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文檔簡介

第十單元現(xiàn)代生物科技專題

學案49基因工程

【考綱要求】1.基因工程誕生(I)o2.基因工程原理及技術(n)。3.基因

工程應用(n)。4.蛋白質(zhì)工程(I)。

一、基因工程概念

基因工程:又叫做技術或技術,是按照人們意愿,

把一種生物某種基因提取出來,加以,然后放到另一種生物

細胞里,地改造生物遺傳性狀。

二、基因工程操作工具

1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術刀",又稱為O

特點:能夠識別DNA特定_____________,切開兩個之間

限制酶切割DNA產(chǎn)生末端有兩種形式:與o

2.DNA連接酶——“分子縫合針”

作用:將雙鏈_______“縫合”起來,恢復被限制酶切開兩個核甘酸

之間O

3.基因進入受體細胞載體—“分子運輸車”

⑴常用載體:O

⑵質(zhì)粒載體特點:①能夠在細胞內(nèi)并穩(wěn)定保存。②具有一個

或多個,便于外源DNA片段插入其中。③具有特

殊,供重組DNA鑒定與選擇。

三、基因工程根本操作程序

第1頁

1.目基因獲?。孩艔闹蝎@??;(2)利用

擴增目基因;⑶合成。

2.構建(核心)

⑴目:使_______基因在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一

代,使目基因能夠表達與發(fā)揮作用。

3.將目基因?qū)胧荏w細胞(轉化)

⑴將目基因?qū)胫参锛毎撼S梅椒ㄓ蟹?、基因槍法與

__________法。

⑵將目基因?qū)雱游锛毎撼S梅椒ㄊ莀______法。

⑶將目基因?qū)胛⑸锛毎菏荏w細胞飛魄-

含耳5'麟陶洲,感受態(tài)細胞吸

收DNA分子

4.目基因_______與o

探究點一基因工程概念及操作工具

1.基因工程概念是什么?

2.完成理解基因工程操作工具比擬表:

限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶(分

工程運載體(分子運輸車)

(分子手術刀)子縫合針)

識別特定______序一般作用于兩能夠在宿主細胞中___

特性

列,并在條具有一樣并穩(wěn)定—;具有一個或

或條

__________切割______DNA分一個限制酶切位點;具

DNA分子子有―基因

第2頁

提取—基因,切構建重組DNA將_______轉移到宿主

作用

割—分子細胞中并大量復制

將DNA分子切成一樣黏性末端

結果DNA片段,產(chǎn)生之間形成形成重組_______

___末端_______鍵

思維拓展

1.對基因工程概念理解

基因拼接技術或DNA重

別名

組技術

操作環(huán)境生物體外

操作對象基因

操作水平DNA分子水平

剪切一拼接一導入一表

根本過程

結果人類需要基因產(chǎn)物

與雜交育種克制遠緣雜交不親與障

相比礙

與誘變育種

定向改造生物性狀

相比

原理基因重組

2.在切割目基因與載體時要求用同一種限制酶,目是產(chǎn)生一樣黏性末

輛,kill。

第3頁

3.將一個基因從DNA分子上切割下來,需要2個限制酶,同時產(chǎn)生

4個黏性末端。

4.不同DNA分子用同一種限制酶切割產(chǎn)生黏性末端都一樣,同一個

DNA分子用不同限制酶產(chǎn)生黏性末端可能一樣。

避究例如1](2021?全國理綜D,5)以下表達符合基因工程概念是

()

A.B細胞與腫瘤細胞融合,雜交瘤細胞中含有B細胞中抗體基因

B.將人干擾素基因重組到質(zhì)粒后導入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾

素菌株

C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素

高產(chǎn)菌株

D.自然界中天然存在噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌

DNA上

聽課記錄:

探究點二基因工程根本操作程序

1.完成基因工程根本操作流程圖:

2.完成目基因檢測與鑒定表,并加以理解、掌握:

