重金屬檢查法課件

五、重金屬檢查法1重金屬檢查法

(1)重金屬概念

工業(yè)上，比重5以上的金屬

藥典上重金屬指在實驗條件下能夠與硫代乙酰胺或Na2S反應(yīng)生成沉淀的金屬雜質(zhì)。如Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Zn、Co、Ni等，其中鉛Pb最常遇到，且易積蓄中毒，因此，檢查時以Pb為代表。

2重金屬檢查法

（2）中國藥典（2000年版）共收載四法。

1.硫代乙酰胺法

2.熾灼殘渣法

3.硫化鈉法

4.微孔濾膜法3重金屬檢查法（一）硫代乙酰胺法

1.原理對照法

硫代乙酰胺在弱酸性條件下（pH3.5醋酸鹽緩沖液）水解產(chǎn)生硫化氫，與微量重金屬離子生成黃色至棕黑色的硫化物均勻混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理后所呈顏色比較。白色背景，自上而下。

適用于在實驗條件下供試液澄清、無色，對檢查無干擾或經(jīng)處理后對檢查無干擾的藥物。

4重金屬檢查法5重金屬檢查法2.方法

（1）在弱酸性下（pH3.5醋酸鹽緩沖液），以硫代乙酰胺為顯色劑。

（2）在堿性下（若藥物在酸性下不溶解），以Na2S為顯色劑（第三法）。

3.討論

（1）硫代乙酰胺試劑：在弱酸性下轉(zhuǎn)換為H2S，所以與H2S顯色劑具有相同作用和效果，無惡臭、濃度易控制。

6重金屬檢查法（2）用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止Pb2+水解），臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10

gPb2+/ml，最適檢出濃度：27ml溶液中含10

g~20

g的Pb2+

。

（3）酸度：金屬離子與H2S呈色酸度影響較大。pH3-3.5硫化鉛沉淀較完全，酸度增大呈色變淺，太大其至不呈色。

7重金屬檢查法（4）消除顏色干擾：

A.外消色法：樣品溶液有色時：向標(biāo)準(zhǔn)管中滴加稀焦糖溶液（蔗糖用火加熱，掌握好加熱程度），使與樣品管顏色一致，或向標(biāo)準(zhǔn)管中加pH指示劑使其顏色一致。

B.內(nèi)消色法

C.改用微孔濾膜過濾法。8重金屬檢查法（5）干擾物的排除：

①微量Fe的干擾:

Fe3++S2-S

排除方法加入維生素C或鹽酸羥胺Fe3++VcFe2++去氫抗壞血酸

9重金屬檢查法②大量的Fe3＋（如枸櫞酸鐵胺）：加入濃HCIFe3++HCI—HFeCl62-（六氯合鐵離子）黃色，用乙醚提取到無色，剩余少量Fe3+，在氨堿性溶液中，加掩蔽劑KCNK3[Fe(CN)6]，(Na2S為顯色劑）（第三法）。

③藥物本身能夠與顯色劑生成不溶性硫化物，如硫酸鋅ZnS04+Na2SZnS，

加掩蔽劑KCN：Zn2++2KCNZn(CN)2

2CN-[Zn(CN)4]2-被掩蔽起來，依第三法檢查。

10重金屬檢查法（6）重金屬限量低時，用比色管難以觀察，可改用微孔濾膜過濾法（第四法，本法適用于2-5μg重金屬）。11重金屬檢查法

（二）熾灼殘渣法適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿或能與重金屬離子形成配位化合物的有機(jī)藥物。原理對照法

500～600℃熾灼后的殘渣，經(jīng)處理后，按第一法檢查。12重金屬檢查法2.操作方法13重金屬檢查法

含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。14重金屬檢查法（三）硫化鈉法適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。

1.原理在堿性介質(zhì)中以硫化鈉為顯色劑，使Pb2+生成PbS微粒的混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理后所顯顏色比較，不得更深。

