血液分析儀臨床應(yīng)用

關(guān)于血液分析儀臨床應(yīng)用第一部分血液學(xué)基礎(chǔ)1.血液流經(jīng)全身各臟器，是人體最大的循環(huán)系統(tǒng)；2.為全身提供氧氣和營養(yǎng)成分；3.帶走二氧化碳和代謝產(chǎn)物4.有動脈和靜脈之分第2頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血液成分EDTA-K2抗凝血

血漿55%

水90%

養(yǎng)分

蛋白質(zhì)

激素

……

細(xì)胞45%

紅細(xì)胞

白細(xì)胞 血小板第3頁,共64頁，2024年2月25日，星期天紅細(xì)胞1.紅細(xì)胞為雙凹圓盤狀；2.內(nèi)含血紅蛋白；3.為機(jī)體組織攜帶氧氣和養(yǎng)分；4.正常男性為：4.0-5.5×1012/L

女性為：3.5-5.0×1012/L細(xì)胞膜有脆性，易破碎，因而溶血劑（表面活性劑）可溶解紅細(xì)胞第4頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血紅蛋白1.血紅蛋白為紅細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，具有攜帶氧氣的位點(diǎn)；2.其功能為攜帶氧氣；3.當(dāng)紅細(xì)胞被溶解后，血紅蛋白釋放出；4.正常人含量為：

110-170g/L血紅蛋白有粘性，容易附著第5頁,共64頁，2024年2月25日，星期天

血小板血小板功能為參與止血正常參考為：

100-300×109/L

血小板由于本身的功能特性，容易受到刺激后聚集，因而在臨床檢測中最容易受影響血小板第6頁,共64頁，2024年2月25日，星期天白細(xì)胞功能為抵抗機(jī)體免受感染正常參考為：4-10×109/L可分為5個亞群，各自行使獨(dú)立的功能具有細(xì)胞核，白細(xì)胞第7頁,共64頁，2024年2月25日，星期天白細(xì)胞亞群1.中性粒細(xì)胞2.淋巴細(xì)胞3.單核細(xì)胞4.嗜酸細(xì)胞5.嗜堿細(xì)胞12345第8頁,共64頁，2024年2月25日，星期天庫爾特原理負(fù)壓血細(xì)胞懸液外電極內(nèi)電極小孔小孔管小孔電流樣品杯小孔近觀庫爾特原理三要素：小孔、負(fù)壓、電極檢測：細(xì)胞大小和數(shù)量第9頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第二部分血細(xì)胞直方圖在小孔計(jì)數(shù)時儀器獲得細(xì)胞的數(shù)量和大小(體積)的信息,再進(jìn)一步分類整理,得到在各種不同體積下相應(yīng)的數(shù)量,反應(yīng)在坐標(biāo)上坐標(biāo)橫軸表示細(xì)胞大小,以fl(飛升)為單位坐標(biāo)縱軸表示相應(yīng)數(shù)量第10頁,共64頁，2024年2月25日，星期天三分類之白細(xì)胞直方圖第11頁,共64頁，2024年2月25日，星期天紅細(xì)胞直方圖典型的紅細(xì)胞直方圖上，可以看到兩個細(xì)胞群體：1．細(xì)胞主群

從50fL開始，兩側(cè)對稱呈正態(tài)分布的曲線，又稱“主峰”

2．大細(xì)胞群

在主群右側(cè)，又稱“足趾部”，是一些紅細(xì)胞二聚體、三聚體、多聚體的混合物。第12頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血小板直方圖（擬合曲線）在血小板的直方圖上可見兩條曲線：一條是2fl-20fl的原始數(shù)據(jù)曲線;另一條是0fl-70fl的擬合曲線.第13頁,共64頁，2024年2月25日，星期天擬合曲線血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來自:2fl以下：噪音、電磁波的干擾20fl以上：裂紅細(xì)胞;小紅細(xì)胞;白細(xì)胞的干擾第14頁,共64頁，2024年2月25日，星期天擬合曲線作用儀器根據(jù)測量得到的2～20fL范圍內(nèi)血小板分布情況，按照對數(shù)正態(tài)分布規(guī)律得到0～70fL范圍血小板分布情況（正常人血小板絕大多數(shù)分布在2～20fL