類型步驟檢測內(nèi)容方法

分目基因是否插入受體_______________(D

第一步

子細胞染色體DNA上NA與DNA之間)

水目基因是否轉錄出_______雜交技術

第二步

平mRNA(DNA與mRNA之間)

第4頁

蛋白質(zhì)分子雜交

目基因是否翻譯出蛋

第三步(_____________雜交

白質(zhì)

法)

___水

——法或—法

平鑒定

思維拓展

1.在整個工程中,只有第三步將目基因?qū)胧荏w細胞過程中不發(fā)生

堿基互補配對,其他步驟均發(fā)生配對。

2.切割質(zhì)粒與目基因限制酶必須是同一種酶,以獲得一樣黏性末端,

利于基因表達載體構建。

3.插入目基因只是構造基因局部,其表達需要調(diào)控序列,因而用作

載體質(zhì)粒插入部位前須有啟動子,后須有終止子。

4.PCR技術與DNA復制比擬

PCR技術DNA復制

DNA雙鏈復制(堿基互補配對)

同四種游離脫氧核甘酸

模板、ATP、酶等

不解

DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化

同旋

第5頁

點方

體外復制主要在細胞核內(nèi)

熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq細胞內(nèi)含有DNA聚

酶)合酶

結在短時間內(nèi)形成大量

形成整個DNA分子

果DNA片段

豚究例如2](2021?浙江卷,6)將ada(腺甘酸脫氨酶基因)通過質(zhì)

粒pET28b導入大腸桿菌并成功表達腺甘酸脫氨酶。以下表達錯誤是

()

A.每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒

B.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點

C.每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個ada

D.每個插入ada至少表達一個腺甘酸脫氨酶分子

聽課記錄:

探究點三基因工程應用

完成基因工程應用表格,了解應用成果。

轉基因生物目基因成果舉例

植抗蟲基因:Bt毒蛋

抗蟲轉基因植抗蟲水稻、抗蟲棉、

物白基因、蛋白酶抑

物抗蟲玉米

基制劑基因、淀粉酶

第6頁

因抑制劑基因、植物

工凝集素基因

程抗——基因:病毒

外殼蛋白基因、病

抗病毒煙草、抗病

抗病轉基因植毒復制酶基因;抗

毒小麥、抗病毒番

物——基因:幾丁質(zhì)

茄、抗病毒甜椒

酶基因、抗毒素合

成基因

抗逆轉基因:滲透

抗鹽堿與抗干旱煙

抗逆轉基因植壓調(diào)節(jié)基因、抗凍

草、抗寒番茄、抗

物蛋白基因、抗除草

______大豆與玉米

劑基因

優(yōu)良性狀基因:提

高必需氨基酸含量

高______玉米、耐

蛋白質(zhì)編碼基因、

儲存番茄、新花色

轉基因植物控制番茄成熟基

矮牽牛

因、與花青素代謝

有關基因

動提高生長速度轉基因綿羊、轉基

基因

物轉基因動物因鯉魚

基生產(chǎn)藥物藥用蛋白基因+乳

—生物反響器

因轉基因動物腺蛋白基因啟動子

第7頁

工改善畜產(chǎn)品品質(zhì)乳汁中含乳糖較少

________基因

程轉基因動物轉基因牛

外源抗原決定基因

利用克隆技術培育

作器官移植供體表達——因子或除

沒有免疫排斥反響

轉基因動物去供體——決定基

豬器官

基治療______免疫缺

體外基因治療腺甘酸脫氨酶基因

因陷癥

治治療囊性纖維化病治療______囊性纖

體內(nèi)基因治療

療基因維化病

思維拓展基因治療是治療人類遺傳病根本方法,但由于尚未全面了

解基因調(diào)控機制與疾病分子機理,基因治療只處于初期臨床試驗階段。

【探究例如3](2021?上海綜合能力測試)運用轉基因技術培養(yǎng)單細

胞“工程硅藻”,可把光合作用合成有機物以脂質(zhì)形式儲存起來???/p>

學家方案在海水中大量培養(yǎng)“工程硅藻",捕撈后從中提煉“生物柴

油"。與礦物柴油相比,使用這種“生物柴油”優(yōu)點是()

