儀器分析：第五章 毛細(xì)管電泳 應(yīng)用

*第五章

毛細(xì)管電泳5.5.1

離子化合物的分析5.5.2

在生物化學(xué)中的應(yīng)用5.5.3

在手性化合物分離中的應(yīng)用第五節(jié)

高效毛細(xì)管電泳的應(yīng)用capillaryelectrophoresis,CEApplicationofHPCE*5.5.1

離子化合物的分析1.陽離子分析

遷移方向和電滲流方向一致；

4.5min內(nèi)分離了24種金屬離子；陽極進(jìn)樣，陰極檢測(cè)；具有很高的靈敏度。*2.陰離子分析

陰離子電泳方向和電滲流方向相反、速率接近，分析時(shí)間長(zhǎng)、效率低。質(zhì)量小、電荷密度大的離子如：SO42-，Cl-，F(xiàn)-等，電泳速率大于電滲流，陽極端流出，在陰極端無法檢測(cè)。加入電滲流改性劑，十六烷基三甲基溴化胺等，使電泳方向和電滲流方向一致，可在3.1min內(nèi)分離36種陰離子。陰極進(jìn)樣，陽極檢測(cè)。*5.5.2

在生物化學(xué)中的應(yīng)用

檢測(cè)體液或細(xì)胞中某些代謝產(chǎn)物的分析。尿液中的氨基酸含量作為臨床診斷糖尿病的輔助手段。采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳方式，在11min內(nèi)分離17種藥物。*采用MEKC模式，鑒定違禁藥物，效果優(yōu)于HPLC法。*氨基酸與蛋白質(zhì)分析采用MEKC模式，在25min內(nèi)分離了23種丹?；被?；HPCE可取代傳統(tǒng)的氨基酸分析儀。問題：吸附和檢測(cè)。*蛋白質(zhì)分析*核酸分析及DNA測(cè)序重要分析手段。圖為酶解的雙螺旋DNA限制性片段的分離。*5.5.3

手性化合物分析

合成獲得單一手性化合物相當(dāng)困難。在528種手性合成藥物中，61種以單一對(duì)映體形式銷售，其他為外消旋體。檢測(cè)分析也相當(dāng)困難。研究熱點(diǎn)。

R-型反應(yīng)停是安眠藥，S-型致胎兒畸形。

HPCE分離分析手性化合物的方法：加入手性選擇劑，形成配合物的穩(wěn)定常數(shù)有差異，結(jié)合HPCE的高效率。常用手性選擇劑：環(huán)糊精及其衍生物，手性冠醚，手性表面活性劑（氨基酸衍生物，膽酸鈉，?；敲撗跄懰峒捌溻c鹽，低聚糖等天然手性表面活性劑）。*手性化合物分析利用手性冠醚的CZE模式分離

利用手性膠束的MEKC模式分離

*手性化合物分析Regan等利用CE研究了生物技術(shù)制備BCH-189（抗愛滋病藥物）過程中的某些反應(yīng)，如其中的有效成分（+）-BCH-189是在胞苷脫氨酶催化下經(jīng)生物轉(zhuǎn)化方法合成的，轉(zhuǎn)化過程持續(xù)51h，可采用CE法分析監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)化過程中手性對(duì)映體轉(zhuǎn)化（分離的手性選擇試劑為二甲基-β-CD）。對(duì)映異構(gòu)體隨時(shí)間轉(zhuǎn)化過程的HPCE分析監(jiān)測(cè)譜圖

*新進(jìn)展（1）微型化整體化學(xué)分析系統(tǒng)（TAS）及TAS微型化在硅片上光刻出矩形槽作為毛細(xì)管，理論塔板數(shù)105/m。（2）聯(lián)用儀器CE-MS。（3）陣列毛細(xì)管凝膠電泳

應(yīng)用于人類基因DNA測(cè)序；5～10萬個(gè)基因，30億個(gè)堿基對(duì)，目前最有效的DNA序列分析儀，10h/次；可同時(shí)電泳24個(gè)試樣；速度1200堿基對(duì)/h，提高速度！100支毛細(xì)管陣列電泳；速度280堿基對(duì)/(h·支)。*請(qǐng)選擇內(nèi)容結(jié)束

第六章5.1

毛細(xì)管電泳的基本原理

5.2

高效毛細(xì)