2023-2024學年安徽省蚌埠二中高考壓軸卷生物試卷含解析

2023-2024學年安徽省蚌埠二中高考壓軸卷生物試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．以下關于“探究2，4-D對插枝生根的作用”實驗說法正確的是（）A．實驗只需配制一種適宜濃度的2，4-D溶液 B．本實驗不需要設置對照組C．2，4-D即吲哚乙酸，是由色氨酸合成的 D．需每天測量每根枝條上根的總長度2．20世紀60年代，醫(yī)院開始用淀粉酶替代酸來分解淀粉。下圖為某同學探究不同pH條件下淀粉酶對淀粉的分解作用的實驗結果。下列說法不正確的是（）A．應先將各組淀粉溶液的pH值調到設定數(shù)值再加入淀粉酶B．pH值為3和9的兩組試驗中的淀粉酶的活性相同C．1h后若將pH為13的試管的pH調至7，則其淀粉量基本不變D．淀粉酶通過降低淀粉分解反應所需的活化能來實現(xiàn)催化作用3．CD20是一種廣泛存在于正?；驉盒訠淋巴細胞表面的標志性抗原，該抗原在其他正常組織細胞中并不表達。1997年，第一個針對B淋巴瘤治療的人鼠嵌合型單克隆抗體—利妥昔單抗上市，該抗體通過誘導細胞凋亡等方式來殺死腫瘤細胞：2002年，鼠源單克隆抗體—替伊莫單抗上市，該抗體除了促進細胞凋亡外，還結合了相關的放射性藥物，進一步增強了對B淋巴瘤細胞的殺傷效果；2017年，人源單克隆抗體—奧美珠單抗上市，該抗體免疫原性（自身作為異物引起免疫應答的性能）更低，治療效果更明顯。分析以上材料，下列敘述正確的是（）A．利妥昔單抗只對B淋巴瘤發(fā)揮作用B．替伊莫單抗結合的放射性藥物能與CD20特異性結合C．鼠源抗體有可能作為抗原被人體免疫系統(tǒng)破壞D．奧美珠單抗可以治療各種癌癥4．下列有關生物變異的敘述，錯誤的是（）A．純合子體細胞中的同源染色體上不含等位基因B．純合子雜交產(chǎn)生的后代均為純合子C．等位基因分離導致Aa自交后代出現(xiàn)性狀分離D．基因重組和染色體結構變異均可能引起DNA堿基序列的改變5．“生命觀念”是指對觀察到的生命現(xiàn)象及相互關系或特性進行解釋后的抽象，是人們經(jīng)過實證后的觀點，比如結構與功能觀、進化與適應觀、穩(wěn)態(tài)與平衡觀、物質與能量觀等。下列說法錯誤的是（）A．溶酶體膜內側的糖蛋白可防止溶酶體膜自身被酸性水解酶水解，體現(xiàn)了結構與功能間的相適應B．發(fā)生在細胞內的吸能反應一定與ATP的水解相聯(lián)系，放能反應則一定與ATP的合成相聯(lián)系C．生物體內各種過程的平衡受信息（遺傳信息、激素、神經(jīng)遞質、細胞因子等）的調控D．適應是生物遺傳變異與環(huán)境相互作用的結果，包括結構與功能、生物與環(huán)境的相適應6．已知三對基在染色體上的位置情況如圖所示，且三對基因分別單獨控制三對相對性狀，則下列說法正確的是（）A．三對基因的遺傳遵循基因的自由組合定律B．基因型為AaDd的個體與基因型為aaDd的個體雜交的后代會出現(xiàn)4種表現(xiàn)型。C．如果基因型為AaBb的個體在產(chǎn)生配子時沒有發(fā)生交叉互換，則它只產(chǎn)生4種配子D．基因型為AaBb的個體自交后代會出現(xiàn)4種表現(xiàn)型，比例為9：3：3：1二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）回答下列（一）、（二）小題。（一）鎮(zhèn)江香醋素以“酸而不澀、香而微甜、色濃味鮮”而蜚聲中外。下圖是鎮(zhèn)江香醋的生產(chǎn)工藝簡化流程：（1）蒸煮的目的：使原料在高溫下滅菌，同時_________，淀粉被釋放出來，淀粉由顆粒狀變?yōu)槿苣z狀態(tài)。（2）由于酵母菌缺少淀粉水解酶系，糯米需經(jīng)蒸煮后在a-淀粉酶的作用下液化，后加入糖化酶糖化，目的是_________。30min后，裝入發(fā)酵罐再接入酵母進行_________。在操作過程中，發(fā)酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高_________的數(shù)量，有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）醋酸發(fā)酵時酒精應先_________，否則會因濃度過高抑制醋桿菌的增殖。發(fā)酵過程需敞口操作，麩皮和糠等拌勻制作成松散的發(fā)酵料，其目的是_________。