尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)展課件

尿液檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化、質(zhì)控進(jìn)展現(xiàn)狀

建議第一章

干化學(xué)檢測

尿液有形成分

優(yōu)點(diǎn)：檢測化學(xué)項(xiàng)目多、速度快；不足：檢測特異性不好、檢測項(xiàng)目名不副實(shí)；質(zhì)控：1、質(zhì)控物為化學(xué)物質(zhì)，不是真實(shí)形態(tài)學(xué)成分；

2、干擾因素多，無法預(yù)知和排除；許多有形成分不能檢測；方法自身不能證實(shí)檢測的真實(shí)性；不符合ISO15189；只能是過篩檢測；現(xiàn)狀彌補(bǔ)辦法必須鏡檢：1、鏡檢與化學(xué)檢驗(yàn)的關(guān)系：互補(bǔ)、驗(yàn)證2、鏡檢干化學(xué)不能檢測的有形成分；使用特異性檢測方法檢測化學(xué)成分；第二章

尿液有形成分檢測標(biāo)準(zhǔn)化

尿液有形成分檢驗(yàn)的現(xiàn)狀尿液有形成分檢測儀器分類單鏡頭單鏡頭ECLM

-EuropeanUrinalysisGuidelines（2000）NCCLS-RoutineUrinalysisandCollection,

Transportation,andPreservationofUrine

Specimens;ApprovedGuideline（1995）JCCLS-JCCLSGuidelineGP1-P3（2000）SCCLS

-尿沉渣檢查標(biāo)準(zhǔn)化的建議(2002)ISLH-ISLHRecommendedReferenceProcedure

fortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)NCCLS-尿液檢驗(yàn)操作指南（第三版）(2009)修改的GP16-A3尿液檢驗(yàn)的規(guī)范管理標(biāo)準(zhǔn)文件不離心離心方法（CLSI原NCCLS)尿液分析操作指南（第三版）GP16-A3(2009)國際標(biāo)準(zhǔn)（GP16-A32009年）給出的解決對策1、數(shù)字圖像流式細(xì)胞儀、流式細(xì)胞儀等標(biāo)本不論是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)為或儀器檢測異常時(shí)（Samplesshowingabnormalities,eitherlaboratory-definedorasindicatedbytheanalyzer,）必須用人工鏡檢方法重新檢測確認(rèn)。2、陰性結(jié)果可以免除鏡檢確認(rèn)。流式圖像流式人工鏡檢國際標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定國際標(biāo)準(zhǔn)的參考文獻(xiàn)64DelangheJ.Newscreeningdiagnostictechniquesinurinalysis.ActaClinBelg.2007;62:155-161.65OttigerC,HuberAR.Quantitativeurineparticleanalysis:integrativeapproachfortheoptimalcombinationofautomationwithUF-100andmicroscopicreviewwithKOVAcellchamber.ClinChem.2003;49:617-623.66DelangheJR,KouriTT,HuberAR,etal.Theroleofautomatedurineparticleflowcytometryinclinicalpractice.ClinChimActa.2000;301:1-18.67RoggemanS,ZamanZ.Safelyreducingmanualurinemicroscopyanalysesbycombiningurineflowcytometerandstripresults.AmJClinPathol.2001;116:872-878.68ShayanfarN,ToblerU,vonEckardsteinA,BestmannL.Automatedurinalysis:firstexperiencesandacomparisonbetweentheIrisiQ200urinemicroscopysystem,theSysmexUF-100flowcytometerandmanualmicroscopicparticlecounting.ClinChemLabMed.2007;45:1251-1256.再次過篩理論依據(jù)：

1、干化學(xué)也能檢測部分有形成分的化學(xué)物質(zhì)；

2、流式儀器也能檢測部分有形成分；

3、兩者結(jié)合檢測結(jié)果對照可以進(jìn)一步減少人工鏡檢數(shù)量，減少復(fù)檢率；干化學(xué)指標(biāo)：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白質(zhì)、膽紅素；方式：排列組合為64種模式；流式+干化學(xué)再次過篩減少鏡檢率的可行性臨床實(shí)際驗(yàn)證差異太大的原因：兩者檢測方法均為過篩檢測，干擾物均無法排除、證實(shí)；兩者均為非形態(tài)學(xué)方法，兩者之間無相互驗(yàn)證性；兩者方法之間也無檢測的互補(bǔ)性；排列組合方式不適合這種檢測：案例流式結(jié)果RBCWBC

干化學(xué)排列組合結(jié)果

RBCWBCPr1

234++++++++鏡檢方法

標(biāo)準(zhǔn)化文件

具體要求國際標(biāo)準(zhǔn)ISLHRecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)ISLH鏡檢方法核心內(nèi)容1、不離心尿液直接檢測，2、計(jì)數(shù)池體積6.4ul3、低倍鏡

觀察計(jì)數(shù)大型有形成分（上皮細(xì)胞、管型）；高倍鏡

觀察計(jì)數(shù)小型有形成分（細(xì)胞、真菌、結(jié)晶等）4、結(jié)果以“個(gè)/ul”報(bào)告。5、統(tǒng)計(jì)學(xué)精度

低倍：（管型和上皮）至少計(jì)數(shù)50個(gè)