15重金屬檢查法2.測定條件

（1）NaOH堿性條件下（2）顯色劑：硫化鈉試液，現(xiàn)用現(xiàn)配16重金屬檢查法（四）微孔濾膜法

適用于含2～5

g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。方法：首先依第一法檢查，結(jié)果經(jīng)微孔濾膜過濾后比較色斑。17重金屬檢查法

總之，各國檢查重金屬方法不一。USP（24）檢查重金屬時，使用硫代乙酰胺顯色。檢查時，除用供試管、對照管，還規(guī)定用監(jiān)控管，三管同法檢查。BP（2000）用供試管、對照管和空白管檢查。

18重金屬檢查法97：78．重金屬檢查中，加入硫代乙酰胺時溶液控制最佳的pH值是（B）A.1.5B.3.5C．7.5D.9.5E.11.519重金屬檢查法95：84．微孔濾膜法是用來檢查（C）A.氯化物B.砷鹽C.重金屬D.硫化物E.氰化物20重金屬檢查法例1.中國藥典(2000年版)重金屬檢查法中，所使用的顯色劑是（BC）

A.硫化氫試液

B.硫代乙酰胺試液

C.硫化鈉試液

D.氰化鉀試液

E.硫氰酸銨試液21重金屬檢查法例2.葡萄糖中進(jìn)行重金屬檢查時，適宜的條件是（C）A.用硫代乙酰胺為標(biāo)準(zhǔn)對照液B.用10ml稀硝酸/50ml酸化C.在pH3.5醋酸鹽緩沖溶液中D.用硫化鈉為試液E.結(jié)果需在黑色背景下觀察

22重金屬檢查法例3.現(xiàn)有一藥物為苯巴比妥，欲進(jìn)行重金屬檢查，應(yīng)采用《中國藥典》上收載的重金屬檢查的哪種方法（C）

A.一法

B.二法

C.三法

D.四法

E.以上都不對23重金屬檢查法例4.下面哪些方法為《中國藥典》收載的重金屬檢查方法（ACD）

A.500～600℃熾灼殘渣后,按一法操作

B.pH3～3.5條件下，加入硫化氫試液

C.堿性下，加入硫化鈉試液

D.按一法操作，結(jié)果用微孔濾膜過濾后觀察色斑

E.以上都對24重金屬檢查法六、砷鹽檢查法

（一）古蔡氏法（Gutzeit）（ChP（2000）,BP（1998）,JP采用）

25重金屬檢查法1.原理

利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物中的微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在同樣條件下生成的砷斑比較，判定藥物中砷鹽的限量．優(yōu)點：靈敏度高，1μgAs即可檢出。缺點：Sb干憂。26重金屬檢查法2.操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備（2）供試品如需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作

操作：樣品和標(biāo)準(zhǔn)品(As203)分別置檢砷瓶中KI,SnC12As3++Zn粉/HClAsH3PbAc2棉花HgBr2試紙砷斑

27重金屬檢查法28重金屬檢查法3.討論：

(1)試劑的作用：

①KI還原劑As5+-As3+，五價砷在酸性溶液也能被金屬Zn還原為砷化氫，但生成砷化氫速度較慢，故加KI還原As5+為三價砷。

②SnC12:還原劑As5+-As3+;除去KI被氧化生成的I2，生成的I-與鋅離子形成穩(wěn)定配位離子，有利于生成砷化氫反應(yīng)，4I-+Zn2+-ZnI42-；生成Zn-Sn齊，去極化作用，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生

。(H2在Zn表面超電壓0.70V.在Sn表面超電壓0.50V)