①可再生②不顯著增加碳排放③不排放含硫廢氣

④不會對生態(tài)環(huán)境造成負面影響

A.①②③B.①③④

C.①②④D.②③④

聽課記錄:

探究點四蛋白質(zhì)工程

第8頁

1.蛋白質(zhì)工程概念

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子構造規(guī)律及其與生物功能關系作為根

底,通過基因修飾或基因合成,對現(xiàn)有蛋

白質(zhì)進展改造,或制造一種新蛋白質(zhì),以滿足人類生產(chǎn)與生活需求。

2.蛋白質(zhì)工程過程填充

蛋白質(zhì)工程過程:其根本途徑是從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)一設計預期蛋

白質(zhì)-推測應有序列一找到相對應

序列()o其流程圖如下:

思維拓展

1.對蛋白質(zhì)工程概念應從以下幾個方面理解

⑴蛋白質(zhì)工程根底:蛋白質(zhì)分子構造規(guī)律及其與生物功能關系;⑵

蛋白質(zhì)工程實質(zhì):改造控制該蛋白質(zhì)合成基因;⑶蛋白質(zhì)工程產(chǎn)物:

產(chǎn)生新蛋白質(zhì),是自然界所沒有。

2.蛋白質(zhì)工程是在基因工程根底上,延伸出來第二代基因工程。因

為對現(xiàn)有蛋白質(zhì)改造或制造新蛋白質(zhì),必須通過基因修飾或基因合成

實現(xiàn)。

【探究例如4】以下關于蛋白質(zhì)工程說法正確是()

A.蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底

B.蛋白質(zhì)工程就是酶工程延伸

C.蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對蛋白質(zhì)進展改造

D.蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì)

聽課記錄:

第9頁

題組一基因工程及根本操作

1.(2021?四川卷,5)北極比目魚中有抗凍基因,其編碼抗凍蛋白具

有11個氨基酸重復序列,該序列重復次數(shù)越多,抗凍能力越強。以

下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株過程示意圖,有關表達正確是()

A.過程①獲取目基因,可用于基因工程與比目魚基因組測序

B.將多個抗凍基因編碼區(qū)依次相連成能表達新基因,不能得到抗凍

性增強抗凍

蛋白

C.過程②構成重組質(zhì)粒缺乏標記基因,需要轉入農(nóng)桿菌才能進展篩

D.應用DNA探針技術,可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目基因存

在及其完全表達

2.以下圖為DNA分子在不同酶作用下所發(fā)生變化,圖中依次表示限

制酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用正確順序是()

A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②

3.以下關于基因工程表達,不正確是(多項選擇)()

A.基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為目基因

B.細菌質(zhì)粒是基因工程常用運載體

C.通常用一種限制性核酸內(nèi)切酶處理含目基因DNA,用另一種處理

運載體DNA

D.為培育成抗除草劑作物新品種,導入抗除草劑基因時只能以受精

卵為受體

第10頁

題組二基因工程應用及蛋白質(zhì)工程

4.(2021?鎮(zhèn)江質(zhì)檢)科學家將干擾素基因進展定點突變導入大

腸桿菌表達,使干擾素第十七位半胱氨酸,改變成絲氨酸,結果

大大提高了B-干擾素抗病毒活性,并且提高了儲存穩(wěn)定性。該生物

技術為()

A.蛋白質(zhì)工程B.基因工程

C.基因突變D.細胞工程

5.以下關于基因工程及其應用表達正確是()

A.假設要生產(chǎn)轉基因抗病水稻,可先將目基因?qū)氪竽c桿菌中,再

轉入水稻細胞

B.用氨基酸序列推測合成目基因與原基因編碼區(qū)中外顯子一致

C.用DNA探針能檢測飲用水中重金屬物質(zhì)含量

D.作為運載體要有多種限制酶切點,但對一種限制酶而言,最好只

有一個切點

6.(2021?南師大附中學情分析)蛋白質(zhì)工程中,直接需要進展操作

對象是()

