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選修一生物技術(shù)實(shí)踐專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1.果酒制作的原理(1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過(guò)程用到的微生物是,它的代謝類型是,與異化作用有關(guān)的方程式有。生活狀態(tài):進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)生大量。(2)果酒制作條件傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所運(yùn)用的酵母菌的來(lái)源是。酵母菌生長(zhǎng)的最適溫度是;PH呈;(3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的緣由是:酒精發(fā)酵過(guò)程中,隨著的提高,紅色葡萄皮的進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈色。(4)在、的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖,而絕大多數(shù)其它微生物都因無(wú)法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。2.果醋的制作原理(1)果醋發(fā)酵菌種是,新陳代謝類型。(2)當(dāng)氧氣和糖源足夠時(shí)醋酸菌將糖分解成,當(dāng)糖源不足時(shí)醋酸菌將變?yōu)樵僮兂纱姿?,其反?yīng)式。3.操作過(guò)程應(yīng)留意的問(wèn)題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約的空間。(3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格限制在,時(shí)間限制在d左右,可通過(guò)對(duì)發(fā)酵的狀況進(jìn)行剛好的監(jiān)測(cè)。(4)制葡萄醋的過(guò)程中,將溫度嚴(yán)格限制在,時(shí)間限制在d,并留意適時(shí)在充氣。4.酒精的檢驗(yàn)(1)檢驗(yàn)試劑:。(2)反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在條件下,反應(yīng)呈現(xiàn)。5.制作果酒、果醋的試驗(yàn)流程選擇葡萄→→→→↓↓果酒果醋P4旁欄思索題1.你認(rèn)為應(yīng)當(dāng)先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么?應(yīng)當(dāng)先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,以避開(kāi)除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。2.你認(rèn)為應(yīng)當(dāng)從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?須要從發(fā)酵制作的過(guò)程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開(kāi)瓶蓋等。3.制作葡萄酒時(shí),為什么要將溫度限制在18~250C?制作葡萄醋時(shí),為什么要將溫度限制在30~溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖,因此須要將溫度限制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為30~350C,因此要將溫度限制在30~354.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過(guò)充氣口充氣?醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸時(shí)須要養(yǎng)的參加,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。P4:A同學(xué):每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋,不要完全揭開(kāi)瓶蓋;制醋時(shí),再將瓶蓋打開(kāi),蓋上一層紗布,進(jìn)行葡萄醋的發(fā)酵。來(lái)防止發(fā)酵液被污染,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌B同學(xué):分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接?充氣口:是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的;排氣口:是在酒精發(fā)酵時(shí)用來(lái)排出二氧化碳的;出料口:是用來(lái)取樣的。排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。運(yùn)用該裝置制酒時(shí),應(yīng)當(dāng)關(guān)閉充氣口;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。課題2腐乳的制作1.制作原理(1).經(jīng)過(guò)微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小分子的和,脂肪被分解成和,因而更利于消化汲取。(2).腐乳的發(fā)酵有多種微生物參加,如、、、等,其中起主要作用的是。它是一種絲狀,常見(jiàn)、、、上。(3).現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下,將優(yōu)良菌種干脆接種在豆腐上,這樣可以避開(kāi)其他菌種的,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。2.腐乳制作的試驗(yàn)流程:讓豆腐長(zhǎng)出→→→密封腌制。3.試驗(yàn)留意事項(xiàng)(1)在豆腐上長(zhǎng)出毛霉時(shí),溫度限制在,自然條件下毛霉的菌種來(lái)自空氣中的。(2)將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而,近瓶口的表層要。加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于,同時(shí)也能的生長(zhǎng)。鹽的濃度過(guò)低,;鹽的濃度過(guò)高,。(3)鹵湯中酒精的含量應(yīng)限制在左右,它能微生物的生長(zhǎng),同時(shí)也與豆腐乳獨(dú)特的形成有關(guān)。酒精含量過(guò)高,;酒精含量過(guò)低,。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,同時(shí)也有作用。(4)瓶口密封時(shí),最好將瓶口,防止瓶口污染。P6旁欄思索題1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)學(xué)問(wèn),說(shuō)明豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事?豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說(shuō)是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。2.王致和為什么要撒很多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來(lái)?鹽能防止雜菌污染,避開(kāi)豆腐腐敗。3.你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎?讓豆腐長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→密封腌制。P7旁欄思索題1.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來(lái)做腐乳?含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過(guò)高的豆腐制腐乳,不易成形。2.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)覺(jué)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害嗎?它的作用是什么?“皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形?!捌ぁ睂?duì)人體無(wú)害。P8練習(xí)1.腌制腐乳時(shí),為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量?