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文檔簡介
第十單元現(xiàn)代生物科技專題
學案49基因工程
【考綱要求】1.基因工程誕生(I)o2.基因工程原理及技術(n)。3.基因
工程應用(n)。4.蛋白質(zhì)工程(I)。
一、基因工程概念
基因工程:又叫做技術或技術,是按照人們意愿,
把一種生物某種基因提取出來,加以,然后放到另一種生物
細胞里,地改造生物遺傳性狀。
二、基因工程操作工具
1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術刀",又稱為O
特點:能夠識別DNA特定_____________,切開兩個之間
限制酶切割DNA產(chǎn)生末端有兩種形式:與o
2.DNA連接酶——“分子縫合針”
作用:將雙鏈_______“縫合”起來,恢復被限制酶切開兩個核甘酸
之間O
3.基因進入受體細胞載體—“分子運輸車”
⑴常用載體:O
⑵質(zhì)粒載體特點:①能夠在細胞內(nèi)并穩(wěn)定保存。②具有一個
或多個,便于外源DNA片段插入其中。③具有特
殊,供重組DNA鑒定與選擇。
三、基因工程根本操作程序
第1頁
1.目基因獲?。孩艔闹蝎@??;(2)利用
擴增目基因;⑶合成。
2.構建(核心)
⑴目:使_______基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一
代,使目基因能夠表達與發(fā)揮作用。
3.將目基因?qū)胧荏w細胞(轉化)
⑴將目基因?qū)胫参锛毎撼S梅椒ㄓ蟹?、基因槍法與
__________法。
⑵將目基因?qū)雱游锛毎撼S梅椒ㄊ莀______法。
⑶將目基因?qū)胛⑸锛毎菏荏w細胞飛魄-
含耳5'麟陶洲,感受態(tài)細胞吸
收DNA分子
4.目基因_______與o
探究點一基因工程概念及操作工具
1.基因工程概念是什么?
2.完成理解基因工程操作工具比擬表:
限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶(分
工程運載體(分子運輸車)
(分子手術刀)子縫合針)
識別特定______序一般作用于兩能夠在宿主細胞中___
特性
列,并在條具有一樣并穩(wěn)定—;具有一個或
或條
__________切割______DNA分一個限制酶切位點;具
件
DNA分子子有―基因
第2頁
提取—基因,切構建重組DNA將_______轉移到宿主
作用
割—分子細胞中并大量復制
將DNA分子切成一樣黏性末端
結果DNA片段,產(chǎn)生之間形成形成重組_______
___末端_______鍵
思維拓展
1.對基因工程概念理解
基因拼接技術或DNA重
別名
組技術
操作環(huán)境生物體外
操作對象基因
操作水平DNA分子水平
剪切一拼接一導入一表
根本過程
達
結果人類需要基因產(chǎn)物
與雜交育種克制遠緣雜交不親與障
相比礙
與誘變育種
定向改造生物性狀
相比
原理基因重組
2.在切割目基因與載體時要求用同一種限制酶,目是產(chǎn)生一樣黏性末
輛,kill。
第3頁
3.將一個基因從DNA分子上切割下來,需要2個限制酶,同時產(chǎn)生
4個黏性末端。
4.不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生黏性末端都一樣,同一個
DNA分子用不同限制酶產(chǎn)生黏性末端可能一樣。
避究例如1](2021?全國理綜D,5)以下表達符合基因工程概念是
()
A.B細胞與腫瘤細胞融合,雜交瘤細胞中含有B細胞中抗體基因
B.將人干擾素基因重組到質(zhì)粒后導入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾
素菌株
C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素
高產(chǎn)菌株
D.自然界中天然存在噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌
DNA上
聽課記錄:
探究點二基因工程根本操作程序
1.完成基因工程根本操作流程圖:
2.完成目基因檢測與鑒定表,并加以理解、掌握:
類型步驟檢測內(nèi)容方法
分目基因是否插入受體_______________(D
第一步
子細胞染色體DNA上NA與DNA之間)
水目基因是否轉錄出_______雜交技術
第二步
平mRNA(DNA與mRNA之間)
第4頁
蛋白質(zhì)分子雜交
目基因是否翻譯出蛋
第三步(_____________雜交
白質(zhì)
法)
___水
——法或—法
平鑒定
思維拓展
1.在整個工程中,只有第三步將目基因?qū)胧荏w細胞過程中不發(fā)生
堿基互補配對,其他步驟均發(fā)生配對。
2.切割質(zhì)粒與目基因限制酶必須是同一種酶,以獲得一樣黏性末端,
利于基因表達載體構建。
3.插入目基因只是構造基因局部,其表達需要調(diào)控序列,因而用作
載體質(zhì)粒插入部位前須有啟動子,后須有終止子。
4.PCR技術與DNA復制比擬
PCR技術DNA復制
原
DNA雙鏈復制(堿基互補配對)
理
相
原
同四種游離脫氧核甘酸
料
點
條
模板、ATP、酶等
件
不解
DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化
同旋
第5頁
點方
式
場
體外復制主要在細胞核內(nèi)
所
熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq細胞內(nèi)含有DNA聚
酶
酶)合酶
結在短時間內(nèi)形成大量
形成整個DNA分子
果DNA片段
豚究例如2](2021?浙江卷,6)將ada(腺甘酸脫氨酶基因)通過質(zhì)
粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺甘酸脫氨酶。以下表達錯誤是
()
A.每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒
B.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點
C.每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個ada
D.每個插入ada至少表達一個腺甘酸脫氨酶分子
聽課記錄:
探究點三基因工程應用
完成基因工程應用表格,了解應用成果。
轉基因生物目基因成果舉例
植抗蟲基因:Bt毒蛋
抗蟲轉基因植抗蟲水稻、抗蟲棉、
物白基因、蛋白酶抑
物抗蟲玉米
基制劑基因、淀粉酶
第6頁
因抑制劑基因、植物
工凝集素基因
程抗——基因:病毒
外殼蛋白基因、病
抗病毒煙草、抗病
抗病轉基因植毒復制酶基因;抗
毒小麥、抗病毒番
物——基因:幾丁質(zhì)
茄、抗病毒甜椒
酶基因、抗毒素合
成基因
抗逆轉基因:滲透
抗鹽堿與抗干旱煙
抗逆轉基因植壓調(diào)節(jié)基因、抗凍
草、抗寒番茄、抗
物蛋白基因、抗除草
______大豆與玉米
劑基因
優(yōu)良性狀基因:提
高必需氨基酸含量
高______玉米、耐
蛋白質(zhì)編碼基因、
儲存番茄、新花色
轉基因植物控制番茄成熟基
矮牽牛
因、與花青素代謝
有關基因
動提高生長速度轉基因綿羊、轉基
基因
物轉基因動物因鯉魚
基生產(chǎn)藥物藥用蛋白基因+乳
—生物反響器
因轉基因動物腺蛋白基因啟動子
第7頁
工改善畜產(chǎn)品品質(zhì)乳汁中含乳糖較少
________基因
程轉基因動物轉基因牛
外源抗原決定基因
利用克隆技術培育
作器官移植供體表達——因子或除
沒有免疫排斥反響
轉基因動物去供體——決定基
豬器官
因
基治療______免疫缺
體外基因治療腺甘酸脫氨酶基因
因陷癥
治治療囊性纖維化病治療______囊性纖
體內(nèi)基因治療
療基因維化病
思維拓展基因治療是治療人類遺傳病根本方法,但由于尚未全面了
解基因調(diào)控機制與疾病分子機理,基因治療只處于初期臨床試驗階段。
【探究例如3](2021?上海綜合能力測試)運用轉基因技術培養(yǎng)單細
胞“工程硅藻”,可把光合作用合成有機物以脂質(zhì)形式儲存起來???/p>
學家方案在海水中大量培養(yǎng)“工程硅藻",捕撈后從中提煉“生物柴
油"。與礦物柴油相比,使用這種“生物柴油”優(yōu)點是()
①可再生②不顯著增加碳排放③不排放含硫廢氣
④不會對生態(tài)環(huán)境造成負面影響
A.①②③B.①③④
C.①②④D.②③④
聽課記錄:
探究點四蛋白質(zhì)工程
第8頁
1.蛋白質(zhì)工程概念
蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子構造規(guī)律及其與生物功能關系作為根
底,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋
白質(zhì)進展改造,或制造一種新蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)與生活需求。
2.蛋白質(zhì)工程過程填充
蛋白質(zhì)工程過程:其根本途徑是從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設計預期蛋
白質(zhì)-推測應有序列一找到相對應
序列()o其流程圖如下:
思維拓展
1.對蛋白質(zhì)工程概念應從以下幾個方面理解
⑴蛋白質(zhì)工程根底:蛋白質(zhì)分子構造規(guī)律及其與生物功能關系;⑵
蛋白質(zhì)工程實質(zhì):改造控制該蛋白質(zhì)合成基因;⑶蛋白質(zhì)工程產(chǎn)物:
產(chǎn)生新蛋白質(zhì),是自然界所沒有。
2.蛋白質(zhì)工程是在基因工程根底上,延伸出來第二代基因工程。因
為對現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造或制造新蛋白質(zhì),必須通過基因修飾或基因合成
實現(xiàn)。
【探究例如4】以下關于蛋白質(zhì)工程說法正確是()
A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底
B.蛋白質(zhì)工程就是酶工程延伸
C.蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進展改造
D.蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì)