發(fā)酵過程中可通過高效液相色譜技術對多種有機酸組成及動態(tài)變化進行研究。將_________在相同的色譜條件下進行檢測，繪制標準曲線。再根據(jù)其對發(fā)酵過程中的有機酸含量進行測算跟蹤發(fā)酵進程。（4）黑曲霉可產(chǎn)生a-淀粉酶用于液化，還可以產(chǎn)生果膠酶將果膠徹底分解為_________。（二）請回答下列與基因工程和植物克隆有關的問題。（1）質粒的抗性基因是常用的_________標記，如果質粒的抗性基因內有若干單一的限制性酶切位點就更好。當外源基因插入這樣的酶切位點時，會使該抗性基因失活，這時宿主菌變?yōu)閷υ摽股豞________的菌株，容易檢測出來。（2）雙酶切會使載體和目的基因的DNA都產(chǎn)生兩種不同的粘性末端，但DNA連接酶在適宜pH條件下會選擇把_________連接起來，從而保證目的基因只以一個方向連接入載體。影響DNA連接反應的因素有_________（寫出兩點）。（3）花藥培養(yǎng)是單倍體克隆的主要方法?；ㄋ幵偕仓甑漠a(chǎn)生有兩條途徑：一是煙草等植物通過形成花粉胚的_________途徑，二是水稻等植物通過產(chǎn)生芽和根的_________途徑，最后發(fā)育成單倍體植物。水稻花藥培養(yǎng)除了得到單倍體植物，還可以得到來源于花藥體細胞的_________植株，因此需要對后代進行進一步的篩選。8．（10分）植物葉片的氣孔是CO2流入葉片的門戶，也是蒸騰散失水分的門戶。某轉基因擬南芥的氣孔保衛(wèi)細胞中存在一種特殊的K+通道（BLINK1，如圖1），它可調控氣孔快速開啟與關閉；而野生擬南芥無BLINK1，氣孔開閉較慢。圖2表示擬南芥在一天中連續(xù)光照和間隔光照（強光和弱光交替光照）下的實驗結果。請回答：（1）由圖1分析，轉基因擬南芥保衛(wèi)細胞吸收K+的方式為____，其氣孔可快速開啟的可能原因是____。（2）CO2進入葉綠體后，先與RuBP結合形成1個____分子，隨即該分子分解成2個3-磷酸甘油酸分子，再經(jīng)NADPH提供的____及ATP、酶等作用下形成三碳糖。（3）圖2中，連續(xù)光照下，野生植株和轉基因植株每升水可產(chǎn)生植物莖的干重無顯著差異，這是因為兩者氣孔在連續(xù)光照下均開啟，____；間隔光照下，轉基因植株每升水可產(chǎn)生植物莖的干重大于野生植株，是因為轉基因植株在強光時____，而弱光時____，所以每升水可產(chǎn)生更多的干物質。（4）該研究成果有望推廣至大田農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，因為通常多云天氣下，太陽光照不時會出現(xiàn)不規(guī)律的____現(xiàn)象進而可能影響農(nóng)作物干物質增量。9．（10分）玉米是全球最重要的農(nóng)作物之一，寒冷條件下其產(chǎn)量降低，科研人員推測這可能與植物體內的一種酶（RuBisco）的含量有關。為探究其含量與低溫（14℃）脅迫下玉米產(chǎn)量的關系，科研人員利用轉基因玉米進行了一系列實驗。（1）首先獲得目的基因RAP1（編碼RuBisco大小亞基組裝的分子伴侶）和LSSS（編碼RuBisco的大小亞基），再利用____________酶將目的基因分別與____________結合，并用________法導入普通玉米中，獲得轉基因玉米。（2）在實驗中（如圖），圖1應使用_______玉米，與轉基因玉米（圖2、3、4）一起在25℃的溫度下生長了三周，然后將溫度降低到___________生長兩周，然后又升高到25℃。（3）描述上圖所示實驗結果：______________；為使實驗嚴謹，應補充一組對照，具體處理是：_______________。（4）此外科研人員還對株高、干重及葉面積進行了測定，實驗結果表明RuBisco可能是通過影響葉面積的大小來影響光合作用強度進而影響產(chǎn)量的。為進一步驗證上述結論還需要______________。10．（10分）自然界里有多種微生物，將其進行合理的篩選、培養(yǎng)和應用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領域帶來巨大經(jīng)濟效益?；卮鹣铝袉栴}。