DB4403T 405-2023食源性致病菌快速檢測(cè)產(chǎn)品性能評(píng)價(jià)通用要求

CCSX01深DB4403深圳市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB4403/T405—2023本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由深圳市市場(chǎng)監(jiān)督管理局提出并歸口。本文件起草單位：深圳市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院。本文件主要起草人：王韋達(dá)、楊睿、蔡琳、盧燦鑫、林長(zhǎng)虹、陳晶、林振華、李樂詩、鄭彥婕、藍(lán)勇波。1DB4403/T405—2023食源性致病菌快速檢測(cè)產(chǎn)品性能評(píng)價(jià)通用要求本文件規(guī)定了食源性致病菌快速檢測(cè)定性產(chǎn)品（下簡(jiǎn)稱“快檢產(chǎn)品”）評(píng)價(jià)的送評(píng)要求、評(píng)價(jià)要求及評(píng)價(jià)流程等內(nèi)容。本文件適用于食品中快檢產(chǎn)品性能的技術(shù)評(píng)價(jià)，包括干片法、膠體金免疫層析法等原理的快速定性產(chǎn)2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4789.45—2023食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)微生物檢驗(yàn)方法驗(yàn)證通則GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T27405實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測(cè)GB/T42233—2022快速檢測(cè)術(shù)語與定義3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1參考方法referencemethod得到公認(rèn)或廣泛接受的微生物傳統(tǒng)培養(yǎng)法。[來源：GB4789.45—2023，2.4]3.2最低檢出水平minimumdetectionlevel快檢產(chǎn)品預(yù)期所能檢出微生物的最低含量水平。注：對(duì)于有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，指增菌后預(yù)期所能檢出3.3排他性exclusivitystudy快檢產(chǎn)品對(duì)非目標(biāo)微生物的抗干擾能力。[來源：GB4789.45—2023，2.7，有修改]3.4精密度precision在規(guī)定條件下多次重復(fù)測(cè)試同一待測(cè)樣品時(shí)各測(cè)試結(jié)果彼此相符合的程度。[來源：GB/T42233—2022，4.7，有修改]3.52DB4403/T405—2023再現(xiàn)性reproducibility由不同的操作者使用同一快檢產(chǎn)品，按相同的測(cè)試方法，對(duì)同一被測(cè)對(duì)象互相獨(dú)立進(jìn)行測(cè)試的條件下，多次重復(fù)測(cè)試獲得的測(cè)試結(jié)果的精密度（3.4）。[來源：GB/T42233—2022，4.12，有修改]3.6盲樣blindsample在評(píng)價(jià)過程中，使用的制備人已知詳細(xì)信息的，但其詳細(xì)信息對(duì)檢測(cè)人員保密的樣品。[來源：GB/T42233—2022，5.13，有修改]4送評(píng)要求4.1產(chǎn)品信息要求4.1.1產(chǎn)品包裝快檢產(chǎn)品包裝應(yīng)完整，內(nèi)容物（產(chǎn)品組成）齊全，包含產(chǎn)品合格證和中文使用說明書。4.1.2中文標(biāo)簽中文標(biāo)簽清晰、規(guī)范，包括產(chǎn)品名稱、批號(hào)、規(guī)格、有效期、保存條件、注意事項(xiàng)、生產(chǎn)者、地址、聯(lián)系方式等。4.1.3使用說明書廠家提供的使用說明書內(nèi)容應(yīng)表述清晰、完整，包括簡(jiǎn)介、適用范圍、檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)原理、產(chǎn)品組成、需配套使用的試劑設(shè)備、注意事項(xiàng)、儲(chǔ)存條件、樣品處理、有無會(huì)引起交叉反應(yīng)的非目標(biāo)菌、檢測(cè)操作步驟、結(jié)果判讀、安全性說明。此外，廠家應(yīng)提供或在說明書上備注產(chǎn)品的最低檢出水平。4.1.4產(chǎn)品安全性說明對(duì)于快檢產(chǎn)品，應(yīng)在說明書的醒目位置清晰地標(biāo)示出實(shí)驗(yàn)廢棄物的處理方式，并且指出其在使用過程中的注意事項(xiàng)。生物類廢棄物根據(jù)病原分類選擇合適的處理方式。4.2批次要求4.2.1首次參加評(píng)價(jià)的快檢產(chǎn)品，對(duì)于同一品種和規(guī)格的快檢產(chǎn)品，應(yīng)至少提供2個(gè)不同生產(chǎn)批號(hào)的產(chǎn)品，每批號(hào)不少于150個(gè)。