為什么在接近瓶口的表面要將鹽厚鋪一些?越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。2.怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳?(可以不看)在酒和料上作變動(dòng)紅腐乳:又稱紅方,指在后期發(fā)酵的湯料中,配以著色劑紅曲,釀制而成的腐乳。白腐乳:又稱白方,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,不添加任何著色劑,湯料以黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳,在釀制過(guò)程中因添加不同的調(diào)味輔料,使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色,目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品種。青腐乳:又稱青方,俗稱“臭豆腐”,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳,具有特有的氣味,表面呈青色。醬腐乳:又稱醬方,指在后期發(fā)酵過(guò)程中,以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等)為主要輔料釀制而成的腐乳。課題3制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量1.乳酸菌代謝類型為,在狀況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,在、、、內(nèi)都有分布。常見(jiàn)的乳酸菌有和兩種,其中常用于生產(chǎn)酸奶。2.亞硝酸鹽為,易溶于,在食品生產(chǎn)中用作。一般不會(huì)危害人體健康,但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá)g時(shí),會(huì)引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá)到g時(shí),會(huì)引起死亡。在特定的條件下,如、和的作用下,會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)——亞硝胺,亞硝胺對(duì)動(dòng)物有致畸和致突變作用。3.泡菜制作大致流程:原料處理→→裝壇→→成品(1)配制鹽水:清水和鹽的比例為,鹽水后備用。(2)裝壇:蔬菜裝至?xí)r加入香辛料,裝至?xí)r加鹽水,鹽水要,蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中,保證壇內(nèi)環(huán)境。(3)腌制過(guò)程種要留意限制腌制的、和。溫度過(guò)高、食鹽用量不足10%、過(guò)短,簡(jiǎn)潔造成,。4.測(cè)亞硝酸鹽含量的原理是。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的進(jìn)行比較,可以大致出泡菜中亞硝酸鹽的含量。測(cè)定步驟:配定溶液→→制備樣品處理液→P9旁欄思索題:為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶?酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L(zhǎng),因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。P10旁欄思索題:1.為什么日常生活中要多吃簇新蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜?有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過(guò)久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。2.為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜?你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的?形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液養(yǎng)分豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。P12練習(xí):2.你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎?你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎?果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類,泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都奇妙的利用了自然菌種,都為特定的菌種供應(yīng)了良好的生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分困難的混合物。專題學(xué)問(wèn)歸納果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作原理果酒和果醋的設(shè)計(jì)制作裝置果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作原理果酒和果醋的設(shè)計(jì)制作裝置果酒和果醋的制作過(guò)程傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用腐乳的制作腐乳的制作腐乳的制作原理腐乳制作過(guò)程的限制條件制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量泡菜制作原理泡菜發(fā)酵條件亞硝酸鹽含量的測(cè)定專題二微生物的培育與應(yīng)用課題1微生物的試驗(yàn)室培育1.依據(jù)培育基的物理性質(zhì)可將培育基可以分為和。2.培育基一般都含有、、、四類養(yǎng)分物質(zhì),另外還須要滿意微生物生長(zhǎng)對(duì)、以及的要求。3.獲得純凈培育物的關(guān)鍵是。4.消毒是指滅菌是指5.日常生活中常用的消毒方法是,此外,人們也常運(yùn)用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用、等。常用的滅菌方法有、、,此外,試驗(yàn)室里還用或進(jìn)行消毒。6.制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的方法步驟是⑴,⑵,⑶,⑷,⑸。7.微生物接種的方法中最常用的是和。平板劃線是指。稀釋涂布平板法指。8.菌種的保藏:(1)臨時(shí)保藏:將菌種接種到試管的,在合適的溫度下培育,長(zhǎng)成后,放入冰箱中保藏,以后每3—6個(gè)月,轉(zhuǎn)移一次新的培育基。缺點(diǎn)是:保存時(shí)間,菌種簡(jiǎn)潔被或產(chǎn)生變異。(2)長(zhǎng)期保存方法:法,放在冷凍箱中保存。P15旁欄思索題:無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止試驗(yàn)室的培育物被其他外來(lái)微生物污染外,還有什么目的?無(wú)菌技術(shù)還能有效避開(kāi)操作者自身被微生物感染。P16旁欄思索題:請(qǐng)你推斷以下材料或用具是否須要消毒或滅菌。假如須要,請(qǐng)選擇合適的方法。(1)培育細(xì)菌用的培育基與培育皿(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管(3)試驗(yàn)操作者的雙手(1)、(2)須要滅菌;(3)須要消毒。P17倒平板操作的探討1.培育基滅菌后,須要冷卻到50℃可以用手觸摸盛有培育基的錐形瓶,感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么須要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰?通過(guò)灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培育基。3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝聚水珠,凝固后的培育基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基,造成污染。4.在倒平板的過(guò)程中,假如不當(dāng)心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來(lái)培育微生物嗎?為什么?空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培育微生物。