自擬中藥復(fù)方委陵菜散治療雛雞大腸桿菌病的實(shí)驗(yàn)研究

第1章導(dǎo)論雞大腸桿菌病(ChickenColibacillosis)是由大腸桿菌引起的一種禽類常見病，由Ligniers在1894年首次發(fā)現(xiàn)，其病原為腸道菌科埃希菌屬的大腸埃希氏桿菌(E.coli)，簡稱大腸桿菌，屬革蘭氏陰性短桿菌，可以感染肉雞、蛋雞、種雞等，導(dǎo)致雞死淘率增加、飼料轉(zhuǎn)化率降低；雛雞生長受阻、發(fā)育不良；蛋雞無產(chǎn)蛋高峰期或產(chǎn)蛋高峰期時(shí)間縮短等REF_Ref13388\r\h[1]。本病廣泛存在于世界各地，是家禽養(yǎng)殖中常見病原之一，可引起家禽的急性敗血癥或多組織器官炎癥，一旦感染會給養(yǎng)殖戶帶來極大的損失REF_Ref13388\r\h[1]。臨床上，預(yù)防雞大腸桿菌病較為有效的方式為疫苗，但大腸桿菌病的血清型眾多，不易找出針對性強(qiáng)的疫苗，目前對大腸桿菌病的治療多采用抗菌藥物治療，輔以對癥治療，調(diào)整腸胃機(jī)能，一般選擇抗生素進(jìn)行治療REF_Ref13388\r\h[1]。用抗生素在防治動物疾病、提高養(yǎng)殖效益、保障畜禽產(chǎn)品有效供給中發(fā)揮了重要作用，而我國是畜禽養(yǎng)殖大國，也是獸用抗生素生產(chǎn)和使用大國，該方法的運(yùn)用遇到了新的挑戰(zhàn)：抗生素濫用和亂用引發(fā)了藥物殘留、細(xì)菌耐藥性、出現(xiàn)“超級細(xì)菌”等問題，越來越多的人認(rèn)識到抗菌治療的副作用，更對人類的身體健康造成危害和對公共衛(wèi)生安全造成威脅REF_Ref13891\r\h[2-REF_Ref13969\r\h3]。中草藥是我國傳統(tǒng)文化的瑰寶，中藥治療效果受菌株耐藥性的影響較小、副作用小、幾乎無殘留，還有資源廣、成本低等獨(dú)特優(yōu)勢，即中藥不僅可以治療疫病、解決抗菌藥物殘留的問題，還能節(jié)約成本，有十分高的實(shí)用價(jià)值，在動物疾病防控中占有一席之地REF_Ref15363\r\h[4]。禽大腸桿菌病在中醫(yī)上表現(xiàn)為濕熱下痢,是因濕熱之邪蓄積、阻塞腸胃,導(dǎo)致腸胃傳化失常。治療代表方劑有白頭翁湯,方中白頭翁清熱解毒、涼血、清大腸血熱而專治熱毒血痢，為君藥；黃連、黃柏、秦皮助主藥清熱解毒，燥濕止痢，共為臣佐藥,合而用之，可清熱解毒，涼血止痢。國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道了白頭翁湯廣泛用于治療仔豬黃白痢、仔豬大腸桿菌性腹瀉、禽大腸桿菌病、犬出血性痢疾等多種腹瀉性疾病，具有良好療效REF_Ref15739\r\h[5]。呂顏枝等REF_Ref15997\r\h[6]用白頭翁湯治療人工感染雞大腸桿菌病，治愈率可達(dá)96%?，F(xiàn)代藥理研究顯示白頭翁湯各組分均可有效抑制大腸桿菌，單藥中黃連抑菌效果（MIC為50mg/mL）和殺菌效果（MBC為50mg/mL）最強(qiáng)，黃連與秦皮聯(lián)合組成藥對大腸桿菌的抑菌效果（MIC為12.5mg/mL）最強(qiáng)，而白頭翁湯方劑對大腸桿菌的MIC為3.125mg/mL,MBC為100.00mg/mL，故白頭翁湯是臨床上治療畜禽大腸桿菌病的常用方劑REF_Ref15997\r\h[6]。本試驗(yàn)為臨床治療雞大腸桿菌病提供更加經(jīng)濟(jì)實(shí)惠和更有實(shí)用價(jià)值的中藥治療新方案，減少養(yǎng)殖成本，提高經(jīng)濟(jì)效益，采用中藥“復(fù)方委陵菜散”治療雞大腸桿菌病。秉承清熱解毒、涼血止痢治療原則，自擬中藥“復(fù)方委陵菜散”（委陵菜18%，楊樹花18%，秦皮15%，馬齒莧15%，魚腥草12%，山楂12%，苦參10%）。