（1）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取____________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用____________法，若要將微生物采用平板劃線法進行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒____________次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的____________開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線____________。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____________培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了____________。長期保存菌種時，應將培養(yǎng)的菌液與____________充分混勻后，放在-20℃的冷凍箱中保存。（3）甲、乙兩組同學用稀釋涂布平板法測定某種微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下每隔一段時間記錄數(shù)據(jù)（統(tǒng)計時間內微生物總數(shù)小于環(huán)境容納量），得到以下結果：培養(yǎng)時間(小時)24487296甲組菌落均值(個)18253632乙組菌落均值(個)20283832計數(shù)時最好取培養(yǎng)____________小時記錄的菌落數(shù)作為實驗結果，一方面是由于培養(yǎng)時間較短，會遺漏菌落數(shù)目，另一方面是由于____________。11．（15分）轉基因生物培育成功的關鍵是保證目的基因在受體中的正常表達或抑制特定基因的表達。在這個過程中，根據(jù)獲得的目的基因不同、采取的措施不同等，培育時選擇的方法也不相同。回答下列相關問題：（1）利用乳腺生物反應器獲得胰島素的過程中，為保證通過反轉錄法獲得的胰島素基因能正常表達，在構建基因表達載體時需將獲得的含目的基因的片段連接在__________之間，然后通過_________的方法將基因表達載體導入__________________中。（2）為降低耐除草劑轉基因水稻通過花粉傳播而引起的環(huán)境生物安全問題，一是利用轉入的耐除草劑基因的位置進行控制，如__________________；二是將耐除草劑基因拆分為兩部分，只有兩部分片段同時存在才具有耐除草劑的特性，請?zhí)岢隹尚械拇胧篲___________________________________。（3）下圖中插入顛倒的轉錄區(qū)的目的是__________________，其原理可能是顛倒的轉錄區(qū)與轉錄區(qū)形成的RNA通過_________原則形成雙鏈而無法使轉錄區(qū)形成的RNA與核糖體結合。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

生長素是植物產(chǎn)生的、對植物有調節(jié)作用的激素之一。天然的植物激素和人工合成的類似化學物質合稱為植物生長物質或植物生長調節(jié)劑。生長素類似物是一種植物生長調節(jié)劑，是人工合成的激素的替代物，在生產(chǎn)上獲得了很多應用。生長素類似物，能夠促進植物的生長，不同濃度的生長素類似物，促進生長的效果不同，一般為低濃度促進高濃度抑制?！驹斀狻緼、該實驗使用了不同濃度的2，4-D溶液，A錯誤；B、本實驗需要設置對照組，即不加2，4-D溶液加蒸餾水的對照組，B錯誤；C、生長素即吲哚乙酸，是由植物體內的色氨酸合成的，2，4-D是生長素的類似物，是人工合成的，C錯誤；D、需每天測量每根枝條上根的總長度，作為觀測指標，D正確。故選D。2、B【解析】

分析柱形圖：圖示為某同學探究不同pH條件下淀粉酶對淀粉的分解作用的實驗結果，由圖可知pH為7時，淀粉酶的活性最高；pH在3～7時，隨著pH的升高，酶活性逐漸增強；pH在7～9時，隨著pH的升高，酶活性逐漸降低；pH達到11時，酶基本已經(jīng)變性失活?！驹斀狻緼、本實驗的目的是探究不同pH條件下淀粉酶對淀粉的分解作用的實驗結果，實驗時應先將各組試管溶液pH分別調到設定數(shù)值再混合，A正確；B、在pH為3和9時兩只試管中的淀粉剩余量相同，但pH為3時，酶可以催化淀粉水解，酸也會促進淀粉水解，而pH為9時只有酶的催化作用，所以兩種pH下酶的催化效率應該是不同的，即pH為3和9時酶的活性不同，B錯誤；C、pH為13時，酶已經(jīng)變性失活，因此再將pH調為7時，反應速率不變，即淀粉含量基本不變，C正確；D、淀粉酶通過降低淀粉分解反應所需的活化能來實現(xiàn)催化作用，D正確。故選B。3、C【解析】