P18平板劃線操作的探討1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍舊須要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避開(kāi)接種環(huán)上可能存在的微生物污染培育物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種干脆來(lái)源于上次劃線的末端,從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目漸漸削減,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能剛好殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避開(kāi)細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。3.在作其次次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端起先劃線?劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端起先,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步削減,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。P19涂布平板操作的探討涂布平板的全部操作都應(yīng)在火焰旁邊進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無(wú)菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作?應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)微環(huán)節(jié)保證“無(wú)菌”。例如,酒精燈與培育皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰四周;等等。P20六、課題成果評(píng)價(jià)1.培育基的制作是否合格假如未接種的培育基在恒溫箱中保溫1~2d后無(wú)菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培育基的制備是勝利的,否則須要重新制備。2.接種操作是否符合無(wú)菌要求假如培育基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形態(tài)、大小基本一樣,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說(shuō)明接種操作是符合要求的;假如培育基上出現(xiàn)了其他菌落,則說(shuō)明接種過(guò)程中,無(wú)菌操作還未達(dá)到要求,須要分析緣由,再次練習(xí)。3.是否進(jìn)行了剛好細(xì)致的視察與記錄培育12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,剛好視察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)覺(jué)這一點(diǎn),并能視察到其他一些微小的改變。這一步的要求主要是培育學(xué)生良好的科學(xué)看法與習(xí)慣。P20練習(xí)1.提示:可以從微生物生長(zhǎng)須要哪些條件的角度來(lái)思索。例如,微生物的生長(zhǎng)須要水、空氣、相宜的溫度,食品保存可以通過(guò)保持干燥、真空的條件,以及冷藏等方法來(lái)阻擋微生物的生長(zhǎng)。2.提示:可以從這三種培育技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。例如,這三種培育技術(shù)都須要為培育物供應(yīng)足夠的養(yǎng)分,但無(wú)土栽培技術(shù)的操作并不須要保證無(wú)菌的條件,而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無(wú)菌條件。3.提示:這是一道開(kāi)放性的問(wèn)題,答案并不惟一,重點(diǎn)在于激勵(lì)學(xué)生主動(dòng)參加,從不同的角度思索問(wèn)題。例如,正是由于證明白微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門(mén)獨(dú)立的學(xué)科;巴斯德試驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)1.尿素只有被分解成之后,才能被植物汲取利用。選擇分解尿素細(xì)菌的培育基特點(diǎn):惟一氮源,按物理性質(zhì)歸類為培育基。2..PCR()是一種在體外將。此項(xiàng)技術(shù)的自動(dòng)化,要求運(yùn)用耐高溫的DNA聚合酶。3試驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為供應(yīng)有利于生長(zhǎng)的條件(包括等),同時(shí)抑制或阻擋其他微生物生長(zhǎng)。4.選擇培育基是指。5.常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培育基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推想出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果精確,一般選擇菌落數(shù)在的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)公式是。利用稀釋涂布平板法勝利統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是。另外,也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。6.一般來(lái)說(shuō),統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目。這是因?yàn)椤R虼?,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是活菌數(shù)來(lái)表示。7.設(shè)置比照試驗(yàn)的主要目的是,提高試驗(yàn)結(jié)果的可信度。比照試驗(yàn)是。滿意該條件的稱為,未滿意該條件的稱為。8.試驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有:、、和,具體的試驗(yàn)步驟以剛好間支配等的綜合考慮和支配。9.不同種類的微生物,往往須要不同的培育和培育。在試驗(yàn)過(guò)程中,一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以。10.土壤有“”之稱,同其他生物環(huán)境相比,土壤中微生物、。11.土壤中的微生物約是細(xì)菌,細(xì)菌相宜在酸堿度接近潮濕土壤中生長(zhǎng)。土壤中微生物的數(shù)量不同,分別不同微生物采納的的稀釋度不同。12.一般來(lái)說(shuō),在肯定的培育條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的、、和等方面。13.在進(jìn)行多組試驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)留意做好標(biāo)記,其目的是。14.對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選,只是分別純化菌種的第一步,要對(duì)分別的菌種進(jìn)行一步的鑒定,還須要借助的方法。15.在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,細(xì)菌合成的將尿素分解成了。氨會(huì)使培育基的堿性,PH。因此,我們可以通過(guò)檢測(cè)培育基改變來(lái)推斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以為唯一氮源的培育基中加入指示劑。培育某種細(xì)菌后,假如PH上升,指示劑將變,說(shuō)明該細(xì)菌能夠。P22旁欄思索題1.想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推想出每克樣品中的菌落數(shù)?答:統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。P22兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培育集中,得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果:1.第一位同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230;2.