方中委陵菜、楊樹花、馬齒莧清熱解毒、涼血止痢，共為君藥；秦皮清熱燥濕、收澀止痢，苦參清熱燥濕，魚腥草治下焦?jié)駸釣a痢，山楂炭收斂止血，共為臣佐藥。委陵菜是薔薇科委陵菜屬植物，分布于中國多地，別名有白頭翁、翻白菜，具有清熱解毒、收斂止瀉的作用，與白頭翁有相似作用，都可以清熱解毒治痢疾，但比白頭翁價(jià)格更低，更節(jié)約成本。現(xiàn)代研究表明委陵菜屬植物主要包含薩類、黃酮類、酚酸類、鞣質(zhì)類、苯丙素類等化學(xué)成分，具有抗氧化、降糖、抗炎、抗腫瘤、心血管系統(tǒng)保護(hù)、神經(jīng)保護(hù)和肝保護(hù)作用等多種藥理活性，臨床上主要用于糖尿病、炎癥、心腦血管疾病、痢疾和功能性子宮出血等多種疾病REF_Ref16415\r\h[7]。研究顯示委陵菜屬植物提取物和單體化合物，對細(xì)菌和真菌等病原微生物均有廣泛的抑制作用。如XUANSH等REF_Ref16415\r\h[8]采用肉湯稀釋法和紙盤法分析表明蛇含委陵菜乙酸乙酯提取物對金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、銅綠假單胞菌和大腸桿菌均有抑制作用，且其抑菌活性高于乙醇提取物，與對羥基苯甲酸甲酯相似；吳玉貴等REF_Ref17000\r\h[9]以葡枝委陵菜在對仔豬大腸桿菌病臨床療效的實(shí)驗(yàn)研究中通過管碟法和紙片法測定其對大腸埃希氏菌的抑菌環(huán)為6-8mm；王婧文等REF_Ref17081\r\h[10]對3株貉源大腸桿菌體外抑菌效果及耐藥性進(jìn)行了研究表明秦皮的MIC在31.25-62.5mg/mL之間，并且秦皮可有效消除大腸桿菌的耐藥性，平均消除率為8.8%；劉位斌等REF_Ref17130\r\h[11]研究表明楊樹花提取液對大腸桿菌的MIC是62.5mg/mL；白建等REF_Ref17215\r\h[12]研究表明苦參中藥水提物對犬源致病性大腸桿菌NJ-1株的MBC在7.80-15.63mg/mL之間，而秦皮中藥水提提取物的MBC在250.00-500.00mg/mL之間；張子越等REF_Ref17261\r\h[13]研究表明馬齒莧水煎液對大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC為125mg/ml。本試驗(yàn)試以白頭翁湯作對照方，通過急性攻毒試驗(yàn)，比較白頭翁湯組、自擬中藥“復(fù)方委陵菜散”組和空白對照組的腹瀉指數(shù)，以實(shí)驗(yàn)研究其對雛雞大腸桿菌病的治療效果，為臨床治療雞大腸桿菌病提供中藥治療新方案。第2章正文2.1材料與方法2.1.1試驗(yàn)材料76只14日齡健康雛雞、中藥復(fù)方委陵菜散（委陵菜、楊樹花、秦皮、馬齒莧、魚腥草、山楂、苦參）、白頭翁湯（白頭翁、黃連、黃柏、秦皮）。2.1.2主要儀器設(shè)備表2.1試驗(yàn)所必需的主要儀器設(shè)備和試劑Table2.1Themainequipmentnecessaryforthetest儀器設(shè)備生產(chǎn)廠家全自動立式壓力蒸汽滅菌鍋上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠超凈工作臺蘇凈集團(tuán)安泰公司隔水式恒溫培養(yǎng)箱GHP-9080超純水儀上海齊欣科學(xué)儀器有限公司成都超純科技有限公司旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器恒溫震蕩搖床上海賢德實(shí)驗(yàn)儀器有限公司重慶伯能佳創(chuàng)儀器儀表有限公司臺式高速冷凍離心機(jī)湖南恒諾儀器設(shè)備有限公司微量離心管電子天平北京蘭杰柯科技有限公司賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司移液器濟(jì)南歐萊博技術(shù)有限公司2.1.3溶液的制備（1）中藥的熬制：中藥復(fù)方委陵菜散（委陵菜9g，楊樹花9g，秦皮7.5g，馬齒莧7.5g，魚腥草6g，山楂6g，苦參5g），白頭翁湯（白頭翁15g、黃連7.5g、黃柏12.5g、秦皮15g）。