全自動尿沉渣分析儀校準規(guī)范

JJF1823—20201全自動尿沉渣分析儀校準規(guī)范1范圍本規(guī)范適用于基于流式細胞術(shù)原理或顯微圖像自動識別原理的全自動尿沉渣分析儀的紅細胞和白細胞檢測項目的校準,其他類型的全自動尿沉渣分析儀的紅細胞和白細胞檢測項目可參照本規(guī)范進行校準。2引用文件本規(guī)范引用了下列文件:JJF1059.1—2012測量不確定度評定與表示YY/T0996—2015尿液有形成分分析儀(數(shù)字成像自動識別)凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。3術(shù)語3.1尿沉渣urinarysediment尿液樣本經(jīng)標準離心沉淀,在顯微鏡下觀察到的有形成分。包括細胞、管型、結(jié)晶、細菌、精子等各種有形成分。4概述全自動尿沉渣分析儀是采用顯微圖像全自動識別技術(shù)或流式細胞阻抗技術(shù),對尿液中的有形成分進行自動識別和分類計數(shù)的檢驗設(shè)備。顯微圖像全自動識別式尿沉渣分析儀使用全自動數(shù)碼顯微鏡對流動計數(shù)池中的尿液樣本進行掃描,采集的圖像經(jīng)形態(tài)學(xué)軟件自動識別統(tǒng)計后得到各項檢測數(shù)據(jù)。流式細胞阻抗技術(shù)分析尿沉渣的原理為:尿液中細胞等經(jīng)熒光色素染色后,在鞘流液的作用下,形成單個、縱列細胞流,通過氬激光檢測區(qū),儀器檢測熒光、散射光和電阻抗的變化;當(dāng)儀器在捕獲了熒光強度、前向熒光脈沖寬度、前向散射光強度、前向散射光脈沖寬度、電阻抗信號后,綜合識別和計算得到相應(yīng)細胞的大小、長度、體積和染色質(zhì)長度等資料,并做出紅細胞、白細胞、細菌、管型等的散射圖及定量報告。5計量特性計量特性見表1。JJF1823—20202表1全自動尿沉渣分析儀的校準項目特性量校準項目空白值攜帶污染率示值誤差重復(fù)性紅細胞(RBC)++++白細胞(WBC)++++注:+為校準項目。6校準條件6.1環(huán)境條件6.1.1實驗室環(huán)境應(yīng)當(dāng)滿足儀器安裝的要求,不得存在強烈的機械振動和電磁干擾。6.1.2環(huán)境溫度:按照儀器說明書規(guī)定的溫度條件進行。6.1.3相對濕度:按照儀器說明書規(guī)定的濕度條件進行。6.1.4光照:避免陽光直射。6.1.5電源電壓:AC(220±22)V,50Hz/60Hz或相應(yīng)的直流電源。6.1.6大氣壓力:(76~106)kPa。6.2標準物質(zhì)和校準設(shè)備應(yīng)采用國內(nèi)外有證標準物質(zhì)進行儀器校準,尿沉渣紅細胞和白細胞標準物質(zhì)的技術(shù)指標見表2。表2尿沉渣標準物質(zhì)技術(shù)指標標準物質(zhì)特性量量值范圍相對不確定度(k=2)RBC(150~2000)/μL≤10%WBC(150~2000)/μL≤10%7校準項目和校準方法以下校準項目應(yīng)在全自動尿沉渣分析儀經(jīng)過開機預(yù)熱、儀器達到正常工作條件后進行,校準前應(yīng)當(dāng)確保儀器工作狀態(tài)正常,參照附錄A進行校準原始數(shù)據(jù)記錄。7.1空白值取儀器配套的空白稀釋液進行上樣計數(shù),連續(xù)測量4次。舍去第1次測量值,記錄其余3次測量結(jié)果的最大值,即為RBC、WBC的空白值。7.2示值誤差儀器的示值誤差以尿沉渣標準物質(zhì)測量值與標準值的相對誤差表示。取尿沉渣標準物質(zhì),上下顛倒多次(計2min左右)從而保證充分混勻后(瓶底無沉積物)進行上樣計數(shù),連續(xù)測量10次,記錄測量值,并按照公式(1)進行示值誤差計算。并分別取ΔC作為儀器RBC、WBC示值誤差的測量結(jié)果。JJF1823—20203ΔCr=式中:ΔCr—細胞計數(shù)相對示值誤差; C—10次測量值的平均值;Cs—標準物質(zhì)的標準值。 C-Cs Cs×100%(1)7.3重復(fù)性選取測量濃度范圍內(nèi)的尿沉渣細胞標準物質(zhì),上下顛倒多次(計2min左右)從而保證充分混勻后(瓶底無沉積物)連續(xù)測量20次,記錄每次RBC、WBC的測量值,按照公式(2)進行相對標準偏差RSD計算,以RSD作為儀器測量重復(fù)性。 RSD=(i-1Ci)2×i×100%(2)式中:RSD—相對標準偏差(%);n—測量次數(shù);Ci—第i次測量值; Ci—細胞標準物質(zhì)測量平均值。