其次位同學(xué)在該濃度下涂布了三個(gè)平板……第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板,沒(méi)有設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有勸服力。其次位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問(wèn)題,涂布了3個(gè)平板,但是,其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn),說(shuō)明在操作過(guò)程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,因此,不能簡(jiǎn)潔地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來(lái)求平均值。P22設(shè)置比照A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的說(shuō)明有兩種。一是由于土樣不同,二是由于培育基污染或操作失誤。原委是哪個(gè)緣由,可以通過(guò)試驗(yàn)來(lái)證明。試驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行試驗(yàn),假如結(jié)果與A同學(xué)一樣,則證明A無(wú)誤;假如結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存在操作失誤或培育基的配制有問(wèn)題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培育基在不加土樣的狀況下進(jìn)行培育,作為空白比照,以證明培育基是否受到污染。通過(guò)這個(gè)事例可以看出,試驗(yàn)結(jié)果要有勸服力,比照的設(shè)置是必不行少的。P24旁欄思索題為什么分別不同的微生物要采納不同的稀釋度?測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn),放線菌數(shù)約為477萬(wàn),霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。因此,為獲得不同類型的微生物,就須要按不同的稀釋度進(jìn)行分別,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地供應(yīng)選擇培育的條件。P25結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.培育物中是否有雜菌污染以及選擇培育基是否篩選出菌落比照的培育皿在培育過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng),說(shuō)明培育基沒(méi)有被雜菌污染。牛肉膏培育基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培育基的數(shù)目,說(shuō)明選擇培育基已篩選出一些菌落。2.樣品的稀釋操作是否勝利假如得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30~300的平板,則說(shuō)明稀釋操作比較勝利,并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。3.重復(fù)組的結(jié)果是否一樣假如學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)當(dāng)接近。假如結(jié)果相差太遠(yuǎn),老師須要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的緣由。P26練習(xí)2.提示:反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會(huì)死亡,因此分別其中能分解尿素的微生物除了須要準(zhǔn)備選擇培育基外,還應(yīng)參照厭氧菌的培育方法進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)。課題3分解纖維素的微生物的分別1.纖維素是類物質(zhì),是自然界中纖維素含量最高的自然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。2.纖維素酶是一種酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即、和,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成。正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,為微生物的生長(zhǎng)供應(yīng)養(yǎng)分,同樣,也可以為人類所利用。3.篩選纖維素分解菌可以用法,這種方法能夠通過(guò)干脆對(duì)微生物進(jìn)行篩選??梢耘c像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成,但并不和水解后的和發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生分解纖維素,從而使菌落四周形成。4.分別分解纖維素的微生物的試驗(yàn)流程圖如下:→→梯度稀釋→→。5.為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學(xué)進(jìn)行的試驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵和發(fā)酵。測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的進(jìn)行定量測(cè)定。P28旁欄思索題1.本試驗(yàn)的流程與課題2中的試驗(yàn)流程有哪些異同?本試驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)分如下。課題2是將土樣制成的菌懸液干脆涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培育基上,干脆分別得到菌落。本課題通過(guò)選擇培育,使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培育基上。其他步驟基本一樣。2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中找尋纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于一般環(huán)境。3.將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)當(dāng)埋進(jìn)土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,事實(shí)上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的相宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。P29旁欄思索題1.想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?你準(zhǔn)備選用哪一種方法?(兩種剛果紅染色法的比較)方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問(wèn)題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透亮圈較為模糊,因?yàn)榕嘤欣w維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透亮圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是:有些微生物具有降解色素的實(shí)力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培育過(guò)程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透亮圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。2.為什么選擇培育能夠“濃縮”所需的微生物?在選擇培育的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物得到快速繁殖,而那些不適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。P29六、課題成果評(píng)價(jià)1.培育基的制作是否合格以及選擇培育基是否篩選出菌落:比照的培育基在培育過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)則說(shuō)明培育基制作合格。假如視察到產(chǎn)生透亮圈的菌落,則說(shuō)明可能獲得了分解纖維素的微生物。2.