每個方50g藥材（藥材碾碎、剪碎至約0.5～1cm），加入約400ml水，浸透后泡2h，煎至約75ml，倒出藥液。再加入400ml水，煎至約75ml，倒出藥液。合并兩次藥液，蒸發(fā)濃縮至100ml(0.5g/ml)，4℃保存?zhèn)溆?。并?.5ml煎好的藥液于EP管中離心取上清，過濾紙過濾后用無菌柱過濾，即得到待測的無菌藥液。（2）LB液體培養(yǎng)基的配制：稱取5gLB肉湯轉(zhuǎn)移至燒杯中，加入200mL超純水至燒杯中，用磁力攪拌器將溶液混勻后分裝到試管中，5mL/管。121°C高壓蒸汽滅菌25min，4°C保存。（3）大腸桿菌菌液的稀釋：來源于西南大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院中獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室保存菌株。取200ul大腸桿菌菌液于制備好的5mlLB液體培養(yǎng)基（試管）中，于恒溫震蕩搖床37℃、150rpm-180rpm培養(yǎng)16-24h，采用麥?zhǔn)媳葷醿x調(diào)整大腸桿菌菌液濃度至分別為1×109、2×109、4×109、8×109cfu/mL備用，在4℃冰箱中保存。2.2治療試驗(yàn)設(shè)計(jì)2.2.1攻毒預(yù)實(shí)驗(yàn)14日齡雛雞16只，隨機(jī)分為4個組，每組4只雞，早上8點(diǎn)攻毒，頸部皮下注射0.5ml菌液，劑量濃度分別為1×109、2×109、4×109、8×109cfu/mL，觀察3天，以出現(xiàn)拉稀、精神萎靡等典型臨床癥狀但不死亡為最佳攻毒劑量。2.2.2治療試驗(yàn)取17日齡幼雞60只，隨機(jī)分為3個組，分別為空白組、陽性對照的白頭翁湯組和模型組委陵菜散組，每組20只雞，稱量計(jì)算各組動物的平均體重。攻毒劑量為2×109cfu/ml，每只頸部皮下注射0.5ml菌液，攻毒當(dāng)天開始給藥，各組動物每升飲水加入5ml藥液混勻（終濃度0.25%），供組內(nèi)雞自由飲用。攻毒治療當(dāng)天每2小時(shí)觀察一次發(fā)病情況（精神狀態(tài)、采食、腹瀉指數(shù)），以后每日早晚觀察兩次，連續(xù)觀察直至所有動物恢復(fù)健康。2.2.3觀察指標(biāo)（1）定性癥狀：精神狀態(tài)、羽毛狀態(tài)等臨床癥狀；（2）定量指標(biāo)：腹瀉指數(shù)、死亡數(shù)、平均日采食量、平均日增重、平均料肉比等。2.2.4療效評價(jià)與數(shù)據(jù)處理（1）每日腹瀉指數(shù)：記錄試驗(yàn)各組雛雞大腸桿菌性腹瀉指數(shù)，并對一周內(nèi)腹瀉指數(shù)數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)。腹瀉指數(shù)=稀便數(shù)/干便數(shù)。（2）腹瀉指數(shù)下降速率變化：[（第一天腹瀉指數(shù)-第n天腹瀉指數(shù)）/第一天腹瀉指數(shù)]×100%。（3）死亡率：在試驗(yàn)期間，因大腸桿菌性腹瀉而引起的雛雞死亡數(shù)量，根據(jù)每組試驗(yàn)物中的死亡數(shù)來計(jì)算其死亡率。死亡率=雛雞死亡數(shù)/該組雛雞總數(shù)×100%。（4）平均日采食量、平均日增重：在試驗(yàn)期間，每日記錄每組雛雞采食量、增重量，通過初重和末重計(jì)算。（5）平均料肉比：通過平均日采食量、平均日增重（初重和末重計(jì)算）來計(jì)算平均料肉比。