結(jié)核菌素及結(jié)核菌素試驗

關(guān)于結(jié)核菌素及結(jié)核菌素試驗結(jié)核菌素

結(jié)核菌素簡稱結(jié)素，是由結(jié)核桿菌濾液制成的一種試劑，即用人型結(jié)核桿菌培養(yǎng)后加熱殺死結(jié)核菌所提煉的濃縮液，不含任何死菌或活菌，在臨床和結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查中廣泛應(yīng)用。第2頁,共20頁，2024年2月25日，星期天一、目前我國常用的結(jié)核菌素種類1、舊結(jié)核菌素（OldTuberculinOT）：

是從生長過結(jié)核菌的液體培養(yǎng)基中提煉出來的結(jié)核菌代謝產(chǎn)物.它由結(jié)核菌的菌體全部和培養(yǎng)基等成分構(gòu)成，主要有：（1）菌體蛋白、多糖、核酸、脂類；（2）菌體代謝產(chǎn)物；（3）培養(yǎng)基成分。試驗中易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)。80年代前使用，現(xiàn)在已不用。第3頁,共20頁，2024年2月25日，星期天2、結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）：結(jié)核菌純蛋白衍生物，它是將舊結(jié)素過濾后，再用硫酸銨等加以沉淀而獲得的純度較高的結(jié)核桿菌分泌蛋白質(zhì)。

其制作過程：菌株→培養(yǎng)→滅菌、濾過→濃縮→鹽析、脫鹽→干燥、保存→分裝。

我國從人型結(jié)核菌制成PPD（PPD-C），又從卡介苗制成卡介菌純蛋白衍生物（BCG-PPD），0.1ml為5IU用于臨床診斷。應(yīng)用中特異性反應(yīng)更加敏感和準(zhǔn)確，90年代后至今一直在使用。第4頁,共20頁，2024年2月25日，星期天二、結(jié)核菌素試驗方法(一）、試驗方法分類皮上劃痕法（Pirquet）軟膏粘貼法（Moro）皮上多刺法（Heaf）皮內(nèi)注射法(C.Mantoux第5頁,共20頁，2024年2月25日，星期天（二）、皮內(nèi)注射的部位和方法

選擇1ml一次性注射器，在左前臂掌側(cè)前1/3中央皮膚處，用75%的酒精消毒，注射時繃緊皮膚，針管平放，注射器刻度和針孔斜面一致向上，淺淺地與皮膚平行刺入皮內(nèi)，不見針孔即可，將0.1mlPPD緩慢注入皮內(nèi)，劑量準(zhǔn)確時，局部可出現(xiàn)直徑6-8mm大小的橘皮樣皮丘。

不能把皮丘的大小作為衡量劑量的指標(biāo)（注意：在注射前應(yīng)詢問患者以前曾否做過該試驗，如做過應(yīng)問清時間、部位，以免引起促進(jìn)反應(yīng)。同時了解是否存在接種禁忌癥。）第6頁,共20頁，2024年2月25日，星期天三.結(jié)素試驗禁忌癥：a.患有重癥或熱性疾病，體溫超過37.5度，及各種傳染病的恢復(fù)期，結(jié)素試驗可能發(fā)生不良反應(yīng)，使其病情加重。b.有器質(zhì)性疾病如：心血管、腎臟病、胃腸病的急性期。C.有過敏反應(yīng)史、特別是預(yù)防注射過敏史和免疫缺陷的人員。d.明顯營養(yǎng)不良，體弱和嚴(yán)重衰弱者。e.正在使用激素等免疫抑制劑治療者。f.在既往結(jié)素試驗中出現(xiàn)水泡、壞死等非常強(qiáng)烈反應(yīng)者。g.患有彌漫性皮膚病者或注射部位有皮膚病。家族皮膚病史。h.有癲癇、癔病等神經(jīng)系統(tǒng)疾病。第7頁,共20頁，2024年2月25日，星期天第8頁,共20頁，2024年2月25日，星期天

