江蘇2023-2024學(xué)年高二期中測(cè)生物生物試題01（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1江蘇2023-2024學(xué)年高二期中測(cè)試卷01（考試時(shí)間：75分鐘試卷滿分：100分）一、單項(xiàng)選擇題：共14題，每題2分，共28分。每題只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意。1．傳統(tǒng)工藝釀酒過(guò)程中，會(huì)出現(xiàn)“釀酒不成反釀醋”的現(xiàn)象，即釀出的酒水變酸。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．酒和醋都是利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品，它們是我國(guó)傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分B．“酸酒”產(chǎn)生的過(guò)程中，糖類直接被分解成為乙酸C．“釀酒不成反釀醋”的原因可能是發(fā)酵條件控制出現(xiàn)問(wèn)題，如容器的密封性D．釀酒前將釀酒容器高溫消毒不一定能夠防止酒變酸〖答案〗B〖祥解〗參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。若氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧氣充足，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，乙醛變?yōu)榇姿??！驹斘觥緼、酒和醋都是利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的食品，它們是我國(guó)傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分，A正確；B、在釀酒的過(guò)程中糖類被酵母菌利用，由于缺少糖源，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛轉(zhuǎn)化為乙酸，B錯(cuò)誤；C、釀酒控制的發(fā)酵條件是無(wú)氧，溫度控制在18~30℃，釀醋控制的發(fā)酵條件是有氧，溫度控制在30—35℃，若釀酒過(guò)程容器的密封性出現(xiàn)問(wèn)題，醋酸菌大量繁殖就可能出現(xiàn)“釀酒不成反釀醋”，C正確；D、釀酒前將酒缸高溫消毒不一定能夠防止酒變酸，若發(fā)酵過(guò)程中沒(méi)有嚴(yán)格把控發(fā)酵條件，也可能導(dǎo)致酒變酸，D正確。故選B。2．下圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進(jìn)行篩選的過(guò)程示意圖。已知精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，但可作為鳥(niǎo)氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（

）

A．野生型菌液的培養(yǎng)皿中不會(huì)出現(xiàn)菌落B．乙培養(yǎng)基中加入了精氨酸，甲中未加入C．乙中的菌落是通過(guò)影印法接種獲得的D．甲中的菌落B為鳥(niǎo)氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種〖答案〗B〖祥解〗由圖分析可知，圖中①表示將紫外線照射處理的菌液接種在含有精氨酸的培養(yǎng)基上，②表示影印到不含精氨酸的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，圖甲中有A、B兩種菌落，圖乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株?！驹斘觥緼、液體培養(yǎng)基的作用是讓細(xì)菌快速大量繁殖，細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上才能形成菌落，A正確；B、圖示為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進(jìn)行篩選的過(guò)程示意圖，精氨酸依賴型菌株不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，因此A為野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株，乙培養(yǎng)基上沒(méi)有B菌落，據(jù)此推測(cè)乙培養(yǎng)基與甲相比缺少了精氨酸，B錯(cuò)誤；CD、乙中的菌落是通過(guò)影印法獲得的，菌落A是野生型菌種，菌落B為精氨酸依賴型菌株，B可作為鳥(niǎo)氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種，CD正確。故選B。3．黃河入?？谑徒到饩暮Y選是修復(fù)石油污染，保護(hù)黃河的重要工作，如圖表示篩選石油降解菌的過(guò)程。下列敘述正確的是（