聽課記錄:
第9頁
題組一基因工程及根本操作
1.(2021?四川卷,5)北極比目魚中有抗凍基因,其編碼抗凍蛋白具
有11個氨基酸重復序列,該序列重復次數(shù)越多,抗凍能力越強。以
下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株過程示意圖,有關表達正確是()
A.過程①獲取目基因,可用于基因工程與比目魚基因組測序
B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達新基因,不能得到抗凍
性增強抗凍
蛋白
C.過程②構成重組質(zhì)粒缺乏標記基因,需要轉入農(nóng)桿菌才能進展篩
選
D.應用DNA探針技術,可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目基因存
在及其完全表達
2.以下圖為DNA分子在不同酶作用下所發(fā)生變化,圖中依次表示限
制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用正確順序是()
A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②
3.以下關于基因工程表達,不正確是(多項選擇)()
A.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為目基因
B.細菌質(zhì)粒是基因工程常用運載體
C.通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目基因DNA,用另一種處理
運載體DNA
D.為培育成抗除草劑作物新品種,導入抗除草劑基因時只能以受精
卵為受體
第10頁
題組二基因工程應用及蛋白質(zhì)工程
4.(2021?鎮(zhèn)江質(zhì)檢)科學家將干擾素基因進展定點突變導入大
腸桿菌表達,使干擾素第十七位半胱氨酸,改變成絲氨酸,結果
大大提高了B-干擾素抗病毒活性,并且提高了儲存穩(wěn)定性。該生物
技術為()
A.蛋白質(zhì)工程B.基因工程
C.基因突變D.細胞工程
5.以下關于基因工程及其應用表達正確是()
A.假設要生產(chǎn)轉基因抗病水稻,可先將目基因?qū)氪竽c桿菌中,再
轉入水稻細胞
B.用氨基酸序列推測合成目基因與原基因編碼區(qū)中外顯子一致
C.用DNA探針能檢測飲用水中重金屬物質(zhì)含量
D.作為運載體要有多種限制酶切點,但對一種限制酶而言,最好只
有一個切點
6.(2021?南師大附中學情分析)蛋白質(zhì)工程中,直接需要進展操作
對象是()
A.氨基酸構造B.蛋白質(zhì)空間構造
C.肽鏈構造D.基因構造
7.科學家將動物體內(nèi)能夠合成胰島素基因與大腸桿菌DNA分子重
組,并且在大腸桿菌體內(nèi)表達成功。請據(jù)圖答復以下問題:
(1)圖中①DNA是以為模板,形成單鏈DNA,在酶
作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要基因。
第11頁
⑵圖中②代表是____________,在它作用下將質(zhì)粒(DNA)切
出________末端。
⑶圖中④表示將o⑤表示DNA隨大腸桿
菌繁殖而進展________o
⑷采用蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進展改造,使之起效時間縮短,保證
餐后血糖頂峰與血液中胰島素頂峰一致。如果你是科研工作者,請寫
出研制速效胰島素思路。
⑸以下關于蛋白質(zhì)工程說法不正確是()
A.蛋白質(zhì)工程能將人抗體某些區(qū)段替代鼠單克隆抗體區(qū)段,降低鼠
單克隆抗體免疫原性
B.蛋白質(zhì)工程可對酶催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、
堿變性等加以改變
C.理論上通過對關鍵氨基酸置換與增刪是進展蛋白質(zhì)工程唯一方法
D.蛋白質(zhì)工程崛起主要是工業(yè)生產(chǎn)與根底理論研究需要
題組三綜合題
8.(2021?安徽理綜,31II)家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。
將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。
⑴進展轉基因操作前,需用酶短時處理幼蠶組織,以便獲得
單個細胞。
⑵為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達,需要把來自cDNA文庫干
擾素基因片段正確插入表達載體與之間。
⑶采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞。該PCR
第12頁
反響體系主要成分應包含:擴增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖
核甘酸、模板DNA、與
⑷利用生物反響器培養(yǎng)家蠶細胞時,貼壁生長細胞會產(chǎn)生接觸抑制。
通常將多孔中空薄壁小玻璃珠放入反響器中,這樣可以