分別的結(jié)果是否一樣:由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最簡(jiǎn)潔分別得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的分別結(jié)果。P30練習(xí)2.答:流程圖表示如下。土壤取樣→選擇培育(此步是否須要,應(yīng)依據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來(lái)確定)→梯度稀釋→將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培育基上→選擇單菌落→發(fā)酵培育專題學(xué)問(wèn)歸納結(jié)果分析與評(píng)價(jià)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)培育基培育基的類型培育基的養(yǎng)分物質(zhì)無(wú)菌技術(shù)避開(kāi)雜菌污染的方法試驗(yàn)室常用的消毒方法試驗(yàn)室常用的滅菌方法制備牛肉膏蛋白胨固體培育基計(jì)算稱量溶化滅菌倒平板純化大腸桿菌平板劃線法稱釋涂布法課題延長(zhǎng)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)篩選菌株P(guān)CR技術(shù)試驗(yàn)室中篩選微生物的原理選擇培育基統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目稀釋涂布平板法顯微鏡干脆計(jì)數(shù)法設(shè)置比照設(shè)置比照的目的比照試驗(yàn)的概念試驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣樣品的稀釋微生物的培育與視察無(wú)菌操作做好標(biāo)記規(guī)劃時(shí)間操作提示結(jié)果分析與評(píng)價(jià)課題延長(zhǎng)分解纖維素的微生物的分別纖維素與纖維素酶纖維素酶的組成成分纖維素酶分解纖維素的試驗(yàn)纖維素分解菌的篩選剛果紅染料篩選纖維素分解菌的依據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培育剛果紅染色法操作提示復(fù)習(xí)微生物技術(shù)選擇培育的操作方法結(jié)果分析與評(píng)價(jià)課題延長(zhǎng)專題三植物的組織培育技術(shù)課題1菊花的組織培育1.有某種生物全套的任何一個(gè)活細(xì)胞,都具有發(fā)育成的實(shí)力,即每個(gè)生物細(xì)胞都具有。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中并不表現(xiàn)出來(lái),這是因?yàn)樵跅l件下,通過(guò)基因的,構(gòu)成不同組織和器官。2.植物組織培育技術(shù)的應(yīng)用有:實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的;培育作物;制作種子;培育作物以及細(xì)胞產(chǎn)物的等。3.細(xì)胞分化:個(gè)體發(fā)育中細(xì)胞在上出現(xiàn)差異的過(guò)程。4.愈傷組織是通過(guò)形成的,其細(xì)胞排列,高度呈狀態(tài)的細(xì)胞。5.植物組織培育的過(guò)程可簡(jiǎn)潔表示為:(脫分化))(脫分化))()愈傷組織組織(生長(zhǎng))新個(gè)體6.材料:植物的種類、材料的和等都會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培育一般選擇作材料。7.養(yǎng)分:常用的培育基是培育基,其中含有的大量元素是,微量元素是,有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。8.激素:在培育基中須要添加和等植物激素,其、、等都影響結(jié)果。9.環(huán)境條件:PH、、等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為,溫度為,光照條件為。10.配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。運(yùn)用時(shí)依據(jù)母液的,計(jì)算用量,并加稀釋。11.配制培育基:應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液,并用定容到毫升。在菊花組織培育中,可以不添加,緣由是菊花莖段組織培育比較簡(jiǎn)潔。12.滅菌:實(shí)行的滅菌方法是。13.發(fā)酵操作13.1前期準(zhǔn)備:用消毒工作臺(tái),點(diǎn)燃酒精燈。留意全部接種工作都必需在酒精燈旁進(jìn)行,器械運(yùn)用前后都要用火焰灼燒。13.2接種操作:接種過(guò)程中插入外植體時(shí)朝上,每個(gè)錐形瓶接種個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相像之處是。13.3培育過(guò)程應(yīng)當(dāng)放在中進(jìn)行,并定期進(jìn)行消毒,保持相宜的和。13.4移栽前應(yīng)先打開(kāi)培育瓶的,讓其在培育間生長(zhǎng)幾日,然后用流水清洗根部培育基。然后將幼苗移植到等環(huán)境中生活一段時(shí)間,進(jìn)行壯苗。最終進(jìn)行露天栽培。課題成果評(píng)價(jià)(一)對(duì)接種操作中污染狀況的分析接種3~4d后,在接種操作中被雜菌污染的培育物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)學(xué)生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率,分析接種操作是否符合無(wú)菌要求。(二)是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化視察試驗(yàn)結(jié)果,看看是否培育出了愈傷組織,記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培育基后愈傷組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。(三)是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、比照與記錄做好統(tǒng)計(jì)和比照,填好結(jié)果記錄表,培育嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)看法。從試驗(yàn)的第一步起先就要求學(xué)生做好試驗(yàn)記錄,可以讓學(xué)生分組配制不同培育基,如誘導(dǎo)愈傷或干脆分化叢芽的培育基,然后做不同配方的比較。(四)生根苗的移栽是否合格生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培育基,又不能傷及根系。一般運(yùn)用無(wú)土栽培的方法。培育基質(zhì)要提前消毒,可以向培育基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的高錳酸鉀,并用塑料薄膜覆蓋12h。掀開(kāi)塑料薄膜后24h才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過(guò)渡幾天,等壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率,看看移栽是否合格。答案和提示(一)旁欄思索題1.你能說(shuō)出各種養(yǎng)分物質(zhì)的作用嗎?同專題2中微生物培育基的配方相比,MS培育基的配方有哪些明顯的不同?答:微量元素和大量元素供應(yīng)植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽;蔗糖供應(yīng)碳源,同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿意離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到肯定影響后所產(chǎn)生的特別養(yǎng)分需求。微生物培育基以有機(jī)養(yǎng)分為主。與微生物的培育不同,MS培育基則需供應(yīng)大量無(wú)機(jī)養(yǎng)分,無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必需的大量元素和微量元素兩大類。2.你準(zhǔn)備做幾組重復(fù)?你準(zhǔn)備設(shè)置比照試驗(yàn)嗎?答:老師可以支配學(xué)生分組,做不同的材料或配方,最終分別匯報(bào)成果。但每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置比照試驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過(guò)滅菌的裝有培育基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培育,用以說(shuō)明培育基制作合格,沒(méi)有被雜菌污染。