A.氨基酸構造B.蛋白質(zhì)空間構造

C.肽鏈構造D.基因構造

7.科學家將動物體內(nèi)能夠合成胰島素基因與大腸桿菌DNA分子重

組,并且在大腸桿菌體內(nèi)表達成功。請據(jù)圖答復以下問題:

(1)圖中①DNA是以為模板,形成單鏈DNA,在酶

作用下合成雙鏈DNA,從而獲得了所需要基因。

第11頁

⑵圖中②代表是____________,在它作用下將質(zhì)粒(DNA)切

出________末端。

⑶圖中④表示將o⑤表示DNA隨大腸桿

菌繁殖而進展________o

⑷采用蛋白質(zhì)工程可以對胰島素進展改造,使之起效時間縮短,保證

餐后血糖頂峰與血液中胰島素頂峰一致。如果你是科研工作者,請寫

出研制速效胰島素思路。

⑸以下關于蛋白質(zhì)工程說法不正確是()

A.蛋白質(zhì)工程能將人抗體某些區(qū)段替代鼠單克隆抗體區(qū)段,降低鼠

單克隆抗體免疫原性

B.蛋白質(zhì)工程可對酶催化活性、底物專一性、抗氧化性、熱變性、

堿變性等加以改變

C.理論上通過對關鍵氨基酸置換與增刪是進展蛋白質(zhì)工程唯一方法

D.蛋白質(zhì)工程崛起主要是工業(yè)生產(chǎn)與根底理論研究需要

題組三綜合題

8.(2021?安徽理綜,31II)家蠶細胞具有高效表達外源基因能力。

將人干擾素基因?qū)爰倚Q細胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。

⑴進展轉基因操作前,需用酶短時處理幼蠶組織,以便獲得

單個細胞。

⑵為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達,需要把來自cDNA文庫干

擾素基因片段正確插入表達載體與之間。

⑶采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經(jīng)導入家蠶細胞。該PCR

第12頁

反響體系主要成分應包含:擴增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖

核甘酸、模板DNA、與

⑷利用生物反響器培養(yǎng)家蠶細胞時,貼壁生長細胞會產(chǎn)生接觸抑制。

通常將多孔中空薄壁小玻璃珠放入反響器中,這樣可以

增加培養(yǎng)細胞數(shù)量,也有利于空氣交換。

9.干擾素是病毒侵入人體后由淋巴細胞產(chǎn)生一種免疫活性物質(zhì),它

具有廣譜抗病毒作用。利用現(xiàn)代生物技術生產(chǎn)干擾素流程如下:

⑴過程①產(chǎn)生物質(zhì)A是_____,cDNA文庫(大于/小于)人基

因組文庫。

⑵過程④用到工具酶是,過程⑤需先用

處理受體細胞,過程⑥通常采用技術o

⑶過程⑧與⑨關鍵技術分別是_______、o

⑷基因工程核心步驟是圖中(填標號)。

學案49基因工程

課前準備區(qū)

一、基因拼接DNA重組修飾改造定向

二、L限制酶核昔酸序列核甘酸磷酸二酯鍵黏性末端平末

場上山

2.DNA片段磷酸二酯鍵3.(1)質(zhì)粒(2)①自我復制②限制酶切

割位點③標記基因

三、1.⑴基因文庫(2)PCR技術(3)人工

第13頁

2.基因表達載體⑴目⑵標記RNA聚合終止鑒別篩選

3.⑴農(nóng)桿菌轉化花粉管通道⑵顯微注射⑶感受態(tài)4.檢測

鑒定

課堂活動區(qū)