計(jì)算全程平均料肉比時(shí)，如果中途有死亡的情況，則計(jì)算需要扣除死亡雞只的初重和至死亡前一天的總采食量（按組內(nèi)相應(yīng)天數(shù)的平均日采食量計(jì)算）。2.3體外抑菌試驗(yàn)2.3.1MIC的測定在無菌臺上操作，采用倍比稀釋法，做三組平行試驗(yàn)。取試管分別編號1號~10號，1號~10號管分別裝入1mL液體培養(yǎng)基，再在1號管中加入1mL濃度為0.5g/mL過濾后的中藥復(fù)方溶液搖勻，從1號管吸取1mL混合液移入2號管，按這種方式依次進(jìn)行操作。1號~10號管中中藥復(fù)方濃度分別為250mg/ml、125mg/ml、62.5mg/ml、31.25mg/mL、15.625mg/mL、7.8125mg/mL、3.9062mg/mL、1.9531mg/mL、0.9766mg/mL、0.4883mg/ml，到10號管棄去1mL，11號管加1ml液體LB作為陽性對照組，12號管加1ml液體LB做陰性對照。再在1號~11號試管各加入菌懸液0.1mL,37℃恒溫培養(yǎng)24h。2.3.2MIC的效果鑒定無細(xì)菌生長的試管的稀釋倍數(shù)即為該藥液對大腸桿菌菌株的最低濃度(MIC)。24h后，以肉眼觀察EP管混濁還是澄清，以三次澄清管的最低濃度做平均值為中藥復(fù)方對該菌的MIC值。若無澄清管，說明該復(fù)方最小抑菌濃度大于1號管濃度。2.4結(jié)果與分析2.4.1攻毒預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析結(jié)果：感染后5～48h，試驗(yàn)雞只出現(xiàn)不同程度的大腸桿菌病典型臨床癥狀，主要表現(xiàn)為精神沉郁、食欲下降、羽毛松亂、閉眼縮頸、眼結(jié)膜泛紅、腹瀉，嚴(yán)重者出現(xiàn)死亡。剖檢死亡雞只可見心包發(fā)炎，心包腔中有纖維素性滲出物；肝臟充血腫大，肝漿膜有滲出物。感染細(xì)菌劑量以使感染組的雛雞出現(xiàn)拉稀等典型臨床癥狀但不死亡為最佳攻毒劑量，根據(jù)細(xì)菌感染組雛雞的攻毒前后腹瀉指數(shù)（稀便數(shù)/干便數(shù)）結(jié)果（見表2.2）和攻毒前后雛雞數(shù)量(見表2.3)：攻毒前雛雞無腹瀉，無死亡，攻毒后5h，8×109劑量組死亡1只，攻毒后10h，4×109劑量組死亡1只，攻毒48h后，2×109出現(xiàn)臨床癥狀且無死亡，因此確定預(yù)防和治療試驗(yàn)的細(xì)菌感染劑量為每只雞注射0.5ml菌液2×109cfu/mL。分析：1×109劑量組異常死亡原因（該劑量組攻毒當(dāng)天無死亡，攻毒后24h后死亡2只）是①攻毒預(yù)實(shí)驗(yàn)組的雞是挑選雞群中相對瘦小，狀態(tài)相對較差的雞，其中1×109劑量組是最先挑選出來的，雞的體型和狀態(tài)是四個預(yù)實(shí)驗(yàn)組中最弱的。②攻毒預(yù)實(shí)驗(yàn)組安排在靠門的四個籠子進(jìn)行攻毒飼喂，所處位置溫度相對較低，同時(shí)保溫不到位。表2.2攻毒前后腹瀉指數(shù)（稀便數(shù)/干便數(shù)）Table2.2Diarrheaindexbeforeandafterattack(numberofloosestools/drystools)時(shí)間1×1092×1094×1098×109攻毒后10h0.50.60.710.8攻毒后24h0.480.50.51攻毒后48h0.160.370.670.57表2.3預(yù)實(shí)驗(yàn)不同劑量菌攻毒前后雛雞數(shù)量Table2.3Numberofchicksbeforeandafterchallengewithdifferentdosesofpre-experiment時(shí)間1×1092×1094×1098×109攻毒前攻毒后48h424443412.4.2治療實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析定性癥狀結(jié)果：攻毒前，雛雞無腹瀉，無死亡，采食量飲水量正常，精神狀態(tài)狀態(tài)良好，肛周干凈。