任務(wù)一 乙醇中少量水分的分析

任務(wù)一乙醇中少量水分的分析實驗?zāi)康?/p>

掌握氣相色譜儀使用熱導(dǎo)檢測器的操作及液體進(jìn)樣技術(shù)；掌握內(nèi)標(biāo)法定量分析的原理和方法，能用氣相色譜儀分析乙醇中少量水分。課前準(zhǔn)備

1.乙醇有什么用途？

2.本實驗所用的主要儀器是

；所用的試劑有

。

3.儀器操作條件是什么？

1．儀器氣相色譜儀（配熱導(dǎo)檢測器）、10uL微量注射器、帶膠蓋的小藥瓶。儀器操作條件：柱溫90℃；汽化溫度120℃；檢測器溫度120℃；載氣H2，流速30mL/min；橋電流150mA。2．試劑GDX-104（60～80目）、無水乙醇（在分析純試劑無水乙醇中，加入500℃加熱處理過的5A分子篩，密封放置一日，以除去試劑中的微量水分）、無水甲醇（按照與無水乙醇同樣的方法作脫水處理）實驗儀器和用品

1．峰高相對校正因子的測定將帶膠蓋的小藥瓶洗凈、烘干。加入約3mL試樣乙醇，稱量（稱準(zhǔn)至0.0001g，下同）；再加入蒸餾水和無水甲醇各約0.1mL分別稱量。混勻。吸取5.0uL上述配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，測量水和甲醇的峰高平行進(jìn)樣兩次。2．乙醇試樣的測定將帶膠蓋的小藥瓶洗凈、烘干、稱量。加入3mL試樣乙醇，量；再加入適量體積的無水甲醇（視試樣中水含量而定，應(yīng)使甲醇峰高接近試樣中水的峰高），稱量?；靹蚝笪?.0uL進(jìn)樣，記錄色譜圖，測量水和甲醇的峰高。平行進(jìn)樣兩次。實驗步驟

3．?dāng)?shù)據(jù)處理（1）峰高相對校正因子實驗步驟＝（2）乙醇試樣中水的質(zhì)量分?jǐn)?shù)’fwmm甲醇h甲醇h水=××任務(wù)二肥皂的制備

實驗?zāi)康?/p>

了解皂化反應(yīng)的原理及肥皂的制備方法；熟悉鹽析原理。課前準(zhǔn)備

1.閱讀本實驗。實驗室中肥皂的制備需要的主要儀器

。

2.實驗室肥皂的制備原理（用化學(xué)方程式表示）

。3.本實驗需要的藥品有

。

實驗原理R1COOCH2|R2COOCH|R3COOCH2NaOH/H2OR1COONaR2COONa

R3COONa+CH2–OH|CH–OH|CH2–OH實驗用品

氫氧化鈉（40%）、飽和食鹽水、圓底燒瓶（250mL）、燒杯（400mL）、球形冷凝管、乙醇（95%）、減壓過濾裝置、電熱套、豬油。實驗步驟1.在圓底燒瓶中加入新煉制的5g豬油、15mL乙醇和15mL氫氧化鈉溶液。按照圖8-2安裝普通蒸餾裝置。用電熱套加熱，保持微熱40min。此間燒杯內(nèi)產(chǎn)生大量泡沫，可從冷凝管上口滴少量1∶1的乙醇和氫氧化鈉混合液，以防泡沫沖入冷凝管中。1-圓底燒瓶2-冷凝管2.鹽析分離

皂化反應(yīng)結(jié)束后，趁熱將反應(yīng)混合液倒入盛有150mL飽和食鹽水的燒杯中，靜止冷卻。將充分冷卻后的皂化液倒入布氏漏斗中，減壓過濾。用冷卻水洗滌沉淀兩次，抽干。