探究點一

1.按照人們愿望,進展嚴格設計,并通過體外DNA重組與轉基因等

技術,賦予生物以新遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要新生物類

型或生物產(chǎn)品,又叫DNA重組技術。

2.核甘酸特定位點黏性末端復制保存多標記目運

載體目基因黏性磷酸二酯DNA

探究例如1B[基因工程是指按照人們愿望,進展嚴格設計,并通

過體外DNA重組與轉基因等技術,賦予生物以新遺傳特性,進而創(chuàng)

造出更符合人們需要新生物類型與生物產(chǎn)品。B細胞與腫瘤細胞融合,

屬于細胞工程;用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,進而篩

選出青霉素高產(chǎn)菌株,屬于人工誘變;自然界中天然存在噬菌體自行

感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上,并沒有進展人為加工,不屬

于基因工程。]

探究點二

1.mRNAPCR基因組文庫cDNA文庫構建基因表達載體

目基因

2.DNA分子雜交技術核酸分子抗原一抗體個體侵染感染

探究例如2C[大腸桿菌成功表達出腺甘酸脫氨酶,說明這些大腸

第14頁

桿菌都至少含有一個重組質(zhì)粒,A項正確;作為載體條件為至少含有

一個或多個酶切位點,所以作為載體質(zhì)粒至少含有一個限制性核酸內(nèi)

切酶識別位點,B項正確;作為基因表達載體應包括目基因、啟動子、

終止子、標記基因四局部,但并不是每個酶切位點都至少插入一個

ada,C項錯誤;由于這些目基因成功表達,所以每個ada至少表達

一個腺甘酸脫氨酶分子,D項正確。]

探究點三

病毒真菌除草劑改進品質(zhì)賴氨酸外源生長激素乳腺腸

乳糖酶調(diào)節(jié)抗原復合型遺傳性

探究例如3A

探究點四

2.構造氨基酸脫氧核昔酸基因轉錄翻譯氨基酸分子

設計

探究例如4A[蛋白質(zhì)工程以基因工程為根底,又稱為第二代基因

工程。蛋白質(zhì)工程不僅能生產(chǎn)天然蛋白質(zhì),還可以定向改造控制蛋白

質(zhì)合成相應基因中脫氧核甘酸序列或人工合成所需要自然界原本不存

在基因片段,從而合成自然界中原本不存在蛋白質(zhì)。]

構建知識網(wǎng)絡

DNA連接酶基因表達載體檢測鑒定

課后練習區(qū)

1.B[因為一種氨基酸可能對應多種密碼子、真核生物體內(nèi)基因含

有內(nèi)含子等因素,導致逆轉錄合成目基因與原基因有較大差異,所以

第15頁

人工合成目基因不能用于比目魚基因組測序,A選項錯誤;抗凍蛋白

11個氨基酸重復序列重復次數(shù)越多,抗凍能力越強,并不是抗凍基因

編碼區(qū)重復次數(shù)越多抗凍能力越強,抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成新

基因已不是原來抗凍基因,因此不能得到抗凍性增強抗凍蛋白,B選

項正確;農(nóng)桿菌轉化法是將目基因?qū)胫参锛毎畛S梅椒?,不是?/p>

了篩選含有標記基因質(zhì)粒,C選項錯誤;應用DNA探針技術,可以

檢測轉基因植物中目基因存在,但不能完成對目基因表達檢測,D選

項錯誤。]

2.C[限制酶可在特定位點對DNA分子進展切割;DNA聚合酶在

DNA分子復制時將脫氧核甘酸連接成脫氧核甘酸鏈;DNA連接酶可

將限制酶切開磷酸二酯鍵連接在一起;解旋酶作用是將DNA雙鏈解

開螺旋,為復制或轉錄提供模板。]

3.ACD[基因工程經(jīng)常以抗菌素抗性基因為標記基因;質(zhì)粒是基因

工程常用運載體;通常用同一種限制酶切割目基因與運載體,以獲得

一樣黏性末端;受體細胞可以是受精卵,也可以是體細胞。]

4.A[基因工程是通過對基因操作,將符合人們需要目

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