攻毒時(shí)雞日齡為17日齡，攻毒劑量為2x109cfu/mL，每只注射0.5ml，攻毒當(dāng)天開始給藥，各組動物每升飲水加入5ml藥液混勻（終濃度0.25%），供組內(nèi)雞自由飲用。攻毒后1小時(shí)出現(xiàn)腹瀉，24h-48h出現(xiàn)死亡，48h后剖檢病死雞，臟器無出血腫脹，無明顯病理變化。給藥治療當(dāng)天雞群整體精神萎靡，呈現(xiàn)不同程度的采食量飲水量下降，第二天開始逐漸恢復(fù)采食量與飲水量，雞群整體精神狀態(tài)恢復(fù)。定量指標(biāo)結(jié)果1：由每日采食量（見表2.4）和平均初重、末重計(jì)算得平均料肉比（見表2.5），作委陵菜散、白頭翁湯、空白組的日采食量、料肉比對比圖（見圖2.6），可見委陵菜散組平均料肉比明顯低于白頭翁湯組和空白對照組（分別為2.16、2.50、2.44）。定量指標(biāo)結(jié)果2：治療感染雛雞一周的死亡率、治療感染雛雞第一天腹瀉指數(shù)、治療感染雛雞一周后腹瀉指數(shù)（見表2.7）；攻毒后治療一周內(nèi)各組腹瀉指數(shù)變化和腹瀉指數(shù)下降速率變化（見表2.8和2.9）；將委陵菜散、白頭翁湯治療感染雛雞一周的腹瀉指數(shù)變化表做對比圖（圖2.10）。可知中藥復(fù)方組的腹瀉指數(shù)明顯低于空白對照組，其中委陵菜散組腹瀉指數(shù)從0.92下降到0.06，白頭翁湯組從0.94下降到0.06，空白組從0.97下降到0.13；再以委陵菜散組、白頭翁湯組與空白對照組的腹瀉指數(shù)下降速率進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，其中第三天、第四天均為差異極顯著（p<0.01）。試驗(yàn)結(jié)果表明：自擬復(fù)方委陵菜散對雛雞大腸桿菌病起到良好的治療效果，與白頭翁湯的治療效果相當(dāng)，且在料肉比上明顯優(yōu)于白頭翁湯。分析：（1）第四天、第五天的日采食量異常，懷疑因腳標(biāo)松緊度不合適，當(dāng)天給雞群松了腳標(biāo)，造成雞應(yīng)激反應(yīng)，同時(shí)也導(dǎo)致腹瀉指數(shù)異常。（2）攻毒第二天均出現(xiàn)雛雞死亡，且委陵菜散組死亡率更高，考慮正?，F(xiàn)象，由于隨機(jī)挑選，個別雞相對瘦小，狀態(tài)相對較差。表2.4治療試驗(yàn)中感染雛雞一周的日采食量（g）Table2.4Dailyfeedintakeforoneweekininfectedchicksinthetreatmenttrial（g）組別第一天第二天第三天第四天第五天第六天第七天委陵菜散193492547538579626617白頭翁散241523566589588623624空白對照264538557567596801703表2.5治療實(shí)驗(yàn)雛雞的料肉比Table2.5Themeatratiooftreatedexperimentalchicks組別日均采食量（g）日均增重（g）平均初重（g）平均末重（g)平均料肉比委陵菜散28.3513.10150241.72.16白頭翁散28.1311.27150228.92.50空白對照30.1712.39147.5234.22.44圖2.6治療實(shí)驗(yàn)雛雞的日采食量、料肉比對比圖Figure2.6Comparisonofdailyfeedintakeandmeatratiooftreatedexperimentalchicks表2.7一周后感染雛雞的死亡率