CV<14%；

高倍：（紅、白細(xì)胞等）至少計(jì)數(shù)200個(gè)，

CV<7%；必須有兩個(gè)鏡頭：高倍鏡和低倍鏡兩個(gè)鏡頭觀察的內(nèi)容不同（大小不同）兩個(gè)鏡頭觀察的范圍不同（體積范圍不同）兩個(gè)鏡頭觀察的細(xì)節(jié)不同（分辨率不同）二、標(biāo)準(zhǔn)鏡檢參考方法的基本要求：統(tǒng)計(jì)學(xué)精度低倍：（管型和上皮）至少計(jì)數(shù)50個(gè)CV<14%；高倍：（紅、白細(xì)胞等）至少計(jì)數(shù)200個(gè)，

CV<7%；這是在有形成分濃度不低時(shí)候的理想統(tǒng)計(jì)學(xué)精度三、標(biāo)準(zhǔn)鏡檢參考方法的理想精密度

第二節(jié)

鏡檢自動化技術(shù)儀器

依據(jù)機(jī)器視覺方法學(xué)：顯微鏡鏡檢方法，金標(biāo)準(zhǔn)，方法溯源鏡檢自動化已經(jīng)成為發(fā)展方向鏡檢自動化儀器沒有改變?nèi)斯ょR檢程序：改變的是：操作自動化：儀器預(yù)識別和計(jì)數(shù)有形成分人工審核時(shí)作用就是人工鏡檢符合國際標(biāo)準(zhǔn)：ISLH

RecommendedReferenceProcedurefortheEnumerationofParticlesinUrine(2003)儀器工作流程

完全參照人工鏡檢標(biāo)準(zhǔn)參考方法進(jìn)樣充池低倍過篩（視野數(shù)可設(shè)置）低倍定位分類計(jì)數(shù)（管型、上皮）高倍識別分類計(jì)數(shù)報(bào)告清洗陰性陽性人工審核鏡檢自動化儀器=人工鏡檢條件是否符合ISLH（2003年）的國際標(biāo)準(zhǔn)條件；是否是使用的具有高、低倍鏡的顯微鏡;拍攝圖像是否是真實(shí)顯微鏡下的實(shí)景？圖像經(jīng)過處理否？檢測靈敏度能否達(dá)到:3-10個(gè)細(xì)胞/ul;結(jié)果有人工審核；審核人員專業(yè)知識、經(jīng)驗(yàn)、能力、責(zé)任心；第三章

尿液有形成分檢驗(yàn)質(zhì)控

尿液有形成分檢測質(zhì)控真實(shí)成分標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控單一真實(shí)成分標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)成分圖像質(zhì)控替代品質(zhì)控有形成分檢測儀器技術(shù)不同質(zhì)控不同流式：質(zhì)控物為特制顆粒物；機(jī)器視覺技術(shù)：紅細(xì)胞沒有質(zhì)控物的儀器現(xiàn)狀第一節(jié)

流式質(zhì)控質(zhì)控依據(jù)是血液分析質(zhì)控物為特制顆粒，不是尿液有形成分，為替代品，與實(shí)際檢測無系統(tǒng)屬性；干擾物影響無法質(zhì)控和檢測；檢測錯(cuò)誤時(shí)檢測者無法獲悉；分類計(jì)數(shù)無意義；實(shí)際意義：校準(zhǔn)儀器計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性；檢測、質(zhì)控依據(jù)和問題流式特制顆粒質(zhì)控物，實(shí)際檢測無系統(tǒng)屬性流式檢測錯(cuò)誤時(shí)儀器無法知道流式第二節(jié)

鏡檢儀器質(zhì)控機(jī)器視覺質(zhì)控：質(zhì)控物：單一紅細(xì)胞；其他成分質(zhì)控品目前無法做到；發(fā)展方向：標(biāo)準(zhǔn)圖像質(zhì)控；預(yù)識別后人工審核不能少；標(biāo)準(zhǔn)圖庫建立和指導(dǎo)意義大，需要增加和加強(qiáng)；實(shí)際意義：校準(zhǔn)儀器計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性；分類計(jì)數(shù)在人工審核后才具有意義；第三節(jié)

無質(zhì)控品儀器

問題無質(zhì)控品的儀器檢測靈敏度不夠，不能質(zhì)控識別能力不好，無法質(zhì)控檢測體積達(dá)不到國際標(biāo)準(zhǔn)要求，精確度較差單鏡頭下小的分辨不清（ISLH要求兩個(gè)鏡頭）單鏡頭的儀器探討：高、低倍鏡下圖像比較第四章

如何保證尿液檢測標(biāo)準(zhǔn)和正確

如何能是尿液檢測標(biāo)準(zhǔn)和正確按國際標(biāo)準(zhǔn)文件

ISLH（2003）和GP16-A3執(zhí)行，不折扣；尿液檢驗(yàn)必須包括：理學(xué)、化學(xué)和鏡檢；任何儀器檢測結(jié)果必須與人工鏡檢相符合；總原則儀器檢測的陽性結(jié)果必須鏡檢復(fù)檢（GP16-A3規(guī)定）；鏡檢復(fù)核時(shí)方法應(yīng)符合ISLH規(guī)定自動化儀器靈敏度符合臨床決定限要求

3-10個(gè)細(xì)胞/ul如何能是尿液