12 經(jīng)典血清學(xué)試驗(yàn)

朽木易折，金石可鏤。千里之行，始于足下。第頁/共頁十二章經(jīng)典血清學(xué)實(shí)驗(yàn)一、名詞解釋凝結(jié)性實(shí)驗(yàn)：按照是否產(chǎn)生凝結(jié)現(xiàn)象，用已知抗體或抗本來判定相應(yīng)（未知）抗原或抗體的免疫反應(yīng)。凝集反應(yīng)：細(xì)菌，紅細(xì)胞等顆粒性抗原，或吸附在顆粒性載體表面的可溶性抗原，與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性反應(yīng)，在適當(dāng)電解質(zhì)存在下，經(jīng)過一段時(shí)光形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。反應(yīng)中的抗原稱為凝集原，反應(yīng)中的抗體稱為凝集素。直接凝集反應(yīng)：顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接發(fā)生特異性結(jié)合并浮上肉眼可見的凝集現(xiàn)象稱為直接凝集反應(yīng)。間接凝集反應(yīng)：將可溶性抗原（或抗體）吸附在一種與免疫無關(guān)的惰性載體顆粒表面，使其成為致敏載體，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）結(jié)合，在電解質(zhì)存在的條件下發(fā)生凝集的現(xiàn)象。葡萄球菌A蛋白（SPA）：是金黃色葡萄球菌的特異性表面抗原，能與IgG分子的Fc片段結(jié)合，當(dāng)SPA-Ab與相應(yīng)抗原結(jié)合時(shí)，就可產(chǎn)生協(xié)同凝集反應(yīng)。HA：有些病毒具有能凝集某種哺乳動(dòng)物和禽類紅細(xì)胞的特性，依此特性建立的檢測(cè)主意稱為病毒血凝實(shí)驗(yàn)。HI：按照病毒的特異性抗體可以抑制血凝現(xiàn)象建立的檢測(cè)主意稱為血凝抑制實(shí)驗(yàn)。沉淀反應(yīng)：可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在適量電解質(zhì)存在的條件下，形成肉眼可見的白色沉淀。參加沉淀反應(yīng)的可溶性抗原稱為沉淀原，抗體稱為沉淀素。瓊脂免疫蔓延：抗原，抗體在瓊脂凝膠中蔓延，當(dāng)二者在比例適當(dāng)處相遇，即發(fā)生沉淀反應(yīng)。反應(yīng)的沉淀物因顆粒較大，故在凝膠中不再蔓延，而形成沉淀帶。電泳：帶電質(zhì)點(diǎn)在電場中向著帶異向電荷的電場移動(dòng)。免疫電泳：由瓊脂雙蔓延與瓊脂電泳技術(shù)結(jié)合的實(shí)驗(yàn)。凝集價(jià)/滴度/抗體效價(jià)：浮上50%以上凝集的血清最大稀釋度為該血清的凝集價(jià)。沉淀價(jià)：環(huán)狀沉淀實(shí)驗(yàn)時(shí)，以浮上白色沉淀環(huán)的最高抗原稀釋倍數(shù)作為沉淀素的效價(jià)，即沉淀價(jià)。中和指數(shù)：在盡頭法中和實(shí)驗(yàn)中，使病毒感染力減少至50%的血清中和效價(jià)稱為中和指數(shù)。中和效價(jià)：中和實(shí)驗(yàn)中，被檢血清中抗體中和病毒的能力。病毒的毒價(jià)：引起半數(shù)感染動(dòng)物死亡的病毒最小量。二、簡答題1.凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)的基本類型有哪些？有何用途？2.凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)的區(qū)別？（凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)各有什么特點(diǎn)？）沉淀反應(yīng)凝集反應(yīng)抗原可溶性抗原顆粒性或可溶性抗原反應(yīng)時(shí)光數(shù)小時(shí)至數(shù)天幾分鐘至十幾分鐘反應(yīng)產(chǎn)物沉淀物凝集塊用途定性，定量定性，半定量優(yōu)點(diǎn)操作容易，基層適用操作容易，基層適用3.瓊脂凝膠免疫蔓延實(shí)驗(yàn)有哪些不同的主意？舉例說明它們的用途？抗原，抗體在瓊脂凝膠中蔓延，當(dāng)二者在比例適當(dāng)處相遇，即發(fā)生沉淀反應(yīng)。