人教版生物選修1課時分層作業(yè)2-1微生物的實驗室培養(yǎng)

課時分層作業(yè)(四)微生物的實驗室培養(yǎng)(建議用時：40分鐘)題組一培養(yǎng)基及無菌技術1．不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含()A．碳源、磷酸鹽和維生素B．氮源和維生素C．水、碳源、氮源和無機鹽D．碳元素、氧元素、氫元素、氮元素C[培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外還應考慮pH、特殊營養(yǎng)物質及O2等條件。]2．如何判斷制作的培養(yǎng)基是否滅菌徹底()A．看培養(yǎng)基是否透明B．有沒有消滅細菌菌體C．未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2天后有無菌落生長D．是否消滅了微生物的芽孢、孢子C[配制好的培養(yǎng)基，是否滅菌徹底，通常在使用前在恒溫箱中保溫1～2天后檢驗有無菌落生長，若無則說明滅菌徹底。]3．在微生物的實驗室培養(yǎng)中，下列各項操作不需要在無菌條件下進行的是()A．配制培養(yǎng)基 B．倒平板C．接種 D．培養(yǎng)A[配制培養(yǎng)基時不需要無菌操作，因為配制后的培養(yǎng)基需要進行高壓蒸汽滅菌。]4．煮沸消毒法與巴氏消毒法的主要區(qū)別是()A．溫度不同B．時間不同C．前者適用于固體消毒，后者適用于液體消毒D．沒有區(qū)別A[煮沸消毒法是指在100℃條件下煮沸5～6min，而巴氏消毒法則是在70～75℃條件下煮30min或在80℃條件下煮15min，二者的關鍵區(qū)別是溫度不同。]5．關于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的制備，敘述錯誤的是()A．操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時進行倒平板D．等平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置A[制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時，其操作順序為計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板；由于牛肉膏比較黏稠，稱量時可連同稱量紙一同放入燒杯；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板；平板冷凝后，應將平板倒過來放置，以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。]6．下列有關稀釋涂布平板法的敘述中，錯誤的是()A．首先將菌液進行一系列的梯度稀釋B．然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C．適宜條件下培養(yǎng)D．結果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落D[稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)。只有在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物才能被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。故選D。]7．某小組同學為了調查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察、計數(shù)。請回答與此實驗相關的問題：(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細菌的培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________。(2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應該采用的方法是________。(3)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結果，應將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設定在37℃。要使該實驗所得結果可靠，還應該同時在另一平板上接種________作為對照進行實驗。(4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有________種細菌。一般來說，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越________。[解析]用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中，一般含有微生物所需要的碳源、氮源、水和無機鹽等成分，碳源、氮源一般分別由糖類和蛋白質類物質所提供。對培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。在檢測湖水中細菌的污染情況時，應設置對照實驗，才能得出可靠的結果。[答案](1)氮源碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌法(3)恒溫培養(yǎng)箱無菌水(4)多高題組二純化大腸桿菌8．獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是()A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌B．接種純種細菌C．適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D．防止外來雜菌的入侵D[獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌的入侵。]9．能夠測定樣品活菌數(shù)的方法是()A．稀釋涂布平板法 B．重量法C．直接計數(shù)法 D．比濁法A[利用稀釋涂布平板法能夠在不影響生活的情況下，將細菌個體從固體培養(yǎng)基上分離出來，并可以繁殖形成菌落，可根據(jù)菌落數(shù)測定樣品活菌數(shù)。]10．在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是一個純化的細菌菌落。實驗基本步驟如下：eq\x(配制培養(yǎng)基)→eq\x(滅菌、倒平板)→eq\x(培養(yǎng))→eq\x(觀察)請回答下列有關問題：(1)配制培養(yǎng)基時，各成分含量確定的原則是________________________。不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進行的是______________。(2)倒平板的適宜溫度是50℃左右，原因是_____________。待平板冷凝后，要將平板倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止____________________。(3)純化菌株時，若使用稀釋涂布平板法進行接種，應選擇的涂布工具是圖中的________；若使用平板劃線法進行接種，應選擇的接種工具是圖中的________。ABCD(4)劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有______________________。