增加培養(yǎng)細胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
9.干擾素是病毒侵入人體后由淋巴細胞產(chǎn)生一種免疫活性物質(zhì),它
具有廣譜抗病毒作用。利用現(xiàn)代生物技術生產(chǎn)干擾素流程如下:
⑴過程①產(chǎn)生物質(zhì)A是_____,cDNA文庫(大于/小于)人基
因組文庫。
⑵過程④用到工具酶是,過程⑤需先用
處理受體細胞,過程⑥通常采用技術o
⑶過程⑧與⑨關鍵技術分別是_______、o
⑷基因工程核心步驟是圖中(填標號)。
學案49基因工程
課前準備區(qū)
一、基因拼接DNA重組修飾改造定向
二、L限制酶核昔酸序列核甘酸磷酸二酯鍵黏性末端平末
場上山
2.DNA片段磷酸二酯鍵3.(1)質(zhì)粒(2)①自我復制②限制酶切
割位點③標記基因
三、1.⑴基因文庫(2)PCR技術(3)人工
第13頁
2.基因表達載體⑴目⑵標記RNA聚合終止鑒別篩選
3.⑴農(nóng)桿菌轉化花粉管通道⑵顯微注射⑶感受態(tài)4.檢測
鑒定
課堂活動區(qū)
探究點一
1.按照人們愿望,進展嚴格設計,并通過體外DNA重組與轉基因等
技術,賦予生物以新遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要新生物類
型或生物產(chǎn)品,又叫DNA重組技術。
2.核甘酸特定位點黏性末端復制保存多標記目運
載體目基因黏性磷酸二酯DNA
探究例如1B[基因工程是指按照人們愿望,進展嚴格設計,并通
過體外DNA重組與轉基因等技術,賦予生物以新遺傳特性,進而創(chuàng)
造出更符合人們需要新生物類型與生物產(chǎn)品。B細胞與腫瘤細胞融合,
屬于細胞工程;用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,進而篩
選出青霉素高產(chǎn)菌株,屬于人工誘變;自然界中天然存在噬菌體自行
感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上,并沒有進展人為加工,不屬
于基因工程。]
探究點二
1.mRNAPCR基因組文庫cDNA文庫構建基因表達載體
目基因
2.DNA分子雜交技術核酸分子抗原一抗體個體侵染感染
探究例如2C[大腸桿菌成功表達出腺甘酸脫氨酶,說明這些大腸
第14頁
桿菌都至少含有一個重組質(zhì)粒,A項正確;作為載體條件為至少含有
一個或多個酶切位點,所以作為載體質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)
切酶識別位點,B項正確;作為基因表達載體應包括目基因、啟動子、
終止子、標記基因四局部,但并不是每個酶切位點都至少插入一個
ada,C項錯誤;由于這些目基因成功表達,所以每個ada至少表達
一個腺甘酸脫氨酶分子,D項正確。]
探究點三
病毒真菌除草劑改進品質(zhì)賴氨酸外源生長激素乳腺腸
乳糖酶調(diào)節(jié)抗原復合型遺傳性
探究例如3A
探究點四
2.構造氨基酸脫氧核昔酸基因轉錄翻譯氨基酸分子
設計
探究例如4A[蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底,又稱為第二代基因
工程。蛋白質(zhì)工程不僅能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì),還可以定向改造控制蛋白
質(zhì)合成相應基因中脫氧核甘酸序列或人工合成所需要自然界原本不存
在基因片段,從而合成自然界中原本不存在蛋白質(zhì)。]
構建知識網(wǎng)絡
DNA連接酶基因表達載體檢測鑒定
課后練習區(qū)
1.B[因為一種氨基酸可能對應多種密碼子、真核生物體內(nèi)基因含
有內(nèi)含子等因素,導致逆轉錄合成目基因與原基因有較大差異,所以
第15頁
人工合成目基因不能用于比目魚基因組測序,A選項錯誤;抗凍蛋白
11個氨基酸重復序列重復次數(shù)越多,抗凍能力越強,并不是抗凍基因
編碼區(qū)重復次數(shù)越多抗凍能力越強,抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成新
基因已不是原來抗凍基因,因此不能得到抗凍性增強抗凍蛋白,B選
項正確;農(nóng)桿菌轉化法是將目基因?qū)胫参锛毎畛S梅椒?,不是?/p>
了篩選含有標記基因質(zhì)粒,C選項錯誤;應用DNA探針技術,可以
檢測轉基因植物中目基因存在,但不能完成對目基因表達檢測,D選
項錯誤。]
2.C[限制酶可在特定位點對DNA分子進展切割;DNA聚合酶在
DNA分子復制時將脫氧核甘酸連接成脫氧核甘酸鏈;DNA連接酶可
將限制酶切開磷酸二酯鍵連接在一起;解旋酶作用是將DNA雙鏈解
開螺旋,為復制或轉錄提供模板。]
3.ACD[基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為標記基因;質(zhì)粒是基因
工程常用運載體;通常用同一種限制酶切割目基因與運載體,以獲得
一樣黏性末端;受體細胞可以是受精卵,也可以是體細胞。]
4.A[基因工程是通過對基因操作,將符合人們需要目
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