）A．圖示接種方法為稀釋涂布平板法，據(jù)結(jié)果推測(cè)1g土壤中石油分解菌數(shù)最多為1.6×106個(gè)B．分離、純化石油分解菌時(shí)，還可采用平板劃線法且該方法也需要進(jìn)行③步驟操作C．稀釋涂布時(shí)，利用涂布器從盛有菌液的試管中蘸取菌液，進(jìn)行涂布D．進(jìn)行步驟⑤時(shí)，應(yīng)用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的石油降解菌，并檢測(cè)菌的數(shù)量和石油降解能力〖答案〗D〖祥解〗1、每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。2、常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法分離純化土壤中微生物的步驟為土壤取樣→溶化→梯度稀釋→涂布平板。3、由題圖可知，①稱取10g土壤；②10g土壤加入盛有90mL無(wú)菌水的錐形瓶中制備土壤懸浮液，稀釋了101；③進(jìn)行梯度稀釋，即依次稀釋至101、102、103稀釋度；④使用稀釋涂布平板法篩選菌株，接種了104稀釋度菌液0.1mL，長(zhǎng)出16個(gè)菌落；推測(cè)1g土壤中石油分解菌數(shù)=16÷0.1×104÷10=1.6×105個(gè)；⑤鑒別優(yōu)質(zhì)菌種，保存?zhèn)溆?，推測(cè)使用甘油管藏法或臨時(shí)保存法?！驹斘觥緼、根據(jù)題圖分析可知，圖示接種方法為稀釋涂布平板法，涂布平板的稀釋度為104，據(jù)結(jié)果推測(cè)1g土壤中石油分解菌數(shù)最少為16÷0.1×104=1.6×106個(gè)，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)題圖分析可知，③進(jìn)行梯度稀釋，雖然分離、純化石油分解菌時(shí)，可以采用稀釋涂布平板法，也可以采用平板劃線法，但平板劃線法不需要進(jìn)行梯度稀釋，也就是不需要進(jìn)行③步驟操作，B錯(cuò)誤；C、稀釋涂布時(shí)，先取少量菌夜（不超過(guò)0.1ml）滴加到培養(yǎng)基表面，再將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻，用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，而不是利用涂布器從盛有菌液的試管中蘸取菌液，進(jìn)行涂布，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)題圖分析可知，⑤鑒別優(yōu)質(zhì)菌種和保存?zhèn)溆?，無(wú)論使用甘油管藏法或臨時(shí)保存法，都要應(yīng)用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的石油降解菌，獲得菌液，而鑒別優(yōu)質(zhì)菌種就是要檢測(cè)菌的數(shù)量和石油降解能力，D正確。故選D。4．如圖為醬油的制作流程，其中米曲霉發(fā)酵過(guò)程的主要目的是使米曲霉充分生長(zhǎng)繁殖，大量分泌制作醬油所需的蛋白酶、脂肪酶等，該過(guò)程需要提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣。下列說(shuō)法正確的是（）A．大豆、小麥和麥麩都要蒸煮的目的是為了破壞酶的活性B．發(fā)酵罐發(fā)酵需要將罐內(nèi)的pH控制在中性或弱堿性條件下C．發(fā)酵罐發(fā)酵類型為有氧發(fā)酵，而發(fā)酵池發(fā)酵為無(wú)氧發(fā)酵D．米曲霉在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵的過(guò)程主要為產(chǎn)生大量醬油〖答案〗C〖祥解〗在提供主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供無(wú)氧的條件。【詳析】A、大豆、小麥和麥麩等原料中含有蛋白質(zhì)、糖類和脂肪等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，相當(dāng)于培養(yǎng)基，在制作醬油時(shí)需要經(jīng)蒸煮和適當(dāng)配比處理，其目的是滅菌和調(diào)整營(yíng)養(yǎng)配比從而滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求，A錯(cuò)誤；B、發(fā)酵罐發(fā)酵需要黃曲霉菌，培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵罐發(fā)酵主要是米曲霉起作用，類型為有氧發(fā)酵，而發(fā)酵池發(fā)酵是乳酸菌和酵母菌起作用，為無(wú)氧發(fā)酵，C正確；D、根據(jù)題意信息可知，米曲霉發(fā)酵過(guò)程的主要目的是使米曲霉充分生長(zhǎng)繁殖，大量分泌制作醬油所需的蛋白酶、脂肪酶等，該過(guò)程需要提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、通入空氣，D錯(cuò)誤。故選C。5．如圖為某二倍體植株花藥中未成熟的花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過(guò)程。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．過(guò)程①②表示脫分化，過(guò)程③表示再分化B．過(guò)程①②需要液體培養(yǎng)基C．過(guò)程①②③說(shuō)明花粉細(xì)胞具有全能性D．通過(guò)過(guò)程③獲得的完整植株自交后代不會(huì)發(fā)生性狀分離〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化（需光）過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株。圖中①表示脫分化，②③表示再分化。【詳析】A、離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化（需光）過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株，圖中過(guò)程①表示脫分化，②③表示再分化，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程①表示脫分化形成愈傷組織，②表示再分化形成叢芽，需要固體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程①、②、③是植物組織培養(yǎng)過(guò)程，由花粉細(xì)胞最終獲得了完整植物個(gè)體，說(shuō)明花粉細(xì)胞具有全能性，C正確；D、過(guò)程③獲得的完整植株屬于單倍體植株，高度不育，不能自交產(chǎn)生后代，D錯(cuò)誤。故選C。6．植株甲金花菜是一種多年生開(kāi)花植物，具有多種優(yōu)良性狀，另一種遠(yuǎn)緣植株乙青花菜存在抗除草劑基因，欲將植株乙細(xì)胞中抗除草劑基因引入植株甲中，進(jìn)行了如下操作。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）

A．過(guò)程A取頂芽細(xì)胞的操作有利于獲得脫毒苗B．過(guò)程B中常用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．兩個(gè)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁D．獲得的融合原生質(zhì)體需放在無(wú)菌水中以防雜菌污染〖答案〗D〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)是指將來(lái)源不同的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)?！驹斘觥緼、植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖）的病毒極少，甚至無(wú)毒，因此過(guò)程A取頂芽細(xì)胞的操作有利于獲得脫毒苗，A正確；B、過(guò)程B為誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，常用PEG促融，B正確；C、雜種細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生出細(xì)胞壁，C正確；D、獲得的融合原生質(zhì)體（無(wú)細(xì)胞壁）不能放在無(wú)菌水中，以防原生質(zhì)體吸水漲破，D錯(cuò)誤。故選D。7．下圖為小鼠細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程示意圖。下列敘述正確的是（

）

A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)至一定代數(shù)，所培養(yǎng)的細(xì)胞全部都會(huì)衰老死亡B．為了保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，可以添加適量的抗生素C．制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胃蛋白酶處理組織塊D．培養(yǎng)過(guò)程中，需要CO2濃度維持在5%左右，以促進(jìn)細(xì)胞呼吸〖答案〗B〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，在傳代培養(yǎng)的過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生癌變。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得細(xì)胞群或細(xì)胞產(chǎn)物。【詳析】A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)至一定代數(shù)，部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制地傳代下去，A錯(cuò)誤；B、抗生素能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，因此為了保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，可以添加適量的抗生素，B正確；C、制備細(xì)胞懸浮液時(shí)應(yīng)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，不能使用胃蛋白酶，因?yàn)槲傅鞍酌感枰谒嵝原h(huán)境下才能起作用，但這樣的環(huán)境不適于細(xì)胞生存，C錯(cuò)誤；D、恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，D錯(cuò)誤。故選B。8．為解決雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體丟失問(wèn)題，研究者將抗原刺激后的B淋巴細(xì)胞，用EBV（一種病毒顆粒）感染，獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞。EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對(duì)Oua敏感。骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對(duì)Oua不敏感。下圖表示操作過(guò)程。下列分析錯(cuò)誤的是（