范圍內(nèi)）。如果擬合成功，血小板數(shù)量由擬合曲線下的面積換算得到，即0～70fL范圍的血小板數(shù)量；如果擬合不成功，沒有擬合曲線，血小板結(jié)果只報(bào)告2～20fL范圍的血小板數(shù)量。通常情況下是低于實(shí)際數(shù)量的第15頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血小板曲線不擬合的原因1.血小板原始計(jì)數(shù)小于20×109/L；2.血小板曲線不呈現(xiàn)對數(shù)正態(tài)分布；3.血小板曲線的波峰不在3fL-15fL之間；4.血小板PDW大于20%5.三次計(jì)數(shù)中任何一次沒有符合上述4點(diǎn)擬合條件第16頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第三部分血細(xì)胞五分類庫爾特VCS五分類技術(shù)

V：體積分析

C：細(xì)胞核型分析

S：細(xì)胞內(nèi)部顆粒分析第17頁,共64頁，2024年2月25日，星期天接近原態(tài)的白細(xì)胞分析ScatterPak雙試劑系統(tǒng)的作用E-lyse:通過低滲作用溶解紅細(xì)胞；S-lyse:終止溶解作用，使白細(xì)胞恢復(fù)到接近原態(tài)第18頁,共64頁，2024年2月25日，星期天接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細(xì)胞進(jìn)入流式通道第19頁,共64頁，2024年2月25日，星期天逐個、同時、直接的三維檢測第20頁,共64頁，2024年2月25日，星期天NEDC

Mean細(xì)胞的三維定位NEOP

MeanNE

RLS

Mean第21頁,共64頁，2024年2月25日，星期天細(xì)胞的三維定位第22頁,共64頁，2024年2月25日，星期天細(xì)胞的三維定位第23頁,共64頁，2024年2月25日，星期天三維空間的多側(cè)面表示-DF1

-體積(V),激光散射(S)嗜酸細(xì)胞中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞第24頁,共64頁，2024年2月25日，星期天DF2

-體積(V),傳導(dǎo)性(C)單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞第25頁,共64頁，2024年2月25日，星期天網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞是介于晚幼紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞之間的不成熟紅細(xì)胞,通常較成熟紅細(xì)胞稍大,其胞質(zhì)中尚殘存部分嗜堿性物質(zhì)(RNA,核糖體),經(jīng)堿性染料染色后可見深染的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),故名。右圖中標(biāo)記A、B、C的細(xì)胞分別代表不同成熟度的網(wǎng)織紅細(xì)胞的。第26頁,共64頁，2024年2月25日，星期天新亞甲藍(lán)-VCS檢測法以經(jīng)典的超活染料新亞甲藍(lán)（NMB）著色網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)殘存的RNA漂洗紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白(酸性試劑)用VCS三維技術(shù)，檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞第27頁,共64頁，2024年2月25日，星期天網(wǎng)織紅細(xì)胞

VCS三維散點(diǎn)圖分析第28頁,共64頁，2024年2月25日，星期天網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測注意點(diǎn)使用抗凝血，樣本采集后8小時內(nèi)完成檢測加入染液（A液）后室溫下作用5-60分鐘取2ul，加入2ml漂洗液（B液）后勿混勻，等待30秒鐘30秒鐘一到，立即進(jìn)樣檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測的重復(fù)性不太理想（半自動）第29頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第四部分血細(xì)胞參數(shù)介紹WBC、NE%、NE#、LY%、LY#、MO%、MO#、EO%、EO#、BA%、BA#；RBC、Hgb、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDWPLT、MPV、PCT、PDWRET%、RET#、MRV、MI第30頁,共64頁，2024年2月25日，星期天白細(xì)胞系列參數(shù)WBC：白細(xì)胞數(shù)量，正常人參考為4-10×109/LNE%：中性粒細(xì)胞百分比，正常參考為50%-75%NE#：中性粒細(xì)胞絕對值LY%：淋巴細(xì)胞百分比，正常參考為20%-40%LY#：淋巴細(xì)胞絕對值MO%：單核細(xì)胞百分比，正常參考為3%-10%MO#：單核細(xì)胞絕對值EO%：嗜酸細(xì)胞百分比，正常參考為0.5%-5%EO#：嗜酸細(xì)胞絕對值BA%：嗜堿細(xì)胞百分比，正常參考為0-2%BA#：嗜堿細(xì)胞絕對值第31頁,共64頁，2024年2月25日，星期天紅細(xì)胞系列參數(shù)RBC：紅細(xì)胞數(shù)量，正常參考男性為4.0-5.5×1012/L

