負責該步驟,簡單指導合作的病人留取。
需采取如下步驟:
(1)向病人強調洗手和全面清洗
(2)給病人貼好標簽的容器,要求他們核對瓶簽上的名字。
(3)給予口頭說明和書面的說明單或卡片或顯示尿收集方面更多信息的說明,給非講英語病人說明時用他們本國的語言。
教病人蓋好標本容器的蓋子防止?jié)B漏。
8.4收集標本
通常留取標本應在可供病人坐或站的隔離區(qū)域。
8.4.1隨機標本
隨機標本不在特定的時間收集,憋尿數小時后收集的尿標本對進行尿分析可能是需要的。
8.4.2第一次晨尿或8小時標本
第一次晨尿或8小時標本通常是病人經一夜睡眠起床后立即收集的標本。這也稱為過夜或清晨標本。另外8小時時間也可用于調節(jié)失眠癥,夜班工人和某些兒科情況。躺臥8小時后收集的標本用于證實病人是否有直立性蛋白尿。躺臥前立即將膀胱排空,于起身后收集尿標本,如此收集的標本是病人臥位時累積的尿液,任何在夜間排的尿都收集起來連同早晨第一次排的尿收集在一起。
8.4.3計時標本
計時標本在24小時期間特定的時間采集(如在早10點,或另外活動有關的特定時間,如進餐后2小時,或前列腺按摩后立即收集)。
8.4.424小時尿標本
如果需要測定24小時中溶質排渣總量,則需要嚴格留取24小時標本,因很多溶質呈現日間變化,最低濃度的兒茶酚胺,十七羥類固醇和電解質出現在清晨,而最高濃度出現在下午或稍后(24小時標本收集的更多信息,參閱9節(jié))。
8.4.5清潔標本
男性病人
(1)采尿前病人應先用肥皂或小布巾洗手
(2)指導未行包皮切除的病人退上包皮露出尿道口
(3)用消毒清潔的小布巾或類似物洗潔陰莖頭,從尿道口開始向上清潔。
(4)病人開始排尿時排第一部份到便盆或廁所,收集中段尿到適當未污染的容器中,多余的尿排入便盆或廁所。
(5)如病人不能執(zhí)行所推薦的方法在提供聯系站長時應戴手套。
女性病人
(1)采尿前病人應用肥皂或小布巾洗手。
(2)病人蹲踞于便盆或馬桶之上
(3)用消毒小布巾或類似物清洗尿道口和周圍處
(4)病人開始排尿時排第一部份于便盆或馬桶,中段收集于未受污染的(保持清潔)適當容器內。多余的尿排入便盆或廁所。
(5)如病人不能執(zhí)行推薦的方法給予聯系站長時,應戴手套。
8.4.6導尿標本
導尿標本是通過尿道將導管插入膀胱后收集的標本,從導出的尿流中選擇一部份作尿標本。
8.4.7恥骨上標本
恥骨上標本是通過下腹壁從膨脹的膀胱吸收尿液所收集的標本。
8.4.8微生物培養(yǎng)
如果采取了特殊防護措施(參閱8.6.4和8.7.3節(jié))
從8.4.5節(jié)到8.4.7節(jié)所介紹的任何標本均可作微生物培養(yǎng)。
8.5嬰幼兒標本的收集
用兒科和新生兒尿標本收集袋,此袋有低過敏原的膜粘于因太小而不能留尿標本的小兒身上。
8.5.1隨機標本的收集過程
收集兒童隨機標本,臨床人員需按如下內容操作:
(1)分開兒童的腿
(2)保證恥骨會陰部清潔、干燥、無粘液,勿施于粉、油或清洗液于皮膚上
(3)移去防護紙,暴露出粘連于袋上低過敏厚的膜
·對于女孩,拉緊會陰除去皮膚皺折,將粘膜緊壓于陰道四周,從皮膚連接處開始,粘膜在直腸與陰道之間一直向前。
·對于男孩,將袋連于陰頸,將片狀物壓緊于會陰。
·確保整個粘膜牢固地粘于皮膚,粘膜無皺折。
·年齡大的孩子可按8.4.5節(jié)所述成人的方法留取。
(4)定時察看容器(如每隔15分鐘)
(5)從病人處收回收集的標本并標明記號。
(6)如無進一步污染,將標本倒入收集杯,杯子貼上標簽,送去檢查。
8.5.2微生物培養(yǎng)標本的收集方法
為了收集兒童的微生物培養(yǎng)標本,臨床工作人員需作到下列各項:
(1)開始此步驟前,臨床工作人員須用肥皂或小布巾洗手。
(2)將兒童腿分開。
(3)用肥皂和水清洗恥骨和會陰區(qū),使之干燥,以保證該區(qū)清洗干燥,無殘余肥皂,勿施粉末,油或洗滌劑于皮膚。
(4)除去防護紙,暴露低敏原的膜粘連于袋子。
·對于女孩拉緊會陰,去除皮膚皺折,將粘膏緊壓于陰道四周,人皮膚連結處分開直腸與陰道一直前進。
·對于男孩將袋連于陰頸,將片狀物壓緊于會陰。
·確保整個粘膜片牢固粘于皮膚,粘膜片無皺折。
(5)定時觀察容器(如每隔15分鐘)
(6)收回收集的標本,并標明記號
(7)如無進一步污染,將標本倒入收集杯,蓋緊塑料蓋,杯子貼上標簽送檢。
8.6收集用容器
8.6.1構成
適用的初步收集容器和運送容器應該是清潔、防滲漏,無顆粒并由透明,易處理與尿成份不起反應的材料制造的。容器和蓋子應不含干擾物質如清潔劑,一些實驗室喜歡用無菌容器收集尿液。
8.6.2重復使用
不要重復使用標本容器
8.6.3容量
第一步收集的容器容積最少應有50ml,圓形開口,至少直徑為4公分,容器應有寬底,避免偶然倒出。小的特殊容器,用于年幼兒童收集標本。
8.6.4運送和貯存
運送時用的容器應有嚴密的蓋子,以防止運送時內容物漏出,蓋子應易于蓋上和取下。實驗室應保證標本識別方法的完善和標本從收到到分析的狀況是良好的。例如假定標本被存冰箱,實驗室應保證冰箱有良好的維護,且標本遲延遞送,不會影響標本的完善保存。
8.6.5無菌容器
偶爾一份尿標本送來作微生物研究和尿分析,如標本收集用于微生物研究需要有嚴密蓋子的無菌容器,標本應先送細菌研究,再送尿分析檢查,除非已用滅菌技術將標本分出一部份用于尿分析,如果標本收集和分析中間超過兩小時建議也采用無菌容器。
8.6.6標簽
容器應設計一種放冰箱時仍能粘牢的標簽的容器,瓶簽應包括充分的空白處,以填寫包括病人全名,特有的標識碼,標本收集日期,時間以及容器內如放有防腐劑寫出其名稱。某些實驗室可能需要的標簽包括另外的信息或條形碼。為了保證良好的檢測,標簽貼于容器上,不可貼在蓋子上。
8.6.7防腐劑
標本采集后2小時內不分析時用特別設計的化學防腐劑或介質運輸裝置進行尿標本防腐。如果分析延遲(采集后大于2小時)標本用于測試其它的不穩(wěn)定分析物,或標本被固定用于作微生物學研究時建議防腐。
8.7標本的運送和貯存
8.7.1運送
如標本被運送,容器需有嚴密的蓋子以防止內容物滲漏,如果恰當,采用第二個容器,防止可能濺出物的污染,迅速將尿標本送實驗室,以便快速檢測。運送實驗室應保證標本的完善保存。(如氣壓管道系統)
8.7.2冰箱
如標本不能立即運送和檢查,收集后應置于(2-8℃)冰箱。(參閱2.1.6節(jié)中更多的信息)
8.7.3微生物學檢查
如需要微生物學檢查,而標本不能立即送到實驗室,采取下列步驟:
(1)標本放于2-8℃冰箱至24小時,此時可得到有用的培養(yǎng)信息。
(2)一部份尿移于含檢菌防腐劑的運送管內,許多情況下是通用的。防腐的標本不需冰箱保存。
8.8標本的合格性和質量保證
8.8.1檢查
為了保證適合分析,實驗室收到尿標本后應進行檢查,保證標本的適用應考慮以下各點:
·申請單上與容器標簽上的信息一致
·標本收集和實驗室收到標本中間所花費的時間合乎要求
·如運送遲延,并要求微生物研究,標本有放冰箱或放有適當防腐劑
·容器及條件(如蓋著蓋子)合適
·量適當且不存在污染物
·放或未放化學防腐劑符合標本用途
8.8.2合格性
如標本不能達到合格標準,立即與主
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