）A．B淋巴細(xì)胞可從多次間歇注射某種抗原的動(dòng)物脾臟中獲得B．HAT培養(yǎng)基和Oua篩選去除的是未融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞C．雜交瘤細(xì)胞染色體丟失可能會(huì)導(dǎo)致抗體的產(chǎn)生能力下降D．圖中獲得的雜交瘤細(xì)胞需經(jīng)抗體檢測(cè)篩選后才可用于生產(chǎn)〖答案〗B〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、兩次篩選：篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群?！驹斘觥緼、對(duì)動(dòng)物進(jìn)行間歇注射抗原處理，以刺激動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；B淋巴細(xì)胞在骨髓中發(fā)育成熟，可分布于淋巴結(jié)和脾臟等處，故B淋巴細(xì)胞可從多次間歇注射某種抗原的動(dòng)物脾臟中獲得，A正確；B、據(jù)題意“EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞能夠在HAT培養(yǎng)基中存活，但對(duì)Oua敏感；骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對(duì)Oua不敏感”可知，HAT培養(yǎng)基去除的是未與EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞融合的骨髓瘤細(xì)胞和自身融合的骨髓瘤細(xì)胞，Oua篩選去除的是未與骨髓瘤細(xì)胞融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞和自身融合的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、抗體是由漿細(xì)胞分泌的，雜交瘤細(xì)胞若丟失來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體，可能會(huì)導(dǎo)致抗體產(chǎn)生能力下降，C正確；D、圖示獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的篩選，用專一抗體檢測(cè)呈現(xiàn)陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞才能直接用于生產(chǎn)單克隆抗體，D正確。故選B。9．動(dòng)物的某種退行性神經(jīng)疾病由基因t突變?yōu)榛騎導(dǎo)致。隨著生物工程技術(shù)的發(fā)展和基因編輯（CRISPR/Cas9）技術(shù)的出現(xiàn)，為治療該疾病提供了如下新思路。以下說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A．①過(guò)程需采用MⅡ期卵母細(xì)胞B．ES細(xì)胞能分化為動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞C．過(guò)程④的培養(yǎng)基中需要添加誘導(dǎo)分化因子D．移植的神經(jīng)干細(xì)胞會(huì)成為抗原，引發(fā)免疫排斥反應(yīng)〖答案〗D〖祥解〗核移植技術(shù)指的是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體?！驹斘觥緼、MII時(shí)期的卵母細(xì)胞體積大，易操作，細(xì)胞質(zhì)中含有促使細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件，所以體細(xì)胞核移植技術(shù)要選擇MII期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，A正確；B、ES細(xì)胞的細(xì)胞核大，核仁明顯，具有發(fā)育的全能性，可以誘導(dǎo)分化成動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞，B正確；C、在培養(yǎng)液中加入誘導(dǎo)分化因子，就可以誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞向不同類型的組織細(xì)胞分化，用于患者的組織器官移植，C正確；D、由于移植的神經(jīng)干細(xì)胞的遺傳物質(zhì)與患者相同，不會(huì)成為抗原，因而不會(huì)發(fā)生免疫排斥，可用于治療該退行性神經(jīng)疾病，D錯(cuò)誤。故選D。10．下圖為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的過(guò)程，相關(guān)敘述正確的是（