單克隆抗體的特點：特異性強、靈敏度高、可大量制備?！驹斀狻緼、利妥昔單抗對正?；驉盒訠淋巴細胞均起作用，A錯誤；B、替伊莫單抗能與CD20特異性結合，放射性藥物不能，B錯誤；C、鼠源抗體有可能作為抗原，誘發(fā)機體的免疫反應，被人體免疫系統(tǒng)破壞，C正確；D、奧美珠單抗只能用于治療B淋巴瘤，不能治療其他癌癥，D錯誤。故選C。4、B【解析】

純合子是指遺傳因子（基因）組成相同的個體，如AA或aa；其特點是純合子自交后代全為純合子，無性狀分離現(xiàn)象?！驹斀狻緼、純合子是由基因型相同的雌雄配子結合形成的受精卵發(fā)育而成的個體，體細胞中的同源染色體上不含等位基因，A正確；B、純合子雜交產(chǎn)生的后代可能為雜合子，如AA×aa→Aa，B錯誤；C、由于減數(shù)分裂形成配子時等位基因分離，導致Aa自交后代出現(xiàn)性狀分離，C正確；D、基因重組和染色體結構變異使DNA分子中基因的排列順序發(fā)生改變，從而引起了DNA堿基序列的改變，D正確。故選B。5、B【解析】

溶酶體屬于生物膜系統(tǒng)，在消化細胞內的物質時要吞噬這些物質，形成具有消化作用的小泡，所以溶酶體執(zhí)行功能時要發(fā)生膜成分的更新；ATP好象是細胞內能量轉換的“中轉站”，我們可形象地把它比喻細胞內流通的能量“通貨”，但其并非唯一的能源物質?！驹斀狻緼、溶酶體膜內側存在與細胞膜糖被類似的結構，此結構具有防止溶酶體膜被水解酶水解的作用，這體現(xiàn)了結構與功能間的適應，A正確；B、吸能反應一般與ATP水解的反應相聯(lián)系，由ATP水解提供能量，但ATP不是唯一的能源物質，如GTP、UTP等也可供能，B錯誤；C、生物體內各種過程的平衡受信息的調控，如水鹽平衡的調節(jié)需要抗利尿激素的調控，這體現(xiàn)了穩(wěn)態(tài)與平衡觀，C正確；D、適應是生物遺傳變異與環(huán)境相互作用的結果，包括結構與功能（如細胞膜的流動性是其選擇透過性的前提）、生物與環(huán)境的相適應（選擇與適應），這體現(xiàn)了進化與適應觀，D正確。故選B?！军c睛】明確細胞結構與各種物質的關系是解答本題的關鍵。6、B【解析】

分析題圖可知，圖中A和B、a和b基因連鎖，不遵循基因的自由組合定律；而與D和d基因位于非同源染色體上，遵循基因的自由組合定律。【詳解】A、圖中看出，圖中A和B、a和b基因位于一對同源染色體上，屬于連鎖基因，不遵循基因的自由組合定律，A錯誤；B、基因A和a與D和d遵循自由組合定律，因此基因型為AaDd的個體與基因型為aaDd的個體雜交的后代會出現(xiàn)4種表現(xiàn)型，B正確；C、如果基因型為AaBb的個體在產(chǎn)生配子時沒有發(fā)生交叉互換，則它只產(chǎn)生2種配子，C錯誤；D、圖中A和B、a和b基因位于一對同源染色體上，不遵循基因的自由組合定律，因此AaBb的個體自交后代不會出現(xiàn)9：3：3：1的性狀分離比，D錯誤。故選B?！军c睛】本題考查了基因的自由組合定律以及基因的連鎖與交換等有關知識，考生要能夠根據(jù)圖示信息判斷基因之間的關系，確定是否遵循基因自由組合定律解題。二、綜合題：本大題共4小題7、使植物細胞破裂將淀粉分解成糖酒精發(fā)酵酵母菌（用水）稀釋增加通氣性各種有機酸的標準溶液半乳糖醛酸篩選敏感相同的粘性末端溫度、酶的用量、反應時間胚胎發(fā)生器官發(fā)生二倍體【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定?！驹斀狻浚ㄒ唬?）蒸煮的目的：使原料在高溫下滅菌，同時高溫可以破壞細胞膜，使細胞中的淀粉被釋放出來。（2）淀粉在a-淀粉酶的作用下變成糊精，糊精在β-淀粉酶的作用下變成麥芽糖，麥芽糖在糖化淀粉酶的作用下變成葡萄糖。加入糖化酶糖化，目的是糖化。30min后，裝入發(fā)酵罐再接入酵母進行酒精發(fā)酵，酵母菌利用葡萄糖進行厭氧呼吸可產(chǎn)生酒精。