反應(yīng)的沉淀物因顆粒較大，故在凝膠中不再蔓延，而形成沉淀帶。（1）類型：單向單蔓延，單向雙蔓延，雙向單蔓延，雙向雙蔓延（2）用途：抗原或抗體的定性、復(fù)合抗原成分的區(qū)別、抗原定量如：雙向單用于傳染病的診斷，如馬立克病的診斷4.免疫電泳技術(shù)的種類有哪些？試述其原理，主意和用途？原理：免疫電泳技術(shù)是將凝膠蔓延與電泳技術(shù)結(jié)合的迅速、靈巧的免疫技術(shù)?？乖贵w在凝膠中自由蔓延的同時(shí)，參加電場力的作用，使它們的移動(dòng)加快，并限制蔓延方向，從而縮短了反應(yīng)時(shí)光提高了敏感性。分為：（1）免疫電泳：是將瓊脂雙蔓延與瓊脂電泳技術(shù)結(jié)合的技術(shù)。用途：可用來研究抗原和抗體的對(duì)應(yīng)性、測(cè)定樣品的成分以及各自的的電泳遷移率、鑒定抗原或抗體的純度等。（2）對(duì)流免疫電泳：是在瓊脂蔓延基礎(chǔ)上結(jié)合電泳技術(shù)建立的一種簡便而迅速的主意。敏感性高，用于疾病的迅速診斷。（3）火箭免疫電泳：是單向輻射免疫蔓延和電泳相結(jié)合的檢測(cè)技術(shù)。用于抗原的定量檢測(cè)。5.影響免疫電泳的因素有哪些？（1）帶電質(zhì)點(diǎn)的性質(zhì)：顆粒所帶凈電荷量、顆粒大小、形狀等（2）電場強(qiáng)度（3）溶液中的pH值（4）溶液的離子強(qiáng)度：溶液離子強(qiáng)度越高，顆粒移動(dòng)速度越慢（5）電滲作用（6）吸附作用：介質(zhì)對(duì)樣品的滯留作用（7）電泳時(shí)光：與遷移率成正比6.補(bǔ)體參加的檢測(cè)技術(shù)的原理及種類？（1）基本原理：通過補(bǔ)體是否激活來證實(shí)抗原與抗體是否相對(duì)應(yīng)，進(jìn)而對(duì)抗體或抗原做出檢測(cè)①抗體分子的Fc片段存在補(bǔ)體受體②惟獨(dú)當(dāng)抗體與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合后才干裸露出補(bǔ)體受體③補(bǔ)體結(jié)合抗原抗體復(fù)合物后各種成分相繼活化，繼而浮上一系列免疫學(xué)反應(yīng)（2）常用的補(bǔ)體參加的檢測(cè)技術(shù)：①溶血實(shí)驗(yàn)原理：將抗紅細(xì)胞的抗體與相應(yīng)的紅細(xì)胞混合，當(dāng)補(bǔ)體存在時(shí)，紅細(xì)胞即被溶解特點(diǎn)：此種溶血現(xiàn)象肉眼可見應(yīng)用：廣泛用于血清補(bǔ)體活性檢測(cè)、也在補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)中做為指標(biāo)系統(tǒng)②補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)（CFT）（試述補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)的原理與用途？）原理：補(bǔ)體能與任何一種抗原抗體復(fù)合物結(jié)合，但倘若抗原抗體不匹配，補(bǔ)體則不被結(jié)合而游離存在。但當(dāng)參加綿羊紅細(xì)胞和溶血素后，即可與游離的補(bǔ)體結(jié)合而浮上溶血現(xiàn)象，因此綿羊紅細(xì)胞和溶血素是CFT的指示系統(tǒng)。按照溶血現(xiàn)象是否發(fā)生，可得知檢測(cè)系統(tǒng)中有無相應(yīng)的抗原或抗體存在。（理解記憶）特點(diǎn)：具有高度的特異性和一定的敏感性應(yīng)用：傳染病的診斷、病毒亞型的鑒定等③免疫黏附實(shí)驗(yàn)④溶血空斑實(shí)驗(yàn)或空斑形成實(shí)驗(yàn)7.什么是中和實(shí)驗(yàn)？有哪些常用主意？按照抗體能否中和病毒的感染性而建立的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)稱為中和實(shí)驗(yàn)。分為盡頭法中和實(shí)驗(yàn)和空斑減數(shù)實(shí)驗(yàn)。（1）原理：病毒可刺激機(jī)體產(chǎn)生中和抗體，該抗體與病毒結(jié)合后使病毒失去感染能力。這種中和作用不僅有鄭重的種、型特異性，而且還表現(xiàn)在量的方面，即一定量的病毒必須有相應(yīng)數(shù)量的中和抗體才干