(二)練習(xí)1.答:植物組織培育所利用的植物材料體積小、抗性差,對(duì)培育條件的要求較高。用于植物組織培育的培育基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培育物一旦受到微生物的污染,就會(huì)導(dǎo)致試驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。2.答:外植體的生理狀態(tài)是勝利進(jìn)行組織培育的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,簡(jiǎn)潔誘導(dǎo)脫分化和再分化。課題2月季的花藥培育1.小孢子母細(xì)胞(小孢子母細(xì)胞(2n)()時(shí)期(n)單核()期(n)雙核期()細(xì)胞核(n)()細(xì)胞核(n)()細(xì)胞(n)()細(xì)胞(n)()個(gè)精子(n)()分裂()分裂單核()期(n)()分裂育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)驗(yàn)、和等階段?;ǚ凼怯苫ǚ勰讣?xì)胞經(jīng)過(guò)而形成的,因此花粉是。在正常狀況下,一個(gè)小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生個(gè)精子;在一枚花藥中可以產(chǎn)生個(gè)花粉。產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑花藥中的花粉花藥中的花粉花藥中的花粉花藥中的花粉叢芽叢芽誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化()()
②誘導(dǎo)花粉植株能否勝利及誘導(dǎo)勝利率的凹凸,受多種因素影響,其中影主要因素是:和等。材料的選擇:①?gòu)幕ㄋ巵?lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(初花期、盛花期、晚花期)的花藥;②從花粉來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期)的花粉;③從花蕾來(lái)看,應(yīng)當(dāng)選擇(完全未開(kāi)放、略微開(kāi)放、完全盛開(kāi))的花蕾。選擇花藥時(shí)一般通過(guò)確定花粉發(fā)育時(shí)期,此時(shí)須要對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色,最常用的染色劑是和,它們分別可以將細(xì)胞核染成色和色。在運(yùn)用焙花青-鉻釩溶液時(shí),須要首先將花藥用處理20min。該試劑的配制方法是將按體積比為的比例混合勻稱。消毒后的花蕾,要在條件下除去花萼、花瓣。剝?nèi)』ㄋ帟r(shí),一是留意不要損傷花藥,緣由是;二是要徹底除去花絲,緣由是。剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒓唇臃N到上。每個(gè)培育瓶接種個(gè)花藥?;ㄋ幣嘤玫呐嘤桥嘤?,pH為,溫度為℃,幼苗形成之前(須要、不須要)光照。在花藥培育基中,用量最高的激素是;在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培育基中,用量最高的激素是;在誘導(dǎo)生根的培育基中,用量最高的激素是。培育20-30d后,花藥開(kāi)裂,長(zhǎng)出或釋放出胚狀體。前者還要轉(zhuǎn)移到上進(jìn)行分化培育成再生植株;后者要盡快并轉(zhuǎn)移到新的培育基上。通過(guò)愈傷組織形成的植株,經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)的改變,因而須要鑒定和篩選。課題成果評(píng)價(jià)(一)選材是否恰當(dāng)選材是否勝利是花藥培育勝利的關(guān)鍵。學(xué)生應(yīng)學(xué)會(huì)通過(guò)顯微鏡視察處于相宜發(fā)育期的花粉。(二)無(wú)菌技術(shù)是否過(guò)關(guān)假如出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,說(shuō)明某些操作步驟,如培育基滅菌、花蕾消毒或接種等有問(wèn)題。(三)接種是否勝利假如接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體,花藥培育的第一步就勝利了。要適時(shí)轉(zhuǎn)換培育基,以便愈傷組織或胚狀體進(jìn)一步分化成再生植株。答案和提示(一)旁欄思索題為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來(lái)困難?答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來(lái)困難。(二)練習(xí)1.答:F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。假如運(yùn)用常規(guī)育種方法,將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進(jìn)行測(cè)交,可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣,耗時(shí)也較長(zhǎng),須要至少三年的選種和育種時(shí)間。假如利用花藥培育的技術(shù),在F1代產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合,再將花粉植株進(jìn)行染色體加倍,就可以干脆得到紫色甜玉米的純合體(AAsusu)。這種方法可以大大縮短育種周期。2.答:植物組織培育技術(shù)與花藥培育技術(shù)的相同之處是:培育基配制方法、無(wú)菌技術(shù)及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于:花藥培育的選材特別重要,需事先摸索時(shí)期相宜的花蕾;花藥裂開(kāi)后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要?jiǎng)偤酶鼡Q培育基;花藥培育對(duì)培育基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥培育的難度大為增加。原理:細(xì)胞的全能性原理:細(xì)胞的全能性概念:基礎(chǔ):條件:植物組織培育的基本過(guò)程:外植體愈傷組織胚狀體幼苗脫分化再分化影響植物組織培育的因素:外植體的選擇養(yǎng)分、環(huán)境等植物激素的用法溫度、pH、光照等試驗(yàn)操作:制備MS培育基外植體消毒培育接種移栽栽培植物組織培育菊花的組織培育月季的花藥培育被子植物花粉的發(fā)育:花粉母細(xì)胞→減數(shù)分裂→小孢子母細(xì)胞→四分體時(shí)期→單核期→雙核期→精子產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑:花藥中的花粉花藥中的花粉胚狀體叢芽叢芽愈傷組織誘導(dǎo)生根移栽脫分化脫分化分化再分化影響花藥培育的因素:主要因素:材料的選擇與培育基的組成重要因素:選擇合適的花粉發(fā)育時(shí)期影響因素:親本植株的生長(zhǎng)條件、低溫處理和接種密度等試驗(yàn)操作:材料的消毒:材料的選取:確定花粉發(fā)育時(shí)期的方法接種和培育:鑒定和篩選:專題六植物有效成分的提取課題1植物芳香油的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1.植物芳香油的來(lái)源自然香料的主要來(lái)源是和。動(dòng)物香料主要來(lái)源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等,植物香料的來(lái)源更為廣泛。植物芳香油可以從大約50多個(gè)科的植物中提取。例如,工業(yè)生產(chǎn)中,玫瑰花用于提取,樟樹(shù)樹(shù)干用于提取。提取出的植物芳香油具有很強(qiáng)的,其組成也,主要包括及其思索:你能說(shuō)出一些用于提取某些植物芳香油的器官嗎?并分別可提取哪種芳香油?2.植物芳香油的提取方法植物芳香油的提取方法有、和等。具體采納那種方法要依據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)確定。是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是。依據(jù)蒸餾過(guò)程中的位置,可以將水蒸氣蒸餾法劃分為、和。其中,水中蒸餾的方法對(duì)于有些原料不適用,如柑橘和檸檬。這是因?yàn)榈葐?wèn)題。因此,柑橘、檸檬芳香油的制備通常運(yùn)用法。植物芳香油不僅,而且易溶于,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料,可以考慮運(yùn)用法。萃取法是將的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后,只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純凈的了。但是,用于萃取的有機(jī)溶劑必需,,否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。3、玫瑰精油的提取玫瑰精油是制作的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì),難溶于,易溶于,能隨一同蒸餾,通常采納法中的法。提取玫瑰精油的試驗(yàn)流程、、、、、。思索:在提取過(guò)程中,如何對(duì)乳濁液的處理和玫瑰液的回收?4、橘皮精油的提取從橘皮中提取的,主要成分為,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。橘皮精油主要貯存在部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解,運(yùn)用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問(wèn)題,所以一般采納法。具體的流程是、、、、、、。試驗(yàn)案例案例一