29重金屬檢查法③PbAc2棉花：樣品中可能含有少量硫化物，在酸性溶液中生成

色斑。醋酸鉛棉花用量60mg（裝管高度60-80mm），應(yīng)松緊適度。

④HgBr2試紙：與砷化氫作用較氯化汞試紙靈敏，但其砷斑不穩(wěn)定，反應(yīng)中應(yīng)保持干燥及避光，且立即與標(biāo)準(zhǔn)品比較。30重金屬檢查法⑤SnC12和KI可抑制微量Sb的干擾，在實驗條件下，100

gSb存在不干擾測定。

（2）最佳實驗條件：

①試劑的濃度

②反應(yīng)溫度：25-40。C水浴反應(yīng)45min

③Zn粒：2g（Zn粒大小，加減），2000±70μm(1號篩）

④臨用新配標(biāo)準(zhǔn)液（lμgAs/ml）：取AS2030.132g1000m1，取出l0ml-->1000ml，即得。

31重金屬檢查法（3）干擾物的排除：

①硫化物的排除：S2-、S032-、S2032-H+H2S、SO2與溴化汞試紙作用生成HgS色斑或Hg。排除方法先加濃HNO3。

②Fe3+:供試品為鐵鹽，可消耗還原劑，影響測定條件，并能氧化砷化氫，干擾測定：排除方法可先加酸性氯化亞錫SnC12，使Fe3+Fe2+除去干擾，如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。

32重金屬檢查法③共價鍵結(jié)合的砷化物：先要有機(jī)破壞，破壞方法有堿破壞法或酸破壞法，ChP常采用前者。

④銻的干擾：

銻斑（灰色），需改用白田道夫法。33重金屬檢查法

（二）Ag-DDC法二乙基二硫代氨基甲酸銀

對照法檢查、含量測定（ChP90,95,2000采用，85未用），（Silyerdithyldithio-CarbamateAg-DDC）,USP（24）34重金屬檢查法

利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫，與藥物中的微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，砷化氫與Ag-DDC溶液作用，還原Ag—DDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長處測定吸收度，與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較。

35重金屬檢查法過程：第一步同古蔡氏法生成AsH3

第二步將生成的AsH3經(jīng)導(dǎo)管導(dǎo)入盛有Ag-DDC吡淀溶液中，與之作用使Ag-DDC中銀還原為紅色膠態(tài)銀溶液，同法處理標(biāo)準(zhǔn)砷溶液后比較（目視或于510nm處測定吸收度）。

36重金屬檢查法37重金屬檢查法

優(yōu)點：①靈敏度高0.5μgAs/30ml;②重現(xiàn)性好，儀器測定；③消除銻干擾

吸收度：35μgSbH3≈1μgAsH3

缺點：吡啶惡臭，ChP90,95,2000用三乙胺：氯仿(1.8:98.2）溶液代替吡啶，其靈敏度略低于吡啶溶液。

38重金屬檢查法

用有機(jī)堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC,有利于反應(yīng)的進(jìn)行。本法適用于含Sb量小于500

g的供試品。

39重金屬檢查法（三）白田道夫法（Bttendorff)ChP（2000）原理對照法氯化亞錫在HCI中能將砷鹽還原成棕褐色的膠態(tài)砷，與一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液、同法處理后比較。

優(yōu)點：不受銻干擾缺點：靈敏度低20μgAs203/10ml（15μgAs/l0ml），若加入少量HgC12,靈敏度提高2μgAs203/10ml。

40重金屬檢查法（四）奇列氏法（次磷酸法，BP收載（1998））原理：在鹽酸溶液中，用次磷酸還原砷鹽為棕色的游離砷，再與一定量的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液同法處理所顯顏色比較

NaH2P02+HCI--H3P02+NaCl3H3P02+2H3As03--3H3P03+2As+3H20

生成的游離砷，用乙醚提取，在水·醚間形成棕色環(huán)。優(yōu)點：不受S2-，SO32-，Sb，Hg，Ag干擾。缺點：靈敏度低，10μgAs203/10ml41重金屬檢查法98：82.在藥物的雜質(zhì)檢查中，其限量一般不超過百萬分之十的是（D）A.氯化物B.硫酸鹽C.醋酸鹽D.砷鹽E.淀粉

42重金屬檢查法97：79.在用古蔡法檢查砷鹽時，導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的目的是（C）A.除去I2

B.除去AsH3C.除去H2SD.除去HBrE.除去SbH343重金屬檢查法99x：75．砷鹽檢查法中，在檢砷裝置導(dǎo)氣管中塞入醋酸鉛棉花的作用是（C）A.吸收砷化氫B.吸收溴化氫C.吸收硫化氫D.吸收氯化氫E.吸收銻化氫