3.濾餅取出后，隨意壓制成型，自然晾干后，稱量質(zhì)量并計算產(chǎn)率。注意事項

1.在制備肥皂時加入乙醇，是因為酒精既能溶解堿，又能溶解油脂，是油脂和NaOH的共同溶劑，能使反應(yīng)物融為均一的液體，使皂化反應(yīng)在均勻的系統(tǒng)中進(jìn)行，并且速率加快。2.可用長玻璃管從冷凝管上口插入燒杯中，蘸取幾滴反應(yīng)液，放入盛有少量熱水的試管中。3.油脂在適量堿溶液中水解即生成高級脂肪酸鹽(肥皂)和甘油。加入NaOH溶液的作用，就是使油脂在堿性條件下水解，以制取肥皂。4.加入飽和NaCl溶液的作用，是高級脂肪酸鈉(肥皂)發(fā)生凝聚而從混合液中析出，并浮在表面，而皂化反應(yīng)的另一副產(chǎn)物甘油、未作用的堿和酒精能在NaCl溶液中溶解，得到質(zhì)地較好的肥皂。

5.豬油的化學(xué)式可表示為：（C17H35COO）3C3H5。6.氫氧化鈉的濃度一定要足夠大。7.飽和氯化鈉的量一定要控制好，否則都不利于肥皂的析出。學(xué)習(xí)掌握有關(guān)操作1.掌握普通回流裝置的安裝與操作方法；2.熟練掌握沉淀的洗滌及減壓過濾操作技術(shù)。

1.實驗室為什么使用新煉制的的豬油？制作肥皂時除豬油作原料外，還有哪些物質(zhì)可以用來制肥皂?試舉例說明。2.制作肥皂的基本原理是什么？3.皂化反應(yīng)后，為什么要進(jìn)行鹽析分離？4.皂化反應(yīng)過程中，為什么始終保持微熱？5.制作肥皂時為什么采用回流裝置？廢液中還有哪些副產(chǎn)品，怎么進(jìn)行回收？6.皂化液和準(zhǔn)備添加的混合液中乙醇含量較高，易燃燒，應(yīng)注意什么？提問任務(wù)三蔬菜中葉綠素的提取、分離和含量測定

實驗?zāi)康牧私庵参锝M織中葉綠素的分布及性質(zhì)；能獨立完成文獻(xiàn)查閱，掌握天然產(chǎn)物的分離提取、鑒定和含量測定等實驗技術(shù)。實驗內(nèi)容與要求1.查閱資料通過查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，對蔬菜中葉綠素的提取、分離和含量測定擬定出實驗方案。2.提取蔬菜中葉綠素根據(jù)擬定的實驗方案，在實驗室內(nèi)由學(xué)生自己準(zhǔn)備所需儀器和試劑，經(jīng)實驗教師同意后進(jìn)行實驗。3.蔬菜中葉綠素的分離根據(jù)擬定的方案進(jìn)行分離，在實驗室內(nèi)由學(xué)生自己準(zhǔn)備所需的儀器和試劑，獨立進(jìn)行實驗，對所提取的樣品進(jìn)行分離。分離主要包括裝柱、洗滌劑的選擇等工作。實驗時強調(diào)學(xué)生注意安全。4.葉綠素含量的測定應(yīng)用分光光度法測定蔬菜中葉綠素的含量。提問1.提取葉綠素需要哪些儀器、原料和試劑?2.提取葉綠素的原理是什么？Ⅰ葉綠體色素的提取、分離（紙層析法）設(shè)計實驗?zāi)康?/p>

通過實驗，掌握葉綠體色素提取、分離的基本原理和方法。實驗原理葉綠體中含有綠色素（葉綠素a和葉綠素b）和黃色素（胡蘿卜素和葉黃素）。這兩類色素均不溶于水，而溶于有機溶劑，故常用酒精或丙酮等提取。葉綠體色素可用色層分析法加以分離。其原理主要是色素種類不同，被吸附劑吸附的強弱就不同，當(dāng)用適當(dāng)溶劑推動時，不同色素的移動速度不同，色素便被分離。實驗步驟

1.葉綠體色素的提取稱取新鮮葉片2g剪碎于研缽中，加少量95﹪酒精（或80﹪丙酮）和少量CaCO3粉及石英砂，研磨成勻漿，再加95﹪酒精（或80﹪丙酮）l0ml稀釋研磨后，用濾紙過濾于小瓶中，濾液即為葉綠體色素提取液。