酵母菌繁殖需要能量，而需氧呼吸能提供更多的能量，通氣能提高酵母菌的數(shù)量，有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。（3）酒精含量過高，醋桿菌容易死亡，因此醋酸發(fā)酵時酒精應先（用水）稀釋。發(fā)酵過程需敞口操作，麩皮和糠等拌勻制作成松散的發(fā)酵料，都是為了增加通氣性。將各種有機酸的標準溶液在相同的色譜條件下進行檢測，繪制標準曲線。再根據(jù)其對發(fā)酵過程中的有機酸含量進行測算跟蹤發(fā)酵進程。（4）果膠是半乳糖醛酸的高聚物，果膠酶可將果膠徹底分解為半乳糖醛酸。（二）（1）質粒常含有抗性基因用于重組質粒的篩選。當外源基因插入這樣的酶切位點時，會使該抗性基因失活，抗性基因無法表達，這時宿主菌變?yōu)閷υ摽股孛舾械木辏菀讬z測出來。（2）雙酶切會使載體和目的基因的DNA都產(chǎn)生兩種不同的粘性末端，但DNA連接酶在適宜pH條件下會選擇把相同的粘性末端連接起來，避免單酶切使目的基因或質粒自連或反向連接，保證目的基因只以一個方向連接入載體。溫度、酶的用量、反應時間都會影響DNA連接反應。（3）花藥再生植株的產(chǎn)生有兩條途徑：一是煙草等植物通過形成花粉胚的胚胎發(fā)生途徑（胚是植物的幼體），二是水稻等植物通過產(chǎn)生芽和根的器官發(fā)生途徑（芽、根是植物的器官），最后發(fā)育成單倍體植物。水稻花藥培養(yǎng)除了得到單倍體植物，還可以得到來源于花藥體細胞的二倍體植株（秋水仙素加倍），因此需要對后代進行進一步的篩選（表現(xiàn)型進行篩選）?！军c睛】基因工程是現(xiàn)代生物技術研究的重要內容，基因工程涉及到很多技術，是重點也是難點，在學習時應在理解相應技術原理的基礎上，熟悉各種技術的特點及應用范圍。8、主動轉運K+進入細胞后使細胞液濃度升高，細胞吸水六碳氫和能量二氧化碳攝入量和水分散失量基本相當/兩者的CO2吸收量和水分蒸騰量基本相當氣孔快速打同開，快攝入二氧化碳氣孔能快速關閉，減少水分蒸發(fā)量間隔光照（強光和弱光交替光照）【解析】

分析圖1，在光照條件下，鉀離子通過K+通道（BLINK1）進入氣孔細胞內，需要消耗能量，屬于主動運輸。分析圖2，自變量是植株類型（是否含BLINK1）和光照類型（連續(xù)光照或者是強光和弱光交替光照），因變量是每單位重量水分干物質量，可以反映蒸騰作用的強弱和氣孔的開放程度?！驹斀狻浚?）據(jù)上分析可知，鉀離子通過K+通道（BLINK1）進入氣孔細胞內，需要消耗能量，屬于主動轉運。由于鉀離子通過K+通道（BLINK1）進入氣孔細胞內，提高了胞內滲透壓，保衛(wèi)細胞吸水膨脹，氣孔快速開啟。（2）CO2在酶的催化下，與RuBP結合生成六碳化合物，該分子隨即分解成2個三碳酸，進而在光反應提供的[H]和ATP的條件下被還原為三碳糖，其中NADPH為暗反應提供的是氫和能量。（3）據(jù)圖2分析可知，在連續(xù)光照下，野生株和含BLINK1植株的莖干重無顯著性差異，因為連續(xù)光照下，野生株和含BLINK1植株的均氣孔開啟，二氧化碳攝入量和水分散失量基本相當；間隔光照下，含BLINK1植株的莖干重大于野生株，因為間隔光照下，強光時含BLINK1植株氣孔能快速打開，加快二氧化碳攝入，弱光時，氣孔能快速關閉，減少水分蒸發(fā)量，所以每單位重量水分干物質量大。（4）通常大田環(huán)境通常多云天氣，這些現(xiàn)象會出現(xiàn)強光和弱光交替光照，均可能影響農(nóng)作物干物質增量（或糧食產(chǎn)量），BLINK1植株可以在強光和弱光交替光照下氣孔能快速打開或關閉，增加每單位重量水分干物質量。【點睛】本題考查影響光合作用因素及相關實驗分析，抓準實驗自變量、因變量和無關變量的分析是解決這道題的關鍵。9、限制酶和DNA連接酶載體（質粒）農(nóng)桿菌轉化法/鳥槍法/花粉管通道法非轉基因（野生型）14℃與1和2相比LSSS（3）和LSSS-RAF1（4）組玉米長勢較好，且3和4組無明顯差異野生型玉米一直在25℃的溫度下生長測定各組中RuBisCo酶的含量及成熟時玉米籽粒的干重【解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，該實驗探究RuBisco含量與低溫（14℃）脅迫下玉米產(chǎn)量的關系，實驗的自變量有溫度、玉米的種類，因變量是玉米的長勢。圖中顯示2、3、4是不同的轉基因玉米，則1組應該是非轉基因玉米，作為對照組；長勢較好的是3、4兩組?！驹斀狻浚?）