玫瑰精油的提取5月上、中旬是玫瑰的盛開(kāi)期,最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花瓣用清水沖洗,去掉上面的灰塵等雜質(zhì),瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,從玫瑰花中提取玫瑰精油可實(shí)行水中蒸餾法。本試驗(yàn)的具體操作步驟如下。1.稱取50g玫瑰花瓣,放入500mL的圓底燒瓶中,加入200mL蒸餾水。按教科書(shū)圖6-2所示安裝蒸餾裝置。蒸餾裝置包括:鐵架臺(tái)兩個(gè)、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸餾瓶、橡膠塞、蒸餾頭、溫度計(jì)、直型冷凝管、接液管、錐形瓶,以及連接進(jìn)水口和出水口的橡皮管。全部?jī)x器必需事先干燥,保證無(wú)水。整套蒸餾裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過(guò)加熱進(jìn)行蒸餾,中部將蒸餾物冷凝,右邊的部分用來(lái)接收。安裝儀器一般都依據(jù)自下而上、從左到右的依次。拆卸儀器的依次與安裝時(shí)相反。具體安裝依次和方法如下。(1)固定熱源──酒精燈。(2)固定蒸餾瓶,使其離熱源的距離如教科書(shū)中圖6-2所示,并且保持蒸餾瓶軸心與鐵架臺(tái)的水平面垂直。(3)安裝蒸餾頭,使蒸餾頭的橫截面與鐵架臺(tái)平行。(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上,通過(guò)橡皮管與水池相連;下端進(jìn)水口向下,通過(guò)橡皮管與水龍頭相連。(5)連接接液管(或稱尾接管)。(6)將接收瓶瓶口對(duì)準(zhǔn)尾接管的出口。常壓蒸餾一般用錐形瓶而不用燒杯作接受器,接收瓶應(yīng)在試驗(yàn)前稱重,并做好記錄。(7)將溫度計(jì)固定在蒸餾頭上,使溫度計(jì)水銀球的上限與蒸餾頭側(cè)管的下限處在同一水平線上。2.蒸餾裝置安裝完畢后,可以在蒸餾瓶中加幾粒沸石,防止液體過(guò)度沸騰。打開(kāi)水龍頭,緩緩?fù)ㄈ肜渌?,然后起先加熱。加熱時(shí)可以視察到,蒸餾瓶中的液體漸漸沸騰,蒸氣漸漸上升,溫度計(jì)讀數(shù)也略有上升。當(dāng)蒸氣的頂端達(dá)到溫度計(jì)水銀球部位時(shí),溫度計(jì)讀數(shù)急劇上升。在整個(gè)蒸餾過(guò)程中,應(yīng)保證溫度計(jì)的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴。限制蒸餾的時(shí)間和速度,通常以每秒1~2滴為宜。蒸餾完畢,應(yīng)先撤出熱源,然后停止通水,最終拆卸蒸餾裝置,拆卸的依次與安裝時(shí)相反。3.收集錐形瓶中的乳白色的乳濁液,向錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氯化鈉溶液,使乳化液分層。然后將其倒入分液漏斗中,用分液漏斗將油層和水層完全分開(kāi)。打開(kāi)頂塞,再將活塞緩緩旋開(kāi),放出下層的玫瑰精油,用接收瓶收集。向接收瓶中加入無(wú)水硫酸鈉,吸去油層中含有的水分,放置過(guò)夜。為了更好地將油、水兩層液體分別,操作時(shí)應(yīng)留意正確運(yùn)用分液漏斗。分液漏斗的運(yùn)用方法如下。(1)首先把活塞擦干,為活塞勻稱涂上一層潤(rùn)滑脂,留意切勿將潤(rùn)滑脂涂得太厚或使?jié)櫥M(jìn)入活塞孔中,以免污染萃取液。(2)塞好活塞后,把活塞旋轉(zhuǎn)幾圈,使?jié)櫥植紕蚍Q。并用水檢查分液漏斗的頂塞與活塞處是否滲漏,確認(rèn)不漏水后再運(yùn)用。(3)將分液漏斗放置在大小合適的、并已固定在鐵架臺(tái)上的鐵圈中,關(guān)好活塞。將待分別的液體從上部開(kāi)口處倒入漏斗中,塞緊頂塞,留意頂塞不能涂潤(rùn)滑脂。(4)取下分液漏斗,用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸,左手握住漏斗活塞處,大拇指壓緊活塞,將分液漏斗略傾斜,前后振蕩(起先振蕩時(shí)要慢)。(5)振蕩后,使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài),左手仍握在漏斗活塞處,下部管口指向無(wú)人處,用拇指和食指旋開(kāi)活塞,使其釋放出漏斗內(nèi)的蒸氣或產(chǎn)生的氣體,以使內(nèi)外壓力平衡,這一步操作也稱做“放氣”。(6)重復(fù)上述操作,直至分液漏斗中只放出很少的氣體時(shí)為止。再將分液漏斗猛烈振蕩2~3min,然后將漏斗放回鐵圈中,待液體靜置分層。案例二
橘皮精油的提取課前準(zhǔn)備在試驗(yàn)前一天,老師須要準(zhǔn)備簇新的、沒(méi)有霉?fàn)€的橘皮,用量可依據(jù)試驗(yàn)人數(shù)來(lái)確定。用清水沖洗橘皮,去掉灰塵等雜質(zhì),瀝干水分后,將橘皮攤放在干燥通風(fēng)處。將晾干的橘皮浸泡在pH大于12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%~8%的石灰水中,時(shí)間為16~24h,中間翻動(dòng)2~3次。浸泡好的橘皮呈黃色、無(wú)白芯、稍硬、脆而不斷、具有彈性。這樣的橘皮在壓榨時(shí)不易打滑,橘油的噴射力強(qiáng);壓榨后的殘?jiān)暑w粒狀,殘?jiān)械暮康?,黏稠度不太高,過(guò)濾時(shí)比較順當(dāng),不易堵塞篩孔。提取橘皮精油的具體步驟如下。1.將浸泡后的橘皮,用流淌的水漂洗,洗凈后撈起、瀝干。切記肯定要將橘皮徹底沖洗干凈。然后將橘皮粉碎至3mm大小,放入家用榨汁機(jī)或手動(dòng)壓榨機(jī)中粉碎。粉碎時(shí)加入與橘皮同質(zhì)量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25%的小蘇打和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的硫酸鈉溶液,并調(diào)整pH為7~8。2.在榨出的油水混合液中加入明礬,使之沉淀并變澄清,然后用布袋過(guò)濾,除去糊狀殘?jiān)T賹⒌玫降幕旌衔?,?000r/min~8000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行高速離心。在正常狀況下,離心后獲得的香精油將是澄清透亮的。3.分別出的香精油往往帶有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì),為了進(jìn)一步除去雜質(zhì),可以將分別的產(chǎn)品放在5℃~10課題成果評(píng)價(jià)(一)是否提取出了植物精油視察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油,從顏色、氣味等方面來(lái)評(píng)價(jià)所提取的精油的純度和質(zhì)量。從玫瑰花提取的芳香油是淺黃色至黃色的液體,并帶有甜韻的玫瑰香;從橘皮提取的橘皮精油無(wú)色透亮,具有迷人的橘香味。本課題只是對(duì)兩種精油進(jìn)行了初步的提取,其中仍舊含有大量的雜質(zhì)。(二)出油率的計(jì)算依據(jù)教科書(shū)供應(yīng)的公式計(jì)算出油率。假如出油率高,說(shuō)明試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)合理;假如出油率低,老師可以幫助學(xué)生從試驗(yàn)方法的選擇、試驗(yàn)過(guò)程的操作等各方面分析緣由,改進(jìn)后再作嘗試。答案和提示練習(xí)1.答:植物芳香油一般都是由2~3種芳香油混合調(diào)配而成的,其中的基底油常取自植物的種子或果實(shí),比如胡桃油、甜杏油。基底油與其他芳香油調(diào)配在一起,能夠加強(qiáng)功效。