4.2.2非首次參加評(píng)價(jià)的快檢產(chǎn)品，對(duì)于同一品種和規(guī)格的快檢產(chǎn)品，應(yīng)至少提供1個(gè)生產(chǎn)批號(hào)的產(chǎn)品，每批號(hào)不少于150個(gè)。4.3其他要求4.3.1快檢產(chǎn)品由生產(chǎn)商提供，送至評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)參加評(píng)價(jià)。送評(píng)樣品應(yīng)為同一品種和規(guī)格的快檢產(chǎn)品，且有效期不少于三個(gè)月。產(chǎn)品如有儲(chǔ)藏、運(yùn)輸要求的應(yīng)按要求執(zhí)行。4.3.2對(duì)于采用儀器法檢測(cè)的快檢產(chǎn)品，儀器由送評(píng)方提供，且具有有效的校準(zhǔn)或檢定證明。對(duì)于需采用確認(rèn)反應(yīng)片或配套試劑的快檢產(chǎn)品，配套試劑和耗材應(yīng)由送評(píng)方提供。5評(píng)價(jià)要求3DB4403/T405—20235.1評(píng)價(jià)樣品要求5.1.1陰性樣品陰性樣品應(yīng)經(jīng)參考方法確認(rèn)無目標(biāo)菌。5.1.2質(zhì)控樣品質(zhì)控樣品應(yīng)為已知微生物濃度水平的樣品，具有較好的穩(wěn)定性，且經(jīng)過認(rèn)證檢驗(yàn)符合實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。5.1.3自然污染樣品天然原因造成污染的實(shí)物樣品，使用前應(yīng)經(jīng)參考方法確認(rèn)。能夠獲得自然污染樣品時(shí)，優(yōu)先選用自然污染樣品。5.1.4人工污染樣品根據(jù)快檢產(chǎn)品使用說明書的實(shí)驗(yàn)要求，稱取適量的陰性樣品，接種一定濃度的目標(biāo)菌菌液混合而成。制備后的人工污染樣品應(yīng)小心處理、保存，使樣品在評(píng)價(jià)前保持穩(wěn)定，并盡快進(jìn)行測(cè)試。5.2評(píng)價(jià)指標(biāo)要求5.2.1最低檢出水平5.2.1.1測(cè)試樣品采用質(zhì)控樣品或人工污染樣品，有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，去除前增菌步驟。5.2.1.2評(píng)價(jià)快檢產(chǎn)品時(shí)應(yīng)根據(jù)使用說明書規(guī)定的適用范圍，選擇食品基質(zhì)的種類和子類。若其適用于多種食品基質(zhì)，則至少選擇2個(gè)種類的食品，其中每類食品至少選擇1種子類的食品；若只適用于某一特定種類的食品，則應(yīng)在該類食品中選擇至少2種不同子類的食品。代表性食品基質(zhì)的選擇參見GB4789.45—2023附錄A。5.2.1.3每種食品基質(zhì)至少需要在中、低、極低3個(gè)不同接種水平和無接種情況下完成測(cè)試，每個(gè)評(píng)價(jià)人在每個(gè)水平下重復(fù)測(cè)試2次。其中中水平：接種量為預(yù)期最低檢出水平的10倍；低水平：將中水平接種物稀釋10倍得到最低檢出水平，此時(shí)接種水平即為理論LOD50；極低水平：將低水平接種物稀釋10倍得到極低水平接種物；無接種物為陰性樣品。注：理論LOD指定性方法檢出概率為50%時(shí)，樣品中目標(biāo)微生物的濃度。5.2.1.4陰性樣品不應(yīng)獲得陽性結(jié)果，如果獲得陽性結(jié)果，則對(duì)所有水平進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，若重復(fù)實(shí)驗(yàn)仍獲得陽性結(jié)果，則評(píng)價(jià)不通過。中水平只能獲得陽性結(jié)果，如果獲得陰性結(jié)果，則對(duì)該水平進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，若重復(fù)實(shí)驗(yàn)仍獲得陰性結(jié)果，則評(píng)價(jià)不通過。低水平應(yīng)至少獲得25%的陽性結(jié)果，若未獲得陽性結(jié)果，則對(duì)該水平進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，測(cè)試結(jié)果仍未獲得陽性結(jié)果，則評(píng)價(jià)不通過。極低水平陽性結(jié)果數(shù)不應(yīng)超過低水平接種的陽性結(jié)果數(shù)。5.2.2排他性5.2.2.1使用純化后的非目標(biāo)菌進(jìn)行測(cè)試，在測(cè)試過程中不需要添加樣品基質(zhì)。測(cè)試菌株的純培養(yǎng)應(yīng)是最佳生長(zhǎng)條件下，非選擇性培養(yǎng)基上培養(yǎng)并處于穩(wěn)定期的細(xì)胞群體。有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，去除前增菌步驟。5.2.2.2若廠家在說明書中已注明的交叉反應(yīng)非目標(biāo)菌在本標(biāo)準(zhǔn)排他性評(píng)價(jià)交叉反應(yīng)非目標(biāo)菌選擇指引中（見附錄A），則不對(duì)該菌進(jìn)行排他性評(píng)價(jià)。