伊馬替尼、達沙替尼及其衍生物的研究

伊馬替尼、達沙替尼及其衍生物的研究——PTKs抑制劑的簡單分類舉例&仿制藥研制流程導覽伊馬替尼Imatinib·第一個分子靶向治療的抗腫瘤藥·分類：Type2小分子抑制劑

主要識別激酶的非活性構象，即DFG-out構象。·主要識別靶點：Bcr-Abl蛋白激酶

一種非受體型酪氨酸蛋白激酶，由BCR-ABL融合基因表達，是慢性粒細胞白血?。–ML）的重要標志。其通過磷酸化和活化一系列下游底物，促使CML成熟粒細胞無限增生。BCR-ABL在正常細胞中不表達，所以它是治療CML理想的藥物靶標?！ぷ饔锰攸c：只對BCR-ABL(IC50=207nmol/L)起作用，而對其他PTKs作用很弱。從而能抑制CML祖細胞的增殖，而正常細胞則不受損害?！ぷ饔脵C理：ATP的競爭性抑制劑伊馬替尼Imatinib伊馬替尼Imatinib高度特異性易產(chǎn)生耐藥突變作用機理伊馬替尼Imatinib·突變原因：BCR-ABL蛋白激酶區(qū)發(fā)生特異性的點突變·主要表現(xiàn)：1、T315突變?yōu)楫惲涟彼?，較為普遍-影響Imatinib與Abl形成氫鍵，從而阻礙二者結合-不影響Abl與ATP的結合，從而導致藥物耐受性2、P-loop構型改變，最為普遍-G250E、Q252R、Y253F/H和E255K/V等突變所造成-占總體突變的36~48%-臨床數(shù)據(jù)表明，P環(huán)突變的Bcr-Abl激酶對Imatinib的敏感性約是野生型Bcr-Abl激酶的1/70~1/100急需無耐受性小分子抑制劑的新突破達沙替尼Dasatinib·針對Imatinib的耐藥性而發(fā)展的第二代Abl激酶靶向藥物·臨床上用于治療CML、血液腫瘤及實體瘤治療·分類：Type1小分子抑制劑-作用原理：主要模擬ATP的腺嘌呤環(huán)，通過與激酶鉸鏈區(qū)的ATP結合位點形成1~3個氫鍵來對激酶的DFG-in構象進行識別-結構特點：含有一個雜環(huán)結構來占據(jù)腺嘌呤活性位點，并能提供與疏水口袋Ⅰ和Ⅱ相互作用的2個側鏈·主要識別靶點：Bcr-Abl激酶及Src激酶

注：Src激酶是人體內(nèi)最大的非受體型酪氨酸激酶家族，可調節(jié)多種細胞過程·作用機理：ATP的競爭性抑制劑

達沙替尼Dasatinib達沙替尼Dasatinib不可抑制T315I突變體避開與Bcr-Abl蛋白的P環(huán)結合，無高度特異性從而可以克服Bcr-Abl的耐藥突變體作用機理仿制藥研制流程導覽仿制藥：

與被仿制藥具有相同的活性成分、劑型、給藥途徑和治療作用的替代藥品，具有降低醫(yī)療支出、提高藥品可及性、提升醫(yī)療服務水平等重要經(jīng)濟和社會效益。以達沙替尼為先導化合物的小分子抑制劑研究流程一、化合物的設計

選取Abl及Src雙重抑制作用的達沙替尼進行骨架躍遷，其噻唑環(huán)為母核結構，如下所示：電子等排體替換N、O、S等芳雜環(huán)和芳香環(huán)均已被專利保護！-母核：硒唑環(huán)-側鏈：R1：保留達沙替尼的取代苯氨基R2：擬令為甲酰芳香環(huán)。-最終的選?。?/p>

R1：2,4-二甲基苯基氨基、2-甲基苯基氨基、2-氯-6-甲基-苯基氨基和3,4-亞甲二氧基苯基氨基，2-萘基氨基等6種

R2：芳香族側鏈以及脂肪族側鏈

共設計了30個化合物。一、化合物的設計一、化合物的設計一、化合物的設計二、化合物的合成與結構驗證一共成功合成了20種化合物二、化合物的合成與結構驗證二、化合物的合成與結構驗證二、化合物的合成與結構驗證二、化合物的合成與結構驗證二、化合物的合成與結構驗證三、化合物的活性測定：酶水平抑制活性的評價方法：-測量化合物對激酶的抑制率

-測量活性化合物的IC50

注：IC50：被測量的拮抗劑的半抑制濃度公式如下：

-抑制率%=(樣品液孔讀數(shù)－空白孔讀數(shù))/(酶原液讀數(shù)－空白孔讀數(shù))*100%

-Y=本底+(最大值-本底)/(1+10^((LogIC50-X)*斜率))

注：Y為吸光值，X為樣本梯度濃度值三、化合物的活性測定：1、初篩大部分化合物對Abl激酶、Src激酶均有抑制作用，其中化合物1、3、5、8、9、10、11、12、13、14、18、20等12個化合物對Abl、Src激酶抑制率均超過了70%，具有較好的活性，而對Alk、Flt3激酶的抑制活性較低。三、化合物的活性測定：三、化合物的活性測定：2、復篩化合物1、3、8、9、14、20與陽性對照藥活性相近，且對Abl、Src激酶的雙重抑制活性都很高，其中化合物1活性比陽性藥更高。化合物1、3、8、9、