和腹瀉指數(shù)Table2.7Mortalityanddiarrhoeaindexofinfectedchicksafteroneweek組別攻毒一天（24h）腹瀉指數(shù)攻毒一周后腹瀉指數(shù)死亡率(均第二天有死亡）委陵菜散0.920.0610％白頭翁散0.940.065％空白對照0.970.135％表2.8攻毒后治療一周內(nèi)各組腹瀉指數(shù)變化Table2.8Changesofdiarrheaindexineachgroupwithinoneweekaftertreatment組別第一天第二天第三天第四天第五天第六天第七天委陵菜散0.920.620.210.260.220.070.06白頭翁湯0.940.360.260.120.190.070.06空白對照組0.970.540.240.460.600.150.13表2.9攻毒后治療一周內(nèi)腹瀉指數(shù)下降速率變化Table2.9Changesintherateofdecreaseofdiarrheaindexwithinoneweekoftreatmentafterchallenge組別第一天第二天第三天第四天第五天第六天委陵菜散32.4%77.1%71.7%a76.3%a92.2%93.4%白頭翁湯61.4%b72.4%87.7%a79.9%a92.4%93.8%空白對照組44.6%75.8%53.0%38.3%84.1%86.2%注：a表示該實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組差異極顯著（p<0.01），b表示該實(shí)驗(yàn)組與陰性對照組差異顯著(p<0.05)。圖2.10治療感染雛雞一周的腹瀉指數(shù)變化表Figure2.10Tableofchangesindiarrheaindexforoneweekintreatedinfectedchicks2.4.3體外抑菌試驗(yàn)MIC結(jié)果與分析結(jié)果：24h后，以肉眼觀察EP管，與陽性對照管、陰性對照管對比觀察，無澄清管，其中最大中藥復(fù)方濃度管1號（250mg/ml）管渾濁，說明該復(fù)方最小抑菌濃度大于1號管濃度250mg/ml。由表2.11可知，白頭翁散、委陵菜散沒有明顯抑菌效果。分析：（1）大腸桿菌的血清型不同，白頭翁散各組成成分的比例不同導(dǎo)致MIC值測定的結(jié)果不同；（2）藥物放置時(shí)間過久，導(dǎo)致藥效降低，對大腸桿菌的抑制效果減弱，MIC值的測定結(jié)果偏高。表2.11中藥復(fù)方對大腸桿菌的最小抑菌濃度比較Table2.11ComparisonoftheminimuminhibitoryconcentrationsofChineseherbalcompoundsagainstE.coli湯劑MIC值委陵菜散>250mg/ml白頭翁湯>250mg/ml注：“>”表示該稀釋倍數(shù)管有極少細(xì)菌生長2.5討論2.5.1雞大腸桿菌病的辨證論治中獸醫(yī)學(xué)認(rèn)為，家禽大腸桿菌病辯證屬于大腸濕熱證，濕熱毒邪直入血分，可見突然死亡；熱邪侵襲體表皮毛入肺，可見呼吸喘粗，鼻分泌物增多；與濕邪結(jié)于腸道，可見排黃綠色稀糞；熱邪傷肝，可見肝周炎，表面散布壞死點(diǎn)；熱邪傷心包膜，可見纖維素心包炎。該病符合衛(wèi)氣營血辨證，病邪依次進(jìn)入衛(wèi)分、氣分、營分和血分，體現(xiàn)了由表入里，逐漸加重的發(fā)展趨勢。治則清熱解毒，涼血止痢。委陵菜散中的委陵菜、楊樹花、馬齒莧清熱解毒、收斂止瀉、涼血止痢，共為君藥；秦皮清熱燥濕、收澀止痢，苦參清熱燥濕，魚腥草治下焦?jié)駸釣a痢，山楂炭收斂止血，共為臣佐藥，諸藥相合，清熱解毒，涼血止痢。