4DB4403/T405—20235.2.2.3排他性評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)內(nèi)容應(yīng)包括附錄A中微生物的純培養(yǎng)物。規(guī)定排他性實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)選擇附錄A中4種及以上的非目標(biāo)菌，優(yōu)先測(cè)試應(yīng)驗(yàn)證的非目標(biāo)菌，接種水平為快檢產(chǎn)品最低檢出水平的10倍～100倍，每個(gè)評(píng)價(jià)人重復(fù)測(cè)試2次。5.2.2.4若最終評(píng)價(jià)結(jié)果大于2種非目標(biāo)菌產(chǎn)生交叉反應(yīng)，則評(píng)價(jià)不通過。5.2.3再現(xiàn)性5.2.3.1再現(xiàn)性測(cè)試采用自然污染樣品或人工污染樣品。有前增菌步驟的快檢產(chǎn)品，去除前增菌步驟。5.2.3.2制備的測(cè)試盲樣，優(yōu)先使用自然污染樣品。如沒有自然污染樣品，可以使用人工污染的樣品。評(píng)價(jià)快檢產(chǎn)品時(shí)應(yīng)根據(jù)使用說明書規(guī)定的適用范圍，選擇基質(zhì)的種類和子類，具體要求見5.2.1.2。5.2.3.3每種基質(zhì)至少需要在高、低和陰性3個(gè)不同水平完成測(cè)試，每個(gè)評(píng)價(jià)人在每個(gè)水平下重復(fù)測(cè)試5次。理想情況下，高水平恰好為最低檢出水平的50倍～100倍，低水平為最低檢出水平的5倍～10倍。5.2.3.4快檢產(chǎn)品的假陽性率應(yīng)不大于15%，假陰性率應(yīng)不大于5%，精密度應(yīng)不小于91%。6評(píng)價(jià)流程6.1評(píng)價(jià)前準(zhǔn)備工作6.1.1實(shí)驗(yàn)應(yīng)符合GB19489和GB/T27405相關(guān)規(guī)定。6.1.2評(píng)價(jià)人員應(yīng)先熟悉快檢產(chǎn)品的檢測(cè)原理、實(shí)驗(yàn)方法等相關(guān)內(nèi)容，開展非目標(biāo)菌的接種制備，陰性樣品，自然污染樣品，質(zhì)控樣品和目標(biāo)菌接種制備人工污染樣品等準(zhǔn)備驗(yàn)證工作。6.1.3應(yīng)制定具體作業(yè)指導(dǎo)書或評(píng)價(jià)方案，保障評(píng)價(jià)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，應(yīng)包括但不限于：a)評(píng)價(jià)工作要求；b)送樣要求；c)樣品管理；d)盲樣制備與檢查；e)評(píng)價(jià)內(nèi)容及依據(jù)；f)結(jié)論出具。6.2盲樣6.2.1基質(zhì)的選擇應(yīng)根據(jù)食品安全監(jiān)管的需求，優(yōu)先選擇那些涉及食物中毒、有召回要求和具有潛在高風(fēng)險(xiǎn)危害的食品作為樣品基質(zhì)，具體要求見5.2.1.2。6.2.2盲樣制備6.2.2.1每一生產(chǎn)批號(hào)的快檢產(chǎn)品，按照快檢產(chǎn)品使用說明書取樣要求進(jìn)行盲樣制備，其中包含陰性樣品和陽性樣品。6.2.2.2盲樣制備和評(píng)價(jià)應(yīng)為獨(dú)立環(huán)節(jié)，盲樣制備人員不少于2名。6.3評(píng)價(jià)6.3.1檢測(cè)按照快檢產(chǎn)品使用說明書或儀器使用說明書的要求進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)價(jià)人員不少于2名。5DB4403/T405—20236.3.2結(jié)果判讀按照快檢產(chǎn)品使用說明書或儀器使用說明書的要求判讀結(jié)果。6.3.3檢測(cè)時(shí)間按照快檢產(chǎn)品說明書要求取單個(gè)樣品，檢測(cè)時(shí)間從樣品前處理開始計(jì)時(shí)，記錄從前處理步驟至得出檢測(cè)結(jié)果整個(gè)過程的時(shí)間總和。對(duì)于有前增菌步驟快檢產(chǎn)品的檢測(cè)時(shí)間，需額外說明，加上前增菌時(shí)間。6.3.4計(jì)算根據(jù)盲樣測(cè)試結(jié)果，計(jì)算該快檢產(chǎn)品的假陽性率、假陰性率及精密度，計(jì)算公式詳見表1。表1性能指標(biāo)的計(jì)算NNN=N+NNNN=N+NN=N+NN=N+NN=N+N或者N+N注：N--任何特定單元的結(jié)果數(shù)，第一個(gè)下標(biāo)指行，第二個(gè)下標(biāo)指列。示例1：N表示第一行，第一列，N表示第一行，第二列。示例2：N表示所有的第一行；N表示所有的第二列。6.4結(jié)論快檢產(chǎn)品的最低檢出水平、排他性和再現(xiàn)性均滿足評(píng)價(jià)要求，則評(píng)價(jià)通過。有一項(xiàng)不滿足評(píng)價(jià)要求，則評(píng)價(jià)不通過。6.5報(bào)告對(duì)評(píng)價(jià)整體情況和結(jié)果進(jìn)行匯總整理和分析，評(píng)價(jià)報(bào)告應(yīng)包括但不限于以下內(nèi)容：a)產(chǎn)品名稱、廠家、型號(hào)、批號(hào)、日期；b)盲樣性質(zhì)