第六章：分子生物學研究方法下_第1頁
第六章：分子生物學研究方法下_第2頁
第六章：分子生物學研究方法下_第3頁
第六章：分子生物學研究方法下_第4頁
第六章：分子生物學研究方法下_第5頁
已閱讀5頁，還剩19頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

第六章：分子生物學研究方法（下）

－基因功能研究技術一、基因表達研究技術二、基因敲除技術三、蛋白質(zhì)與RNA、DNA相互作用一、基因表達研究技術1.基因表達系列分析技術（SerialAnalysisofGeneExpression，SAGE）是以DNA序列測定為基礎分析全基因組表達模式的技術。方法:以9~11bp作為標簽（tag）＝49＝262144組合串聯(lián)tag并通過兩端接頭PCR擴增擴增產(chǎn)物進行測序每個tag通過Genebank或EST數(shù)據(jù)庫進行比對確認tag代表的基因表達情況2.RNA的選擇性剪接技術RNA的選擇性剪接是指用不同的剪接方式從一個mRNA前體產(chǎn)生不同的mRNA剪接異構體的過程。常用RT-PCR法研究某個基因是否存在選擇性剪切。3.原位雜交技術(InSituHybridization，ISH)

用標記的核酸探針，在組織、細胞上對核酸進行定位和相對定量研究的一種手段。探針標記用同位素或地高辛、生物素熒光標記等。地高辛標記同位素標記染色體原位雜交人類染色體端粒DNA的熒光原位雜交

4.基因定點突變技術通過改變基因特定位點核苷酸序列來改變所編碼的氨基酸序列，用于研究某個（些）氨基酸殘基對蛋白質(zhì)結(jié)構功能的影響。二、基因敲除技術基因敲除（geneknock-out）又稱基因打靶，通過外源DNA與染色體DNA之間的同源重組，進行精確的定點修飾和基因改造。三、蛋白質(zhì)與RNA、DNA相互作用1.酵母單雜交系統(tǒng)將待測轉(zhuǎn)錄因子cDNA與表達載體導入酵母細胞，該基因產(chǎn)物如果能夠與順式作用元件相結(jié)合，就能激活啟動子，使報告基因得到表達。是一種編碼可被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因，表達產(chǎn)物非常容易被鑒定。

2008年的諾貝爾化學獎授予了日本下村修、美國馬丁?查爾菲，以及美國華裔錢永健。他們?nèi)嗽诎l(fā)現(xiàn)和研究綠色熒光蛋白(GFP)方面有突出成就。

2.凝膠阻滯試驗是用于研究DNA與蛋白質(zhì)相互作用的一種特殊的凝膠電泳技術。當DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合時，在電泳中會受到阻滯，說明可能與某種特殊蛋白結(jié)合了。3.DNAase足跡試驗

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論