7.4攜帶污染率選取有確定濃度值的尿沉渣紅細胞和白細胞標準物質(zhì)和生理鹽水,使用前上下顛倒多次(計2min左右)從而保證充分混勻(瓶底無沉積物)。先對標準物質(zhì)連續(xù)檢測3次,檢測結(jié)果分別為i1、i2、i3;緊接著對生理鹽水連續(xù)檢測3次,檢測結(jié)果分別為j1、j2、j3,按照公式(3)分別計算RBC、WBC的攜帶污染率。CO=--×100%(3)式中:CO—攜帶污染率;j1—生理鹽水的第1次測量值;j3—生理鹽水的第3次測量值;i3—標準物質(zhì)的第3次測量值。8校準結(jié)果表達經(jīng)校準后的全自動尿沉渣分析儀應(yīng)填發(fā)校準證書,校準證書應(yīng)符合JJF1071—2010中5.12的要求,參照附錄B的校準證書內(nèi)頁格式,參照附錄C給出校準項目名稱、測量值以及擴展不確定度。9復(fù)校時間間隔送校單位可根據(jù)實際情況自主決定全自動尿沉渣分析儀的復(fù)校時間間隔,建議不超過1年。JJF1823—20204附錄A校準記錄格式儀器名稱型號制造廠商出廠編號委托單位名稱聯(lián)系人地址電話溫度相對濕度校準日期證書編號記錄編號標準物質(zhì)編號校準員核驗員A.1空白值測試項目測量值最高值紅細胞白細胞A.2示值誤差項目測量值平均值標準值示值誤差紅細胞白細胞A.3重復(fù)性測量次數(shù)紅細胞白細胞測量值重復(fù)性測量值重復(fù)性123456JJF1823—20205測量次數(shù)紅細胞白細胞測量值重復(fù)性測量值重復(fù)性7891011121314151617181920A.4攜帶污染率項目測量值攜帶污染率紅細胞標準物質(zhì)生理鹽水白細胞標準物質(zhì)生理鹽水6附錄B校準證書內(nèi)頁格式證書編號:校準環(huán)境條件溫度:℃相對濕度:%地點:其他:參照JJF1823—2020《全自動尿沉渣分析儀校準規(guī)范》對該儀器進行校準,結(jié)果如下:序號校準項目校準結(jié)果1空白值紅細胞測量值:白細胞測量值:2示值誤差紅細胞測量值:不確定度:(k=2)白細胞測量值:不確定度:(k=2)3重復(fù)性紅細胞測量值:白細胞測量值:4攜帶污染率紅細胞測量值:白細胞測量值:校準員:核驗員:JJF1823—20207附錄C全自動尿沉渣分析儀示值誤差的不確定度評定示例C.1測量方法采用可溯源至顯微鏡檢方法的尿沉渣標準物質(zhì)進行測試,測量結(jié)果并與標準物質(zhì)定值結(jié)果進行比較。C.2測量模型校準結(jié)果相對示值誤差計算公式可由公式(C.1)給出:ΔCr=式中:ΔCr—細胞計數(shù)相對示值誤差; C—10次測量值的平均值;Cs—標準物質(zhì)的標準值。C.3不確定度來源 C-Cs Cs×100%(C.1)不確定度來源包括:a)全自動尿沉渣分析儀測量重復(fù)性引入的標準不確定度u(Ci);b)標準物質(zhì)引入的標準不確定度u(Cs)。C.4標準不確定度分量評定C.4.1測量重復(fù)性引入的標準不確定度分量u(Ci)在校準中白細胞10次測定值分別為265.49/μL、253.38/μL、230.03/μL、231.76/μL、212.74/μL、228.30/μL、217.06/μL、218.79/μL、216.20/μL、203.23/μL,可由公式(C.2)評估此次測量的實驗標準差s(xi): (C.2)s(xi)=ni-1i)2=19.02/μL(C.2)則測量結(jié)果平均值的標準不確定度為:u(Ci)=s(xi)/n=6.01/μLC.4.2標準物質(zhì)引入的標準不確定度分量u(Cs)由標準物質(zhì)引入的不確定度u(Cs)可以根據(jù)標準物質(zhì)證書提供的擴展不確定度Ur和包含因子k根據(jù)公式(C.3)計算:u(Cs)=(C.3)式中:u(Cs)—標準物質(zhì)引入的標準不確定度;U—標準物質(zhì)證書提供的擴展不確定度;JJF1823—20208k—標準物質(zhì)證書提供的包含因子,通常為2。在校準過程中標準物質(zhì)白細胞特性量值的標準值為194.68±25.3/μL(k=2),則由標準物質(zhì)引入的標準不確定度分量:u(Cs)==12.65/μLC.5標準不確定度一覽表標準不確定度一覽表見表C.1。表C.1全自動尿沉渣分析儀相對示值誤差測量的標準不確定度一覽表不確定度來