2.點樣取層析濾紙條（規(guī)格為1.5×10cm），在其一端距邊沿約1.5cm處畫一點樣線，用玻璃毛細(xì)管吸取葉綠體色素提取液點于點樣線上，每點一次樣待稍干后再點下一次，重復(fù)在原樣點點樣4～5次，然后將樣點完全吹干后進(jìn)行色素層析分離。

3.層析取一支平底試管，加入推動劑溶液（石油醚：丙酮以10:1比例混合）約2ml，將己點好樣的濾紙條插入試管中，使點樣端浸入推動劑中（注意樣點不能浸入溶劑中），加塞，直立于暗處層析。約5min（推動劑到達(dá)距濾紙前沿約2cm處）后，將濾紙條取出，用鉛筆標(biāo)出各色帶的位置。

結(jié)果鑒定

觀察濾紙條上的色帶分布，根據(jù)各色帶的顏色標(biāo)明為何種色素。

Ⅱ葉綠素含量的測定方法一實驗?zāi)康?/p>

掌握葉綠素含量測定的基本原理和方法。

實驗原理葉綠素與其他顯色物質(zhì)一樣，在溶液中如液層厚度不變則其吸光度與它的濃度成一定的比例關(guān)系。已知葉綠素a、b在652nm波長處有相同的比吸收系數(shù)（均為34.5）。因此，在此波長下測定葉綠素溶液的吸光度，即可計算出葉綠素a、b的總量。1.材料：菠菜葉；芥菜葉或其他植物葉片。2.儀器設(shè)備：電子分析天平；分光光度計；漏斗；25ml容量瓶；剪刀；濾紙；玻棒等。3.試劑：95﹪乙醇、石英砂、碳酸鈣粉。材料、儀器設(shè)備及試劑

1.葉綠素的提取稱取植物鮮葉0.20g（可視葉片葉綠素含量增減用量），剪碎放入研缽中，加少量碳酸鈣粉和石英砂及3～5ml95﹪乙醇研成勻漿，再加約10ml95﹪乙醇稀釋研磨后，用濾紙過濾入25ml容量瓶中，然后用95﹪乙醇滴洗研磨及濾紙至無綠色為止，最后定容至刻度，搖勻，即得葉綠素提取液。

2.測定取光徑為1cm的比色杯，倒入葉綠素提取液距杯口1cm處，以95﹪乙醇為空白對照，在652nm波長下讀取吸光度（A）值。實驗步驟

將測得的吸光度A652值代入公式(1),即可求得提取液中葉綠素濃度。所得結(jié)果再代入公式(2)，即可得出樣品中葉綠素含量（mg·g－1Fw）。

A652

C(mg·ml－1)=————……(1)34.5公式中：C—葉綠素（a和b）的總濃度(mg·ml－1)A652—表示在652nm波長下測得葉綠素提取液的吸光度

34.5為葉綠素a和b混合溶液在652nm波長的比吸收系數(shù)（比色杯光徑為1cm,樣品濃度為1g·L－1時的吸光度）。

C（mg·ml－1）×提取液總量（ml）葉綠素含量（mg·g－1Fw）=—————————————--------（2）

樣品鮮重（g）

計算實驗?zāi)康?/p>

掌握葉綠素a、b含量測定的基本原理和方法。

方法二葉綠素a、b分別在663nm和645nm波長處有最大的吸收峰，同時在該波長處葉綠素a.、b的比吸收系數(shù)K為已知，我們即可以根據(jù)Lambert－Beer定律，列出濃度C與吸光度A之間的關(guān)系式：A663=82.04Ca+9.27Cb……(1)A645=16.75Ca+45.6Cb……(2)（1）、（2）式中的A663.A645為葉綠素溶液在波長663nm和645nm時測得的吸光度。

