種子生活力測定

關(guān)于種子生活力測定一、實驗?zāi)康?/p>

通過實驗，掌握主要作物種子生活力測定方法、基本操作和結(jié)果計算。氯化三苯基四氮唑（TTC）法紅墨水（酸性大紅Ｇ）染色法第2頁,共12頁，2024年2月25日，星期天二、實驗原理1、氯化三苯基四氮唑（TTC）法

凡有生活力的種子胚部在呼吸作用過程中都有氧化還原反應(yīng)，而無生活力的種胚則無此反應(yīng)。當(dāng)TTC溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔酶(NADH2或NADPH2)還原時，可產(chǎn)生紅色的三苯基甲腙（TTF），胚便染成紅色。當(dāng)種胚生活力下降時，呼吸作用明顯減弱，脫氫酶的活性亦大大下降，胚的顏色變化不明顯，故可由染色的程度推知種子的生活力強弱。第3頁,共12頁，2024年2月25日，星期天2、紅墨水（酸性大紅Ｇ）染色法

有生活力的種子其胚細(xì)胞的原生質(zhì)具有半透性，有選擇吸收外界物質(zhì)能力，某些染料如紅墨水中的酸性大紅Ｇ不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，胚部不染色。而喪失活力的種子其胚部細(xì)胞原生質(zhì)膜喪失了選擇吸收的能力，染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)使胚部染色，所以可根據(jù)種子胚部是否染色來判斷種子的生活力。第4頁,共12頁，2024年2月25日，星期天第5頁,共12頁，2024年2月25日，星期天三、試材與設(shè)備【實驗材料】玉米種子【儀器與用具】培養(yǎng)皿、鑷子、單面刀片、墊板（切種子用）、燒杯、棕色試劑瓶、搪瓷盤、pH試紙?！驹噭縏TC溶液的配制：取1gTTC溶于１L蒸餾水或冷開水中，配制成0.1％的TTC溶液。藥液pＨ應(yīng)在6.5～7.5，以pH試紙試之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。紅墨水溶液的配制：取市售紅墨水稀釋20倍（1份紅墨水加19份自來水）作為染色劑。第6頁,共12頁，2024年2月25日，星期天四、實驗步驟

1.將玉米種子用溫水（30℃）浸泡2～6h，使種子充分吸脹。（待充分吸脹后取出一部分種子，在沸水中煮沸3～5min，作為死種子）2.隨機取種子50粒，沿種胚中央準(zhǔn)確切開，并取幾粒死種子作為對照。3.將每粒種子的一半用TTC法染色，溶液以浸沒種子為度。

第7頁,共12頁，2024年2月25日，星期天4.TTC染色的種子放入30～35℃的恒溫箱內(nèi)保溫30min.也可在20℃左右的室溫下放置40～60min；紅墨水法室溫染色10～20min5.保溫后，傾出藥液，用自來水沖洗2～3次，立即觀察種胚著色情況，判斷種子有無生活力，把判斷結(jié)果記入表1內(nèi)。第8頁,共12頁，2024年2月25日，星期天表1染色法測定種子生活力記載表種子活力（％）＝有活力的種子數(shù)/種子總數(shù)×100%第9頁,共12頁，2024年2月25日，星期天【注意事項】

1.TTC溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如需貯藏則應(yīng)貯于棕色瓶中，放在陰涼黑暗處，如溶液變紅則不可再用。2.染色溫度一般以25～35℃為宜。3.判斷有生活力的種子應(yīng)具備：胚發(fā)育良好、完整、整個胚染成鮮紅色；子葉有小部分壞死，其部位不是胚中軸和子葉連接處；胚根尖雖有小部分壞死，但其它部位完好。4.TTC反應(yīng)結(jié)束，從黑暗下取出后立即觀察，因光下久放TTC本身會變色。5.不同作物種子生活力的測定，所需試劑濃度、浸泡時間、染色時間不同。現(xiàn)將主要作物種子生活力測定所需條件列入下表。第10頁,共12頁，2024年2月25