）A．嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是基因重組和細(xì)胞全能性B．過(guò)程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的滋養(yǎng)層C．過(guò)程②中可利用聚乙二醇誘導(dǎo)卵裂球細(xì)胞發(fā)生融合D．嵌合胚胎發(fā)育到囊胚時(shí)期細(xì)胞發(fā)生分化〖答案〗D〖祥解〗由圖可知，將白鼠的早期胚胎的卵裂球和黑鼠的早期胚胎的卵裂球放在一起培養(yǎng)，將形成嵌合胚胎，將嵌合胚胎發(fā)育至囊胚后移植到代孕母體內(nèi)發(fā)育，可形成嵌合鼠。【詳析】A、嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性，并沒(méi)有進(jìn)行基因重組，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程①中需利用相關(guān)技術(shù)去除早期胚胎外的透明帶，而滋養(yǎng)層屬于早期胚胎的一部分，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程②不需要誘導(dǎo)卵裂球細(xì)胞發(fā)生融合，C錯(cuò)誤；D、過(guò)程③操作前需對(duì)多只代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證受體與供體的生殖器官的生理變化是相同的，D正確。故選D。11．下列有關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的敘述，正確的是（）A．用限制性內(nèi)切核酸酶切割一個(gè)DNA分子中部，獲得一個(gè)目的基因時(shí)，被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)B．限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端可用DNA連接酶連接D．只有用相同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒〖答案〗B〖祥解〗限制酶的來(lái)源、作用及其結(jié)果：（1）來(lái)源：主要從原核生物中分離純化出來(lái)。（2）作用（特異性）：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端；特別注意：用限制酶切割DNA時(shí)，每切開(kāi)一個(gè)切口需要水解兩個(gè)磷酸二酯鍵?！驹斘觥緼、用限制性內(nèi)切核酸酶切割一個(gè)DNA分子中部，獲得一個(gè)目的基因時(shí)，需要切割目的基因的兩側(cè)，又因DNA為雙鏈結(jié)構(gòu)，因此要斷裂4個(gè)磷酸二酯鍵，即被水解的磷酸二酯鍵有4個(gè)，A錯(cuò)誤；B、限制酶具有專一性，限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大，B正確；C、—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端不同，分別為—CATG和GATC—，因此不能用DNA連接酶連接，C錯(cuò)誤；D、用不同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，若產(chǎn)生的黏性末端相同，則也能形成重組質(zhì)粒，D錯(cuò)誤。故選B。12．若要利用某目的基因（見(jiàn)圖甲）和P1噬菌體載體（見(jiàn)圖乙）構(gòu)建重組DNA（見(jiàn)圖丙），限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ（－A↓GATCT－），EcoRⅠ（－G↓AATTC－）和Sau3AⅠ（－↓GATC－）。下列分析合理的是（）A．用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體B．用BglⅡ和EcoRI切割目的基因和P1噬菌體載體C．用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體D．用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體〖答案〗D〖祥解〗限制酶選擇原則：（1）應(yīng)選擇切點(diǎn)位于目的基因兩端的，不能位于目的基因內(nèi)部，防止破壞目的基因，同時(shí)為避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化或隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。（2）根據(jù)質(zhì)粒特點(diǎn)確定限制酶種類具體原則：①保證切割的黏性末端與目的基因的相同，以便兩者能夠連接。②保證切割后的質(zhì)粒至少保留一個(gè)標(biāo)記基因，以便進(jìn)行篩選；保留復(fù)制原點(diǎn)，以便在受體細(xì)胞中維持穩(wěn)定和表達(dá)?！驹斘觥緼、用EcoRⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，產(chǎn)生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時(shí)可能會(huì)發(fā)生反向連接，A錯(cuò)誤；B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，這與A選項(xiàng)中僅用EcoRⅠ切割一樣，B錯(cuò)誤；C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端，可能會(huì)發(fā)生反向連接，C錯(cuò)誤；D、只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1質(zhì)粒載體，產(chǎn)生不同的黏性末端，防止發(fā)生反向連接，且這樣目的基因插入運(yùn)載體后，RNA聚合酶的移動(dòng)方向與圖丙實(shí)線方向相同，D正確。故選D。13．胰島素用于治療糖尿病，但胰島素注射后易在皮下堆積，需較長(zhǎng)時(shí)間才能進(jìn)入血液，進(jìn)入血液后又易被分解，因此治療效果受到影響。科研人員研制了速效胰島素，其生產(chǎn)過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．速效胰島素的生產(chǎn)需要用到蛋白質(zhì)工程和發(fā)酵工程B．大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用C．除人工合成DNA外，還可以通過(guò)定點(diǎn)突變技術(shù)獲得目的基因D．可以用Ca2+處理的方法直接將新的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中〖答案〗D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程的過(guò)程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）。蛋白質(zhì)工程得到的蛋白質(zhì)一般不是天然存在的蛋白質(zhì)?！驹斘觥緼、圖示的前半部分是利用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程，后半部分是利用發(fā)酵工程生產(chǎn)速效胰島素的過(guò)程，A正確；B、大腸桿菌是原核生物，沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體對(duì)胰島素原進(jìn)行加工，因此大腸桿菌合成的新的胰島素不能正常發(fā)揮作用，B正確；C、基因定點(diǎn)突變是指按照特定的要求，使基因的特定序列發(fā)生插入、刪除、置換、重排等變異，除人工合成DNA外，還可以通過(guò)定點(diǎn)突變技術(shù)獲得目的基因，C正確；D、可以用Ca2+處理的方法可以將含有新的胰島素基因的基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，D錯(cuò)誤。故選D。14．下列有關(guān)生物技術(shù)的安全性與倫理問(wèn)題的說(shuō)法正確的是（

）A．轉(zhuǎn)基因食品中的外源基因經(jīng)過(guò)食用后會(huì)進(jìn)入人體細(xì)胞并整合到人體的基因組中B．任何情況下我們必須堅(jiān)決抵制生物武器，防止生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散C．試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟，為保證嬰兒的健康可對(duì)植入前的胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷D．生殖性克隆和治療性克隆都涉及到核移植技術(shù)，中國(guó)政府不接受任何克隆試驗(yàn)〖答案〗B〖祥解〗目前對(duì)轉(zhuǎn)基因生物安全性的爭(zhēng)論主要是食物安全和環(huán)境安全，另外還有生物安全問(wèn)題，轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題。轉(zhuǎn)基因食品、產(chǎn)品上都要標(biāo)注原料來(lái)自轉(zhuǎn)基因生物。當(dāng)今社會(huì)的普遍觀點(diǎn)是反對(duì)生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，但不反對(duì)治療性克??；試管嬰兒可以設(shè)計(jì)嬰兒的性別，反對(duì)設(shè)計(jì)試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術(shù)選擇性設(shè)計(jì)嬰兒?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因食品中含有外源基因，但是食用后外源基因會(huì)被酶水解，不能進(jìn)入人體細(xì)胞并改變?nèi)梭w遺傳物質(zhì)，A錯(cuò)誤；B、在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器，反對(duì)生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散，以確保人類生存安全，B正確；C、試管嬰兒技術(shù)已經(jīng)成熟，設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)對(duì)植入前胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷，判斷其是否含有遺傳病基因或者異常染色體，C錯(cuò)誤；D、克隆人技術(shù)并未完全成熟，中國(guó)政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，但是不反對(duì)治療性克隆，D錯(cuò)誤。二、多項(xiàng)選擇題：共5題，每題3分，共15分。每題有不止一個(gè)選項(xiàng)符合題意。每題全選對(duì)者得3分，選對(duì)但不全的得1分，錯(cuò)選或不答的得0分。15．某種物質(zhì)A（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解A。研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株。圖中③將M中的菌液稀釋一定倍數(shù)后，取0.1mL涂布到平板上，初步估測(cè)搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個(gè)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A．實(shí)驗(yàn)時(shí)，淤泥及盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B．③接種方法為稀釋涂布平板法，涂布時(shí)用涂布器蘸取菌液均勻涂布于平板上C．乙平板中大小不同的菌落是分解菌分解能力不同導(dǎo)致的D．乙平板上菌落數(shù)平均為240個(gè)，菌液稀釋倍數(shù)為105〖答案〗ABC〖祥解〗分析題圖：①為淤泥取樣進(jìn)行稀釋，②為接種到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以S為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，其中Y為瓊脂，④為挑取單菌落接種，⑤在以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)一步篩選出高效降解A的菌株?！驹斘觥緼、實(shí)驗(yàn)時(shí)，從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株，則圖①為淤泥取樣進(jìn)行稀釋，可以取淤泥加無(wú)菌水制成菌懸液，淤泥中有菌種，因此不能進(jìn)行滅菌處理；盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，A錯(cuò)誤；B、識(shí)圖分析可知，③稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，因此步驟③的接種工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，應(yīng)該將菌液加入到培養(yǎng)基中，用涂布器進(jìn)行均勻涂抹，B錯(cuò)誤。C、乙平板中大小不同的菌落說(shuō)明分解菌對(duì)物質(zhì)A的分解能力不同，但是乙平板中可能還存在其他分解菌，也可能是不同分解菌所形成的菌落大小不同，C錯(cuò)誤。D、利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)平均為240個(gè)，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，根據(jù)搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個(gè)，在每個(gè)平板上涂布100μL（即0.1mL）稀釋后的菌液，則有240×a÷0.1=2.4×108，則稀釋倍數(shù)a=105，D正確。故選ABC。16．為了培育新型苜品種，科學(xué)家們用野生型清水紫花苜和里奧百脈根為材料進(jìn)行了實(shí)踐研究。研究的主要流程如圖所示，判斷以下說(shuō)法正確的是（