正常參考女性為3.5-5.0×1012/LHgb：外周血中血紅蛋白濃度，正常參考為110-160g/LHct：血細(xì)胞壓積，也可指紅細(xì)胞壓積，正常參考為0.35-0.50MCV：平均紅細(xì)胞體積，正常參考為80-100fLMCH：平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量，指平均每個紅細(xì)胞含的血紅蛋白量，正常參考為27-34pgMCHC：平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度，指紅細(xì)胞中血紅蛋白濃度，正常參考為320-360g/LRDW：紅細(xì)胞分布寬度，正常參考為11.5%-15%第32頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血小板系列參數(shù)PLT：血小板數(shù)量，正常參考為100-300×109/LMPV：平均血小板體積，正常參考為6.5-12.5fLPct：血小板壓積，正常參考為0.108%-0.271%PDW：血小板分布寬度，正常參考為11.5%-18%第33頁,共64頁，2024年2月25日，星期天網(wǎng)織紅細(xì)胞系列參數(shù)RET%：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比，正常參考為0.5%-2.5%RET#：網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值MRV：平均網(wǎng)織紅細(xì)胞體積，正常參考為100-125fLMI：網(wǎng)織紅細(xì)胞不成熟度，即不成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞占所有網(wǎng)織紅細(xì)胞的比率，正常參考為0.2-0.4第34頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第五部分HMX常見的旗標(biāo)和代碼旗標(biāo)(數(shù)值后):R結(jié)果需復(fù)核*R計(jì)數(shù)受干擾H結(jié)果高于參考范圍上限L結(jié)果低于參考范圍下限代碼(替代數(shù)值):-----三次計(jì)數(shù)比統(tǒng)一…..不完全計(jì)算+++++結(jié)果超出操作范圍:::::流式通道堵塞?????數(shù)據(jù)無效第35頁,共64頁，2024年2月25日，星期天白細(xì)胞計(jì)數(shù)值后出現(xiàn)*R的臨床意義說明白細(xì)胞在35fl處的檢測受到干擾.在白細(xì)胞計(jì)數(shù)孔有35fl大小的顆粒通過并被當(dāng)作白細(xì)胞計(jì)數(shù),且超過一定數(shù)量,觸發(fā)報(bào)警在白細(xì)胞直方圖上看,曲線在35fl處上抬第36頁,共64頁，2024年2月25日，星期天正常情況第37頁,共64頁，2024年2月25日，星期天異常情況第38頁,共64頁，2024年2月25日，星期天導(dǎo)致*R出現(xiàn)的可能原因小白細(xì)胞有核紅細(xì)胞、抗溶紅細(xì)胞紅細(xì)胞聚集,大血小板,血小板聚集溶血劑輸送系統(tǒng)故障第39頁,共64頁，2024年2月25日，星期天RDW后出現(xiàn)R的臨床意義紅細(xì)胞計(jì)數(shù)時儀器計(jì)數(shù)24fl～360fl的顆粒,繪出直方圖,正常紅細(xì)胞直方圖應(yīng)為兩端封閉、單峰、呈高斯分布的曲線.RDW反應(yīng)紅細(xì)胞大小分布的偏離情況,其意義相當(dāng)于CV%(變異系數(shù)).導(dǎo)致的原因：輸血紅細(xì)胞凝集紅細(xì)胞碎片大血小板血小板凝集成塊處理方法：涂片鏡檢紅細(xì)胞是否大小不一第40頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第41頁,共64頁，2024年2月25日，星期天PLT結(jié)果后出現(xiàn)R旗標(biāo)的

臨床意義儀器進(jìn)行血小板計(jì)數(shù)時,計(jì)數(shù)2fl～20fl的血小板數(shù)量,再擬合出一條0fl～70fl的曲線,目的是為了排除計(jì)數(shù)干擾.但條件不滿足時儀器不能給出擬合曲線,這時候血小板數(shù)值后出現(xiàn)R.第42頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第43頁,共64頁，2024年2月25日，星期天導(dǎo)致血小板后出現(xiàn)R的原因小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片;白細(xì)胞碎片;大血小板,血小板凝集;血小板大小不一(輸血后);電磁波或噪音干擾小孔計(jì)數(shù)第44頁,共64頁，2024年2月25日，星期天處理方法1.手工涂片鏡檢,如發(fā)現(xiàn)小紅細(xì)胞,細(xì)胞碎片等異常細(xì)胞,則手工計(jì)數(shù)血小板;2.如果大血小板影響到白細(xì)胞或紅細(xì)胞數(shù)值,重新復(fù)核;3.如果出現(xiàn)衛(wèi)星血小板,將標(biāo)本以枸櫞酸鈉抗凝,檢測血小板數(shù)值,但最終數(shù)值須乘以1.1(10%稀釋比例).第45頁,共64頁，2024年2月25日，星期天+++++出現(xiàn)的臨床意義+++++(代碼)：結(jié)果超出儀器的操作范圍對白細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于99.9×109/L；對紅細(xì)胞而言計(jì)數(shù)值大于7.00×1012/L；對血小板而言計(jì)數(shù)值大于999×109/L.處理方法：用ISOTONIII液稀釋標(biāo)本至線性范圍內(nèi)再測注:1.先做一空白循環(huán)以防止攜帶污染