四.結(jié)果觀察試驗結(jié)果需在皮試后48—96小時觀察，我國通常規(guī)定在皮試后72小時為觀測反應(yīng)時間，測量時以硬結(jié)（橫徑+縱徑/2）大小為主，不以紅暈大小作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。因為硬結(jié)為特異性變態(tài)反應(yīng)，而紅暈為非特異性反應(yīng)。有的情況下硬結(jié)和紅暈大小一致。反應(yīng)大小以mm記錄，不應(yīng)記錄為+、-號。第9頁,共20頁，2024年2月25日，星期天硬結(jié)示意圖

平均直徑=橫徑+縱徑/2第10頁,共20頁，2024年2月25日，星期天五.結(jié)素反應(yīng)結(jié)果分類：1）陰性反應(yīng)：注射部位無硬結(jié)或硬結(jié)平均直徑＜5mm.2)陽性反應(yīng)：硬結(jié)平均直徑≥5mm___陽性

5-9mm___一般陽性

10-19mm___中度陽性

≥20mm(5歲以下兒童≥15mm)___強(qiáng)陽性反應(yīng)≤20mm，但是出現(xiàn)水泡、潰瘍、壞死或淋巴管炎--強(qiáng)陽性陽性和陰性之間不可能有精確的科學(xué)分界。但是一般反應(yīng)越強(qiáng)則結(jié)核菌感染的可能性越大，但皮試陽性并不意味著就是結(jié)核病人。第11頁,共20頁，2024年2月25日，星期天六.影響結(jié)素反應(yīng)強(qiáng)度的因素1.結(jié)素試驗的假陰性反應(yīng)a.機(jī)體處于變態(tài)反應(yīng)前期感染后3-8周，機(jī)體沒有形成免疫b.重癥或進(jìn)展期的結(jié)核?。簜鬟f免疫作用的致敏淋巴細(xì)胞減少。結(jié)腦粟粒干酪性肺炎c.有HIV感染、AIDS、麻疹、猩紅熱、腮腺炎等急性傳染病免疫機(jī)制受到抑制，結(jié)素陰性d.某些疾?。喊籽　⒔Y(jié)節(jié)病、癌癥等，免疫系統(tǒng)受干擾，結(jié)素可陰性e.藥物因素：應(yīng)用免疫抑制劑，如激素等結(jié)素可陰性f.其他因素：老年、營養(yǎng)不良、高燒等均能使結(jié)素反應(yīng)成陰性g.技術(shù)因素：結(jié)素效價低、注射劑量不足、判斷和記錄錯誤h.非典型抗酸桿菌感染：約占結(jié)素陰性病人的50%。第12頁,共20頁，2024年2月25日，星期天2.結(jié)素試驗的假陽性a.非典型分支桿菌感染對結(jié)素試驗有交叉反應(yīng)b.結(jié)素試驗的復(fù)強(qiáng)作用（接種卡介苗或受感染，弱陽性-重復(fù)試驗-增強(qiáng)過敏反應(yīng)強(qiáng)度）c.同一部位重疊試驗（促進(jìn)反應(yīng)）（特點(diǎn);出現(xiàn)早、反應(yīng)大，消失快)d.紫外線照射、或因注射引起的非特異性刺激導(dǎo)致判斷錯誤第13頁,共20頁，2024年2月25日，星期天3.結(jié)素試驗的促進(jìn)和復(fù)強(qiáng)a.促進(jìn)反應(yīng):當(dāng)在同一部位反復(fù)注射結(jié)素時，反應(yīng)與初次注射相比出現(xiàn)早、程度強(qiáng)，但消退快。6小時出現(xiàn)，12-24小時高峰，持續(xù)4-6年，更換注射部位可以避免b.復(fù)強(qiáng)作用：不同部位重復(fù)注射結(jié)素已經(jīng)致敏的機(jī)體經(jīng)過一段時間后過敏性已經(jīng)減弱或消失，當(dāng)再次注射結(jié)素時使減弱的過敏反應(yīng)恢復(fù)，這種現(xiàn)象稱為復(fù)強(qiáng)作用。未接種卡介苗，未受自然感染的機(jī)體無復(fù)強(qiáng)作用第14頁,共20頁，2024年2月25日，星期天七、結(jié)素試驗結(jié)果的意義