(5)若用大腸桿菌進行實驗，使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。[解析]培養(yǎng)基中各成分含量要根據(jù)微生物的生長需要來確定。微生物生長需要一定的pH，所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調節(jié)pH。由圖可知，A為接種環(huán)，B為涂布器，C為膠頭滴管，D為接種針，故稀釋平板法應選擇的涂布工具應是B，平板劃線法應選擇的接種工具是A。由題意分析可知，造成此現(xiàn)象的原因可能有兩個：一是接種環(huán)灼燒后未冷卻，菌種接觸到高溫的接種環(huán)而死亡；二是劃第二劃線區(qū)域第一條線時未從第一區(qū)域末端開始。有的大腸桿菌會釋放一種強烈的毒素，因此，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。[答案](1)所培養(yǎng)微生物對各營養(yǎng)成分的需要量調整pH(2)溫度過高會燙手，過低培養(yǎng)基又會凝固皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染(3)BA(4)①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始(5)滅菌11．某研究小組從有機廢水中分離微生物用于廢水處理。下列敘述正確的是()A．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌B．轉換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進行劃線C．接種后的培養(yǎng)皿須放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D．培養(yǎng)過程中每隔一周觀察一次B[培養(yǎng)基滅菌后再分裝到培養(yǎng)皿中；轉換劃線角度后要灼燒接種環(huán)，冷卻后再從上次劃線的末端開始進行劃線；接種后的培養(yǎng)皿必須放在恒溫箱中進行培養(yǎng)，一般每隔12h或24h觀察一次。]12．金黃色葡萄球菌有很強的致病力，常引起骨髓炎等，還可能引起食物中毒，下列敘述實驗結束后的做法錯誤的是()A．對接種環(huán)進行灼燒處理B．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后才能倒掉C．帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D．接種后雙手必須用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭C[金黃色葡萄球菌有很強的致病力，所以在操作時一定要做到安全防范，接種后雙手用肥皂洗凈，再用75%的酒精棉球擦拭，以起到殺菌的作用；對接種環(huán)進行灼燒也可以殺滅細菌，防止污染環(huán)境；高壓蒸汽滅菌也可殺死培養(yǎng)基中的金黃色葡萄球菌；如果只對帶菌培養(yǎng)基進行加熱，殺不盡其中的致病菌，因為此菌的耐高溫能力很強，會污染環(huán)境。]13．如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為1、2、3、4、5。下列操作方法正確的是()A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線操作須在火焰上進行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌D[本題考查平板劃線的操作方法。在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應是在火焰上灼燒，接種時劃線操作是在火焰邊進行。在5個區(qū)域中，只要有單個活細菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落。]14．下列關于四種生物的能源、碳源、氮源和代謝類型的描述，其中正確的一組是()項目硝化細菌乳酸菌酵母菌衣藻能源氧化NH3分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖類糖類CO2氮源NH3N2N2NOeq\o\al(－,3)代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型自養(yǎng)需氧型A．硝化細菌、乳酸菌B．乳酸菌、酵母菌C．酵母菌、衣藻D．硝化細菌、衣藻D[本題考查的知識有：①各種微生物的代謝類型，②微生物所需的能源、碳源和氮源的不同。解答此題時應明確：硝化細菌、乳酸菌屬于細菌，酵母菌屬于真菌，衣藻屬于真核生物。微生物所需的能源、碳源、氮源因其同化作用類型的不同而不同。]15．下表是培養(yǎng)某微生物的培養(yǎng)基的配方，請回答下列問題：試劑牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂加水定容至用量5g10g5g20g1000mL(1)培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、________和無機鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當碳源的成分是____________________。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行________處理。(2)在配制培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。(3)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需進行清洗和________；空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質________，還能損傷DNA的結構。(4)分離純化微生物最常使用的接種方法是______________和____________。(5)在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是____________________________________。[解析](1)培養(yǎng)基中都應含有水、無機鹽、碳源、氮源。培養(yǎng)基配制完成后要調pH和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作為有機碳源。(2)配制培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(3)滅菌是使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，所以要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌。消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內部一部分微生物，故操作者的雙手需要進行清洗和消毒。紫外線能使蛋白質變性，還能損傷DNA的結構。(4)分離純化微生物常采用平板劃線法和稀釋涂布平板法。(5)培養(yǎng)微生物時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。[答案](1)氮源牛肉膏和蛋白胨滅菌(2)溫度酸堿度(3)滅菌消毒變性(4)平板劃線法稀釋涂布平板法(5)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生不能正確辨