）

（注：IOA可抑制植物細(xì)胞呼吸第一階段，里奧百脈根原生質(zhì)體對(duì)其較為敏感。R-6G可阻止線粒體的呼吸作用，清水紫花蓿原生質(zhì)體對(duì)其較為敏感。）A．制備兩種原生質(zhì)體所需的酶溶液含纖維素酶和果膠酶B．本研究主要用到的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，目的是獲得雜種植株C．圖中①的完成依賴細(xì)胞膜的流動(dòng)性，②需要給予適當(dāng)?shù)墓庹?，③一般不需要光照D．用IOA和R-6G處理的目的是篩選出雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞能夠存活的原因是代謝途徑互補(bǔ)〖答案〗ABD〖祥解〗分析題圖：圖中①表示原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞以及雜種細(xì)胞的增殖，②表示脫分化過(guò)程，③表示再分化過(guò)程?！驹斘觥緼、由于植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性可知，制備兩種原生質(zhì)體所需的酶溶液含纖維素酶和果膠酶以去除細(xì)胞壁制備原生質(zhì)體，A正確；B、本研究所用技術(shù)是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，其中包括原生質(zhì)體融合和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，主要用到的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，目的是獲得雜種植株，B正確；C、圖中①示原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞的過(guò)程，該過(guò)程的完成依賴細(xì)胞膜的流動(dòng)性，②表示脫分化過(guò)程，脫分化需要避光處理，③表示再分化過(guò)程，再分化需要給予光照處理，C錯(cuò)誤；D、由題意可知，IOA可抑制植物細(xì)胞呼吸第一階段，里奧百脈根原生質(zhì)體對(duì)其較為敏感，R-6G可阻止線粒體的呼吸作用，清水紫花蓿原生質(zhì)體對(duì)其較為敏感，用IOA和R-6G處理的目的是篩選出雜種細(xì)胞，雜種細(xì)胞能夠存活的原因是代謝途徑互補(bǔ)，D正確。故選ABD。17．如圖所示為治療性克隆的基本過(guò)程，首先取病人的體細(xì)胞核，移植到去核的卵母細(xì)胞中，在早期胚胎形成后，從中分離獲得胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞），對(duì)ES細(xì)胞進(jìn)行基因修飾和定向分化處理，將定向分化后的細(xì)胞移植給病人，從而達(dá)到治療疾病的目的。下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂中期B．獲得圖中去核的卵母細(xì)胞時(shí)，可通過(guò)顯微操作去核C．圖中形成的器官用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)D．治療性克隆過(guò)程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)〖答案〗ABC〖祥解〗減數(shù)分裂是有性生殖的生物產(chǎn)生生殖細(xì)胞時(shí)，從原始生殖細(xì)胞發(fā)展到成熟生殖細(xì)胞的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程中DNA復(fù)制一次，細(xì)胞分裂兩次，產(chǎn)生的生殖細(xì)胞中染色體數(shù)目是本物種體細(xì)胞中染色體數(shù)目的一半?！驹斘觥緼、卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂時(shí)停止在減數(shù)第二次分裂中期，因此接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂中期，A正確；B、顯微鏡下可以通過(guò)顯微操作去核，B正確；C、圖中形成的器官來(lái)源于病人的細(xì)胞，用于移植，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，C正確；D、治療性克隆過(guò)程采用的技術(shù)有核移植技術(shù)，不用進(jìn)行胚胎移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選ABC。18．線粒體腦肌病是由線粒體DNA異常而引起的人類遺傳病，“三親嬰兒”技術(shù)的應(yīng)用可避免該遺傳病基因傳遞給子代，培育過(guò)程如下圖，下列相關(guān)敘述正確的是（