1.陰性的意義

a.未受結(jié)核菌感染，非結(jié)核病人；b.已受結(jié)核菌感染但處于結(jié)核感染早期（3—8周）；c.老年人；d.營養(yǎng)不良、HIV感染、尿毒癥、惡性腫瘤接受放、化療者等免疫功能低下者（免疫系統(tǒng)受干擾）；f.使用腎上腺皮質(zhì)激素的患者；g.有發(fā)高熱的急性傳染?。檎?、猩紅熱、水痘）或重癥結(jié)核?。ㄋ诹Ｐ头谓Y(jié)核、結(jié)核性腦膜炎）患者；h.技術(shù)誤差注射劑量不足或結(jié)核菌素失效。*結(jié)素試驗陰性并不100%意味著未受結(jié)核菌感染。(存在著結(jié)素試驗假陰性的問題）第15頁,共20頁，2024年2月25日，星期天2.陽性的意義：人為或自然感染，對結(jié)核菌有免疫力（1）接種卡介苗后；（2）結(jié)核病病人；（3）無明顯臨床癥狀僅呈一般陽性反應(yīng)，表示曾感染過結(jié)核桿菌；（4）嬰幼兒尤其是未接種卡介苗者（5歲以下），并伴有發(fā)燒等不適，陽性反應(yīng)多表示體內(nèi)有活動性結(jié)核病灶。年齡愈小，活動性結(jié)核可能性愈大；（5）強(qiáng)陽性反應(yīng)者，表示體內(nèi)可能有活動性結(jié)核??；結(jié)合臨床（6）由陰性反應(yīng)轉(zhuǎn)為陽性反應(yīng)，或反應(yīng)強(qiáng)度由原來小于10mm增至大于10mm，且增幅超過6mm時，表示新近有感染。由于廣泛推行卡介苗接種，結(jié)核菌素試驗的診斷價值受到一定限制。接種卡介苗與自然感染陽性反應(yīng)的主要區(qū)別見表1；(7)技術(shù)誤差及其他原因引起的假陽性反應(yīng)第16頁,共20頁，2024年2月25日，星期天接種卡介苗與自然感染陽性反應(yīng)的主要區(qū)別接種卡介苗自然感染硬結(jié)直徑多為5—9mm多為10—15mm硬結(jié)顏色淺紅深紅硬結(jié)質(zhì)地較軟，邊緣不整較硬，邊緣清楚陽性反應(yīng)持續(xù)時間較短，2—3天即消失較長，可達(dá)7—10天以上陽性反應(yīng)的變化有較明顯的逐年減弱傾向，一般3—5年內(nèi)逐漸消失短時間內(nèi)反應(yīng)無減弱傾向，可持續(xù)若干年，甚至終身第17頁,共20頁，2024年2月25日，星期天八、結(jié)素反應(yīng)的付作用及其處理1.結(jié)素副反應(yīng)：

1）、全身反應(yīng)暈厥或暈針過敏性休克發(fā)熱及淋巴細(xì)胞減少全身出疹（猩紅色丘疹）2）.局部反應(yīng)：水泡、潰瘍、壞死和淋巴管炎第18頁,共20頁，2024年2月25日，星期天2.副反應(yīng)的處理水泡:水泡較小用紅霉素藥膏涂抹即可，如較大，可用一次性滅菌注射器將液體抽出，再涂上藥膏并無菌包扎。潰瘍:紅霉素藥膏,硫磺粉消毒紗布包扎淋巴管炎:每日局部熱敷2-3次,減少前