2.5.2復(fù)方委陵菜散對大腸桿菌病的療效本試驗(yàn)中將治療濕熱痢疾的經(jīng)典方白頭翁湯作為陽性對照組，從定性指標(biāo)（精神狀態(tài)、羽毛狀態(tài)等臨床癥狀）和定量指標(biāo)（腹瀉指數(shù)、死亡數(shù)、平均日采食量、平均日增重、平均料肉比）對由委陵菜、秦皮、馬齒莧、楊樹花、魚腥草、山楂、苦參等7味中藥組成的方劑治療雛雞大腸桿菌感染的效果進(jìn)行了評價(jià)。結(jié)果表明委陵菜散在對大腸桿菌病的療效上與白頭翁湯具有同樣好的效果，并且從經(jīng)濟(jì)效益和養(yǎng)殖效益的角度考慮，委陵菜的價(jià)格低于白頭翁湯，且委陵菜散有更好的料肉比。肉雞料肉比是指肉雞每生產(chǎn)0.5千克肉產(chǎn)品所消耗的飼料量，在飼養(yǎng)中盡量降低料肉比，獲得最大的利潤空間REF_Ref19116\r\h[14]。試驗(yàn)表明委陵菜散能對治療雛雞大腸桿菌病有較好療效，可以考慮在治療大腸桿菌病時(shí)選擇委陵菜散來代替白頭翁湯，且能提高養(yǎng)殖生產(chǎn)效益。2.5.3復(fù)方委陵菜散的抑菌效果利用試管二倍稀釋法測定委陵菜散制劑對大腸桿菌的體外抑菌作用。在本實(shí)驗(yàn)中白頭翁散、委陵菜散在MIC測定中無明顯抑菌效果。但在張敬禮等REF_Ref19556\r\h[15]的研究中白頭翁湯對大腸桿菌的MIC值為23.6g/L；楊明凡等REF_Ref19831\r\h[16]的結(jié)果也顯示白頭翁湯對分離出的大腸桿菌菌株MIC均為0.625mg/mL；陸毅興等REF_Ref13105\r\h[17]的研究中白頭翁散水提物對大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)株的MIC值為6.25mg/ml，單味藥對大腸桿菌的抑菌效果為黃連>秦皮>白頭翁>黃柏，其中黃柏沒有明顯抑菌效果。分析是因?yàn)榇竽c桿菌的血清型不同，白頭翁散各組成成分的比例不同導(dǎo)致MIC值測定的結(jié)果不同；以及因藥物放置時(shí)間過久，導(dǎo)致藥效降低，對大腸桿菌的抑制效果減弱，MIC值的測定結(jié)果偏高。自擬中藥“復(fù)方委陵菜”用于雛雞大腸桿菌病治療效果明顯,但本次體外抑菌實(shí)驗(yàn)中委陵菜散無明顯抑菌效果，考慮組方中藥物可能有調(diào)整動物機(jī)體免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能、抗炎和調(diào)節(jié)腸道菌群等的綜合作用，提高機(jī)體抗病能力達(dá)到治療大腸桿菌病的目的，并非直接通過抑制或殺滅細(xì)菌來治療大腸桿菌病。如徐佩等REF_Ref14882\r\h[18]應(yīng)用給乳腺炎患者內(nèi)服翻白草煎劑和局部外敷黃柏泥治療方案，治療患者36例，全部患者經(jīng)3-5d治療均獲愈；張寶等REF_Ref15029\r\h[19]研究了蛇含委陵菜化學(xué)成分和抗炎活性，明確了脂肪酸衍生物、二菇及酚性成分是其潛在的抗炎物質(zhì)，均說明委陵菜可以用于治療炎癥、痢疾。第3章結(jié)論本文研究結(jié)果表明：（1）中藥“復(fù)方委陵菜散”對雛雞大腸桿菌病的治療效果較好，能為臨床治療雞大腸桿菌病提供更加經(jīng)濟(jì)實(shí)惠和有效的的中藥治療新方案；（2）中藥“復(fù)方委陵菜散”沒有明顯的抑菌效果，復(fù)方主要作用不是抑菌，有綜合作用，考慮有抗炎、調(diào)節(jié)腸道菌群等作用。

參考文獻(xiàn)徐新蕊,張鶴平,劉建釵,劉彥威,劉利強(qiáng),齊佳欣,龍海川,趙海棋.中草藥防治雞大腸桿菌病研究進(jìn)展[J].中國家禽,2022,44(08):97-103.李相府.改進(jìn)“葛根芩連湯”在治療禽大腸桿菌病中的應(yīng)用研究[D].揚(yáng)州大學(xué),2020.袁萬哲,趙興華,何欣,王建昌,張若曦,李麗敏.禁抗、限抗