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ICS65.020.30CCSICS65.020.30CCSB44內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB15/T3363—2024綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定方法Thedeterminationofsheeprumenmicrobialreserveglycogen2024-02-232024-02-232024-03-23內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB15/T3363—2024DB15/T3363—2024前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAM/TC19)歸口。本文件起草單位:內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院。IIDB15/T3363—2024DB15/T3363—2024DB15/T3363—2024PBS665mgKH2PO4DB15/T3363—2024PBS665mgKH2PO4890mg(Na2HPO4.2H20),溶于90ml雙蒸水中,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.80,定容至100mL。細(xì)菌裂解液:TiangenRK160-02細(xì)菌裂解液,主要組成為:50mMTris-HCl、1mMPMSF、0.1%TritonX-100、10mg/mL溶菌酶。2mol/LNaOH220g200mLCO2108mL1000mL6儀器和設(shè)備綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定方法范圍本文件適用于綿羊瘤胃微生物儲備糖原的測定。(GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法下列術(shù)語和定義適用于本文件。下列術(shù)語和定義適用于本文件。微生物儲備糖原microbialreservecarbohydrate4測定原理標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液比色定量。5試劑及配制蒸餾水,符合GB/T66822g1000mL80C2HCl3O2。乙醚,C4HO。1mg/mL100mg80℃烘至恒重)100mL10.0001g。100mL1000mL250mL0℃~50185nm~900nm。20℃~420℃~40200rpm~15000rpm。0.57分析步驟瘤胃微生物樣品的制備200mL39℃預(yù)熱的暖水CO2100mLPBS1:139℃培養(yǎng),45min20410000rpm10PBSrpm離心10min-20貯存糖原提取1mL15min,10000rpm10min,500uL45minuL10000rpm10min2mol/LNaOH200ul1mL2.2mL4℃的60%v/v15000rpm離心15min60v/v1mL糖原含量測定1ml0.5mL1mg/mL1.5mL2mL10mL215620nm8測定結(jié)果的計(jì)算糖原含量以W表示,數(shù)值以mg/mL計(jì),按公式(1)進(jìn)行計(jì)算:式中:DUDS
WDS
0.512
0.9……………(1)0.5——表示0.5mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液中葡萄糖含量;2——表示比色液中標(biāo)準(zhǔn)管稀釋倍數(shù)為樣品管的2倍;1/10——表示由10mL瘤胃
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