）

A．該過(guò)程涉及細(xì)胞核移植、體外受精、胚胎移植等技術(shù)B．卵母細(xì)胞在MⅡ期與獲能后的精子受精C．“三親嬰兒”胚胎早期發(fā)育依次經(jīng)歷了受精卵、囊胚、桑葚胚、原腸胚階段D．“三親嬰兒”的基因來(lái)自于自己的父親、母親和捐獻(xiàn)者〖答案〗AD〖祥解〗核移植技術(shù)指的是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體；用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物，原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性；動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植?！驹斘觥緼、試管嬰兒技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，圖示表示三親嬰兒的培育過(guò)程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了細(xì)胞核移植、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等技術(shù)，A正確；B、精子與卵子結(jié)合前，受精過(guò)程若想順利進(jìn)行必須滿足兩個(gè)條件：來(lái)自父方的精子要進(jìn)行精子獲能；來(lái)自母方的卵子要培養(yǎng)至培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，B錯(cuò)誤；C、胚胎發(fā)育的過(guò)程為受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體，所以哺乳動(dòng)物胚胎的早期發(fā)育依次經(jīng)歷桑葚胚、囊胚、原腸胚等不同發(fā)育階段，C錯(cuò)誤；D、分析題意可知，“三親嬰兒”的細(xì)胞核基因一半來(lái)自母親，一半來(lái)自父親，線粒體基因來(lái)自于卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者，D正確。故選AD。19．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個(gè)基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽（引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體）基因連接，構(gòu)建多基因表達(dá)載體（載體中部分序列如圖所示），利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化棉花，在棉花葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新的代謝途徑，提高了棉花的產(chǎn)量。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．四個(gè)基因都在棉花葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄、翻譯B．OsGLO1、EcCAT基因轉(zhuǎn)錄時(shí)以DNA的不同單鏈為模板C．應(yīng)選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的棉花細(xì)胞D．若轉(zhuǎn)基因棉花的產(chǎn)量提高則可確定四個(gè)基因在棉花中成功表達(dá)〖答案〗AC〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，標(biāo)記基因可便于目的基因的鑒定和篩選。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、四個(gè)基因在葉綠體外合成蛋白質(zhì)，由葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體，即這四個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程都在葉綠體外完成，A錯(cuò)誤；B、啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，圖中OsGLO1、EcCAT基因啟動(dòng)子的位置不同，因而，轉(zhuǎn)錄時(shí)以DNA的不同單鏈為模板，B正確；C、卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，沒(méi)有轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞的染色體DNA上，因此應(yīng)用潮霉素培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、通過(guò)導(dǎo)入四個(gè)基因，在棉花葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新的代謝途徑，提高了棉花的產(chǎn)量，據(jù)此推測(cè)，若轉(zhuǎn)基因棉花的產(chǎn)量提高則可確定四個(gè)基因在棉花中成功表達(dá)，D正確。故選AC。三、非選擇題：共5題，共57分。20．青梅果肉營(yíng)養(yǎng)豐富，成熟的青梅果實(shí)易腐爛，不易運(yùn)輸保存。進(jìn)行青梅果酒研究，既可提高青梅資源利用率，又可提高產(chǎn)品附加值。圖1為制作青梅果酒的簡(jiǎn)易裝置圖；由于青梅果肉含糖量低，往往在青梅果漿中加入白砂糖后再進(jìn)行釀制，圖2為在青梅果漿中添加白砂糖對(duì)酒精度和果酒感官評(píng)分的影響（感官評(píng)分越高，果酒的品質(zhì)越高）。(1)在青梅果酒發(fā)酵過(guò)程中，圖1裝置中的充氣口應(yīng)處于狀態(tài)，排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，目的是?？稍谒嵝詶l件下，用（填試劑名稱）檢測(cè)有無(wú)果酒產(chǎn)生。(2)生產(chǎn)酒和醋都需要嚴(yán)格篩選菌種和控制溫度條件。在酒精發(fā)酵時(shí)，使用的菌種為；在醋酸發(fā)酵時(shí)，使用的菌種為。從圖2可看出，青梅果酒釀制時(shí)果漿中初始糖濃度為時(shí)效果最佳，在此濃度之前，果酒酒精度隨初始糖濃度的增加而增加，原因是。（答出2點(diǎn)）在青梅果酒釀制過(guò)程中，若發(fā)酵時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，產(chǎn)酒率不再增加，但會(huì)增加被雜菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，若被醋酸菌污染，（填“會(huì)”或“不會(huì)”）經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生大量醋酸，理由是。