2.不能報(bào)告白細(xì)胞分類結(jié)果檢查儀器稀釋液和溶血劑輸送系統(tǒng)有無故障第46頁,共64頁，2024年2月25日，星期天代碼-----出現(xiàn)的臨床意義-----出現(xiàn)代表三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一可能導(dǎo)致的原因：小孔堵塞或部分堵塞;標(biāo)本有凝塊或絲狀纖維蛋白;白細(xì)胞聚集,紅細(xì)胞凝集;大血小板,血小板凝集;標(biāo)本稀釋后未氣泡混勻.處理方法：參照維修手冊清洗小孔;查看標(biāo)本有無凝塊,涂片鏡檢有無細(xì)胞聚集;檢測標(biāo)本混勻系統(tǒng).第47頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第48頁,共64頁，2024年2月25日，星期天代碼…..出現(xiàn)的臨床意義…..出現(xiàn)表示數(shù)據(jù)不完整,不完全計(jì)數(shù)通常當(dāng)一個參數(shù)由于三次計(jì)數(shù)不統(tǒng)一或超過范圍得不到確切數(shù)值時,其衍生參數(shù)后將出現(xiàn)……,如WBC+++++,則其衍生參數(shù)NE#、LY#、MO#、EO#、BA#后將出現(xiàn)…..第49頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第50頁,共64頁，2024年2月25日，星期天…..也可表示吸樣錯誤…..出現(xiàn)也可表示吸樣錯誤,當(dāng)發(fā)生吸樣錯誤時,所有參數(shù)的結(jié)果后都會帶有…..導(dǎo)致的可能原因有：樣本有凝塊,堵塞吸樣針;樣本量不夠;樣本的RBC和HGB濃度過低(嚴(yán)重貧血病人標(biāo)本),血樣探測器檢測失敗;儀器吸樣系統(tǒng)堵塞.第51頁,共64頁，2024年2月25日，星期天發(fā)生吸樣錯誤的處理方法1.查看樣本有無凝塊,如果有重取標(biāo)本,沒有則重新檢測,再出現(xiàn)如上問題則涂片鏡檢有無凝塊或細(xì)胞聚集;2.檢測標(biāo)本量是否夠;3.對于嚴(yán)重貧血病人樣本采用手動進(jìn)樣方式.4.檢測儀器吸樣系統(tǒng),如發(fā)生堵塞則清洗.第52頁,共64頁，2024年2月25日，星期天代碼:::::出現(xiàn)的臨床意義在白細(xì)胞五項(xiàng)分類及網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)中,當(dāng)流式通道堵塞產(chǎn)生:::::代碼.在散點(diǎn)分布圖上可有三種堵塞報(bào)警：-FC,流式通道完全堵塞(無檢測);-PC1,流式通道檢測時間延長;-PC2,流式通道檢測時間縮短.第53頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第54頁,共64頁，2024年2月25日，星期天第55頁,共64頁，2024年2月25日，星期天導(dǎo)致PC/:::::的原因-FC：完全堵塞;-PC1：流式通道或標(biāo)本通道部分堵塞導(dǎo)致分類時間延長;-PC2：紅細(xì)胞未完全溶解導(dǎo)致分類時間縮短,或鞘液系統(tǒng)問題.臨床上高膽固醇和高甘油三酯血癥、血紅蛋白病、藥物治療后、進(jìn)行性肝病等都可導(dǎo)致PC2.第56頁,共64頁，2024年2月25日，星期天出現(xiàn)PC/:::::的處理方法1.手工涂片進(jìn)行白細(xì)胞分類;2.用乳膠和5C質(zhì)控清洗流式通道;3.查看ScatterPak液有否過期,檢查ScatterPak液輸送系統(tǒng)有無故障.第57頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血常規(guī)樣本的制備抗凝劑的使用問題長期放置對分類的影響樣本本身的干擾問題檢測溫度的影響第六部分臨床應(yīng)用問題探討第58頁,共64頁，2024年2月25日，星期天血常規(guī)樣本的制備靜脈采血、并立即和抗凝劑充分混勻抗凝劑濃度必須適宜試管必須潔凈，最好為一次性真空采血管通常樣本采集后24小時內(nèi)