基因工程中，最常用的運載體是質粒，將目的基因與質粒結合形成重組質粒（基因表達載體）需要用到限制酶和DNA連接酶；將目的基因導入普通玉米常用農(nóng)桿菌轉化法。（2）根據(jù)題意分析，2、3、4組玉米都是轉基因玉米，則1組應該是作為對照組的非轉基因玉米；根據(jù)題干信息已知，該實驗探究RuBisco含量與低溫（14℃）脅迫下玉米產(chǎn)量的關系，因此將四組玉米一起在25℃的溫度下生長了三周，然后將溫度降低到14℃生長兩周，然后又升高到25℃。（3）據(jù)圖分析可知，與1和2相比，LSSS（3）和LSSS-RAF1（4）組玉米長勢較好，且3和4組無明顯差異。為使實驗嚴謹，應設置一組不經(jīng)過低溫處理的對照組，具體處理是野生型玉米一直在25℃的溫度下生長。（4）實驗結果表明RuBisco可能是通過影響葉面積的大小來影響光合作用強度進而影響產(chǎn)量的，為進一步驗證該結論還需要測定各組種RuBisCo酶的含量及成熟時玉米籽粒的干重?！军c睛】解答本題的關鍵是掌握基因工程的基本步驟和實驗設計的基本原則，能夠根據(jù)實驗目的和圖形分析自變量和因變量、實驗組和對照組，進而結合題干要求分析答題。10、高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌6末端相連（或相接、相交等意思正確）倒置作為對照組，排除培養(yǎng)基被雜菌污染甘油72培養(yǎng)時間過長，兩個或多個菌落連成一個菌落【解析】

1、微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作技術，無菌操作過程中的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌。高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌。干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進行干熱滅菌。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌。2、平板劃線操作的基本步驟是：（一）右手持接種環(huán)，經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口通過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口通過火焰并塞上棉塞。（二）左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應劃破培養(yǎng)基表面。（三）燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻（是否冷卻，可先在培養(yǎng)基邊緣處試觸，若瓊脂溶化，表示未涼，稍等再試），從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內劃線，重復以上操作，在第三四五區(qū)內劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。（四）將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?！驹斀狻浚?）對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采取高壓蒸汽滅菌法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用灼燒滅菌法。接種環(huán)在每次接種前都要灼燒滅菌，最后一次接種完也要滅菌，所以在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進行了5次劃線，則需要對接種環(huán)灼燒6次。平板劃線在做第二次及其后的劃線操作時，要從上次劃線的末端開始劃線，使菌體的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終獲得由單個菌體形成的單個菌落。最后一次劃的線不能與第一次劃的線相連。（2）將接種后的固體培養(yǎng)基和一個未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中的水分揮發(fā)。培養(yǎng)未接種的