從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不行取代的原料,多用于制造高級(jí)香水等化妝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料,是純自然的護(hù)膚品,具有極好的抗蒼老和止癢作用,能夠促進(jìn)細(xì)胞再生、防止肌膚老化、平撫肌膚細(xì)紋,還具有使人放松、愉悅心情的功效。杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地溫柔、高滲透性的保濕劑。熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用,此外它還具有降壓、止痛、促進(jìn)細(xì)胞再生的功能,可以用于治療燙傷和蚊蟲(chóng)叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。檸檬精油取自檸檬果皮,具有消退驚慌、焦慮、激昂精神的作用,可用于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎,還具有促進(jìn)血液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的功效。茶樹(shù)精油具有簇新、猛烈的藥草香味,能改善毛孔堵塞,凈化肌膚,抗感染,對(duì)治療青春痘有奇效。它也能消退疲憊、緩解壓力。天竺葵精油能收斂皮膚,平衡、調(diào)理、潤(rùn)滑中干性皮膚和敏感性皮膚,改善橘皮樣表皮,還有助于復(fù)原精力,平緩心情。茉莉精油能防止肌膚老化,對(duì)中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕和滋潤(rùn)作用,尤其對(duì)女性的妊娠紋和內(nèi)分泌有獨(dú)特的改善效果。橙花精油具有清爽的水果香味,不但能使人冷靜,還能防止中干性肌膚的老化現(xiàn)象發(fā)生,給肌膚給予青春活力,促進(jìn)皮膚再生。2.建議:老師可以組織學(xué)生進(jìn)行一次社會(huì)調(diào)查,并要求學(xué)生寫(xiě)出具體的調(diào)查報(bào)告。課題2胡蘿卜素的提取【導(dǎo)學(xué)誘思】1.胡蘿卜素是,化學(xué)性質(zhì)比較,不溶于水,微溶于,易溶于等有機(jī)溶劑。依據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為α、β、γ三類。是其中最主要的組成成分。與β-胡蘿卜素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。等蔬菜是提取自然β-胡蘿卜素的原料。工業(yè)生產(chǎn)上,提取自然β-胡蘿卜素的方法主要有三種,一是從中提取,二是從中獲得,三是利用生產(chǎn)。本課題所供應(yīng)的方法只能提取胡蘿卜素的,若要獲得β-胡蘿卜素,還須要進(jìn)一步的。2.提取胡蘿卜素的試驗(yàn)流程有、、、、、。思索:影響萃取的因素有哪些?試驗(yàn)案例提取胡蘿卜素的主要步驟如下。1.選取500g簇新的胡蘿卜,用清水洗凈,瀝干、切碎,然后在40℃2.將樣品放入500mL圓底燒瓶中,加入200mL石油醚混勻,按教科書(shū)中圖6-7所示安裝萃取回流裝置,萃取30min,然后過(guò)濾萃取液,除去固體物質(zhì)。3.按教科書(shū)中圖6-2所示安裝蒸餾裝置,對(duì)萃取的樣品進(jìn)行濃縮。具體的操作步驟及留意事項(xiàng)見(jiàn)本專題課題1的案例1。4.收集接受器中的樣品,視察樣品的顏色和氣味,并通過(guò)紙層析進(jìn)行鑒定。層析時(shí)留意選擇干凈的濾紙,為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染,應(yīng)盡量避開(kāi)用手干脆接觸濾紙,可以帶手套進(jìn)行操作。點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)留意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直徑應(yīng)小于0.5cm),假如用吹風(fēng)機(jī)吹干,溫度不宜過(guò)高,否則斑點(diǎn)會(huì)變黃。將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時(shí)留意濾紙的兩邊不能相互接觸,以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快,溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。課題成果評(píng)價(jià)(一)確定提取胡蘿卜素的最佳方案在進(jìn)行本試驗(yàn)時(shí),老師可以將學(xué)生分組,每組可以采納不同的有機(jī)溶劑和時(shí)間進(jìn)行萃取,比較各組的試驗(yàn)結(jié)果,確定提取胡蘿卜素的最佳方案。(二)是否出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的層析帶假如萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶,說(shuō)明提取胡蘿卜素的試驗(yàn)勝利。由于提取物中含有雜質(zhì),萃取樣品的顏色可能比標(biāo)準(zhǔn)樣品的顏色淺,我們也可以通過(guò)顏色的比較,初步確定提取的胡蘿卜素的量。答案和提示(一)[資料一]萃取劑的選擇探討題1.乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取嗎?為什么?答:胡蘿卜素可溶于乙醇和丙酮,但它們是水溶性有機(jī)溶劑,因萃取中能與水混溶而影響萃取效果,所以不用它們作萃取劑。2.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳這幾種有機(jī)溶劑中,哪種最相宜用來(lái)提取胡蘿卜素?答:在這五種有機(jī)溶劑中,石油醚的沸點(diǎn)最高,在加熱萃取時(shí)不易揮發(fā),所以石油醚最相宜用作萃取劑。(二)練習(xí)1.答:列表分析如下。提取方法試驗(yàn)原理方法步驟適用范圍水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)1.水蒸氣蒸餾2.分別油層3.除水過(guò)濾適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油1.石灰水浸泡、漂洗2.壓榨、過(guò)濾、靜置3.再次過(guò)濾適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取有機(jī)溶劑萃取
使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油1.粉碎、干燥2.萃取、過(guò)濾3.濃縮適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶液中專題學(xué)問(wèn)歸納本專題主要是植物有效成分的濾取,主要談了植物芳香油的提取和胡蘿卜素的提取。來(lái)源:動(dòng)物和植物化學(xué)成分:萜類化合物及其衍生物植物芳香油的提取蒸氣蒸餾法:玫瑰精油的提取提取方法壓榨法:橘皮精油的提取植物有效成分的提取萃取法化學(xué)性質(zhì):比較穩(wěn)定,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有機(jī)溶劑胡蘿卜素的提取提取方法:有機(jī)溶劑萃取紙層析法:防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染,應(yīng)盡量避開(kāi)用手干脆接觸濾紙。點(diǎn)樣時(shí)應(yīng)留意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直徑應(yīng)小于0.5㎝),參考答案專題一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題1果酒和果醋的制作1.(1)酵母菌堿性厭氧型無(wú)氧時(shí)C12H22O11+H2O→2C6H12O6,有氧時(shí)C6H12O6→2C2H5OH+2CO2酒精(2)附著于葡萄品皮上的野生型酵母菌20℃酸性(3(4)缺氧酸性2.(1)醋酸菌需氧型(2)醋酸乙醇乙醛C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O3.(1)體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精(2)1/3(3)18~25℃10---12天(4)30—35℃7—84.(1)重鉻酸鉀(2)酸性灰綠色5.沖洗榨汁酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵課題2腐乳的制作1.(1).肽氨基酸甘油脂肪酸(2).青霉酵母曲霉毛霉毛霉真菌土壤水果蔬菜谷物(3).無(wú)菌
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