（答出2點(diǎn)）〖答案〗（1）關(guān)閉避免空氣中其他微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置（或防止空氣中的微生物污染）重鉻酸鉀溶液（2）酵母菌醋酸菌20%糖類是主要的能源物質(zhì)，可為酵母菌的生長(zhǎng)、繁殖提供能源物質(zhì)，還可作為酒精發(fā)酵的原料不會(huì)酒精發(fā)酵是無(wú)氧環(huán)境，而醋酸發(fā)酵需要氧氣，且酒精發(fā)酵與醋酸發(fā)酵的溫度不同〖祥解〗1、果酒工藝生產(chǎn)流程：選料一沖洗一壓榨過(guò)濾一滅菌一接種一發(fā)酵一過(guò)濾一果酒。2、果酒制作過(guò)程中溫度控制在18-25℃，先通氣后密封，發(fā)酵10-12d；果醋制作過(guò)程中溫度控制在30-35℃，全程通氣，發(fā)7-8d?！驹斘觥浚?）果酒發(fā)酵是在無(wú)氧環(huán)境中進(jìn)行的，因此在青梅果酒發(fā)酵時(shí)，圖1裝置中的充氣口應(yīng)關(guān)閉，排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接，目的是避免空氣中其他微生物進(jìn)入發(fā)酵裝置(或防止空氣中的微生物污染)。酒精可用酸性重鉻酸鉀來(lái)檢測(cè)，顏色由橙色變成灰綠色，因此，可在酸性條件下，用重鉻酸鉀溶液與發(fā)酵液反應(yīng)檢測(cè)有無(wú)果酒產(chǎn)生。（2）酒精發(fā)酵的菌種是酵母菌，醋酸發(fā)酵的菌種是醋酸菌。從圖2曲線可看出，當(dāng)初始糖濃度為20%時(shí)，酒精度及果酒感官評(píng)分均最高，效果最佳。糖類是主要的能源物質(zhì)，在果汁中加入糖可為酵母菌的生長(zhǎng)繁殖提供能源物質(zhì)，另外，糖是發(fā)酵的原料，加入的糖可作為酒精發(fā)酵的原料，所以在初始糖度低于20%時(shí)果酒酒精度隨初始糖度的增加而增加。果酒發(fā)酵后期若被醋酸菌污染，仍不會(huì)經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生醋酸，因?yàn)榫凭l(fā)酵是無(wú)氧環(huán)境，而醋酸菌是需氧型生物，醋酸發(fā)酵需要氧氣，且酒精發(fā)酵與醋酸發(fā)酵的溫度不同，果酒制作過(guò)程中溫度比果醋制作的溫度低。21．土壤中的有些細(xì)菌可以利用石油中的多環(huán)芳烴，據(jù)此研究人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)從土壤中分離得到了能降解石油的細(xì)菌菌株M和N，實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基成分如下表所示：成分培養(yǎng)基1K2HPO4、MgSO4、NH4NO3、石油培養(yǎng)基ⅡK2HPO4、MgSO4、石油(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)，培養(yǎng)基通常采用的方法進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)基中提供碳源的是。(2)用稀釋涂布平板法對(duì)菌株M計(jì)數(shù)時(shí)，每毫升菌液中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)，每個(gè)平板上涂布0．1mL，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)約200個(gè)，則至少應(yīng)將菌株M的菌液稀釋倍。(3)為進(jìn)一步探究并比較M和N兩個(gè)菌株在不同條件下降解石油的能力，科研人員繼續(xù)進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：步驟一：將M、N兩個(gè)菌株分別接種在兩液體培養(yǎng)基Ⅰ中，得到M、N菌液。步驟二：另取培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ，添加瓊脂分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，在平板Ⅰ上制作兩個(gè)直徑相等的孔標(biāo)號(hào)ⅠA、ⅠB，平板Ⅱ重復(fù)以上的操作，兩個(gè)孔分別標(biāo)號(hào)ⅡA、ⅡB。步驟三：將等量等濃度的M菌液和N菌液分別接種到平板Ⅰ的ⅠA和ⅠB，平板Ⅱ也進(jìn)行同樣的操作。步驟四：相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，記錄平板Ⅰ、Ⅱ的透明圈大小如下表所示：菌株平板Ⅰ平板ⅡⅠAIBⅡAⅡB透明圈大小+++++++—注：“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示無(wú)透明圈。①本實(shí)驗(yàn)的自變量是。②平板上透明圈出現(xiàn)的原因是。③本實(shí)驗(yàn)可以得出的結(jié)論是?！即鸢浮剑?）高壓蒸汽滅菌石油（2）10?（3）培養(yǎng)基的成分和菌株的類型細(xì)菌將平板中的石油分解在有氮源的培養(yǎng)基上，M菌株降解石油的能力高于N菌株；在無(wú)氮源的培養(yǎng)基上，N菌株無(wú)降解石油的能力，但M菌株降解石油的能力減弱〖祥解〗1、選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，允許特定微生物生長(zhǎng)，阻止或抑制其他微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。2、培養(yǎng)基的成分主要包括碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水?！驹斘觥浚?）通常采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。表中只有石油含有碳元素，所以提供碳源的是石油。（2）若要在每個(gè)平板上涂布0.1ml稀釋液后的菌液，且每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò)200個(gè)，則搖瓶M中的菌液稀釋的倍數(shù)至少為2×107÷1000×100÷200=1×104倍。（3）①本實(shí)驗(yàn)中人為改變的量是培養(yǎng)基的成分和菌株的類型，所以培養(yǎng)基的成分和菌株的類型是本實(shí)驗(yàn)的自變量。②由于細(xì)菌將平板中的石油分解，則在平板上出現(xiàn)透明圈。③培養(yǎng)基Ⅰ和培養(yǎng)基Ⅱ的區(qū)別就是培養(yǎng)基Ⅰ有氮源，培養(yǎng)基Ⅱ沒(méi)有氮源，所以根據(jù)本實(shí)驗(yàn)中透明圈的大小可以判斷在有氮源的培養(yǎng)基上，M菌株降解石油的能力高于N菌株；在無(wú)氮源的培養(yǎng)基上，N菌株無(wú)降解石油的能力，但M菌株降解石油的能力減弱。22．中醫(yī)治療疾病多用復(fù)方，三白草和魚(yú)腥草是同科不同屬的兩種常見(jiàn)藥用植物，二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被用作“藥對(duì)”，在我國(guó)全年可采收兩次。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到個(gè)體生長(zhǎng)或生產(chǎn)過(guò)程，并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，具體操作如圖1。