Ca、、Cb為葉綠素a、b的濃度，單位為mg·L－1。82.04、9.27為葉綠素a、b在波長663nm下的比吸收系數(shù)。16.75、45.6為葉綠素a、b在波長645nm下的比吸收系數(shù)。解（1）、(2)式聯(lián)立方程，得：Ca=12.70A663–2.69A645……(3)Cb=22.9A645–4.68A663……(4)CT=Ca+Cb=20.21A645+8.02A663……(5)Ca、Cb為葉綠素a、b的濃度,CT為總?cè)~綠素濃度，單位:（mg·L－1）’利用上面(3)、（4）、（5）式可以分別計算出葉綠素a、b及總?cè)~綠素濃度。實驗原理

1.材料：菠菜葉、芥菜葉或其他植物葉片2.儀器設(shè)備：電子分析天平；分光光度計；恒溫水浴鍋；25ml刻度試管；剪刀；試管；試管架；玻棒等。3.試劑：80﹪乙醇。材料、儀器設(shè)備及試劑

1.葉綠素的提取從植株上選取有代表性的葉片數(shù)張（除去粗大葉脈）剪碎后混勻，快速稱取0.2g(可視樣品葉綠素含量高低而增減用量)，置于25ml刻度試管中，加80﹪乙醇10ml左右，加塞放入60～80℃水浴中保溫提取葉綠素（或常溫下放在暗處浸提12～24h），至葉片全部褪綠為止，冷卻后，用80﹪乙醇定容至刻度，此液即為葉綠素提取液。2.測定取光徑為1cm的比色杯，加入葉綠素提取液距比色杯口1cm處，以80﹪乙醇作為對照，分別于663nm及645nm波長下測定吸光度（A）值。實驗步驟將測定得到的吸光度A663、A645值分別代入上面(3)、(4)、（5）式計算出Ca

、Cb及CT(即葉綠素a、b及葉綠素總量濃度)。再按下式計算出葉綠素a、b及葉綠素總含量。Ca×提取液總量(ml)葉綠素a含量（mg·g－1Fw）=—————————————

樣品鮮重（g）×1000Cb×提取液總量(ml)葉綠素b含量（mg·g－1Fw）=————————————樣品鮮重（g）×1000CT×提取液總量(ml)

葉綠素總含量（mg·g－1Fw）=————————————樣品鮮重（g）×1000最后計算出葉綠素a/葉綠素b的比值，并加以分析。結(jié)果計算任務(wù)四蔬菜中農(nóng)藥殘留物的檢測實驗?zāi)康奶接戅r(nóng)藥殘留的快速檢測方法；應(yīng)用酶抑制法，確定分析方案，從而達(dá)到掌握殘留農(nóng)藥測定的方法。

課前準(zhǔn)備

1.閱讀本實驗。實驗中所需要的主要儀器

。

2.實驗室制備原理（用化學(xué)方程式表示）

。

3.本實驗需要的藥品有:

。

實驗內(nèi)容1.查閱文獻(xiàn)通過查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，對蔬菜中農(nóng)藥殘留物的檢測擬定實驗方案。2.蔬菜中農(nóng)藥殘留物的檢測對所提取的樣品，根據(jù)擬定的方法進(jìn)行分離，在實驗室內(nèi)由學(xué)生自己準(zhǔn)備所需的儀器和試劑，經(jīng)實驗教師同意后，學(xué)生獨立進(jìn)行實驗，確定農(nóng)藥殘留。實驗時強調(diào)學(xué)生注意操作安全。注意事項1.農(nóng)藥殘留速測儀的檢測原理是利用速測卡中的膽堿酯酶（白色藥片）可催化靛酚乙酸酯（紅色藥片）水解為乙酸和靛酚，由于有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶的活性有強烈的抑制作用，因此，根據(jù)顏色變化程度的不同，即可判斷樣品中含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留情況。2.我國生產(chǎn)了很多快速測定蔬菜中農(nóng)藥殘留物的檢測儀，可查有關(guān)資料了解用途及操作方法。提問1.殘留農(nóng)藥速測儀的測定原理是什么？2.殘留農(nóng)藥速測儀的操作步驟有哪些？任務(wù)五玉米秸稈制備乙醇

實