44重金屬檢查法95：140.古蔡氏法中，SnC12的作用有（ACD）A.使As5+→As3+

B.除去H2SC.除去I2

D.組成鋅錫齊E.除去其它雜質(zhì)

45重金屬檢查法95：83.Ag—DDC法檢查砷鹽的原理為：砷化氫與Ag—DDC吡啶作用，生成的物質(zhì)是（E）A.砷斑B.銻斑C.膠態(tài)砷D.三氧化二砷E.膠態(tài)銀46重金屬檢查法98：137.中國藥典（1995年版）收載的古蔡法檢查砷鹽的基本原理是（BE）

A.與鋅、酸作用生成H2S氣體

B.與鋅、酸作用生成AsH3氣體

C.產(chǎn)生的氣體遇氯化汞試紙產(chǎn)生砷斑

D.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的面積大小

E.比較供試品砷斑與標(biāo)準(zhǔn)品砷斑的顏色強度

47重金屬檢查法96：[106—110]（99x：[126—130]）適用于

A.古蔡氏（Gutzeit）法

B.二乙基二硫代氨基甲酸銀法

C.A和B均可D.A和B均不可

96：106．在連接砷化氫發(fā)生瓶的導(dǎo)管中裝入醋酸鉛棉花（C）

96：107．使用的標(biāo)準(zhǔn)砷溶液為2m1（C）

96：108．測定結(jié)果要與標(biāo)準(zhǔn)砷斑相比較（A）

96：109．要測定吸收度（B）

96：110．要用酸堿滴定法（D）

48重金屬檢查法例[1～5]用古蔡氏法檢查下列藥物中的砷鹽時，排除干擾的方法：

A.先用硝酸或溴水氧化

B.先加酸性氯化亞銻還原

C.改用白田道夫法D.先加氰化鉀掩蔽

E.先加草酸生成沉淀

1.硫化物（A）

2.亞硫酸鹽（A）

3.硫代硫酸鹽（A）

4.高鐵鹽（B）

5.銻鹽（C）49重金屬檢查法例6.Ag—DDC法檢查砷鹽時，所產(chǎn)生的紅色溶液為（C）

A.HDDC吡啶溶液

B.Ag吡啶溶液

C.Ag的膠態(tài)溶液

D.Ag(DDC)溶液

E.AsAg3溶液50重金屬檢查法例7.ChP（2000）檢查葡萄糖酸銻鈉中的砷鹽時，應(yīng)選用（B）A.古蔡氏法B.白田道夫法C.碘量法D.Ag—DDC法E.契列法51重金屬檢查法例8.葡萄糖中砷鹽的檢查，需要的試劑應(yīng)有（BCDE）

A．Pb2+標(biāo)準(zhǔn)液

B．SnCl2試液

C．KI試液

D．ZnE．醋酸鉛棉花52重金屬檢查法例9.Ag-DDC法檢查砷鹽時，加入碘化鉀和酸性氯化亞錫的作用為（ABCDE）A．將As5+還原為As3+B．有利于AsH3生成反應(yīng)C．抑制SbH3的生成D．形成Zn-Sn齊以均勻而連續(xù)地發(fā)生氫氣E．催化加速生成AsH353重金屬檢查法例10.古蔡氏法檢砷，藥典規(guī)定制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑時，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（C）A.1mlB.5mlC.2mlD.依限量大小決定E.以上都不對54重金屬檢查法例11.古蔡氏法檢查所用的溶液是(B)A.強堿性溶液B.強酸性溶液C.含稀鹽酸10ml/50ml溶液D.含稀硝酸10ml/50ml溶液E.含強氧化劑(硝酸或過硫酸銨)溶液55重金屬檢查法96：[96—100]所含待測雜質(zhì)的適宜檢測量為A.0.002mgB.0.01～0.02mgC.0.01～0.05mgD.0.05～