T-SDYZXCP 002-2023 畜禽產品中甲氧芐啶殘留量的檢測微陣列生物芯片試劑盒法

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65.120學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載CCS

B

46團 體 標 準

002—2023畜禽產品中甲氧芐啶殘留量的檢測微陣列生物芯片試劑盒法 發(fā)布學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

002—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載 本文件按照

GB/T1.1—2020《標準化工作導則 第

1

起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由山東省優(yōu)質畜產品協(xié)會提出并歸口。張坤、孟超、時川、謝天群、閆傳琦、張超、許丹科、周嘉明、徐海峰。Ⅰ學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

002—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載 1 范圍本文件規(guī)定了畜禽產品中甲氧芐啶殘留量檢測的微陣列生物芯片試劑盒法。本文件適用于畜禽肉及其內臟中甲氧芐啶的檢測。本文件方法的檢出限為

，定量限為

μg/kg。2規(guī)范性引用文件文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3 術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4 原理固定的人工抗原點競爭結合抗體，加入納米顆粒進行顯色，用生物芯片分析儀檢測，標準曲線定量。5 試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。5.1 水：GB/T6682，三級。5.2 乙腈。5.3 正己烷。5.4 抗體溶液：含有抗甲氧芐啶單克隆抗體。2

℃～8

℃避光保存。使用前搖勻。5.5 顯色液

A：稱取

0.17

g

硝酸銀，用水溶解后定容至

100

，得到濃度為

的硝酸銀溶液，2

℃～8

℃避光保存，有效期

6

個月。使用前搖勻。5.6 顯色液

B：稱取

1.10

g

對苯二酚，用水溶解后定容至

100

，得到濃度為

的對苯二酚溶液，2

℃～8

℃

6

個月。使用前搖勻。5.7 混合顯色液：臨用前將顯色液

A（5.5）和顯色液

B（5.6）

混合均勻。5.8

2.68

g

NaHPO·12HO），0.39

g

NaHPOO），8.5

g氯化鈉（NaCl

1

000

。5.9

2.68

g

NaHPO·12HO），0.39

g

NaHPOO），8.5

g氯化鈉（NaCl），2

吐溫-20，加水溶解后稀釋至

1

。1學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載T/SDYZXCP

002—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載5.10 10

）：準確稱取

1

CAS

號：-70-595.0%），準確至

0.000

1g，用乙腈（5.2）溶解，定容至

100

。-

℃以下避光保存，有效期

6

個月。5.11 1

μg/mL

1

5.10

10

。2℃～8℃避光保存，有效期

6

個月。5.12 ），用復溶液（

0

μg/mL、0.6

μg/L、

μg/mL、

、

μg/mL、9.6

標準系列工作溶液，2℃～8℃期

6

個月。5.13 微陣列生物芯片：

微孔。固定有人工合成甲氧芐啶抗原。2

℃～8

℃

個月。使用前置于

20

℃～

℃平衡

30

min

以上。6 儀器設備6.1

生物芯片分析儀：分辨率不低于

1200

ppi6.2

分析天平：精度為

0.01

g

和

0.000

1

g。6.3

芯片孵育儀：可調溫度范圍為室溫～100

℃

600

。6.4

離心機：轉速不低于

4000

。6.5

氮吹儀。6.6

渦旋振蕩器。7 樣品取不少于

g

樣品，去除皮、筋膜及脂肪，均質混勻，-18

℃以下避光保存。取類型相同，均勻一致，且儀器響應值小于方法定量限

30%的樣品，作為空白樣品。8 試驗步驟8.1 提取平行做兩份試驗。稱取試樣

1.00

g±0.05

g（準確至

0.01g）至

5

乙腈（5.2），渦旋

3

min，4000

離心

5

min

55℃

1

復溶液（5.8）和

1

正己烷（），渦旋

2

min，4000

離心

5

min。除去上層有機相，下層清液待測。8.2 加樣分別取

50

μL

5.12）、50

μL

8.15.13再加入

50

μL

37℃、600

反應

15

min。8.3洗板倒出孔中液體，加入

250

洗滌液（5.9

10

s

后倒掉洗滌液，反復洗滌

3

次，在吸水紙上拍干。8.4 顯色加入

℃、600

2學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載??2

×

學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載??2

×

??

×

1000

×

1000

???????????（1）避光顯色

±1

min

μL

5.9

3

干，待測。8.5測定將顯色后的芯片放入生物芯片分析儀中進行分析。以標準品百分比灰度值為縱坐標（%μg/L據標準曲線計算試樣所對應的濃度對數后，再轉化成甲氧芐啶的濃度。9試驗數據處理試樣中甲氧芐啶的含量以質量分數

計，數值以毫克每千克（）表示，按式（1）計算：??

= ??

×

??1

×

??

×

1000式中：——試樣中甲氧芐啶的含量，單位為毫克每千克（mg/kg）；C——由標準曲線查得的試樣溶液中甲氧芐啶的質量濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；——提取溶液的體積，單位為毫升（）；——定容的體積，單位為毫升（）；——分取溶液的體積，單位為毫升（）；——g）；1000——單位換算。10 質量控制10.1 陰性對照稱取空白試樣，按照

8.1～8.5

操作。10.2 陽性對照稱取空白試樣

1.00

g±0.05

g（準確至

0.01g），置于

（）

，此質控樣中的甲氧芐啶的濃度為

。按