超聲波輔助熱回流提取金銀花中綠原酸

生物分離與純化技術(shù)綜合實(shí)訓(xùn)組員：賴家良賴航通張志毫

黃晶晶梁基敏梁麗娜

李子文課題：超聲波輔助熱回流提取金銀花中綠原酸金銀花自古被譽(yù)為清熱解毒的良藥。它性甘寒氣芳香，甘寒清熱而不傷胃，芳香透達(dá)又可祛邪。金銀花既能宣散風(fēng)熱，還善清解血毒，用于各種熱性病，如身熱、發(fā)疹、發(fā)斑、熱毒瘡癰、咽喉腫痛等癥，均效果顯著。綠原酸是金銀花的主要抗菌、抗病毒有效藥理成分之一。具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用。(98%綠原酸)前言提取金銀花中活性物質(zhì)的方法有很多種，如水提法、醇提取法、超聲波提取法等，上述提取方法都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。有證據(jù)表明兩種或兩種以上方法復(fù)合提取效果明顯優(yōu)于單一方法提取效果。超聲提取技術(shù)與溶劑提取法在中藥材活性成分的提取研究中應(yīng)用的非常廣泛。因超聲波技術(shù)可使目標(biāo)物充分溶解，熱回流提取法可高效提取目標(biāo)物。所以本次采用的是超聲波技術(shù)與醇提取法相結(jié)合的方式，并與傳統(tǒng)的熱回流提取法相比較，以達(dá)到優(yōu)化改良傳統(tǒng)工藝中的索氏提取法工藝的目的。綠原酸在25℃水中時(shí)溶解度約為4%，熱水中溶解度更大，易溶于乙醇、丙酮、甲醇等極性溶劑，極微溶于乙酸乙酯，難溶于三氯甲烷、乙醚、苯等親脂性有機(jī)溶劑。所以可以用熱回流提取法提取金銀花中的綠原酸。超聲波是一種均勻的球面機(jī)械波,以獨(dú)特的作用形式——空化作用在液體內(nèi)部產(chǎn)生強(qiáng)烈的沖擊波和微射流,能擊碎細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)組分滲透到溶液中,從而增加有效成分的提取率。實(shí)驗(yàn)原理提取步驟預(yù)處理：把金銀花經(jīng)過(guò)粉碎機(jī)粉碎后過(guò)40目篩

超聲波提取精密稱取金銀花粉末10g,加入100ml75%乙醇，使用450W（50%）超聲波進(jìn)行粉碎15min，抽濾，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液濃縮，溫度定為50度。索氏提取精密稱取金銀花粉末10g,加入100ml75%乙醇，用索氏提取回流處理4h，抽濾后取濾液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液濃縮，溫度定為50度。熱回流提取精密稱取金銀花粉末10g,加入100ml75%乙醇，熱回流處理4h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液濃縮，溫度定為50度。超聲波輔助熱回流精密稱取金銀花粉末10g,加入100ml75%乙醇，使用450W（50%）超聲波進(jìn)行粉碎15min，熱回流處理4h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取液濃縮，溫度定為50度。分離、純化步驟將每個(gè)濃縮液用濃HCl調(diào)節(jié)到pH為3.0，先用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層；再用5%NaHCO3萃取，取堿層；然后用濃HCl再調(diào)節(jié)到pH為3.0，繼續(xù)用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層,最后減壓濃縮得出濃縮液。測(cè)量濃縮液60度烘干，稱量，計(jì)算粗得率。用75%乙醇定容到100ml，用327nm分光光度，稀釋適當(dāng)濃度，測(cè)量吸光度，數(shù)據(jù)處理與分析類型金銀花重量（g）空瓶重量（g）旋干后重量（g）粗品重量（g）粗得率（%）索氏提取10.00113.36113.750.393.90超聲波提取10.01104.50104.810.313.09熱回流提取10.00224.83225.340.515.10超聲輔助提純10.00254.13254.680.555.50表1：綠原酸粗得率類型分光光度數(shù)值平均值索氏提取0.68940.65420.67530.6730超聲波提取0.34530.34250.35110.3463熱回流提取0.72520.73580.73520.7321超聲輔助提純0.83420.81600.83420.8281表2:327nm分光光度數(shù)值（稀釋5萬(wàn)倍）結(jié)論：從上面兩個(gè)表可以看出，用超聲波輔助后的熱回流提取粗品率提高了，而且在327