(1)取魚(yú)腥草和三白草充分展開(kāi)的嫩葉片，用用70%乙醇和2%的次氯酸鈉對(duì)其（填填“消毒”或“滅菌”），每次處理后用（填“蒸餾水”或“無(wú)菌水”）沖洗葉片5次，去除殘留于葉片上的藥劑，處理后的葉片撕去表皮，切成1mm薄片備用。(2)過(guò)程①通過(guò)酶解法去除獲取原生質(zhì)體，并向三白草和魚(yú)腥草細(xì)胞酶解液中分別加入紅、綠熒光色素（帶熒光色素的原生質(zhì)體仍能融合和再生）。過(guò)程②利用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合，隨后在熒光顯微鏡下選擇帶的雜種原生質(zhì)體。(3)科研人員研究不同的原生質(zhì)體密度對(duì)三白草和魚(yú)腥草原生質(zhì)體融合率的影響，結(jié)果如圖2。

注：雙核異核融合體指具有兩個(gè)不同來(lái)源細(xì)胞核的細(xì)胞由圖2可知促進(jìn)三白草和魚(yú)腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為，高于此密度不利于形成雙核異核融合體的原因是。此外，影響原生質(zhì)體融合的因素還應(yīng)包括等。(4)通常情況下，能增加免疫器官的重量表明該物質(zhì)具有一定的增強(qiáng)免疫力的作用。為判斷融合體對(duì)動(dòng)物免疫力的影響，科研人員取同種小鼠30只，雌雄各半，隨機(jī)均分為三組，實(shí)驗(yàn)處理如下表。組別A組B組C組（空白對(duì)照組）實(shí)驗(yàn)處理三白草和魚(yú)腥草雜種愈傷組織的蒸餾水提取物三白草和魚(yú)腥草直接混合后的蒸餾水提取物每天一次等量灌胃，連續(xù)一周，檢測(cè)各組小鼠的胸腺重量①在表格中將C組的實(shí)驗(yàn)處理補(bǔ)充完整。②若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為，則支持利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍提前并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)?！即鸢浮剑?）消毒無(wú)菌水（2）細(xì)胞壁PEG/聚乙二醇紅、綠熒光色素（3）1×106個(gè)/mL密度過(guò)高，原生質(zhì)體的相互黏連、聚集作用過(guò)強(qiáng)，PEG的誘導(dǎo)作用受到抑制PEG的濃度（4）等量的蒸餾水A、B兩組的胸腺重量相同且都大于C組〖祥解〗分析圖可知，圖1表示三白草和魚(yú)腥草體細(xì)胞雜交過(guò)程，其中①為去除細(xì)胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③為脫分化形成愈傷組織，④為提取代謝產(chǎn)物。圖2柱形圖中，隨著原生質(zhì)體密度增大，雙核異核融合體比例先升高后降低，其中在1×106個(gè)/mL1時(shí)，比例最高?！驹斘觥浚?）為防止微生物污染，應(yīng)取魚(yú)腥草和三白草充分展開(kāi)的嫩葉片，用70%乙醇和2%的次氯酸鈉對(duì)其消毒；為防止雜菌污染，每次處理后用無(wú)菌水沖洗葉片5次，去除殘留于葉片上的藥劑。（2）據(jù)圖示可知，過(guò)程①通過(guò)酶解法去除細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體，需要用纖維素酶、果膠酶處理破壞細(xì)胞壁；過(guò)程②誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法有利用化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG（（聚乙二醇））誘導(dǎo)融合；由于三百草細(xì)胞酶解液中加入了紅熒光色素，魚(yú)腥草細(xì)胞酶解液中加入了綠熒光色素，所以雜種原生質(zhì)體應(yīng)該帶紅、綠熒光色素。（3）由圖2柱形圖可知，在密度為1×106個(gè)/mL時(shí)，雙核異核融合體比例最高，說(shuō)明促進(jìn)三白草和魚(yú)腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為1×106個(gè)/mL；高于此密度不利于形成雙核異核融合體，因?yàn)槊芏冗^(guò)高，原生質(zhì)體的相互黏連、聚集作用過(guò)強(qiáng)，PEG的誘導(dǎo)作用受到抑制；此外，影響原生質(zhì)體融合的因素還應(yīng)包括PEG的濃度、培養(yǎng)液的滲透壓等。（4）①本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖桥袛嗳诤象w對(duì)動(dòng)物免疫力的影響，因?yàn)镃組為對(duì)照組，因此根據(jù)對(duì)A、B兩組的處理，C組應(yīng)用等量的蒸餾水每天一次等量灌胃，連續(xù)一周。②若實(shí)驗(yàn)結(jié)果為A、B兩組的胸腺重量相同且都大于C組，則支持利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍提前并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)。23．CD47是一種免疫抑制蛋白，腫瘤細(xì)胞通過(guò)過(guò)量表達(dá)CD47抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用以實(shí)現(xiàn)免疫逃逸。抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，其制備流程如下圖甲所示。(1)制備過(guò)程中需要用CD47對(duì)小鼠進(jìn)行多次處理，目的是。為保證細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)菌、無(wú)毒，需要進(jìn)行的相關(guān)操作是。(2)下圖乙表示核苷酸合成的兩條途徑，物質(zhì)A可以阻斷全合成途徑，轉(zhuǎn)化酶和激酶是補(bǔ)救合成途徑所必需的兩種酶。正常細(xì)胞中含有轉(zhuǎn)化酶和激酶，骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶。已知圖甲的篩選1利用的是加入了H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”，其篩選得到是細(xì)胞，該細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基中存活并增殖的原因是；經(jīng)篩選2獲得的細(xì)胞的特點(diǎn)是。(3)為驗(yàn)證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，研究人員設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)組：將抗CD47的單克隆抗體加入巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系中，檢測(cè)巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)（與被吞噬腫瘤細(xì)胞的比例呈正相關(guān)）；對(duì)照組為，預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果：?！即鸢浮剑?）獲得較多的已免疫（對(duì)CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理；保證在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作；定期更換培養(yǎng)液（2）雜交瘤HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細(xì)胞含有從B細(xì)胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過(guò)補(bǔ)救合成途徑來(lái)合成核苷酸，同時(shí)又具備骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體（3）不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系對(duì)照組巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于實(shí)驗(yàn)組〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥浚?）用CD47（抗原）對(duì)小鼠進(jìn)行多次處理，可以獲得較多的已免疫（對(duì)CD47產(chǎn)生免疫）的B淋巴細(xì)胞；對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理；保證在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作；定期更換培養(yǎng)液，可以保證細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)菌、無(wú)毒。（2）在HAT培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)的為雜交瘤細(xì)胞；HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，雜交瘤細(xì)胞含有從B細(xì)胞獲得的轉(zhuǎn)化酶和激酶，可以通過(guò)補(bǔ)救合成途徑來(lái)合成核苷酸，同時(shí)又具備骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖的特性，因此能在HAT培養(yǎng)基中存活和增殖；篩選2是為了得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47的抗體的細(xì)胞。（3）為驗(yàn)證抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，實(shí)驗(yàn)組為將抗CD47的單克隆抗體加入巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系中，對(duì)照組為不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)系；由于抗CD4